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国际呼吸杂志 1989年第3期 158-158页

作者：胡桂英

肺炎球菌是引起人类下呼吸道感染、败血症和脑膜炎的重要病原体。它合成许多蛋白质,其中包括被称作肺炎球菌自溶酶的溶血性巯基活化毒素。作者利用光度学技术和透射电子显微镜,在体外研究了肺炎球菌培养物滤液对人呼吸道上皮的影响。肉... 详细信息

肺炎球菌是引起人类下呼吸道感染、败血症和脑膜炎的重要病原体。它合成许多蛋白质,其中包括被称作肺炎球菌自溶酶的溶血性巯基活化毒素。作者利用光度学技术和透射电子显微镜,在体外研究了肺炎球菌培养物滤液对人呼吸道上皮的影响。肉汤培养物滤液使11/15标本的纤毛摆动频率(CBF)明显减慢(p自溶酶质粒的大肠杆菌培养液中纯化的重组肺炎球菌自溶酶,可引起剂量依赖性CBF 减慢,而培养

关键词：肺炎球菌自溶酶培养物

检测自溶酶和游离羟脯氨酸含量判断小儿支气管哮喘病情

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国际呼吸杂志 1990年第2期 103-103页

作者：黄开伟

为了研究小儿支气管哮喘病程中细胞自溶和结缔组织代谢障碍对其病情的影响,检测血清中羟脯氨酸和代表细胞自溶活性的系列酶的含量,如β-氨基己糖酶及其同功酶、β-葡萄糖醛酸酶和β-半乳糖甙酶以观察其与病情的关系。

关键词：支气管哮喘病自溶酶脯氨酸含量病情小儿哮喘患儿

清香酒醅源植物乳杆菌SL32-2自溶特性及机制分析

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清香酒醅源植物乳杆菌SL32-2自溶特性及机制分析

作者：来欢欢山西师范大学

学位级别：硕士

乳酸菌广泛应用于各类发酵食品中,对食品保存以及风味的形成起着关键作用。尤其在清香白酒酿造过程中,乳酸菌的代谢产物乳酸及其与乙醇酯化形成的乳酸乙酯都是清香白酒主要的香气成分;而当乳酸菌过量生长时,乳酸和乳酸乙酯含量升高既影... 详细信息

