检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

鲤鱼卵肽钙复合物的制备及稳定性

食品科技 2016年第9期41卷 246-251页

作者：黄海李八方曾名湧钦州学院食品工程学院钦州535011 广西北部湾特色海产品资源开发与高值化利用高校重点实验室钦州535011 中国海洋大学食品科学与工程学院青岛266003

以鲤鱼卵肽（Carp egg peptide,CEP）的钙结合率为评价指标,对肽钙结合反应条件进行优化。结果表明,在CEP浓度为5 g/L、钙离子浓度为5 mmol/L、p H8.0,45℃、1 h条件下,钙结合率最高,为86%。制备的CEP-Ca复合物具有较好的酸碱稳定性,在... 详细信息

以鲤鱼卵肽（Carp egg peptide,CEP）的钙结合率为评价指标,对肽钙结合反应条件进行优化。结果表明,在CEP浓度为5 g/L、钙离子浓度为5 mmol/L、p H8.0,45℃、1 h条件下,钙结合率最高,为86%。制备的CEP-Ca复合物具有较好的酸碱稳定性,在p H（5~8）范围内钙保留率高达90%以上。一定的加热处理会导致CEP-Ca复合物钙保留率下降,经过高温杀菌后钙保留率为71.33%。CEP-Ca复合物具有较高的抗消化性,经过胃蛋白酶、胰蛋白酶共同作用后,钙保留率为89.69%。磷酸盐能与CEP竞争钙离子,随着磷酸盐浓度的上升,CEP-Ca的钙保留率显著下降（p〈0.05）,当磷酸盐浓度为30 mmol/L时,钙保留率降至37.05%。

关键词：鲤鱼卵肽肽钙复合物制备稳定性

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

利用鱼糜漂洗水回收的蛋白肽制备肽钙复合物

食品研究与开发 2017年第1期38卷 83-87页

作者：王秀敏解相林黄连光黄海日照职业技术学院海洋工程学院山东日照276826 钦州学院食品工程学院广西钦州535011

以钙结合率为指标,对从鱼糜漂洗废水中回收的肌浆蛋白肽(recycled myogenpeptide,RMP)与钙离子的结合条件进行优化。最佳结合条件为p H9、35℃、钙离子浓度4 mmol/L、RMP浓度5 g/L、反应时间1h,此时钙结合率为85.00%。RMP-Ca复合物具有... 详细信息

以钙结合率为指标,对从鱼糜漂洗废水中回收的肌浆蛋白肽(recycled myogenpeptide,RMP)与钙离子的结合条件进行优化。最佳结合条件为p H9、35℃、钙离子浓度4 mmol/L、RMP浓度5 g/L、反应时间1h,此时钙结合率为85.00%。RMP-Ca复合物具有较好的酸碱稳定性,在p H 5~9范围内钙保留率高达85%以上。一定的加热处理会导致RMP-Ca复合物钙保留率下降,经过121.1℃高温处理后钙还能保留70.14%。RMP-Ca复合物具有很好的抗消化性,消化后钙保留率高达95.31%。

关键词：鱼糜漂洗废水回收肽钙复合物稳定性

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

真鲷附肉鱼骨酶解制肽及肽钙复合物的研究

真鲷附肉鱼骨酶解制肽及肽钙复合物的研究

作者：郝立静天津科技大学

学位级别：硕士

鱼骨中含有丰富的蛋白质和钙,但其在实际生产中常被低值化处理或直接丢弃,没有得到很好的利用。本论文以附有少量鱼肉的真鲷鱼骨为原料,采用生物酶解、超声促进解离及微波合成技术制备了鱼骨肽钙复合物,并通过紫外光谱、傅立叶红外光谱... 详细信息

