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三倍体芍药品种染色体制片优化和核型分析

河北农业大学学报 2024年第3期47卷 46-55页

作者：孙榕泽宋焕芝蒋珈琦于晓南北京林业大学园林学院城乡生态环境北京实验室/国家花卉工程技术研究中心花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室北京100083 北京市南水北调团城湖管理处北京100089

为优化三倍体芍药品种染色体制片方法,本研究以三倍体芍药品种‘Fairy Princess’新生长的白色根尖为材料,通过常规染色体制片法,获得预处理试剂和预处理时间对芍药染色体制片影响的结果,并进行核型分析。结果表明,三倍体芍药最佳预处... 详细信息

为优化三倍体芍药品种染色体制片方法,本研究以三倍体芍药品种‘Fairy Princess’新生长的白色根尖为材料,通过常规染色体制片法,获得预处理试剂和预处理时间对芍药染色体制片影响的结果,并进行核型分析。结果表明,三倍体芍药最佳预处理试剂为0.002 mol/L 8-羟基喹啉溶液,最佳预处理时间为12~36 h;‘Fairy Princess’核型公式为2n=3x=15=10m+2sm+3st。核型分类为2A型。研究结果为三倍体芍药应用提供染色体信息,为野外取材长时间保存提供依据。

关键词：芍药预处理制片优化核型分析

芍药种子休眠解除过程生理变化及分子机理研究

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芍药种子休眠解除过程生理变化及分子机理研究

作者：穆赢通内蒙古农业大学

学位级别：硕士

芍药(Paeonia lactiflora Pal L)是一种多功能植物,既可以作为观赏植物,也可以药用植物,作为药用植物是赤芍的基源植物。芍药具有很高的经济价值,但芍药种子具有休眠特性,影响了芍药的繁殖。研究表明芍药种子萌发需要在暖温下才能生根,... 详细信息