乳酸菌广泛应用于各类发酵食品中,对食品保存以及风味的形成起着关键作用。尤其在清香白酒酿造过程中,乳酸菌的代谢产物乳酸及其与乙醇酯化形成的乳酸乙酯都是清香白酒主要的香气成分;而当乳酸菌过量生长时,乳酸和乳酸乙酯含量升高既影响新酒产量,也因改变清香白酒主体香气成分比例影响其质量。本课题选择清香酒醅来源乳酸菌作为研究对象,考察其自溶特性及其自溶酶的酶学性质,并用蛋白质组学分析其自溶机制,为有效控制乳酸菌繁殖提供新的思路。主要研究结果如下:考察植物乳杆菌SL32-2在不同生长阶段、缓冲液、温度、p H、Triton X-100、孵育时间中的自溶度,结合扫描电镜观察自溶过程中菌体细胞的形态变化,以确定SL32-2自溶的最适条件。结果表明,不同生长阶段的植物乳杆菌SL32-2细胞表现出不同的自溶特性,对数前期细胞自溶度最高为46%;五种反应介质中,SL32-2在PBS缓冲液(50mmol/L,p H 6.5)中自溶度最高为40.16%。SL32-2自溶的最适温度和p H分别为37℃和6.5。Triton X-100可以提高自溶度,当Triton X-100浓度为1 g/L时,SL32-2的自溶度为59.5%;孵育时间为45 h时,SL32-2的自溶度达到52.27%。随着处理时间的延长,自溶过程中的菌体细胞由于自溶酶水解细胞壁而严重皱缩并形成空壳。综上所述,SL32-2自溶的最适条件为:处于对数初期细胞、PBS(50 mmol/L,p H 6.5)、37℃、6.5、Triton X-100浓度为1 g/L。为研究SL32-2自溶酶的酶学性质及底物特异性,以该细菌细胞为底物分析其自溶酶的最适温度及最适p H,结合该菌株在有无外加自溶酶时自溶前后还原糖和氨基酸的变化以及对4种底物的敏感性,分析其自溶酶的底物特异性。结果表明,SL32-2自溶酶的最适p H为7.5,最适温度为37℃;添加自溶酶后,SL32-2的自溶度增加了12.04%、还原糖和氨基酸分别增加了1.05倍和42.83倍;底物特异性分析时,SL32-2自溶酶中β-N-乙酰葡萄糖胺酶、酰胺酶、羧肽酶、内肽酶的活性分别为0.0036 U、0.0027 U、1.1267 U、2.0987 U,表明作用于肽链的酶活性远高于作用于糖链的酶。为探究植物乳杆菌SL32-2的自溶机制及自溶酶的作用机制,采用蛋白质组学方法对自溶前后和自溶酶处理的植物乳杆菌SL32-2细胞进行分析。结果表明,植物乳杆菌SL32-2自溶后,有87个差异表达蛋白,其中上调蛋白20个,下调蛋白67个;自溶相关蛋白如溶菌酶/胞壁质酶和细胞外蛋白仅在对数生长期细胞中表达;肽聚糖结合蛋白、细胞壁水解酶、溶菌酶、γ-D-谷氨酰-内消旋二氨基庚二酸肽酶、葡聚糖蔗糖酶自溶后分别下调0.08、0.09、0.16、0.26和0.4倍;自溶后仅鉴定出一种自溶相关蛋白为推测自溶酶,说明对数生长期的细胞均以最大的速率生长与分裂,细菌数量呈对数增加,需要多种高活性肽聚糖水解酶参与。SL32-2经自溶酶处理后,有97个差异表达蛋白,其中上调蛋白57个,下调蛋白40个;部分参与细胞壁代谢的差异表达蛋白在自溶酶处理后再次表达,如细胞外蛋白、γ-D-谷氨酰-内消旋二氨基庚二酸肽酶和溶菌酶/胞壁质酶;D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶、γ-D-谷氨酰-内消旋二氨基庚二酸肽酶和葡聚糖蔗糖酶分别上调169.78、33.82和2.49倍,说明SL32-2经自溶酶处理后,多种细胞壁水解酶显著上调,与对数前期细菌较为相似,通过多种自溶酶协同作用提高对菌体细胞的裂解效果。

关键词：乳酸菌自溶蛋白质组学自溶酶

连续监测血培养系统中肺炎链球菌自溶特点分析

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临床检验杂志 2013年第12期31卷 945-947页

作者：蔡婷婷屈平华穆小萍张磊林冬玲陈茶吴尚为天津医科大学检验学院天津300070 广东省中医院检验医学部广州510006 广东省妇幼保健院检验科广州510010 广州金域医学检验中心有限公司广州510330

目的：研究临床分离的肺炎链球菌菌株的血清型和重要毒力因子碱基序列的保守情况，为临床肺炎链球菌疫苗的使用和蛋白质疫苗的研发提供参考依据。方法：收集2010~2013年重庆医科大学附属儿童医院11岁以下儿童中分离的46株肺炎链球菌，... 详细信息