鱼骨中含有丰富的蛋白质和钙,但其在实际生产中常被低值化处理或直接丢弃,没有得到很好的利用。本论文以附有少量鱼肉的真鲷鱼骨为原料,采用生物酶解、超声促进解离及微波合成技术制备了鱼骨肽钙复合物,并通过紫外光谱、傅立叶红外光谱、扫描电镜等方法对鱼骨肽钙复合物的结构进行了分析。采用5种酶对附肉鱼骨进行水解,通过对水解度和水解液风味的比较,选取胰蛋白酶和风味蛋白酶作为水解用酶。正交试验得到双酶分步水解的最佳条件为：底物浓度5%、酶解温度45℃、pH值6.0,先加入800U/g胰蛋白酶水解4h,再加入3000U/g风味蛋白酶水解4h。高效液相色谱对水解液的分析结果表明,水解液中必需氨基酸含量为148.12mg/100mL,15种氨基酸总含量为332.94mg/100mL采用超滤技术将水解液分为四种组分,对每种组分的鱼骨多肽清除DPPH·能力、清除羟自由基的能力、清除超氧阴离子的能力、还原力和抗油脂氧化的能力进行研究,发现分子量在3kDa以下的多肽组分的抗氧化活性均高于其他组分。对酶解后的骨渣中的钙进行解离,研究结果发现盐酸和乳酸的解离效果较好,超声波明显加速了钙的解离,使钙离子溶出率提高了24.6%。通过单因素和正交实验,得到超声促进乳酸解离钙的最优条件为：温度30℃、乳酸浓度3.0mol/L、时间80min、超声功率576W、液料比7：1。超声促进盐酸解离钙的最佳条件为：温度40℃、盐酸浓度2.0mol/L、时间60min、超声功率504W、液料比9：1。将多肽与解离的钙在微波条件下制备肽钙复合物,分子量为3kDa以下的多肽与超声促进盐酸解离得到的骨钙的合成效果最好,通过单因素和正交实验得到微波合成的最佳工艺参数为：鱼骨多肽与钙的质量比为3：1,微波功率300W、微波时间180s、多肽浓度50g/L。紫外光谱、傅立叶红外光谱、扫描电镜等方法对得到的肽钙复合物的结构进行了分析,结果表明肽钙复合物的结构区别于多肽。

关键词：真鲷鱼骨酶法水解超声微波肽钙复合物

卵黄高磷蛋白磷酸肽钙复合物的制备及其促钙吸收机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

卵黄高磷蛋白磷酸肽钙复合物的制备及其促钙吸收机制研究

作者：赵梦蝶华中农业大学

学位级别：硕士

卵黄高磷蛋白(Phosvitin,PV)是鸡蛋蛋黄中的一种磷酸化糖蛋白,该蛋白质中含有的磷酸化氨基酸,赋予了PV较好的乳化性、抗氧化能力及螯合金属离子能力等特性。本课题以PV作为研究对象,制备卵黄高磷蛋白磷酸肽钙复合物(PPP-Ca),探究PPP与C... 详细信息

