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生猪养殖场仔猪白痢大肠杆菌分离、鉴定及药物敏感性试验

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饲料工业 2017年第9期38卷 61-64页

作者：杨作丰宋淑英高锋刘耀川邓文超张皓淳辽宁省动物疫病预防控制中心辽宁沈阳110164 辽宁省重大动物疫病应急中心辽宁沈阳110161 辽宁益康生物股份有限公司辽宁辽阳111000

仔猪白痢为仔猪常发疾病,严重制约生猪养殖产业。试验以沈阳地区某规模化生猪养殖场患白痢的63头仔猪为研究对象,对其进行病原菌分离、鉴定及药物敏感性试验。结果表明,该场仔猪白痢主要病原菌为大肠杆菌,共得到大肠杆菌分离株55株。分... 详细信息

仔猪白痢为仔猪常发疾病,严重制约生猪养殖产业。试验以沈阳地区某规模化生猪养殖场患白痢的63头仔猪为研究对象,对其进行病原菌分离、鉴定及药物敏感性试验。结果表明,该场仔猪白痢主要病原菌为大肠杆菌,共得到大肠杆菌分离株55株。分离株对磺胺甲基异恶唑耐药率最高、其次为青霉素;分离株对头孢噻呋最敏感。分离株多药耐药现象较为严重,同时耐受5种抗菌药物的分离株最多,占27.3%。

关键词：仔猪白痢大肠杆菌分离和鉴定药物敏感性测试

新型分枝杆菌荧光报告噬菌体的构建及其在结核分枝杆菌药敏检测中的应用

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中华微生物学和免疫学杂志 2023年第10期43卷 749-755页

作者：钱程成马瑞青郭明权范小勇温州医科大学检验医学院、生命科学学院温州325035 上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心科学研究部上海201508

目的设计基于纳米荧光素酶(Nluc)的新型荧光报告系统,构建新型分枝杆菌荧光报告噬菌体ΦFN,分析该噬菌体检测结核分枝杆菌耐药性的能力。方法构建P_(furAma)启动子控制表达的Nluc荧光报告系统,将其整合至耻垢分枝杆菌基因组中,测试其在... 详细信息

目的设计基于纳米荧光素酶(Nluc)的新型荧光报告系统,构建新型分枝杆菌荧光报告噬菌体ΦFN,分析该噬菌体检测结核分枝杆菌耐药性的能力。方法构建P_(furAma)启动子控制表达的Nluc荧光报告系统,将其整合至耻垢分枝杆菌基因组中,测试其在分枝杆菌的荧光报告能力;随后将P_(furAma)-nluc报告系统整合到TM4分枝杆菌噬菌体基因组中,构建新型分枝杆菌荧光报告噬菌体ΦFN;通过调整药物预处理时间、感染时间等条件,建立ΦFN检测分枝杆菌耐药性的快速检测流程,在96孔板中检测52株已知耐药性的结核分枝杆菌临床分离株对3种一线抗结核药物耐药的耐药性。结果整合型表达荧光报告系统P_(furAma)-nluc的耻垢分枝杆菌可报告下限达到100菌落形成单位(colony-forming unit,CFU),低于已报道的P_(left)启动子表达nluc系统。新型分枝杆菌荧光报告噬菌体ΦFN可通过孔板读值法在24 h内检测到分枝杆菌的存在,检测下限达到100 CFU。药物与待测菌预培养48 h后再加入噬菌体孵育24 h,敏感菌在105 CFU以下均无法检测到荧光信号,可有效区分敏感株并进行耐药性的快速检测。以罗氏药敏实验作为金标准,使用ΦFN检测52株结核分枝杆菌临床菌株对利福平、异烟肼和链霉素的耐药性,检测准确性分别是51/52、48/52、49/52。结论利用新型重组荧光报告噬菌体检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、链霉素的耐药性具有极高的准确性,报告时间仅需3 d,有望成为一种快速简便的结核分枝杆菌耐药性检测新方法。

关键词：结核分枝杆菌荧光报告噬菌体药物敏感性测试耐药结核

抗结核菌药物耐药数据库的构建及其体外活性评价

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抗结核菌药物耐药数据库的构建及其体外活性评价

作者：马翠蝶北京化工大学

学位级别：硕士

结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病,和艾滋病、疟疾并列为危害人类健康的三大传染病。结核病流行趋势日益严峻的原因之一是耐药结核病的诞生。耐药结核病的早期诊断和治疗是控制耐药现象的关键途径。系统了解抗生素的耐药产生机制,了... 详细信息