目的：研究临床分离的肺炎链球菌菌株的血清型和重要毒力因子碱基序列的保守情况，为临床肺炎链球菌疫苗的使用和蛋白质疫苗的研发提供参考依据。方法：收集2010~2013年重庆医科大学附属儿童医院11岁以下儿童中分离的46株肺炎链球菌，用多重PCR进行血清型分型。同时PCR扩增肺炎链球菌的11个毒力基因ply、lytA、nanA、phtD、clpP、cps2A、bacteriocin、psaA、piaA、pcsB和stkP，测序后分析碱基序列的突变情况。结果：46株肺炎链球菌共检出13种血清型，其中19A（19.57%）为最常见的血清型，其次为23F和19F（各占15.22%）。临床菌株毒力基因ply、lytA、nanA、phtD、clpP、cps2A、bacteriocin、psaA、piaA、pcsB和stkP的碱基序列保守性分别为97.82 %、96.31 %、82.96 %、87.50 %、98.48 %、83.68 %、66.27 %、99.46 %、98.63 %、88.72 %和96.67 %。结论：在重庆地区儿童感染的肺炎链球菌中，血清型19A分布比例最高，本地区儿童接种肺炎链球菌疫苗时应首选含有19A血清型荚膜多糖抗原的PCV13疫苗。毒力因子ply、stkP、piaA、lytA、clpP和psaA基因在临床菌株中保守性较高，具有作为肺炎链球菌疫苗候选蛋白质的潜力。

关键词：血培养系统肺炎链球菌自溶酶细菌鉴定

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单环刺螠体表黏液的制备与自溶现象的研究

单环刺螠体表黏液的制备与自溶现象的研究

作者：吕慧超烟台大学

学位级别：硕士

单环刺螠是一种生活于浅海泥沙底质中的经济类海洋无脊椎动物。前期研究发现单环刺螠的体外分泌物具有一定的抗菌活性,能够避免洞穴周围污染物的积累和有害微生物的生长;同时还发现单环刺螠存在自溶现象,即当其体壁遭受损伤后,容易产生... 详细信息

单环刺螠是一种生活于浅海泥沙底质中的经济类海洋无脊椎动物。前期研究发现单环刺螠的体外分泌物具有一定的抗菌活性,能够避免洞穴周围污染物的积累和有害微生物的生长;同时还发现单环刺螠存在自溶现象,即当其体壁遭受损伤后,容易产生体壁穿孔、内脏泄露,最终导致整体液化的现象。本研究针对这两种现象,建立单环刺螠体表黏液的制备方法,分析其黏液的抗菌活性;纯化单环刺螠内脏中具有溶解体壁作用的蛋白酶,分析其作用条件和主要构成,研究其自溶机理,进而探索单环刺螠体表黏液和自溶酶在医用材料、食品加工等方面的应用前景。利用微电流刺激法,结合建立的简易收集装置,收集单环刺螠的体表黏液;黏液经冷冻干燥后,采用滤纸片—抑菌圈法测试其对大肠杆菌、溶血性链球菌、鲍曼不动杆菌和痤疮丙酸杆菌等的抑菌活性;分析其溶血活性。取清洗后的单环刺螠内脏匀浆、浸提,上清用饱和硫酸铵溶液低温沉淀,透析得到粗酶溶液;以单环刺螠的体壁为底物,分析其最佳酶解条件及稳定性;以荧光酪蛋白为底物,证实其具有丝氨酸蛋白酶活性;通过Sephadex G-100对粗提物进行分离,SDS-PAGE确定分子量;通过血细胞计数板计数法,探究该类酶对于小球藻细胞的破壁作用。通过实验得到如下结果:(1)用于单环刺螠体表黏液收集的最适刺激电压为6V,最适刺激温度为4℃;黏液的最高制备量为3.291g,得率合1.533%;该黏液具有一定的抑菌活性,0.4g/m L浓度下对大肠杆菌、溶血性链球菌、鲍氏不动杆菌有一定的抑制效果;该黏液具有一定的抗凝血效果。(2)经饱和盐溶液沉淀、透析过滤后得到的源自单环刺螠内脏蛋白溶液具有一定的自溶酶活性;SDS-PAGE测试其平均分子量约为8k Da;酶活分析显示其具有较好的热稳定性,80-100℃热处理2h仍可保持约80%的酶活性;其对单环刺螠体壁具有降解能力,在70℃、p H为9时酶解效果最好;金属离子Pb能够抑制该酶的活性,Ca、Zn有助于提高该酶的活性;组织切片显示,该类酶可破坏单环刺螠体壁的正常结构;且在体外能够降解小球藻的细胞壁;推测单环刺螠的自溶过程中,至少存在由该类酶的内源性泄露所引发的组织结构失稳现象。通过实验得出如下结论:(1)建立并优化了单环刺螠体表黏液的制备方法;(2)单环刺螠体表黏液具有一定的抑菌和抗凝血功能;(3)建立了单环刺螠自溶酶系的提取及纯化工艺;(4)该自溶酶系中具有丝氨酸蛋白酶,可通过溶解、破坏体壁的纤维结构、使体壁失去稳态;(5)明确了单环刺螠发生自溶的主要机理之一:损伤导致内脏酶类释放,溶解体壁造成体壁穿孔,内脏泄露加剧,造成整体液化;(6)该自溶酶系对部分藻类细胞具有较好的溶解和破壁效果。

