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运动干预对不同肥胖程度大鼠脂肪分化胰岛素通路的调控研究

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运动干预对不同肥胖程度大鼠脂肪分化胰岛素通路的调控研究

作者：冯婉瑜南京体育学院

学位级别：硕士

研究目的:本研究旨在探讨8周中等强度跑台运动对不同肥胖程度大鼠附睾周脂和皮下脂肪分化的影响,为运动干预肥胖及慢病提供理论依据。方法:180只雄性SD大鼠随机分为普通饮食对照组（n=30,喂食普通饲料）和高脂诱导组（n=150,喂食D12451... 详细信息

研究目的:本研究旨在探讨8周中等强度跑台运动对不同肥胖程度大鼠附睾周脂和皮下脂肪分化的影响,为运动干预肥胖及慢病提供理论依据。方法:180只雄性SD大鼠随机分为普通饮食对照组（n=30,喂食普通饲料）和高脂诱导组（n=150,喂食D12451高脂饲料,脂肪提供热量占45%）,诱导时间9周。高脂饮食诱导组按体重分类标准分3组:超重组（体重超过对照组体重10%-20%）、轻度肥胖组（体重超过对照组体重20%-30%）、中度肥胖组（体重超过对照组体重30%-50%）。肥胖模型建立成功后将超重组、轻度肥胖组和中度肥胖组大鼠分别分为运动组和安静对照组,对运动组进行8周中等强度跑台运动干预。运动干预8周后大鼠取样,取样时称量大鼠体重、附睾周脂、皮下脂肪和肾周脂肪重量;检测血清中血脂四项、炎症因子变化;HE染色观察大鼠脂肪细胞形态变化;Western Blot检测大鼠附睾周脂肪和皮下脂肪中AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR、S6K1、p-S6K1、PPARγ的蛋白表达。结果:（1）与安静对照组相比,各肥胖程度运动组大鼠体重、皮下脂肪与附睾周脂重量显著降低,脂肪细胞平均半径显著减小,脂肪细胞数量显著增加。（2）在附睾周脂,运动抑制了超重大鼠p-AKT的表达,促进轻度肥胖和中度肥胖大鼠p-AKT表达;对各肥胖程度大鼠p-m TOR的表达无显著性影响,显著上调p-S6K1的表达,并且显著上调超重和中度肥胖大鼠PPARγ的表达。在皮下脂肪中,运动促进了轻度肥胖组和中度肥胖组大鼠p-AKT表达;对各肥胖程度大鼠p-m TOR的表达无显著性影响。运动上调了中度肥胖组大鼠p-S6K1的表达,并上调轻度肥胖和中度肥胖组大鼠PPARγ的表达。研究结论:运动对皮下脂肪和附睾周脂分化的影响受个体肥胖程度的影响,当机体达到中度肥胖程度时,运动对皮下脂肪和附睾周脂分化均表现为促进作用。但机体处于中度肥胖以下时,运动对皮下脂肪和附睾周脂肪的影响不一致。运动对皮下脂肪和附睾周脂肪分化的影响存在差异,与皮下脂肪相比,附睾周脂肪对运动的应答更为敏感。8周中等强度跑台运动促进附睾周脂肪分化在超重大鼠组即体现出来,而对皮下脂肪分化直到轻度肥胖才有所体现。

关键词：运动脂肪分化脂肪分布胰岛素通路肥胖程度

黄芫花总黄酮通过胰岛素信号通路激活自噬延长秀丽隐杆线虫寿命

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黄芫花总黄酮通过胰岛素信号通路激活自噬延长秀丽隐杆线虫寿命

作者：许瑾山西大学

学位级别：硕士

当今世界,人口老龄化现象早已成为一个全球化问题,老年人在人口比重中的增加给各国的医疗系统带来了极大的挑战。为解决这一问题,许多研究者都投身于寻找可以延缓衰老及治疗相关疾病的药物中去。秀丽隐杆线虫是进行抗衰老研究的理想模型... 详细信息