卵黄高磷蛋白(Phosvitin,PV)是鸡蛋蛋黄中的一种磷酸化糖蛋白,该蛋白质中含有的磷酸化氨基酸,赋予了PV较好的乳化性、抗氧化能力及螯合金属离子能力等特性。本课题以PV作为研究对象,制备卵黄高磷蛋白磷酸肽钙复合物(PPP-Ca),探究PPP与Ca的结合特性及PPP-Ca在体内调控肠道Ca吸收转运的作用机制。进而在此基础上,建立成骨细胞(MC3T3-E1细胞)和破骨前体细胞(RAW264.7细胞)直接接触共培育体系,从骨矿化环节展开进一步研究。主要研究内容和实验结果如下:(1)通过高温中压(HTMP)预处理方法制备预处理卵黄高磷蛋白(HTMP-PV),再结合胰蛋白酶和嗜热菌蛋白酶复合酶解制备PPP,以钙螯合率为指标筛选制备PPP-Ca的最优条件。确定HTMP预处理条件为:PV浓度10 mg/m L,p H 6.5,于120℃、0.1 MPa下处理30 min,其SDS-PAGE图显示HTMP-PV的分子量大小明显降低。以水解度和钙结合率为指标筛选得出:嗜热菌蛋白酶的最优酶解条件为HTMP-PV浓度10 mg/m L、加酶量2000 U/g、p H 6.8、酶解温度68℃,酶解时间24h。通过在胰蛋白酶和嗜热菌蛋白酶最适条件下依次酶解,PV酶解物钙结合率为43.01%,水解度为45.55%。在制备PPP-Ca的单因素条件筛选中,PPP和Ca的反应温度和反应时间对肽钙螯合过程没有显著影响,肽钙质量比为7:1,p H 9.5,其钙结合率最高,能达到97%以上。(2)通过傅里叶变换红外光谱、Zeta电位、XRD等方法分析PPP与钙结合前后的结构变化。结果表明:红外光谱表征发现钙主要结合在PPP的磷酸基团上,另外氨基和羧基上也提供了一些钙的结合位点;Zeta电位显示,PV经过HTMP+复合酶解后PPP的Zeta值从-42.47 m V下降到-57.13 m V,表明负电荷增加,而PPP与Ca结合后其Zeta值上升到-24.2 m V,电负性降低;XRD表征验证PPP会与Ca形成复合物,导致Ca的特征峰被掩盖。进一步测定PPP-Ca的酸碱稳定性、热稳定性和模拟消化稳定性。发现PPP-Ca在中性和碱性环境下较为稳定,但对酸性环境非常敏感性,并具有良好的热稳定性和体外模拟消化稳定性。(3)建立低钙小鼠模型,探究PPP-Ca在体内对肠道钙吸收转运的作用机制。结果表明:PPP-Ca能有效的缓解因低钙饮食引起的血清AKP异常升高(18.93 Gold units/100 m L),使之降低到11.09 Gold units/100 m L,达到正常钙摄入组水平(10.89Gold units/100 m L)。股骨钙含量指标发现PPP-Ca组的股骨钙含量达到94.33 mg/g,与低钙对照组的80.47 mg/g相比有明显提高,表明PPP-Ca能有效的改善因钙缺乏引起的骨钙流失。并通过Western Blotting(WB)技术检测小鼠十二指肠TRPV6钙离子通道相关蛋白表达量,发现PPP-Ca能够影响TRPV6通道相关蛋白的表达,下调由于缺钙引起的Calbindin D9K蛋白的过量表达。(4)构建Caco-2细胞单层膜模型,通过检测钙跨膜转运量和TRPV6钙离子通路相关蛋白m RNA的相对表达量,探究卵黄高磷蛋白磷酸肽及肽钙复合物体外促钙吸收机制。结果显示:在建模21 d后,Caco-2细胞单层膜极化现象明显,TEER值达到860Ω·cm以上,且荧光黄通透性为7.79×10cm/s,可以用于转运实验。在测定钙转运量和TRPV6钙离子通路相关蛋白m RNA的表达量指标中,结果发现:经过不同浓度的Ca Cl溶液处理后,Caco-2细胞钙转运量呈现一定的浓度依赖性;在用样品处理3 h后,发现PPP-Ca的钙转运量为5.66μg,显著高于Ca Cl组的钙转运量(3.07μg),表明PPP-Ca可以促进Caco-2细胞单层膜的Ca转运量,同时PPP-Ca能影响Caco-2细胞TRPV6钙离子通路相关蛋白Calbindin D9K m RNA的表达情况。(5)建立成骨细胞(MC3T3-E1细胞)和破骨前体细胞(RAW264.7细胞)共培养体系,探究PPP和PPP-Ca对成骨细胞和破骨细胞活性、分化的影响。结果表明:PPP和PPP-Ca能有效提高共培养体系中MC3T3-E1细胞的AKP活性,在MC3T3-E1细胞与RAW264.7细胞以1:1接种密度中,PPP组和PPP-Ca的AKP值分别为2.39金氏单位/100 m L和2.77金氏单位/100 m L,显著高于对照组的2.05金氏单位/100 m L。同时PPP和PPP-Ca可以降低共培养体系中RAW264.7细胞的TRAP活性,PPP组和PPP-Ca的TRAP值分别为2.69 U/L和2.46 U

关键词：卵黄高磷蛋白磷酸肽肽钙复合物 TRPV6钙离子通路 Caco-2细胞单层模型细胞共培养体

太平洋真鳕（Gadus macrocephalus）碎肉肽钙复合物的制备及其促钙吸收作用研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

太平洋真鳕（Gadus macrocephalus）碎肉肽钙复合物的制备及其促...