关键词：单环刺螠黏液抗菌自溶酶分离纯化

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超高压处理海珍品保鲜实验研究

超高压处理海珍品保鲜实验研究

作者：邓记松大连理工大学

学位级别：硕士

超高压食品处理以其“灭菌”、“保鲜”、“节能”、“环保”等优点,得到了学术界和工业界的广泛关注。食品超高压处理能够杀灭微生物、钝化酶的活性,延长食品的保鲜期限而有效保持食品原有风味、色泽等感官性质。超高压保鲜技术有效地... 详细信息

超高压食品处理以其“灭菌”、“保鲜”、“节能”、“环保”等优点,得到了学术界和工业界的广泛关注。食品超高压处理能够杀灭微生物、钝化酶的活性,延长食品的保鲜期限而有效保持食品原有风味、色泽等感官性质。超高压保鲜技术有效地克服了传统方法保鲜食品所带来的种种弊端,给食品加工业注入了新的活力。海珍品在捕获后由于受体内微生物、酶的影响极易腐败变质,利用超高压技术处理海产品能有效杀灭微生物、钝化酶的活性,延长海产品的保鲜期。但是,目前超高压灭菌、钝酶的机理尚不清楚,超高压保鲜技术与产业化还有相当的距离,亟需大量的基础研究。本文利用超高压技术,选择具有较高附加值的海珍品(牡蛎、海参)进行超高压保鲜实验,按照灭菌—钝酶—保鲜—品质影响的思路,系统全面地研究了超高压处理海产品的保鲜效果。具体工作与结果如下:(1)以牡蛎、海参为研究对象,参照食品卫生标准,考察超高压影响因素对微生物指标变化的影响,结果表明压力越高菌落总数的灭活率越高,延长保压时间、升高处理温度能一定程度上提高灭菌率,而保压方式对灭菌率的影响不明显;并对超高压处理后残存菌落的再生长情况进行了研究,结果表明超高压能有效抑制残存菌落的再生长,压力越高抑制作用越明显;(2)对海参进行超高压处理,探讨了处理压力、保压时间、处理温度和保压方式对海参自溶酶活性的影响,得出了最佳工艺条件,同时提出临界处理压力、临界保压时间和临界介质温度概念,明确了其物理含义和生产实用价值;跟踪检测了自溶酶在保藏期间内的变化情况,结果表明自溶酶活性呈降低趋势,较高的压力处理自溶酶活性变化不大;(3)对牡蛎和海参进行超高压处理,在处理后及保藏的一段时间内通过对感官、pH值、挥发性盐基氮的测定考察了超高压处理对海珍品保鲜的影响,超高压能有效延长其保鲜期;(4)对牡蛎和海参进行超高压处理,探讨了超高压对海珍品的含水量、灰分、蛋白质、海参多糖的影响;超高压处理能增加海珍品的含水量,降低灰分,诱导蛋白质变性,而对海参多糖含量影响不大。通过本为的实验研究,不仅对超高压处理海珍品工艺有了较为深入的认识,还对各个操作参数对灭菌效果、钝化自溶酶活性、保鲜、品质的影响有了较为系统的了解,这对牡蛎、海参的超高压工业生产提供了一定的参考价值。