当今世界,人口老龄化现象早已成为一个全球化问题,老年人在人口比重中的增加给各国的医疗系统带来了极大的挑战。为解决这一问题,许多研究者都投身于寻找可以延缓衰老及治疗相关疾病的药物中去。秀丽隐杆线虫是进行抗衰老研究的理想模型,培养简单、成本低廉、有60%-80%的基因与人类同源。黄芫花是一味传统的中药材,富含二萜类及黄酮类成分,具有抗氧化、治疗心血管疾病等功能。但目前还未有关于黄芫花延缓衰老方面的研究报道。本文研究了黄芫花总黄酮在体外的抗氧化活性,并以秀丽隐杆线虫为模型,研究黄芫花总黄酮(flavonoid from Wikstroemia Chamaedaphne Meissn,WCM)对线虫寿命及生理指标的影响,并通过qRT-PCR、突变体寿命及激光共聚焦检测等方法研究了WCM延长线虫寿命的分子机制。主要研究内容及结果如下:(1)通过采用Fe还原力的测定、DPPH清除率、ABTS.清除实验证明了WCM在体外具有良好的抗氧化活性。(2)通过寿命实验研究WCM对N2线虫衰老的影响,研究结果表明5μg/m L、10μg/m L、20μg/m L WCM均能延长N2线虫寿命,且呈浓度依赖性。其中,20μg/m L WCM的效果最好,延长率为23.8%(p素在50μg/m L显现出延长线虫寿命的效果,延长率为20.8%(p素。与槲皮素相比,WCM具有浓度低,药效强的优点。随后以20μg/m L WCM组作为对照,以WCM所含的8种主要化合物经含量换算进行寿命实验,结果发现这8种黄酮单体化合物在一定程度上均可延长线虫的寿命,但WCM总黄酮的延长寿命效果要优于各单一化合物,表明WCM中各成分之间可能是通过协同作用发挥延长线虫寿命的作用。(3)通过对线虫的运动能力、生殖能力、发育情况及体内褐脂素含量进行研究,发现WCM对线虫的生殖能力及发育情况并没有不利影响,并且可以增强线虫的运动能力及降低体内褐脂素含量,说明WCM可延长线虫的健康寿命。(4)通过应激实验,经WCM处理的线虫体内ROS、抗氧化酶的活性及在应激状态下,经WCM处理的线虫体内ROS、抗氧化酶的活性研究,发现WCM可以改善线虫在氧化环境下的存活情况,并且发现无论是正常环境还是氧化应激环境,WCM加药组线虫体内ROS含量要明显低于对照组线虫,而抗氧化酶活性要明显高于对照组线虫,WCM通过增强线虫体内抗氧化酶活性来达到清除体内过量的自由基的目的。(5)通过qRT-PCR、突变体寿命等多种方法研究WCM延长线虫寿命的分子机制,发现WCM延长线虫寿命不依赖饮食限制通路。WCM通过抑制IIS通路延长线虫寿命。其分子机制可能是通过daf-16、skn-1基因、从而激活自噬基因bec-1、lgg-1并清除受损细胞器及蛋白质大分子来达到延长寿命的效果。综上所述,WCM可以延长线虫寿命、延缓衰老,其机制与胰岛素信号通路及自噬有关。

关键词：衰老秀丽隐杆线虫黄芫花总黄酮胰岛素通路自噬

基于胰岛素通路探讨益肾喘宁汤治疗肾气虚哮喘的作用机制

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中华中医药杂志 2021年第11期36卷 6719-6722页

作者：王音胡燕兰孔丽娅余王琴郑小伟浙江中医药大学基础医学院杭州310053

目的:基于胰岛素通路应用磷酸化抗体蛋白芯片技术探索益肾喘宁汤治疗肾气虚哮喘的作用机制。方法:将24只清洁级Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组8只,分别予以相应措施进行处理,之后取出各组大鼠肺组织,运用磷酸化抗体蛋... 详细信息

目的:基于胰岛素通路应用磷酸化抗体蛋白芯片技术探索益肾喘宁汤治疗肾气虚哮喘的作用机制。方法:将24只清洁级Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组8只,分别予以相应措施进行处理,之后取出各组大鼠肺组织,运用磷酸化抗体蛋白芯片技术检测各组大鼠胰岛素通路相关位点蛋白的磷酸化水平,筛选出组间比较具有显著差异的蛋白。结果:与正常组比较,模型组大鼠IRS1、ELK1、GSK3β、EIF4EBP1、RPS6KB1、PRKAA1、BAD、LIPE等磷酸化水平均有所变化;用药后,IRS1、GSK3β、RPS6KB1、PRKAA1等的指标明显升高。结论:通过磷酸化抗体芯片分析,筛选出了益肾喘宁汤干预后哮喘大鼠胰岛素通路中磷酸化水平具有显著差异的位点蛋白,为进一步探讨其作用机制指明了方向。