芍药(Paeonia lactiflora Pal L)是一种多功能植物,既可以作为观赏植物,也可以药用植物,作为药用植物是赤芍的基源植物。芍药具有很高的经济价值,但芍药种子具有休眠特性,影响了芍药的繁殖。研究表明芍药种子萌发需要在暖温下才能生根,根生长到一定长度,在低温下长芽。依据前人对芍药种子休眠的研究结果,对芍药种子休眠方法进行优化,并在最优处理下对芍药种子休眠过程进行观察,确定休眠解除的关键时期,然后进行生理变化分析并结合转录组差异基因表达分析,来构建芍药种子休眠解除调控网络,其结果为芍药种子的休眠解除进一步探索提供理论基础,主要研究结果如下:(1)芍药种子休眠解除最佳处理方法为20℃暖温沙藏,根生长到4cm以上进行4℃低温沙藏,出苗率可达98%。芍药种子休眠解除过程可以划分为暖温下,下胚轴生长,低温下胚芽膨大和上胚轴生长。种子休眠解除过程中共获得41204个差异表达基因,在芍药种子下胚轴生长过程中共有11045个基因差异表达,其中4933个基因上调表达,6112个基因下调表达。在上胚轴休眠解除过程中,其中4158个基因上调表达,5884个基因下调表达。在胚芽膨大和胚根伸长这一过程中,差异表达基因最多,其中有22672个基因上调表达,10985个基因下调表达。趋势分析和kegg富集分析表明,下胚轴生长过程中差异基因主要富集在植物内源激素转导、糖酵解途径。胚芽膨大和胚根生长过程的差异基因主要富集在植物内源激素转导、糖和淀粉的代谢、脂肪的代谢、TCA循环、糖酵解途径。上胚轴的生长差异基因也主要富集在糖和淀粉的代谢、脂肪代谢、TCA循环、糖酵解途径。(2)物质代谢调控芍药种子休眠解除中,通过对芍药种子休眠解除过程中主要时期的生理指标进行测定,结果表明:芍药种子的储藏物质主要为脂肪,脂肪含量约为28%。脂肪、淀粉、蛋白质和可溶性糖整体下降,为芍药种子萌发提供物质基础。脂肪在芍药种子休眠解除中消耗最多,为主要供能物质。分解营养物质的酶变化趋势符合营养物质的变化。此外休眠解除过程中,抗氧化酶活性增强。对芍药种子休眠解除关键时期的转录组进行分析,在脂肪和淀粉代谢途径中一共鉴定出118个差异表达基因。通过结合生理数据和PCR进行分析,筛选出了5个在芍药种子休眠解除过程中起主要作用的基因,分别为GPAT、LACS、BAM、FRK、AMY。(3)植物激素调控种子休眠中,通过对芍药种子休眠解除关键时期进行靶向代谢测定,鉴定出13种激素,属于7大类植物激素,在芍药种子休眠解除过程中均差异变化。脱落酸、茉莉酸异亮氨酸、细胞分裂素类、水杨酸都整体降低,但只有茉莉酸异亮氨酸、脱落酸和细胞分裂素类持续降低,三者可能对休眠解除起主要抑制作用。赤霉素、茉莉酸、生长素和ACC均整体升高,对休眠解除起促进作用,其中ACC在露白后开始增加。进一步分析4种主要激素的比例变化,GA/ABA、IAA/ABA和CTK/ABA在芍药种子休眠解除关键时期中整体下降。激素含量的比例变化可能是休眠解除的主要原因。芍药种子关键时期转录组分析结果显示,在植物激素合成和信号转导途径中共鉴定出来274个差异基因,通过结合代谢组数据和PCR分析,筛选出9个在激素调控芍药种子休眠解除中起主要作用的基因,分别为CYP707A、NCED、KAO、YUCCA、IPT、GA2ox、DELLA、PP2C、ACS。(4)本研究共鉴定出1362个TFs在芍药种子休眠解除中存在差异表达。具有最多DEGs的TFs基因家族为C2H2,共151个,占全部TFs差异基因的8%,其次是b HLH、ERF、MYB-related等。在鉴定出来的转录因子家族中ERF、WRKY、MYB、b HLH和b ZIP基因家族中大部分基因在低温沙藏阶段差异表达,可以为芍药种子上胚轴休眠解除提供新的研究方向。

关键词：芍药种子休眠物质代谢植物激素转录组分析

赤芍干物质、芍药苷含量与不同花色植株形态特征的相关性研究

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时珍国医国药 2023年第5期34卷 1203-1206页

作者：庄得凤贾俊英郭园李志军孙德智杨恒山内蒙古民族大学农学院内蒙古通辽028000 内蒙古自治区高校中(蒙)药材生态种植工程研究中心(培育) 内蒙古通辽028000

目的研究赤芍干物质、芍药苷与5种花色植株地上部、地下部形态特征的相关性,明确影响产量及芍药苷含量的主要形态特征,为内蒙古东部地区科尔沁沙地筛选适合的优良品系。方法以移栽种植的4年生5种不同花色芍药为试材,调查植株地上、地下... 详细信息

目的研究赤芍干物质、芍药苷与5种花色植株地上部、地下部形态特征的相关性,明确影响产量及芍药苷含量的主要形态特征,为内蒙古东部地区科尔沁沙地筛选适合的优良品系。方法以移栽种植的4年生5种不同花色芍药为试材,调查植株地上、地下部形态特征,采用相关性分析,探讨赤芍干物质、芍药苷与植株形态特性的相关性。结果5种花色芍药无论是地上部还是地下部形态特征指标,粉色系均强于白色花芍药,单株根干物质范围为125.28~223.06 g,由高到低依次为深粉色>红粉色>白粉色>粉色>白色花芍药;芍药苷含量范围为2.58%~4.64%,白色花赤芍含量显著高于其他花色赤芍,由高到低依次为白色>粉色>深粉色>白粉色>红粉色花芍药;赤芍干物质与株高、茎粗、叶长、叶宽、鲜重、干鲜比、根条数、根长8个指标显著正相关;芍药苷与株高、叶长、叶宽、干鲜比、根长、根径粗6个指标显著负相关;芍药根的各指标与地上部株高、茎粗、分枝数、叶片大小显著相关。结论从赤芍干物质和芍药苷含量考虑,深粉色和粉色花芍药更适合内蒙古东部地区科尔沁沙地种植,可通过合理调控芍药株高,茎粗,分枝数,叶片大小使赤芍提质增产。