作者：张明贵青岛大学

学位级别：硕士

以太平洋真鳕(Gadus macrocephalus)碎肉为原料,采用双酶偶联水解获得活性肽,通过其与钙离子螯合制备碎肉肽钙复合物(Gadus macrocephalus minced peptides calcium complex,GMMP-Ca),并采用Caco-2细胞模型研究复合物的促钙吸收功能,主... 详细信息

以太平洋真鳕(Gadus macrocephalus)碎肉为原料,采用双酶偶联水解获得活性肽,通过其与钙离子螯合制备碎肉肽钙复合物(Gadus macrocephalus minced peptides calcium complex,GMMP-Ca),并采用Caco-2细胞模型研究复合物的促钙吸收功能,主要结论如下:1.通过酪蛋白平板初筛和发酵培养复筛,从刺参(Apostichopus iaponicus)肠道中筛选出一株高产蛋白酶菌株HSCD-3,通过16S rDNA鉴定确定其为芽孢杆菌属(Bacillus)。该菌株发酵培养48h后,测得发酵液酶活为89.86 U/m L。发酵液经超滤浓缩、硫酸铵沉淀、冷冻干燥后获得粗酶BP-1,SDS-PAGE显示其蛋白分子量约为30.8 k Da。该酶最适温度为50℃,在40℃能保持85%以上的酶活性,具有良好的热稳定性;最适pH8.0,在pH60范围内,蛋白酶的酶活大于80%;浓度为5m M的不同金属离子对其活性的影响情况是:Na+、K+对酶活性没有影响,而Ca、Fe和Cu对酶活性具有抑制作用,但Mg、Mn和Ba对酶具有激活作用。2.太平洋真鳕碎肉的基本成分:蛋白质18.71%,灰分0.80%,水分80.10%,粗脂肪0.46%。以水解度和可溶性钙结合量为评价指标,通过单因素试验和响应面设计试验优化水解条件。结果表明:胰蛋白酶和BP-1复合水解效果较好;最优水解条件为:pH8.22,温度54.7℃,水解时间5.1h,加酶量300U/g,料液比1:3,两酶比(胰蛋白酶:BP-1)为1:2,在此最优条件下,水解度为32.9%,可溶性钙结合量为23.30μg/m L。高效液相色谱分析结果表明,太平洋真鳕碎肉水解液中分子量大于1 k Da的多肽组分占10.47%;分子量小于1 k Da的多肽组分占89.53%,其中,分子量在0.13.52 k Da的组分占总量的47%。3.以螯合率为指标,优化了太平洋真鳕碎肉肽钙复合物制备工艺,并对其稳定性进行了初步研究。试验结果表明,终浓度为95%乙醇对太平洋真鳕肽钙复合物的沉淀效果最佳,最佳制备工艺条件为肽钙质量比3:1,温度43.6℃,时间50min,pH7.50,螯合率为78.69%。傅里叶红外光谱扫描结果显示,钙离子与太平洋真鳕碎肉多肽的氨基端和羧基端相结合。稳定性分析结果表明,太平洋真鳕碎肉肽钙复合物具有较高的抗消化性,经过胃肠道模拟消化后,持钙能力仍保留85.15%;具有较好的酸碱稳定性,在pH5时,钙保留率保持在80%以上。磷酸盐能够与肽钙复合物竞争钙离子,随着磷酸盐浓度的上升,钙离子的保留率显著下降(P钙离子的保留率下降到15.40%。不同浓度乳糖和氯化钠对肽钙复合物的稳定性没有显著影响(P>0.05)。4.以单层细胞跨膜电阻(transepithelial electrical resistance,TEER)值和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性为评价指标,构建Caco-2细胞单层模型,并研究太平洋真鳕肽钙复合物在Caco-2细胞单层模型中的转运情况。试验结果表明:当细胞培养15d时,单层细胞跨膜电阻已经达到500Ω×cm,Caco-2细胞两侧碱性磷酸酶比值大于2;当培养21d时,单层细胞跨膜电阻达到615Ω×cm,Caco-2细胞两侧碱性磷酸酶比值大于5,说明Caco-2单层细胞已经形成致密、分化完全的单层细胞,建模成功,可用于模拟小肠消化吸收。Caco-2细胞钙转运吸收结果表明:在保留率方面,酪蛋白磷酸肽钙复合物(Casein phosphopeptide calcium complex,CPP-Ca)最高,GMMP-Ca次之,无机钙最低,但三者之间差异不显著(P>0.05);转运率方面,无机钙的转运率最低,CPP-Ca的转运率高于GMMP-Ca但两者之间差异不显著(P>0.05);吸收率方面,CPP-Ca的吸收率最高,GMMP-Ca次之,无机钙最低,统计学分析三者差异显著(P肽钙复合物可以促进细胞水平钙离子的吸收。