关键词：益肾喘宁汤肾气虚哮喘胰岛素通路磷酸化抗体芯片

黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠脂肪组织胰岛素信号通路的影响

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中华中医药学刊 2020年第11期38卷 181-184页

作者：刘倩范颖李新刘丽李军林庶茹辽宁中医药大学中医学院辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学信息工程学院辽宁沈阳110847

目的探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠脂肪组织胰岛素信号通路的影响,明确其对血糖调控机制。方法将86只大鼠随机分为6组,除正常组11只外,其余各组15只大鼠予一次性腹腔注射2%STZ(46 mg/kg)造模。同日正常组、模型组予蒸馏水蒸馏水10 mL/kg... 详细信息

目的探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠脂肪组织胰岛素信号通路的影响,明确其对血糖调控机制。方法将86只大鼠随机分为6组,除正常组11只外,其余各组15只大鼠予一次性腹腔注射2%STZ(46 mg/kg)造模。同日正常组、模型组予蒸馏水蒸馏水10 mL/kg,各给药组分别予金芪降糖片混悬液1.47 g/kg,黄芪2.7 g/kg,葛根1.35 g/kg,黄芪葛根汤4.05 g/kg,给药30 d。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测脂肪组织中胰岛素(Ins)、Ins受体(InsR)、葡萄糖转运体4(Glut-4)的水平,实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测脂肪组织中Ins底物(IRS)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB/AKT)mRNA相对表达。结果与正常大鼠比较,模型大鼠Ins、InsR、Glut-4水平降低,IRS、PI3K、AKT mRNA表达减少(P胰岛素信号通路,黄芪作用效果佳。

关键词：黄芪葛根中药配伍糖尿病胰岛素通路

基于TLRS信号通路和胰岛素信号通路探究桑叶对T2DM治疗作用及其机制

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基于TLRS信号通路和胰岛素信号通路探究桑叶对T2DM治疗作用及其机...

作者：王敏北京中医药大学

学位级别：硕士

研究背景:2型糖尿病(T2DM)是一种以糖脂代谢紊乱为特征的非传染性疾病,其多样化的致病因素和复杂的病理机制使T2DM已成为困扰和危害人类健康的重大疾病之一。近年来,随着对糖尿病研究的逐渐深入,越来越多的学者认为T2DM是一种与代谢相... 详细信息