结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病,和艾滋病、疟疾并列为危害人类健康的三大传染病。结核病流行趋势日益严峻的原因之一是耐药结核病的诞生。耐药结核病的早期诊断和治疗是控制耐药现象的关键途径。系统了解抗生素的耐药产生机制,了解各类型突变在耐药性产生中的比重,对改进分子诊断,指导医生改善治疗方案具有重要意义。同时,系统的包含不同耐药水平和耐药机制的菌株组合在药物筛选及药效评价各阶段都必不可少。本研究主要归纳了一线抗结核药物中的异烟肼和链霉素的耐药作用基因及靶点,整理了耐药位点的分布及频率,建立了一个较完整的抗结核药物的耐药位点数据库,一套系统的包含不同耐药水平和耐药机制的菌株组合已初步形成,并对106种化合物进行了抗结核菌活性评价。环丝氨酸是一种有效的C组抗结核药。其体外药敏试验的可靠性和可重复性无法保证,对临床疗效的预测价值不佳。但在实际应用中,环丝氨酸的体外药敏试验可以用于粗略估计分枝杆菌的耐药性,因此有必要阐明环丝氨酸体外药敏试验中存在的问题及解决的办法。本研究使用Alamar Blue法测定了在37℃下环丝氨酸溶液系列孵育1至29天后的有效性,并通过UPLC-MS分析培养基中的环丝氨酸的降解程度。结果表明,环丝氨酸在培养基中不稳定,持续性降解,其降解量足以改变分枝杆菌的最低抑菌浓度(MIC)值。不等长的测试时间和环丝氨酸的降解是造成不同药敏试验方法之间缺乏一致性以及体外测试可靠性低的原因。根据孵育时间依赖的环丝氨酸降解量进行校正,可以获得更准确的MIC值,从而提高体外实验与临床使用之间的一致性。这将提供更有效和可靠的实验数据,以指导临床医生进行抗结核治疗。

关键词：结核分枝杆菌耐药性基因突变药物敏感性测试降解性

同方学位论文库评论

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类器官模型在胰腺癌中的研究进展

中国普外基础与临床杂志 2023年第7期30卷 863-869页

作者：彭磊朱克祥兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院普外科兰州730000

目的总结类器官模型在胰腺癌中的临床应用情况及未来应用前景。方法检索近几年来国内外关于类器官模型在胰腺癌中的相关研究的文献并进行综述。结果近年来,胰腺癌类器官模型的构建主要采用手术切除的癌组织、细针穿刺抽吸活检获得的癌... 详细信息

目的总结类器官模型在胰腺癌中的临床应用情况及未来应用前景。方法检索近几年来国内外关于类器官模型在胰腺癌中的相关研究的文献并进行综述。结果近年来,胰腺癌类器官模型的构建主要采用手术切除的癌组织、细针穿刺抽吸活检获得的癌组织或人多能干细胞衍生的上皮细胞构建;根据胰腺癌类器官保留了原发肿瘤的组织学、结构异质性等特点来进行胰腺癌生物学标志物的筛选,如细胞外囊泡中的微小RNA、glypican-1、膜联蛋白A6以及蛋白质生物学标志物细胞角蛋白7和20、细胞肿瘤抗原p53、Claudin-4、糖类抗原19-9等。根据类器官模型能够维持原发肿瘤组织特性的研究结果以及胰腺癌类器官药物敏感性数据与胰腺癌患者的临床结果之间存在高度相关性的结果提示,未来利用胰腺癌类器官进行的药物敏感性的数据可避免无效化学药物治疗,以提高治疗应答率和减轻化学药物毒性,可为胰腺癌患者合理选择个体化治疗方案。结论类器官模型用于胰腺癌生物学标志物筛选和类器官模型与胰腺癌个体化治疗及药物敏感性测试方面有较多研究成果,它可在体外模拟胰腺癌发病和进展的复杂病理生理学特征,并保留了原发肿瘤细胞的生理特性和基因表型,有望成为发现胰腺癌生物学标志物、测试药物敏感性及制定个体化胰腺癌治疗方案的新型平台,可进一步促进胰腺癌的研究进展。

关键词：胰腺癌类器官生物标志物个体化药物筛选药物敏感性测试

武汉市某医院临床病原微生物的分布及耐药性监测

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国际检验医学杂志 2018年第19期39卷 2360-2365页

作者：冯丽娜李从荣蔡璇李娟武汉大学人民医院检验医学中心湖北武汉430060

目的了解武汉大学人民医院临床分离病原微生物的分布及对常用抗菌药物的敏感性,为临床预防性使用抗菌药物及医院感染控制提供理论依据。方法采用全自动细菌鉴定药敏系统BD-Phoenix-100对所有分离菌株进行鉴定和药物敏感性测试。结果 201... 详细信息

目的了解武汉大学人民医院临床分离病原微生物的分布及对常用抗菌药物的敏感性,为临床预防性使用抗菌药物及医院感染控制提供理论依据。方法采用全自动细菌鉴定药敏系统BD-Phoenix-100对所有分离菌株进行鉴定和药物敏感性测试。结果 2017年2月至2018年2月武汉大学人民医院共分离临床病原微生物8 380株,其中革兰阳性菌占40.5%,革兰阴性菌占59.5%。产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的检出率为44.6%,对复合制剂氨苄西林/舒巴坦和阿莫西林/克拉维酸处于中介的菌株分别占37.9%和30.2%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为40.0%,未分离出对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的菌株。碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)检出率为70.7%,CRAB和碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌(CRPA)对黏菌素的敏感率超过99.0%,碳青霉烯耐药肠肝菌科细菌(CRE)对替加环素的敏感率为100.0%。结论该院临床重要耐药菌株的检出率较高,耐药菌株的出现为临床抗感染治疗带来挑战,应积极采取感染控制措施。

关键词：细菌分布耐药性监测药物敏感性测试临床耐药菌