关键词：太平洋真鳕碎肉蛋白酶肽钙复合物 Caco-2 钙吸收

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

卵黄高磷蛋白磷酸肽骨矿化作用研究

卵黄高磷蛋白磷酸肽骨矿化作用研究

作者：刘晴丽华中农业大学

学位级别：硕士

卵黄高磷蛋白(PV)是自然界中磷酸化程度最高的蛋白之一,其丝氨酸的含量超过氨基酸总量的55%,其中80%的丝氨酸磷酸化,据报道其水解之后的磷酸肽具有更强的抗氧化等生物活性,基于实验室前期关于PV的工作基础,本论文主要以制备的卵黄高磷... 详细信息

卵黄高磷蛋白(PV)是自然界中磷酸化程度最高的蛋白之一,其丝氨酸的含量超过氨基酸总量的55%,其中80%的丝氨酸磷酸化,据报道其水解之后的磷酸肽具有更强的抗氧化等生物活性,基于实验室前期关于PV的工作基础,本论文主要以制备的卵黄高磷蛋白磷酸肽PPP4为研究对象,从最初观察其与钙的结合情况入手,进一步通过体外胶原蛋白矿化和细胞矿化研究对骨的矿化的影响,最后基于其在体外模型中能促进胶原纤维内部的矿化和成骨细胞细胞基质矿化的作用,为开发促进骨骼发育的功能食品奠定基础。主要研究内容及得到的结论如下:通过ITC研究发现了PPP4与钙离子有三类结合位点,其焓变△H由负变正再变负,说明钙离子与PPP4的结合是先放热再吸热再放热的过程,三类结合位点的△G钙离子浓度的增加,PPP4的结构更加紧密,刚性结构增强,其中β-折叠比例增加了27.8%,β-转角减少37.5%,钙离子对PPP4的荧光猝灭呈自然对数增加的模式,猝灭作用逐步放缓。以体外胶原蛋白膜为基质,以PILP理论为指导,研究了PV和PPP4在钙磷仿生矿化体系中对胶原蛋白矿化的影响。首先制备了胶原蛋白膜,通过SEM/EDS、TEM/SAED和XRD的方法观察了胶原蛋白膜上矿物的沉积状况形貌、晶体的晶型、胶原蛋白矿化后的形貌以及矿物在胶原蛋白基质上的分布。发现PV和PPP4能够调控胶原纤维内部的矿化,促进ACP向HAP的转变,形成的磷灰石晶体在胶原纤维表面也有分布。矿化2d时,对照组的EDS显示Ca/P=1.67,羟磷灰石(HAP)已形成,而此时PPP4组的Ca/P=1.93,主要是无定型磷酸钙(ACP)。矿化14d后,PPP4和PV组有明显的羟磷灰石特征峰。荧光光谱的分析表面PV和PPP4在矿化溶液里面的微观结构并未发生剧烈变化。通过BSA组和空白对照组相比较发现PV和PPP4调控胶原纤维的矿化的发生是一个缓慢有序的过程。以PPP4钙结合实验以及其对胶原蛋白矿化的调控作用为基础,进一步以成骨细胞MC3T3-E1为模型,研究PPP4对其增殖、凋亡、早期分化和后期矿化的影响。PPP4浓度为100μg/mL时,细胞增殖活力与对照组相比增加了32%,PPP4浓度为200μg/m L时,增殖活力增加45%。检测PPP4对细胞凋亡的影响时发现添加不同浓度PPP4后,各组细胞凋亡比率均不超过10%。通过ALP和茜素红染色发现PPP4对成骨细胞分化的影响是缓慢的作用,高浓度长时间的作用反而不利于成骨细胞的分化。制备PPP4与钙的复合物,单因素研究确定其制备工艺为肽钙质量比3:1、反应时间50min、反应温度50℃、反应pH7.5。红外光谱显示PPP4的羧基、氨基和磷酸基团均参与了钙结合。DSC显示PPP4与钙结合之后其热稳定性无明显变化,均达到122℃。PPP4-Ca经过热和冻融处理后稳定性良好,钙保留率维持在98%,消化后钙保留率73.45%。