研究背景:2型糖尿病(T2DM)是一种以糖脂代谢紊乱为特征的非传染性疾病,其多样化的致病因素和复杂的病理机制使T2DM已成为困扰和危害人类健康的重大疾病之一。近年来,随着对糖尿病研究的逐渐深入,越来越多的学者认为T2DM是一种与代谢相关的慢性炎性疾病。临床实践发现T2DM患者体内炎症因子处于高表达状态,实验研究也表明炎症因子的分泌与T2DM的产生有密切关系。临床治疗T2DM的药物以化药为主,虽然疗效显著,但多伴有一定的毒副作用,因此寻找新的降糖药迫在眉睫。中国传统医学对糖尿病的认识始于两千多年前,当时的古籍就有对类糖尿病症状的记录,现代中医学家认为T2DM属“消渴”或“消瘅”范畴,患者多因饮食不节、喜食油腻之物,致机体阴虚燥热,痰湿内阻,成痰成瘀,终成“消渴”。根据糖尿病的不同病因病机,中医常采用不同的药物治疗,清热药桑叶为临床治疗T2DM的常用中药。现代药理学研究表明桑叶含有多种降糖物质,可以通过不同途径改善机体糖代谢。另有研究发现桑叶可以抑制多种动物模型的炎症反应,但桑叶能否通过抑制炎症反应治疗T2DM的研究报道较少,因此本课题基于TLRs介导的炎症信号通路和胰岛素信号通路,探讨桑叶调控炎症信号通路改善IR治疗T2DM的作用及其机制,阐明桑叶通过多信号途径发挥降糖作用的机制,为降糖中药药效与机制研究及降糖新药开发提供研究思路和实验依据。研究方法:本实验选择SPF级Wistar雄性大鼠为受试对象,以高脂高糖饲料喂养8周后,腹腔注射低剂量STZ,筛选空腹血糖≥12mmol/L的大鼠纳入实验,并对其胰腺进行病理学检查。受试药为桑叶水提物(高剂量(2.0g/kg),低剂量(1.0g/kg)),阳性药为二甲双胍(0.2g/kg),灌胃给药并继续高脂饲料喂养,持续12周。实验期间,每周选择固定时间称量大鼠体重与24 h进食饮水量,测量大鼠空腹血糖等基础指标,给药第11周,进行大鼠口服葡萄糖耐量试验(OGTT),给药第12周,进行大鼠胰岛素耐量试验(ITT)。第12周实验结束,取大鼠血清测定胰岛素含量,血脂TG、TC、LDL-C和HDL-C水平,炎症因子TN F-α、IL-6和CRP含量;取大鼠肝脏、肌肉组织进行病理学检测,Realtime-PCR技术分别测定大鼠肝脏组织TLR7-9 mRNA,骨骼肌TLRl-2mRNA,脂肪组织胰岛素信号通路蛋白InsR、IRSI、PI3K以及GLUT4mRNA的表达量。Western-blot技术检测肝脏和肌肉组织TLRs通路下游信号蛋白MyD88、TRAF6、NF-κB以及脂肪纽织胰岛素信号通路蛋白的表达最。研究结果:药效学实验表明,桑叶高剂量组大鼠第2周、8周、10周、11周、12周血糖明显降低,具有统计学差异(p胰岛素耐受情况,降低大鼠HOMA-IR,差异具有统计学意义(p胰岛素信号通路InsR、IRS1、PI3K、GLUT4mRNA表达量(p通路下游蛋白的表达(p胰岛素信号通路蛋白InsR、IRS1、PI3K、GLUT4表达量增加(p胰岛素抵抗;桑叶可以降低T2DM大鼠TC、LDL-C含量,降低血清炎症因子CRP和IL-6含量;其降糖机制可能与抑制TLRs信号通路介导的炎症反应及改善胰岛素通路关键信号元件蛋白表达有关。

关键词：桑叶 T2DM 炎症 TLRs 胰岛素通路药效学作用机制

饲料碳水化合物来源和水平对大口黑鲈生长性能、餐后血糖、肝脏糖代谢及胰岛素通路的影响

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饲料碳水化合物来源和水平对大口黑鲈生长性能、餐后血糖、肝脏糖...

作者：桑春燕上海海洋大学

学位级别：硕士

研究一:饲料碳水化合物来源对大口黑鲈生长性能、餐后血糖、肝脏糖代谢和胰岛素信号通路的影响以10%水平分别添加α-木薯淀粉、马铃薯淀粉、豌豆淀粉和糊精制成四种等氮(52%)等脂(10%)的试验饲料,其中,鱼粉、虾粉、发酵豆粕和玉米蛋白... 详细信息