关键词：芍药产量芍药苷形态特征

不同基原芍药制备的黄芩汤治疗溃疡性结肠炎药效对比研究

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中国中药杂志 2021年第24期46卷 6395-6402页

作者：杨婧怡杜康杨莉王峥涛王瑞石燕红上海中医药大学中药学院上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海中医药大学中医药国际标准化研究所上海201203

黄芩汤为《伤寒论》中经典治痢名方,现代临床主要用于治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)。黄芩汤中以芍药记载,未明确白芍或赤芍,临床上两者均有应用。虽白芍和赤芍基原相近,主成分类似,但两者药性与功效不同,是否能引起黄芩汤... 详细信息

黄芩汤为《伤寒论》中经典治痢名方,现代临床主要用于治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)。黄芩汤中以芍药记载,未明确白芍或赤芍,临床上两者均有应用。虽白芍和赤芍基原相近,主成分类似,但两者药性与功效不同,是否能引起黄芩汤治疗UC药效差异未见系统比较研究。该研究以不同芍药(白芍、北赤芍和川赤芍)分别制备黄芩汤,采用葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型,从动物行为学、病理切片和细胞因子表达水平同步评价和比较不同芍药对经方黄芩汤整体药效的影响,从而来确定黄芩汤中芍药的确切基原。结果表明不同芍药制备的黄芩汤均能改善葡聚糖硫酸钠诱导的UC小鼠相关症状,与黄芩汤(白芍)相比,黄芩汤(北赤芍)和黄芩汤(川赤芍)在UC小鼠体质量降低率、结肠长度、病理损伤评分上均有显著差异,但黄芩汤(北赤芍)和黄芩汤(川赤芍)间无明显差异。而黄芩汤(川赤芍)小鼠结肠组织病理形态改善最为明显,黏膜缺损情况较黄芩汤(北赤芍)和黄芩汤(白芍)均有显著改善。结合前期成分表征及含量配比比较结果,认为黄芩汤中芍药在治疗UC上以川赤芍最佳,可能与川赤芍中含有大量芍药单萜苷和没食子鞣酸类成分有关。该研究可为黄芩汤中芍药基原的准确确定及临床的精准用药提供科学依据。

关键词：多基原药材芍药黄芩汤溃疡性结肠炎药效比较

芍药种子油体发育特点及PlOLE4基因功能的初步研究

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芍药种子油体发育特点及PlOLE4基因功能的初步研究

作者：李苗扬州大学

学位级别：硕士

芍药(Paeonia lactiflora Pall.)是芍药科芍药属多年生草本植物,因具有极高的观赏价值而闻名。近年来,随着牡丹籽油被确定为新型资源食品后,作为同科属植物的芍药,其油用价值也开始得到关注。但目前油用芍药的研究尚处于起始阶段,基本... 详细信息

