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Wnt7a/β-连环蛋白/自身免疫调节因子信号通路参与1型糖尿病的发生

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解剖学报 2022年第4期53卷 453-460页

作者：李远迪马静怡余佳珊何可可文廷浩高杰李红苏敏胡蓉贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室贵阳550025 贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省再生医学重点实验室中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵阳550025 贵州医科大学转化医学研究中心贵阳550025

目的探讨NOD/Ltj小鼠自发1型糖尿病(T1D)过程中,胸腺内Wnt信号通路、自身免疫调节因子(AIRE)及T1D组织特异性抗原(TSAs)胰岛素2(Ins2)、谷氨酸脱羧酶67(GAD67)表达与T1D发生的关系。方法60只雌性NOD/Ltj小鼠分3组:3周组、16周未发病组... 详细信息

目的探讨NOD/Ltj小鼠自发1型糖尿病(T1D)过程中,胸腺内Wnt信号通路、自身免疫调节因子(AIRE)及T1D组织特异性抗原(TSAs)胰岛素2(Ins2)、谷氨酸脱羧酶67(GAD67)表达与T1D发生的关系。方法60只雌性NOD/Ltj小鼠分3组:3周组、16周未发病组及16周发病组,每组20只;非空腹血糖值连续2次≥11.1 mmol/L视为发生T1D。胰腺HE染色观察胰岛炎发生情况,抗Ins、CD45免疫组织化学染色显示胰岛β细胞或浸润炎性细胞;Western blotting和Real-time PCR检测胸腺Wnt7a、β-catenin、AIRE、Ins、GAD67蛋白水平和mRNA表达;流式细胞术分析胸腺T细胞比例。结果1.随着T1D发生,胰岛组织结构破坏,大量淋巴细胞浸润,残存胰岛细胞减少;Ins^(+)胰岛β细胞周围见大量CD45^(+)细胞聚集。2.随年龄的增加,胸腺Wnt7a、β-连环蛋白(catenin)、AIRE、Ins和GAD67蛋白水平和mRNA表达降低;同周龄发病组小鼠与未发病组小鼠相比,胸腺Ins表达下降。3.与3周组相比,16周未发病组CD4、CD8单阳性T细胞比例降低;16周发病组CD4、CD8单阳性T细胞比例升高,CD4、CD8双阳性T细胞比例降低。结论Wnt7a/β-catenin信号通路可能通过调控AIRE表达,下调T1D相关TSAs表达,参与T1D发生发展。

关键词： 1型糖尿病自身免疫调节因子 Wnt信号通路免疫印迹法实时定量聚合酶链反应 NOD/Ltj小鼠

自身免疫调节因子在小鼠肠系膜和外周淋巴结中的表达及其意义

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吉林大学学报（医学版） 2012年第1期38卷 1-5,F0002页

作者：孙际童吴静贾婷刘雪岩杨巍吉林大学白求恩医学院免疫学系吉林长春130021

目的:研究自身免疫调节因子(Aire)在小鼠肠系膜和外周淋巴结表达的分布,探讨Aire在外周免疫耐受中的作用,阐明淋巴结表达Aire在维持耐受及防止自身免疫病中的作用机制。方法:分别采用RT-PCR和Western blotting法检测BALB/c小鼠肠系膜淋... 详细信息

目的:研究自身免疫调节因子(Aire)在小鼠肠系膜和外周淋巴结表达的分布,探讨Aire在外周免疫耐受中的作用,阐明淋巴结表达Aire在维持耐受及防止自身免疫病中的作用机制。方法:分别采用RT-PCR和Western blotting法检测BALB/c小鼠肠系膜淋巴结和外周淋巴结中Aire mRNA和蛋白的表达情况;采用RT-PCR法检测BALB/c小鼠淋巴结基质和非基质组分中Aire mRNA表达情况;采用RT-PCR法和免疫细胞化学染色法检测小鼠淋巴结基质细胞中Aire的表达情况。结果:肠系膜淋巴结和外周淋巴结均有Aire mRNA和蛋白的表达,表达水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05);淋巴结基质与非基质组分均检测到Aire mRNA的表达,其中Aire mRNA在非基质组分的表达水平高于基质组分(P免疫耐受的维持。

关键词：自身免疫调节因子肠系膜淋巴结外周免疫耐受

自身免疫调节因子对CD4^+CD25^+Treg细胞的影响

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吉林大学学报（医学版） 2010年第5期36卷 866-870页

作者：杨巍朱武飞和知非魏晓曦苏静波李一吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林长春130021

目的:观察自身免疫调节因子(AIRE)对CD4+CD25+Treg细胞的影响,探讨其在外周免疫耐受中的作用及机制。方法:pEGFPC3-AIRE质粒通过脂质体介导转染RAW264.7细胞;通过流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的数量;采用半定量RT-PCR法检测Foxp3和... 详细信息

