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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对非小细胞肺癌细胞凋亡的诱导作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2013年第1期39卷 16-18页

作者：郑中华李蕴潜郭敏于洪泉丁丽娟齐玲吉林医药学院病理学教研室吉林吉林132013 吉林大学第一医院神经外科吉林长春130021

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人非小细胞肺癌H596细胞发生凋亡,初步阐明非小细胞肺癌细胞经TRAIL诱导凋亡的作用和机制。方法:培养H596细胞,设对照组和不同浓度(0.01、0.03、0.10、0.30、1.00、3.00、10.00、30.00... 详细信息

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人非小细胞肺癌H596细胞发生凋亡,初步阐明非小细胞肺癌细胞经TRAIL诱导凋亡的作用和机制。方法:培养H596细胞,设对照组和不同浓度(0.01、0.03、0.10、0.30、1.00、3.00、10.00、30.00和100.00μg.L-1)TRAIL组,TRAIL作用H596细胞24h后,酸性磷酸酶法检测细胞凋亡的百分率;Western blotting法检测TRAIL相关蛋白caspase-8、Bcl-2及Fas相关死亡结构域(FADD)的表达情况。结果:TRAIL浓度为0.01～0.03μg.L-1时,对H596细胞的生长无明显抑制作用,细胞出现增殖趋势;从0.10μg.L-1开始,随着TRAIL浓度升高,细胞开始出现凋亡,至10.00μg.L-1时细胞凋亡水平显著增加,与对照组比较差异有统计学意义(P诱导H596细胞发生凋亡,可能与TRAIL相关蛋白表达正常有关联。

关键词：癌,非小细胞肺肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞凋亡

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合穿心莲内酯对肾癌细胞的影响

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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合穿心莲内酯对肾癌细胞的影响

作者：毕然吉林大学

学位级别：硕士

肾细胞癌(RCC)占成人恶性肿瘤的2%至3%,每年新增患者数量超30万。外科手术是RCC首选的治疗方法。但是,对于不可切除和转移的晚期肾癌,有效的治疗方法有限,且毒副作用较大。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)通过结合死亡受体(DR4和D... 详细信息

肾细胞癌(RCC)占成人恶性肿瘤的2%至3%,每年新增患者数量超30万。外科手术是RCC首选的治疗方法。但是,对于不可切除和转移的晚期肾癌,有效的治疗方法有限,且毒副作用较大。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)通过结合死亡受体(DR4和DR5)具有特异性诱导肿瘤细胞凋亡的活性,而且对正常细胞无毒害性,成为当前抗肿瘤研究的热点。但是,由于TRAIL除了激活凋亡信号途径外,还会激活细胞非凋亡信号途径,导致多种癌细胞中TRAIL耐药性的产生。我们的研究证实,RCC细胞对TRAIL同样具有耐药性,单独应用TRAIL对RCC细胞的抑制及杀伤效果不佳。有趣的是,我们发现通过与安全性得到认可的穿心莲内酯联合应用,可以有效对抗RCC细胞的耐药性。相较于单独应用TRAIL或穿心莲内酯,二者联合应用明显增强对RCC细胞细胞活力,增殖,成克隆能力和迁移的抑制作用,并且诱导RCC细胞G2期细胞周期阻滞和细胞衰老,同时诱导RCC细胞程序性凋亡和DNA损伤。随后,我们通过应用Caspase-8抑制剂和坏死抑制剂,蛋白免疫印迹等方法检测凋亡相关蛋白和DNA损伤标志物β-H2AX,发现TRAIL与穿心莲内酯联合应用对RCC细胞的杀伤作用主要通过诱导Caspase-8依赖的细胞凋亡和DNA损伤引起。

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体穿心莲内酯肾癌凋亡 DNA损伤

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肿瘤研究与临床 2013年第7期25卷 441-444页

作者：汤祥军张力王晓勋黄宽明鲁军体曹刚张相华涂汉军湖北医药学院附属太和医院神经外科湖北十堰442000 湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所湖北十堰442000

目的探讨转染肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因的骨髓间充质干细胞（BMSC）基因表达情况及其功能。方法实验分三组，即转染TRAIL基因组、转染空载体组及空白对照组。用脂质体法将TRAIL转入绿色荧光蛋白（GFP）-BMSC中，反转... 详细信息

目的探讨转染肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因的骨髓间充质干细胞（BMSC）基因表达情况及其功能。方法实验分三组，即转染TRAIL基因组、转染空载体组及空白对照组。用脂质体法将TRAIL转入绿色荧光蛋白（GFP）-BMSC中，反转录PCR法检测BMSC的TRAIL mRNA水平，Western blot、免疫荧光法检测TRAIL蛋白的表达；将携带有TRAIL的GFP-BMSC同大鼠C6胶质瘤细胞共培养，通过四甲基偶氮唑蓝比色法检测其对肿瘤细胞的旁观者效应，Hochest-PI双染色法观察TRAIL转染的BMSC对C6细胞凋亡的影响。结果免疫荧光检测显示，转染TRAIL 24、48 h的GFP-BMSC细胞质和细胞膜有TRAIL蛋白的表达，24 h比48 h荧光强，空白对照组及空载体组细胞未见表达。反转录PCR、Western blot显示转染TRAIL基因组细胞TRAIL mRNA及蛋白高表达，空白对照组及空载体组未见表达。转染TRAIL的GFP-BMSC明显抑制C6细胞存活，抑制率为（62.7±0.1）%，高于空载体组的（16.7±0.1）%（P＜0.05），同时转染TRAIL基因的BMSC可促进C6细胞的凋亡。结论转染TRAIL的BMSC能够稳定表达目的基因，且能促进大鼠C6胶质瘤细胞凋亡，具有明显的旁观者效应。