研究一:饲料碳水化合物来源对大口黑鲈生长性能、餐后血糖、肝脏糖代谢和胰岛素信号通路的影响以10%水平分别添加α-木薯淀粉、马铃薯淀粉、豌豆淀粉和糊精制成四种等氮(52%)等脂(10%)的试验饲料,其中,鱼粉、虾粉、发酵豆粕和玉米蛋白粉被用作主要的蛋白质来源,菜籽油和大豆磷脂为主要脂质来源,沸石粉作填充剂。试验备用鱼经禁食24小时后,挑选规格一致和体型健壮的个体(平均初始体重36.34±0.30g)用作正式试验用鱼,随机分配于12个养殖水槽(1000L)中,每种饲料设3重复,每重复35尾鱼。用上述饲料每天两次(8:00和17:00)表观饱食投喂,养殖试验共持续11周。试验期间,水温保持在27±1℃,pH 7.2±0.2,氨氮含量为(0.15±0.05)mg/L。养殖系统的循环水由海绵和珊瑚砂过滤,并经紫外线消毒输送到每个水槽,各水槽保持均一的水流(2.0L min)和不间断通气(溶解氧≥6mg/L),采用自然光照。以试验鱼的生长指标、餐后血糖、糖原积累、胰岛素信号通路和糖代谢相关酶的基因表达作为评价指标,评定大口黑鲈饲料的适宜碳水化合物来源。研究结果如下:1.饲料中碳水化合物来源对试验鱼的生长、体组成和饲料营养素的利用的影响生长性能碳水化合物种类对试验鱼存活率没有显著影响(P>0.05)。豌豆淀粉组试验鱼的末体重和特定增长率显著高于其他三种淀粉组(P0.05)。然而,豌豆淀粉组试验鱼的粗蛋白质含量最高,并显著高于糊精组;粗脂肪含量最低(P0.05)。饲料利用四组试验鱼的摄食率无显著差异(P>0.05)。但豌豆淀粉组试验鱼的饲料效率和蛋白质效率明显高于糊精组(P胰岛素信号通路的影响餐后血糖饲料中碳水化合物来源对餐后不同时段的血糖水平有显著影响(P0.05);然而,餐后3小时豌豆淀粉组试验鱼血糖含量显著低于木薯淀粉组,并且木薯淀粉组的试验鱼在餐后12小时的血糖含量仍显著高于豌豆淀粉和糊精组(P0.05);同时,豌豆淀粉组试验鱼的胰岛素受体(insulin receptor,IR)、胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS1)和磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)的mRNA表达量显著高于其他淀粉组(P胰岛素通路的活性高于其他处理组。3.结论本研究表明,豌豆淀粉组相较另外三组,能显著提高大口黑鲈的生长性能和饲料利用率,且血糖水平的波动较小。豌豆淀粉组糖酵解关键酶的基因表达量显著高于其他组,对糖异生关键酶的基因表达无明显激活作用。同时,豌豆淀粉组对胰岛素通路的基因表达无抑制作用,本研究得出,在四种碳水化合物中,豌豆淀粉较适合作为大口黑鲈配合饲料的碳水化合物来源。研究二:木薯淀粉的添加水平和酶解处理对大口黑鲈生长性能、餐后血糖、肝脏糖代谢及胰岛素信号通路的影响以4%、8%和12%水平添加α-木薯淀粉(CS4、CS8和CS12)或以上述三种水平添加经普鲁兰酶水解的木薯淀粉(EH4、EH8和EH12)制成6种等氮(51%)等脂(11%)的试验饲料。其中,进口鱼粉、虾粉、发酵豆粕和玉米蛋白粉被用作主要的蛋白质来源;豆油和大豆磷脂用作主要的脂质来源。试验用鱼经禁食24小时后,挑选规格一致和体型健壮的个体(平均初始体重13.08±0.02g)用作正式

关键词：大口黑鲈碳水化合物来源添加水平普鲁兰酶糖代谢胰岛素通路

基于肠道菌群和胰岛素通路研究黄芪甲苷降糖作用和机制

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基于肠道菌群和胰岛素通路研究黄芪甲苷降糖作用和机制

作者：肖徐阳陕西科技大学

学位级别：硕士

糖尿病是全球最严重的流行病之一。胰岛素抵抗是糖尿病发病和进展的关键因素,主要影响胰岛素的代谢调节作用,包括葡萄糖转运,糖原合成和基因表达。越来越多的证据表明,肠道微生物群的变化与胰岛素抵抗和糖尿病有关。黄芪甲苷是黄芪中的... 详细信息