目的:观察自身免疫调节因子(AIRE)对CD4+CD25+Treg细胞的影响,探讨其在外周免疫耐受中的作用及机制。方法:pEGFPC3-AIRE质粒通过脂质体介导转染RAW264.7细胞;通过流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的数量;采用半定量RT-PCR法检测Foxp3和转化生长因子β(TGF-β)mRNA的表达;采用ELISA法检测TGF-β1水平。结果:AIRE转染的RAW264.7细胞可直接或间接诱导CD4+CD25+Treg细胞的产生及Foxp3mRNA表达增强(P免疫耐受中发挥重要作用。

关键词：自身免疫调节因子 CD4+CD25+Treg细胞免疫耐受

自身免疫调节因子在小鼠胚胎干细胞向胸腺上皮祖细胞分化中的表达

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中国组织工程研究 2020年第25期24卷 3994-3999页

作者：马静怡杨文江李远迪黄佑娇高杰李红胡蓉苏敏贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室贵州省贵阳市550025

背景:自身免疫性疾病主要是由于胸腺内自身组织特异性抗原持续表达缺失而引起强烈免疫应答的一类疾病,而胸腺功能减退和胸腺内组织特异性抗原的不稳定表达会限制治疗效果。胸腺组织主要由胸腺上皮细胞组成,但胸腺内成熟胸腺上皮细胞和... 详细信息

背景:自身免疫性疾病主要是由于胸腺内自身组织特异性抗原持续表达缺失而引起强烈免疫应答的一类疾病,而胸腺功能减退和胸腺内组织特异性抗原的不稳定表达会限制治疗效果。胸腺组织主要由胸腺上皮细胞组成,但胸腺内成熟胸腺上皮细胞和胸腺上皮祖细胞有限的数量来源极大限制了相关研究。目的:研究小鼠胚胎干细胞向胸腺上皮祖细胞分化过程中自身免疫调节因子的表达变化。方法:采用两步分化方法定向诱导小鼠胚胎干细胞分化为内胚层再分化为胸腺上皮祖细胞,分别收集定向诱导分化第0,3,13天细胞,采用细胞免疫荧光、流式细胞术、Western blot、Real-Time PCR检测相关基因及蛋白的表达变化。结果与结论:①诱导分化第0天,免疫荧光检测OCT4、SSEA1表达阳性;诱导分化第3天,免疫荧光检测SOX17、FoxA2呈双阳性表达;诱导分化第13天,流式细胞术检测EpCAM1、K5、K8表达阳性;②Real-time PCR检测小鼠胚胎干细胞定向分化过程中PAX1、PAX9、FOXN1、PLET1基因表达逐渐增高;③Real-time PCR检测分化第0,3,13天AIRE基因表达升高,INS2、GAD67基因表达也升高;④Western blot检测分化第0,3,13天AIRE蛋白表达降低,胰岛素蛋白、GAD67蛋白均无表达;⑤结果表明,小鼠胚胎干细胞成功分化为胸腺上皮祖细胞,且分化而来的胸腺上皮祖细胞中AIRE基因表达很高,促进了INS2、GAD67基因的表达,为细胞移植治疗自身免疫性疾病提供评价依据。

关键词：胚胎干细胞自身免疫调节因子胸腺上皮祖细胞自身组织特异性抗原

自身免疫调节因子(Aire)对CD4^+CD25^+调节性T细胞产生的影响

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中国免疫学杂志 2006年第10期22卷 898-900,905页

作者：孙世杰李康生松本满李一汕头大学医学院微生物与免疫学教研室汕头515041 日本德岛大学酵素研究中心分子免疫学系吉林大学基础医学部免疫学教研室长春130021

目的:探讨自身免疫调节因子(Aire)基因是否影响调节性T细胞的产生。方法:应用流式细胞术和real-timePCR的方法分别分析了Aire-/-鼠的胸腺细胞和脾脏外周T细胞的CD4+CD25+T细胞分布及Foxp3的表达。结果:与对照鼠相比,Aire-/-鼠的胸腺细... 详细信息

目的:探讨自身免疫调节因子(Aire)基因是否影响调节性T细胞的产生。方法:应用流式细胞术和real-timePCR的方法分别分析了Aire-/-鼠的胸腺细胞和脾脏外周T细胞的CD4+CD25+T细胞分布及Foxp3的表达。结果:与对照鼠相比,Aire-/-鼠的胸腺细胞、脾脏淋巴细胞以及脾脏T细胞总数未发生显著变化;CD4+CD25+调节性T细胞数目以及脾脏T细胞Foxp3mRNA表达无显著差异;成年鼠、3日龄和7日龄鼠的CD4+CD25+T细胞占总的CD4+T细胞的百分比在Aire-/-鼠和相应对照鼠间并无显著差异。结论:结果表明Aire基因不影响CD4+CD25+调节性T细胞的产生。

关键词：自身免疫调节因子 CD4^+CD25^+调节性T细胞 Foxp3 外周耐受

自身免疫调节因子在1型糖尿病发病机制中的作用

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广东医学 2014年第18期35卷 2927-2929页