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体骨髓间充质干细胞凋亡

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中国病理生理杂志 2011年第2期27卷 254-259页

作者：叶盛张怀勤林以诺黄伟剑张艳丽邵小琳温州医学院附属第一医院心内科心血管生物和基因研究所浙江温州325000

目的:探讨雷帕霉素对内皮细胞凋亡和增殖、迁移能力的影响,以及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达水平的变化。方法:用浓度为0、1、10、100μg/L的雷帕霉素孵育内皮细胞24 h,应用CCK8法检测血管内皮细胞的增殖能力,Transwell小... 详细信息

目的:探讨雷帕霉素对内皮细胞凋亡和增殖、迁移能力的影响,以及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达水平的变化。方法:用浓度为0、1、10、100μg/L的雷帕霉素孵育内皮细胞24 h,应用CCK8法检测血管内皮细胞的增殖能力,Transwell小室和划痕试验检测细胞迁移能力,DAPI染色观察凋亡细胞核形态改变,Western blotting法检测caspase-3活性以显示血管内皮细胞的凋亡,并用Western blotting检测TRAIL在凋亡的内皮细胞中的表达。结果:雷帕霉素(1-100μg/L)能诱导血管内皮细胞凋亡并抑制其迁移能力(P诱导内皮细胞发生凋亡并抑制其增殖和迁移能力。TRAIL表达上调与雷帕霉素诱导血管内皮细胞损伤有一定的相关性。

关键词：雷帕霉素内皮细胞细胞凋亡细胞增殖细胞迁移肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体

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临床泌尿外科杂志 2011年第2期26卷 143-146页

作者：糜远源许斌闵治超邵宁华立新冯宁翰南京医科大学第一附属医院泌尿外科南京210029

目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)启动子区-716A/G位点单核苷酸多态性(SNP)与影响前列腺癌危险因素的关系。方法:应用聚合酶链反应-连接酶特异检测技术(PCR-LDR)分析186例前列腺癌患者TRAIL基因-716位点的多态性,比较不同... 详细信息

目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)启动子区-716A/G位点单核苷酸多态性(SNP)与影响前列腺癌危险因素的关系。方法:应用聚合酶链反应-连接酶特异检测技术(PCR-LDR)分析186例前列腺癌患者TRAIL基因-716位点的多态性,比较不同基因型与前列腺癌患者诊断时的前列腺癌特异性抗原(PSA)、Gleason评分和TNM临床分期的关系。结果:TRAIL-716G(AG+GG)等位基因与PSA、Gleason评分和TNM临床分期均具有显著的相关性(adjusted OR=0.04,0.07,0.08;95%CI:0.01～0.14,0.02～0.29,0.03～0.21)。结论:TRAIL-A716G(AG+GG)等位基因可能与前列腺癌预后有关,携带TRAIL-716G(AG+GG)等位基因的前列腺癌患者可能预后较好。

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体前列腺癌启动子

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其在脑缺血中的作用

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国际脑血管病杂志 2011年第12期19卷 940-943页

作者：徐阳赵学廉吴雪松储照虎皖南医学院弋矶山医院神经内科芜湖241001

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）在缺血等病理状态下被诱导,并介导脑缺血后的神经元凋亡.了解TRAIL在缺血脑组织中的上调机制,有望开发出新的卒中治疗方法.

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体脑缺血动脉粥样硬化细胞凋亡

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中国地方病学杂志 2012年第4期31卷 393-396页

作者：张永红魏枫苏日娜柴虎林于跃利魏翠英内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院内分泌科 014010