糖尿病是全球最严重的流行病之一。胰岛素抵抗是糖尿病发病和进展的关键因素,主要影响胰岛素的代谢调节作用,包括葡萄糖转运,糖原合成和基因表达。越来越多的证据表明,肠道微生物群的变化与胰岛素抵抗和糖尿病有关。黄芪甲苷是黄芪中的重要物质,具有降糖作用。然而,黄芪甲苷是如何通过调节肠道菌群和胰岛素信号通路来发挥降糖作用的机制尚未明确。因此,本实验通过建立体内体外糖尿病模型,从肠道菌群和胰岛素信号通路角度来阐释黄芪甲苷的降糖作用分子机制,以期为糖尿病的防治提供新的思路与策略,具体研究内容如下:小鼠糖尿病（DM）模型的构建及黄芪甲苷保护效果研究:采用高脂高糖喂养联合75 mg/kg链脲佐菌素（STZ）构建DM小鼠模型,检测分析小鼠生理生化指标、氧化应激水平以及组织形态学变化。结果显示,与CON组相比,DM 组小鼠饮水饮食、FBG、OGTT、AUC、HOMA-IR、TG、LDL、MDA水平明显上升（p＜0.05）;体重、SOD显著下降（p＜0.05）;肝脏、胰脏组织不同程度损伤。给予不同浓度黄芪甲苷处理后,上述各项指标显著逆转,说明黄芪甲苷能够显著改善DM小鼠损伤。基于AMPK/SIRT1和PI3K/AKT通路研究黄芪甲苷对DM小鼠的保护作用:采用 Western blot 和 RT-PCR 技术分析 AMPK/SIRT1 和 PI3K/AKT 通路蛋白和mRNA的表达情况。结果显示,与CON组相比,DM组小鼠AMPK、SIRT1、PI3K、p-AKT的蛋白和mRNA表达水平显著下调（p＜0.05）;黄芪甲苷组的AMPK、SIRT1、PI3K、p-AKT的蛋白和mRNA表达水平显著上调（p＜0.05）。这提示黄芪甲苷可能通过促进AMPK/SIRT1和PI3K/AKT通路回调,改善氧化应激和胰岛素抵抗,发挥保护DM小鼠的作用。基于宏基因组研究黄芪甲苷对DM小鼠肠道菌群的调节作用:采用宏基因组学对DM小鼠和黄芪甲苷保护小鼠的粪便样品进行检测。结果显示,在门水平上,黄芪甲苷组小鼠肠道中拟杆菌门数量增加,厚壁菌门的相对丰度降低;在属水平上,生产短链脂肪酸的有益菌增加,包括毛螺旋菌、瘤胃球菌属、布劳特氏菌属、丁酸弧菌属、理研菌属、Alistipes等。通过环境因子相关性分析发现,理研菌属、Alistipes、Odoribacter等菌属可上调PI3K/AKT、AMPK/SIRT1通路,改善DM症状。表明黄芪甲苷通过调节肠道菌群的整体平衡,同时影响机体代谢来改善DM。HepG2胰岛素抵抗模型的构建以及黄芪甲苷保护效果研究:用高浓度胰岛素构建IR-HepG2模型,最佳建模条件为1×10-8 mol/L胰岛素刺激下持续48 h时。检测HepG2细胞生化氧化指标,结果显示,与CON组相比,IR组细胞葡萄糖的消耗量显著降低,TG含量显著增加,MDA水平显著增加,SOD活力显著降低（p＜0.05）;不同浓度黄芪甲苷处理48h后,AST组细胞上述指标明显改善（p＜0.05）。说明黄芪甲苷能显著改善IR-HepG2细胞的胰岛素抵抗状态。基于AMPK/SIRT1和PI3K/AKT通路研究黄芪甲苷对IR-HepG2细胞的保护作用:分别采用SIRT1抑制剂和PI3K抑制剂抑制相关通路,采用Western blot和RT-PCR技术分析AMPK/SIRT1和PI3K/AKT代谢通路蛋白和mRNA的表达情况,结果显示,IR组以及SIRT1抑制剂EX527和PI3K抑制剂 LY294002 处理的 IR+EX、IR+LY、AST+EX、AST+LY 组细胞 P-AMPK/AMPK、SIRT1、PI3K、p-AKT/AKT 蛋白表达显著下调（p＜0.05）,且AMPK、SIRT1、PI3K、AKT的mRNA表达水平也显著下调;黄芪甲苷组 P-AMPK/AMPK、SIRT1、PI3K、p-AKT/AKT 蛋白表达和 AMPK、SIRT1、PI3K、AKT的mRNA表达显著上调（p＜0.05）。验证了 IR和DM的发病机制是由于AMPK/SIRT1和PI3K/AKT通路受到抑制进而引起氧化应激,胰岛素抵抗等损伤;黄芪甲苷的保护机制是通过促进上调AMPK/SIRT1和PI3K/AKT蛋白表达,来缓解胰岛素抵抗和氧化应激等损伤。

关键词：黄芪甲苷糖尿病胰岛素抵抗肠道菌群胰岛素通路氧化应激

青钱柳叶对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠骨骼肌INsR/IRS1/PI3K/GLUT4通路的影响

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中华中医药杂志 2019年第1期34卷 86-90页

作者：姚骏凯高学敏李伟付璐高飞王蕾蕾贾岚王景霞北京中医药大学北京100029

目的:研究青钱柳叶水提取物(CPE)对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠骨骼肌INsR/IRS1/PI3K/GLUT4通路的影响。方法:雄性SD大鼠100只,随机分为空白组10只和造模组90只,其中空白组给予普通饲料,造模组给予高脂饲料喂养8周。第9周,造模组以30mg/kg... 详细信息