芍药(Paeonia lactiflora Pall.)是芍药科芍药属多年生草本植物,因具有极高的观赏价值而闻名。近年来,随着牡丹籽油被确定为新型资源食品后,作为同科属植物的芍药,其油用价值也开始得到关注。但目前油用芍药的研究尚处于起始阶段,基本集中在油用芍药的品种筛选、籽油提取和理化性质测定以及脂肪酸合成途径中相关基因挖掘等方面,而对于芍药油脂存储的分子机制研究较少。油体作为存储油脂的细胞器,积极参与脂类代谢、脂类存储等生物学功能。种子中油脂含量与种子细胞中油体相关。因此,从油体入手,解析芍药种子油脂储存的分子机制具有重要意义。本研究基于课题组前期筛选的两个含油量差异较大的‘杭芍’品系HS20(低含油量)和HS37(高含油量)的种子为材料,通过不同发育时期的种子微观切片观察、种子油体的稳定性观察以及种子中脂肪酸成分及含量的测定探究种子油体与含油量的关系;通过转录组学三代与二代测序技术,分析筛选在维持油体大小与稳定性中起十分重要作用的油体膜蛋白(OLE)基因家族,最后选择差异表达基因中表达量最高的PlOLE4进行了基因克隆与功能验证,以明确芍药PlOLE4基因在油脂存储中的作用。主要研究结果如下:(1)以‘杭芍’HS20和HS37两个品系花后30、45、60、75和90d的种子为材料,进行了种子油体发育特点研究。结果表明随着种子发育时期的变化,种子中脂类物质呈现先增加后降低的趋势,同时油体随着发育进程不断增多和扩大,高含油量的HS37中的油体体积和数量均要比其在低含油量的HS20中略有增加。NaCl浓度较高时、pH值为酸性是对芍药油体的破坏性较大,但高含油量的HS37的稳定性要优于低含油量的HS20,而温度对油体结构的影响较小。GC-MS分析发现‘杭芍’种子中存在5种主要的脂肪酸:棕榈酸、硬脂酸、α-亚麻酸、亚油酸和油酸,含量最高的是α-亚麻酸,最低的是硬脂酸;且高含油量的HS37的总脂肪酸含量及5种主要脂肪酸含量均要高于低含油量的HS20中的含量。(2)采用二代结合三代的转录组测序技术,三代测序共获得了获得了 484931条ROI序列和441185条FLNC转录本,整体组装良好。以此作为参考基因库对18个独立样本的二代转录组测序测序结果进行分析,共获得了 115.56 Gb的数据,每个clean reads的数据占原始数据的94.51%以上,通过KEGG富集通路分析发现,在L30D-VS-H30D、L60D-VS-H60D、L90D-VS-H90D3 个比较组中,参与不饱和脂肪酸生物合成的差异表达基因分别为32、20和4个;参与脂肪酸降解的差异表达基因分别为104、37、5个;参与脂肪酸延长的差异表达基因分别为25、22、1个;参与α-亚麻酸代谢的差异表达基因分别为78、33、5个;参与亚油酸代谢的差异表达基因分别为11、11、0个,参与甘油酯代谢的差异表达基因分别为77、24、3个,参与甘油磷脂代谢的差异表达基因分别为105、38、2个。同时我们鉴定到了 10个OLE基因家族成员,氨基酸数在116-220之间,分子质量在9.21-40.42 kDa之间,等电点在5.4-10.45之间,脂肪族指数、蛋白疏水性、不稳定系数以及螺旋结构等也各不相同。OLE基因家族成员均具有保守域(PF01277)每个OLE基因包含motif 6-9个,而PlOLE4包含了 10个motif。(3)基于转录组测序的结果,筛选出表达量最高且在种子发育时期表达最活跃的PlOLE4基因作为研究对象,对PlOLE4进行克隆,得到了核苷酸序列全长819 bp,开放阅读框为435 bp,共145个氨基酸,在高含油量的‘杭芍’HS37种子中的表达水平高于在其在低含油量‘杭芍’HS20中的表达;借助烟草原生质体进行了亚细胞定位观察,推测它定位于油体上。将PlOLE4在烟草中过表达后,转基因烟草种子中的总脂肪酸含量及主要脂肪酸含量均明显高于其野生型烟草种子中的含量;将PlOLE4在拟南芥突变体At2g25890中进行功能回补实验,发现回补后的拟南芥种子中的总脂肪酸含量及主要脂肪酸含量均要高于其突变体种子中的含量,且与其在野生型拟南芥种子中的含量相当,说明了 PlOLE4基因具有油脂存储的功能。