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因（TRAIL）1525位点多态性与结节性甲状腺疾病的关系。方法125例甲状腺疾病患者来自于内蒙古包头医学院第一附属医院内分泌科，其中结节性甲状腺肿（结甲）患者67例，甲状腺腺瘤患者58例。患者... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因（TRAIL）1525位点多态性与结节性甲状腺疾病的关系。方法125例甲状腺疾病患者来自于内蒙古包头医学院第一附属医院内分泌科，其中结节性甲状腺肿（结甲）患者67例，甲状腺腺瘤患者58例。患者中男54例、女71例，平均年龄为（41．05±14．42）岁。结甲患者按毒性或非毒性进行分组，甲状腺腺瘤患者按高功能或非高功能分组。正常对照人群100例，来自本院同期体检者，其中男47例，女53例，平均年龄为（42．35±16．52）岁。根据知情同意的原则，采集两组人群的静脉血，采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RLFP）方法进行TRAIL基因多态性测定，计算TRAIL基因的基因型（纯合子GG、杂合子GA、突变纯合子AA）和等位基因频率（G、A），比较相对风险度（比值比，OR）。结果结甲组TRAIL基因1525位点基因型（GG：40．3％，AG：44．8％，AA：14．9％）、等位基因频率（G：62．7％，A：37．3％）与对照组（GG：17．0％，AG：65．0％，AA：18．0％；G：49．5％，A：50．5％）比较，差异有统计学意义（χ^2值分别为11．376、5．633，P〈0．01或〈0．05）；腺瘤组1525位点基因型（CG：44．8％，AG：38．0％，AA：17．2％）、等位基因频率（G：63．8％，A：36．2％）与对照组比较，差异有统计学意义（χ^2值分别为15．342、6．054，P〈0．01或〈0．05）。结甲组TRAIL基因1525位点等位基因频率风险度与对照组的比较，OR=1．714（P〈0．05），95％可信区间（CI）：1．097—2．679；腺瘤组TRAIL基因1525位点等位基因频率风险度与对照组的比较，OR=1．797（P〈0．05），95％ CI：1．124-2．874。毒性与非毒性结节组、高功能与非高功能腺瘤组TRAIL基因1525位点基因型、等位基因频率比较，差异无统计学意义（χ^2值分别为3．714，2．792；1．103，2．020；P均〉0．05）。结论TRAIL基因1525位点多态性与结节性甲状腺疾病发生关系密切。

关键词：甲状腺结节肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因频率多态性限制性片段长度

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体在特发性炎性肌病患者骨骼肌的表达

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中华内科杂志 2008年第5期47卷 369-373页

作者：赵华王国春北京大学中日友好临床医学院卫生部中日友好医院风湿免疫科 100029

目的通过检测TNF相关凋亡诱导配体（TRAIL）及其受体DR4、DR5、DCR1、DCR2在特发性炎性肌病（IIM）患者骨骼肌组织中的表达，探讨TRAIL系统在IIM发病机制的作用和意义。方法选IIM患者肌活检标本36份，其中多发性肌炎（PM）13份，皮肌炎... 详细信息

目的通过检测TNF相关凋亡诱导配体（TRAIL）及其受体DR4、DR5、DCR1、DCR2在特发性炎性肌病（IIM）患者骨骼肌组织中的表达，探讨TRAIL系统在IIM发病机制的作用和意义。方法选IIM患者肌活检标本36份，其中多发性肌炎（PM）13份，皮肌炎（DM）23份，另选9份骨科外伤手术患者骨骼肌组织标本作对照。用免疫组化法检测TRAIL及其受体在对照组和IIM患者骨骼肌组织中的表达水平。结果（1）对照组和IIM患者骨骼肌细胞上均有TRAIL及其受体DR4、DR5、DCR1、DCR2表达，IIM患者骨骼肌细胞上TRAIL、DR4、DCR2表达明显增加，与对照组相比，差异有统计学意义（P值均小于0．05）。（2）IIM患者肌内膜和间质血管周围浸润的淋巴细胞以表达TRAIL和DCR1为主，少量表达DR4，未见DR5、DCR2表达。（3）有吞咽困难的患者病变肌组织TRAIL、DR4、DCR2表达水平明显升高。ESR升高的患者DCR2表达水平较高。结论IIM患者受累肌组织中TRAIL及其受体的表达明显增加，提示TRAIL系统可能在IIM肌细胞损伤过程中发挥重要作用。

关键词：肌炎肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体特发性炎性肌病骨骼肌

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白血病．淋巴瘤 2012年第10期21卷 585-588页

作者：张迎春王威亚于建渤刘卫平徐州医学院病理学教研室 221002 四川大学华西医院病理科

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）对白血病NB4和K562细胞的作用及与其受体表达的关系。方法以Jurkat细胞株为阳性对照，采用不同浓度的TRAIL分别作用于NB4和K562细胞，观察细胞形态；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）对白血病NB4和K562细胞的作用及与其受体表达的关系。方法以Jurkat细胞株为阳性对照，采用不同浓度的TRAIL分别作用于NB4和K562细胞，观察细胞形态；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞生长情况；用流式细胞术检测细胞表面TRAIL受体的表达情况。结果TRAIL作用导致NB4细胞株生存率显著下降，但弱于Jurkat细胞株，其变化具有TRAIL作用时间和浓度依赖性；对K562细胞株生存率的影响不明显。NB4细胞表面死亡受体4（DR4）和DR5表达水平较高，同时诱骗受体1（DcR1）表达较高；K562细胞DR5表达水平较高，而DR4及DcR1微量表达；Jurkat细胞表面仅DR5低水平表达；DcR2在三株细胞表面均无表达。结论NB4细胞对TRAIL中度敏感，K562细胞对TRAIL耐受；NB4细胞敏感性较低可能与DcR1表达有关，K562细胞耐受性与其表面TRAIL受体表达无关。

关键词： NB4细胞 K562细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体死亡受体欺骗受体