关键词：禽蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽钙结合胶原蛋白矿化肽钙复合物

磷酸化修饰对鲱鱼卵肽钙结合及其体内钙生物利用的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

磷酸化修饰对鲱鱼卵肽钙结合及其体内钙生物利用的影响

作者：王一行大连工业大学

学位级别：硕士

鲱鱼作为我国年产量最高的淡水养殖鱼类,具有极高的营养价值,其中的鲱鱼卵蛋白质含量丰富,但鲱鱼卵在加工过程中大部分被当作加工废弃物,未得到充分的开发利用,这不仅是对生物资源的浪费,还会造成环境污染。本文以鲱鱼卵为原料,通过碱... 详细信息

鲱鱼作为我国年产量最高的淡水养殖鱼类,具有极高的营养价值,其中的鲱鱼卵蛋白质含量丰富,但鲱鱼卵在加工过程中大部分被当作加工废弃物,未得到充分的开发利用,这不仅是对生物资源的浪费,还会造成环境污染。本文以鲱鱼卵为原料,通过碱性蛋白酶酶解制备鲱鱼卵肽（HEPs）,采用多聚磷酸钠进行磷酸化修饰,研究了鲱鱼卵磷酸肽（HEPPs）的钙离子结合活性以及结合位点,并探讨了鲱鱼卵磷酸肽钙复合物（HEPPs-Ca）的构象结构和分子间作用力,此外,对HEPPs-Ca在小鼠体内钙的生物利用度进行了探究。结果表明:1.通过单因素实验,确定了磷酸化修饰鲱鱼卵肽的最佳条件:三偏磷酸钠（STMP）浓度为2%（w/v）、温度为50℃、p H值为8,反应时间为120 min。并且经磷酸化修饰后,鲱鱼卵肽的钙结合能力显著提高（P＜0.05）。通过红外光谱与拉曼光谱,显示鲱鱼卵肽磷酸化的结合位点为丝氨酸残基,同时也确定了氨基、羧基和丝氨酸上磷酸基团参与了钙离子的螯合反应。通过氨基酸组成分析,发现鲱鱼卵磷酸化肽中的Asp、Glu、Ser和His这几种氨基酸能够有效地促进肽与钙离子的结合。***与钙离子螯合时,发生了氨基酸或多肽结构的折叠和聚集。在螯合的过程中,伴随着α-螺旋结构的消失和β-折叠结构的形成,导致了球形纳米颗粒的形成。其中,HEPPs-Ca纳米颗粒的构象主要是依靠疏水相互作用、氢键和静电作用等非共价键形成并维持稳定的。3.通过控制饲料种类,构建生长期缺钙小鼠模型进行动物实验,结果发现,HEPPsCa能够显著促进钙吸收以及维持血液中钙、磷和碱性磷酸酶水平的稳定,并且起到增加骨钙含量、增强骨生物力学性能的效果,使得上述指标达到或优于正常对照组水平;基于Micro-CT分析和骨组织形态学观察,发现HEPPs-Ca能够增加生长期缺钙小鼠的骨密度、骨体积分数和骨小梁数量,恢复其骨小梁结构。因此,鲱鱼卵磷酸肽钙复合物有望成为新的补钙制剂。

关键词：鲱鱼卵肽磷酸化肽钙复合物钙结合钙生物利用增强骨密度