关键词：芍药油体膜蛋白转录组遗传转化油脂存储

外源5-ALA与CaCl_(2)对露地栽培芍药生理及观赏品质的影响

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西北植物学报 2022年第6期42卷 1003-1011页

作者：徐萌张玉李伟青岛农业大学园林与林学院山东青岛266109 乳山市林业局山东乳山265400

该研究以露地栽培芍药品种‘大富贵’为材料,在叶面喷施100 mg·L^(-1)5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)与4%CaCl_(2)后,4~7月份考察芍药叶片的质膜稳定性、抗氧化酶系统活性、叶绿素含量、光合气体交换参数以及观赏品质的变化,探究外源5-ALA和CaC... 详细信息

该研究以露地栽培芍药品种‘大富贵’为材料,在叶面喷施100 mg·L^(-1)5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)与4%CaCl_(2)后,4~7月份考察芍药叶片的质膜稳定性、抗氧化酶系统活性、叶绿素含量、光合气体交换参数以及观赏品质的变化,探究外源5-ALA和CaCl_(2)对高温胁迫下露地栽培芍药的抗逆生理生化机制,为缓解芍药夏季高温伤害提供技术依据。结果显示:(1)5-ALA与CaCl_(2)处理组的芍药植株花期、花径和花朵鲜重较对照组均显著增加。(2)与对照相比,5-ALA与CaCl_(2)处理后的芍药叶片能够维持较高的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性,较低的O^(-)·_(2)产生速率和MDA含量,以及较高的细胞叶绿素含量、净光合速率(P_(n))、蒸腾速率(T_(r))和气孔导度(G_(s))。(3)与叶面喷施CaCl_(2)相比,喷施5-ALA对露地栽培芍药‘大富贵’抗逆生理生化指标和观赏品质的改善效果更佳。研究表明,外源5-ALA与CaCl_(2)处理均可增加芍药的叶绿素含量和抗氧化能力,增强光合作用能力,降低膜脂过氧化水平,有效改善夏季露地栽培芍药‘大富贵’的观赏品质,并以100 mg·L-15-ALA的改善效果更佳。

关键词：芍药 5-氨基乙酰丙酸(5-ALA) CaCl_(2) 气体交换参数叶绿素抗氧化酶

甘肃省河西地区芍药白粉病病原鉴定及田间药效试验

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农药 2023年第10期62卷 758-762,776页

作者：吴之涛张英英常浩杨克泽徐志鹏汪亮芳魏玉杰任宝仓杨宪忠甘肃省农业工程技术研究院甘肃省特种药源植物种质创新与安全利用重点实验室甘肃武威733006

[目的]明确引起河西地区芍药白粉病的病原菌种类,并筛选安全高效的防治药剂。[方法]采用形态学和分子生物学方法对病原菌进行鉴定,同时选取7种药剂开展田间防效试验。[结果]芍药白粉病的病原菌为芍药白粉菌(Erysiphe paeoniae)。田间防... 详细信息

[目的]明确引起河西地区芍药白粉病的病原菌种类,并筛选安全高效的防治药剂。[方法]采用形态学和分子生物学方法对病原菌进行鉴定,同时选取7种药剂开展田间防效试验。[结果]芍药白粉病的病原菌为芍药白粉菌(Erysiphe paeoniae)。田间防效试验结果表明:2次施药后10%多抗霉素WP、2%嘧啶核苷类抗菌素AS和1%蛇床子素EW对芍药白粉病的防效较好,分别为58.40%、57.94%和56.66%,显著高于10%苯醚甲环唑WG和0.5%几丁聚糖AS。[结论]10%多抗霉素WP、2%嘧啶核苷类抗菌素AS和1%蛇床子素EW是防治芍药白粉病的首选药剂,可在生产中交替使用。