目的:研究青钱柳叶水提取物(CPE)对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠骨骼肌INsR/IRS1/PI3K/GLUT4通路的影响。方法:雄性SD大鼠100只,随机分为空白组10只和造模组90只,其中空白组给予普通饲料,造模组给予高脂饲料喂养8周。第9周,造模组以30mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素,并于72h后选择空腹血糖>11.1mmol/L的成模大鼠随机分为模型组,二甲双胍组,CPE低、中、高剂量组,每组10只;空白组和模型组给予0.9%氯化钠溶液,二甲双胍组给予二甲双胍混悬液(0.3g/kg),CPE低、中、高剂量组分别给予CPE 0.18、0.36、1.08g/kg。连续给药4周,检测大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI),骨骼肌过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA),游离脂肪酸(FFA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6),糖原。Western Blot检测骨骼肌胰岛素受体(INsR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达水平。结果:与模型组比较,CPE各剂量组CAT、SOD、GSH-PX、糖原显著升高(P胰岛素抵抗大鼠骨骼肌中抗氧化酶的含量,缓解氧化应激与炎性反应,改善IR,其机制可能与提高骨骼肌胰岛素通路蛋白表达有关。

关键词：青钱柳叶胰岛素抵抗氧化应激胰岛素通路

益髓灸对D-半乳糖衰老小鼠模型海马组织Klotho蛋白表达及胰岛素通路的影响

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广西医学 2018年第7期40卷 812-817页

作者：赵利华陈望龙吴萍萍陈树燕罗志洪方玉丽广西中医药大学第一附属医院针灸科南宁市530023 广西中医药大学研究生院南宁市530001 佛山健翔医院骨伤二科广东省佛山市528000 南方医科大学附属深圳宝安医院康复科广东省深圳市5181013

目的探讨观察益髓灸对D-半乳糖衰老小鼠海马组织Klotho、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、蛋白激酶B(Akt)、叉头框蛋白O3(FOXO3a)mRNA及蛋白表达的影响。方法将60只雄性昆明小鼠随机分为生理盐水组、模型组、足三里组、百会组、非穴位组,每组1... 详细信息

目的探讨观察益髓灸对D-半乳糖衰老小鼠海马组织Klotho、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、蛋白激酶B(Akt)、叉头框蛋白O3(FOXO3a)mRNA及蛋白表达的影响。方法将60只雄性昆明小鼠随机分为生理盐水组、模型组、足三里组、百会组、非穴位组,每组12只。模型组和各干预组小鼠给予D-半乳糖皮下注射建立衰老小鼠模型,生理盐水组注射等量的生理盐水。3个干预组于造模第13天开始于相应穴位进行艾灸,生理盐水组、模型组仅给予同等程度的捉抓。造模前后采用Morris水迷宫实验对5组小鼠进行行为测试。治疗结束后检测小鼠海马组织Klotho、IRS-1、Akt、FOXO3a mRNA及蛋白水平。结果 (1)造模后,模型组潜伏期较生理盐水组、百会组、足三里组延长(P0.05)。(2)与生理盐水组比较,模型组、非穴位组Klotho、IRS-1 mRNA及蛋白表达水平降低,Akt1、FOXO3a mRNA表达水平增高(P<0.05);与模型组比较,足三里组及百会组Klotho、IRS-1 mRNA表达水平增高,Akt1、FOXO3a mRNA表达水平降低(P<0.05)。(3)与生理盐水组比较,模型组海马组织Klotho、磷酸化IRS-1(p-IRS-1)、Akt、FOXO3a蛋白水平降低(P<0.05),IRS-1、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化FOXO3a(p-FOXO3a)蛋白水平升高(P<0.05);与模型组比较,足三里组及百会组Klotho、p-IRS-1、Akt、FOXO3a蛋白水平升高(P<0.05),IRS-1、p-Akt、p-FOXO3a蛋白水平降低(P<0.05),而非穴位组p-Akt蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论益髓灸的早期干预可能通过上调Klotho、IRS-1 mRNA水平,促进D-半乳糖衰老小鼠海马Klotho蛋白表达,激活IRS-1的丝氨酸抑制性位点,负性调控下游的Akt活性而下调其底物FOXO3a的磷酸化表达,从而发挥延缓脑衰老的作用。

关键词：阿尔兹海默病益髓灸 Klotho 胰岛素通路 D-半乳糖脑衰老小鼠