关键词：超高压技术海珍品菌落总数自溶酶新鲜度

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试论西汉古尸的保存原因

江汉考古 1981年第S1期 110-115页

作者：后德俊湖北省博物馆

1972年初在湖南长沙马王堆一号汉墓出土了一具女尸,1975年6月在湖北江陵凤凰山168号汉墓又出土了一具男尸。这二次考古学上的重要发现曾引起国内外的广泛注意,对其保存原因也进行过一些讨论。比较倾向的认识是深埋、密封在古尸的保存中... 详细信息

1972年初在湖南长沙马王堆一号汉墓出土了一具女尸,1975年6月在湖北江陵凤凰山168号汉墓又出土了一具男尸。这二次考古学上的重要发现曾引起国内外的广泛注意,对其保存原因也进行过一些讨论。比较倾向的认识是深埋、密封在古尸的保存中起了主要的作用。本文试就这个问题进行一些探讨。一、古尸的保存情况从目前已发表的资料来看,二具古尸在年代上大体相近,在保存水平上也大体相近。现简略如下:女尸:外形完整、脏器完整。硬脑膜完好,血管结构清楚。有部分脂肪酸保存。作

关键词：古尸深埋外棺墓坑男尸马王堆女尸胶原纤维白纤维尸体自溶酶饱水状态墓室入棺

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上农《火锅伴侣》的研制

上海农学院学报 1996年第4期14卷 231-235页

作者：季瑞溶胡飞闵锐孙向军姚晓敏杨祥玉上海农学院

上农《火锅伴侣》的主要原料是采用加工出口冻对虾时被摘下废弃的虾头，并辅以被誉为天然绿色食物源的螺旋藻等。虾头内有丰富的蛋白质、脑磷脂、卵磷脂、虾青素并含多种必需氨基酸。利用对虾头及螺旋藻的营养成分研制的风味营养食品─... 详细信息

上农《火锅伴侣》的主要原料是采用加工出口冻对虾时被摘下废弃的虾头，并辅以被誉为天然绿色食物源的螺旋藻等。虾头内有丰富的蛋白质、脑磷脂、卵磷脂、虾青素并含多种必需氨基酸。利用对虾头及螺旋藻的营养成分研制的风味营养食品──上农火锅伴侣，由于富含营养、味道鲜美、口感细腻，故制品营销二年来已得到消费者的青睐和认可。

关键词：火锅伴侣对虾头混合溶剂螺旋藻自溶酶

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虾头的综合加工技术

企业科技与发展 1994年第6期 2-3页

作者：夏邦旗

虾头是对虾加工的副产品,约占整个虾重的三分之一,我国仅北方每年加工对虾产生的虾头就有4万吨左右。目前,这些虾头没有得到充分地利用,造成的浪费较大。虾头含丰富的营养物质,可食部分占相当的比重,虾头的粗蛋白约13％,粗脂肪9％。虾... 详细信息

虾头是对虾加工的副产品,约占整个虾重的三分之一,我国仅北方每年加工对虾产生的虾头就有4万吨左右。目前,这些虾头没有得到充分地利用,造成的浪费较大。虾头含丰富的营养物质,可食部分占相当的比重,虾头的粗蛋白约13％,粗脂肪9％。虾体60％以上的自溶酶存在于虾头内。另外还含有风味独特的香味料。

关键词：综合加工技术对虾头香味料操作要点工艺流程原料量逆流浸提自溶酶减压浓缩食盐水

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