关键词：芍药白粉病病原鉴定田间防效

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芍药花药愈伤组织诱导及体细胞胚发生

植物学报 2021年第4期56卷 443-450页

作者：李艳敏蒋卉符真珠张晶袁欣王慧娟高杰董晓宇王利民张和臣河南省农业科学院园艺研究所郑州450002

以芍药(Paeonia lactiflora)品种粉玉奴花药为外植体,研究不同浓度2,4-D对愈伤组织诱导、体胚发生及植株再生的影响,采用组织细胞学方法观察愈伤组织以及体细胞胚发育过程,采用根尖染色体法鉴定再生植株倍性。结果表明,芍药花药愈伤组... 详细信息

以芍药(Paeonia lactiflora)品种粉玉奴花药为外植体,研究不同浓度2,4-D对愈伤组织诱导、体胚发生及植株再生的影响,采用组织细胞学方法观察愈伤组织以及体细胞胚发育过程,采用根尖染色体法鉴定再生植株倍性。结果表明,芍药花药愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg·L^(-1)2,4-D+1mg·L^(-1)NAA+0.1mg·L^(-1)KT+30g·L^(-1)蔗糖+6.5 g·L^(-1)琼脂,愈伤组织诱导率为14.7%。转入体细胞胚诱导培养基上,历经球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段,体胚诱导率为52.1%;在成苗培养基中能够长出真叶并得到完整植株,成苗率为47.1%。经根尖染色体法鉴定出单倍体和二倍体植株。该研究初步建立了通过体细胞胚间接发生途径实现植株再生的培养体系,可为芍药属其它品种的花药培养提供借鉴,获得的再生植株是芍药遗传学研究和育种工作的重要材料。

关键词：芍药花药培养愈伤组织体细胞胚再生植株

芍药白粉菌与寄主及叶际微生物群落的互作关系分析

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芍药白粉菌与寄主及叶际微生物群落的互作关系分析

作者：刘闰东北林业大学

学位级别：硕士

白粉病是一类对植物生长、价值造成重大影响的植物病害,其中芍药白粉病直接影响到芍药(Paeonia lactiflora Pall.)的观赏性和生产。目前我国针对芍药白粉病的基础研究仍然较少,尤其是生物学特性、芍药白粉菌的侵染过程与寄主的生理应答... 详细信息