作者：陈兴朱武飞曾朝阳三峡大学第一临床医学院内分泌科湖北宜昌443003

1型糖尿病（T1DM）是一种T细胞介导胰腺B细胞破坏，从而使胰腺的胰岛素产生过少，导致血糖升高的慢性自身免疫疾病。自身免疫调节因子（Aire）的缺失可引起自身免疫性多内分泌腺病-念珠菌病-外胚层营养不良（auto-immune polyendocrinop... 详细信息

1型糖尿病（T1DM）是一种T细胞介导胰腺B细胞破坏，从而使胰腺的胰岛素产生过少，导致血糖升高的慢性自身免疫疾病。自身免疫调节因子（Aire）的缺失可引起自身免疫性多内分泌腺病-念珠菌病-外胚层营养不良（auto-immune polyendocrinopathy candidiasis ectoderma dystrophy,APECED），

关键词：自身免疫调节因子 1型糖尿病自身免疫性多内分泌腺病-念珠菌病-外胚层营养不良发病机制自身免疫疾病 T细胞介导细胞破坏血糖升高

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自身免疫调节因子与中枢免疫耐受

现代免疫学 2010年第1期30卷 1-4页

作者：陈瑜于姝滕飞董洁金容张毓北京大学医学部免疫学系北京1000183

自身免疫调节因子(autoimmune regulator,AIRE)是一种转录调控分子,主要表达于髓质胸腺上皮细胞(medullary thymic epithelial cell,mTEC),介导了多种外周组织特异性抗原(tissue-specific antigens,TSA)在胸腺中的表达,从而在胸腺细胞... 详细信息

关键词：自身免疫调节因子免疫耐受中枢胸腺上皮细胞特异性抗原自身免疫病调控分子 cell

自身免疫调节因子促进THP-1细胞的自噬性凋亡

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华中科技大学学报（医学版） 2010年第4期39卷 461-465页

作者：石亮李一荣胡丽华华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的探讨自身免疫调节因子(AIRE)对THP-1单核细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将THP-1细胞以佛波醇酯(PMA)诱导分化后,进行瞬时转染。免疫荧光和Western blot法检测转染效率。通过AnnexinⅤ-FITC、PI双染色法和流式细胞仪检测过... 详细信息

目的探讨自身免疫调节因子(AIRE)对THP-1单核细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将THP-1细胞以佛波醇酯(PMA)诱导分化后,进行瞬时转染。免疫荧光和Western blot法检测转染效率。通过AnnexinⅤ-FITC、PI双染色法和流式细胞仪检测过表达AIRE的THP-1细胞凋亡率。通过间接免疫荧光染色和Western blot检测自噬蛋白LC3B的表达。结果 PMA诱导后,THP-1细胞贴壁生长,形态多样,胞质内可见空泡、吞噬细胞碎片等典型成熟分化形态。转染48 h后,THP-1细胞的AIRE蛋白呈现明显高表达。对比空载体转染和阴性对照,过表达AIRE使THP-1细胞的凋亡率上升;同时,Western blot显示LC3B-Ⅱ的蛋白水平也较空载体转染组增高,且间接免疫荧光染色提示单个细胞的阳性LC3B-Ⅱ斑点数目较空载体转染组明显增加(P<0.05)。结论 AIRE可能通过上调THP-1细胞的自噬促进其凋亡。

关键词：细胞凋亡自噬自身免疫调节因子 LC3B蛋白

自身免疫调节因子在重症肌无力患者胸腺内的表达及作用分析

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中风与神经疾病杂志 2017年第10期34卷 918-920页

作者：闫斌朱明振李卫君贾丽景河南省濮阳市人民医院神经内科河南濮阳457000 河北医科大学第二医院神经内科河北石家庄050000

目的比较自身免疫调节因子(AIRE)在重症肌无力(MG)患者及正常人胸腺内的含量,分析AIRE在MG发病中的作用。方法收集濮阳市人民医院胸外科MG胸腺切除患者的胸腺组织及心脏外科手术患者的胸腺组织,将其分为MG合并胸腺异常组(A)、MG胸腺正常... 详细信息

目的比较自身免疫调节因子(AIRE)在重症肌无力(MG)患者及正常人胸腺内的含量,分析AIRE在MG发病中的作用。方法收集濮阳市人民医院胸外科MG胸腺切除患者的胸腺组织及心脏外科手术患者的胸腺组织,将其分为MG合并胸腺异常组(A)、MG胸腺正常组(B)、对照组(C)。采用蛋白免疫印迹法及荧光定量PCR法比较3组胸腺内AIRE基因及蛋白含量。结果 C组(0.75±0.04)AIRE基因含量明显高于A(0.42±0.08)、B(0.45±0.08)两组,差异有统计学意义(P0.05)。C组(0.72±0.05)AIRE蛋白含量较A(0.40±0.08)、B(0.50±0.05)两组高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 MG患者胸腺内AIRE基因及蛋白含量较对照组偏低,而与胸腺病理类型无关,AIRE在MG发病过程中有重要作用。

关键词：自身免疫调节因子重症肌无力