白粉病是一类对植物生长、价值造成重大影响的植物病害,其中芍药白粉病直接影响到芍药(Paeonia lactiflora Pall.)的观赏性和生产。目前我国针对芍药白粉病的基础研究仍然较少,尤其是生物学特性、芍药白粉菌的侵染过程与寄主的生理应答以及对叶际微生物群落影响、芍药感病前后转录组等方面的研究。本研究首先观察芍药白粉菌的显微结构,研究其分生孢子在不同介质(清水、琼脂、Parafilm膜和叶片)上的生长发育情况;显微观察发现有寄生孢在芍药白粉菌上寄生,经分离纯化得到白粉菌寄生孢AQ419菌株,对其初步进行了培养观察与分子生物学的系统进化关系研究;系统测定了受白粉菌侵染前后寄主生理应答反应,利用Illumina Novaseq高通量测序技术探究受到白粉菌侵染后芍药叶际微生物群落的变化,结合叶片相关生理指标与叶际微生物多样性进行互作的相关性分析;最后对受白粉病菌侵染前后叶片的转录组进行了测定与分析,探究关键基因与病原之间互作的关系。论文研究获得以下主要结果:1.经显微观察芍药白粉病病原菌分生孢子梗直立,分生孢子单生,椭圆形,无纤维体蛋白;闭囊壳聚生,球形;附属丝呈丝状扭曲、形状极不规则,多有分枝,无隔膜,顶端多屈膝状;子囊卵形或椭球形,含3-5个子囊孢子;子囊孢子卵形或长椭球形。初步鉴定芍药白粉病的病原菌为芍药白粉菌Erysiphe paeoniae。2.分生孢子在不同介质上萌发实验表明,芍药白粉菌分生孢子在Parafilm膜上萌发生长最好,6h左右在两端分别产生芽管,8h左右附着孢叉状且形成较长的初生菌丝,12h后萌发率高达73%。3.采用CTAB法提取芍药白粉病病原菌及其寄生孢总基因组DNA,PCR扩增r DNA内转录间隔区(ITS)的保守序列并测序,通过Clustal与MEAG软件构建系统发育树推演系统进化关系,结果表明芍药白粉病菌2020-88A为Erysiphe paeoniae,与日本AB257438.1菌株碱基相似度达99.99%,具有极近的亲缘关系;芍药白粉菌寄生孢AQ419与意大利欧洲种葡萄的葡萄白粉菌上的白粉寄生孢Amypelomyces quisqualis(HQ108046、HQ108047及HQ108048)碱基相似度达到99%,具有较近的亲缘关系。4.系统测定了芍药叶片受白粉菌侵染时抗氧化酶系统生理应答响应指标。测定结果显示芍药受到白粉菌侵染后,叶片CAT活性和POD活性在总体变化趋势上都是先升后降,其中POD含量最大值为33.6555 U/mgprot,最小值为25.0873 U/mgprot;CAT含量最大值12.1920 U/mgprot,最小值为6.3964 U/mgprot。叶片内SOD活性总体变化趋势为缓慢下降,SOD含量最低时为13.9718U/mgprot。叶片中的MDA活性在总体变化上呈现显著升高趋势,MDA含量最高时为7.9507 nmol/mgprot。5.高通量测序结果表明随着病害等级提高,叶际菌物群落中白粉菌属的相对丰度也逐渐升高,感病后白粉菌属的相对丰度由6.32%提升至63.60%,而其他物种的相对丰度逐渐降低,甚至逐渐趋于0。证明由于白粉病病害程度的加重,白粉菌会挤占其他菌物生存空间,使叶际菌物群落结构在白粉病发生时受到影响。叶际细菌微生物随着病害等级变化,细菌属水平上的各物种相对丰度差异相对较小,如uncultured＿bacterium＿f＿Lachnospiraceae的相对丰度由11.04%降至5.59%。由此发现,白粉菌的侵染对叶际菌物群落和叶际细菌群落造成的影响不同。叶际细菌群落结构直到白粉病发病十分严重时才会受到明显影响,并且叶际菌物群落结构受到的影响要远高于叶际细菌群落结构。6.针对病原与叶片及叶际微生物互作的更进一步分析结果表明,青霉菌和曲霉菌不仅与白粉菌具有显著相关性,更与各项抗氧化酶系统生理指标具有显著正向相关性,因此青霉菌和曲霉菌有可能成为对抗逆境的有益菌株,这将为芍药白粉病的防治提供新的参考。另外随着发病等级的提高,芍药白粉菌寄生孢的平均相对丰度也逐渐升高,由1.61142E-06升高至0.000785551,与发病严重程度呈正相关性,因此芍药白粉菌寄生孢的研究将有望开发成为白粉病防治的新型生物农药。7.对芍药叶片感病前后转录组测序与分析,GO富集分析结果显示在鉴定出来的1187个(上调726个,下调461个)差异基因中,上调的差异基因出现在ATPdependent chromatin remodeler activity(GO:0140658)、Cytosolic small ribosomal subunit(GO:0022627)、Fatty acid biosynthetic process(GO:0006633)和核糖体小亚基(GO:0015935)等功能区,而下调的差异基因出现在过氧化氢反应(GO:0042542)、蛋白质寡

关键词：芍药白粉菌叶际微生物多样性高通量测序转录组