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绞股蓝总苷提取物及总苷片的质量标准研究

中国中药杂志 2020年第24期45卷 5976-5981页

作者：张子龙李雯珊滕菲匡艳辉范冬冬王德勤朱晶晶王智民中国中医科学院中药研究所北京100700 广州白云山和记黄埔中药有限公司广东广州510515 陕西中医药大学陕西咸阳712046

该文针对目前绞股蓝药材、提取物、制剂尚无国家标准的问题,开展市场调研并收集市面上药用绞股蓝总苷提取物17批,绞股蓝总苷片剂29批,并以其专属性成分绞股蓝皂苷A为指标,建立绞股蓝提取物及其片剂的薄层色谱定性鉴别和HPLC定量评价方... 详细信息

该文针对目前绞股蓝药材、提取物、制剂尚无国家标准的问题,开展市场调研并收集市面上药用绞股蓝总苷提取物17批,绞股蓝总苷片剂29批,并以其专属性成分绞股蓝皂苷A为指标,建立绞股蓝提取物及其片剂的薄层色谱定性鉴别和HPLC定量评价方法。基于17个批次的绞股蓝总苷提取物和29个批次的绞股蓝总苷片的测定结果,分别制定了绞股蓝总苷提取物和总苷片制剂的质量标准,为绞股蓝提取物及其片剂质量标准的提高提出建议。与现有的部颁标准相比,增加了专属性成分的定性鉴别与定量检测,为绞股蓝总苷提取物和片制剂质量标准的修订提供科学依据与建议。

关键词：绞股蓝总苷提取物绞股蓝总苷片绞股蓝皂苷A TLC HPLC 含量测定

超声辅助膜组合技术探索绞股蓝总皂苷部位的分离机制与精制模式

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中草药 2021年第1期52卷 91-98页

作者：李存玉邹雨岑马莉侍言许启龙彭国平南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

目的基于超声与膜分离技术,探索绞股蓝Gynostemma pentaphyllum总皂苷的分离机制与精制模式。方法以总蛋白、多糖、绞股蓝总皂苷、绞股蓝皂苷A、芦丁为指标进行综合评价,微滤-纳滤联用预处理去除大分子并浓缩药液,采用Box-Behnken中心... 详细信息

目的基于超声与膜分离技术,探索绞股蓝Gynostemma pentaphyllum总皂苷的分离机制与精制模式。方法以总蛋白、多糖、绞股蓝总皂苷、绞股蓝皂苷A、芦丁为指标进行综合评价,微滤-纳滤联用预处理去除大分子并浓缩药液,采用Box-Behnken中心组合设计,明确膜孔径、超声功率、pH值对皂苷及黄酮类成分超滤分离行为的差异性,探讨分离机制,设定分离目标,构建绞股蓝总皂苷部位的精制模式。结果微滤和纳滤组合预处理水提取液,可大幅度去除多糖和蛋白,提高浓缩液中总皂苷浓度;超声功率可以调控绞股蓝皂苷胶束状态,溶液碱化,促进包裹或嵌合在胶束中的芦丁溶出,构建了超声辅助超滤的绞股蓝总皂苷精制模式,皂苷类成分总转移率79.7%,其他考察成分均低于6%。结论成分存在状态与分离行为直接相关,以溶液环境和超声辅助调控皂苷缔合状态,构建精制模式,为中药皂苷类成分的常温化精制提供技术支撑。

关键词：皂苷绞股蓝膜分离超声芦丁多糖蛋白精制绞股蓝皂苷A 微滤纳滤 Box-Behnken中心组合设计转移率

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绞股蓝三萜皂苷的β-葡聚糖酶转化研究

国际药学研究杂志 2020年第3期47卷 211-219页

作者：张鸿焱潘俊倩郑伟庞旭张洁陈晓娟张军王磊刘曙晨马百平广东药科大学广州510006 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850 安康正大制药有限公司安康725000

目的探讨β-葡聚糖酶26130 CN对绞股蓝中三萜皂苷的转化及其规律,并基于此酶制备部分次生皂苷,为后续活性研究提供物质基础。方法利用绞股蓝总皂苷进行β-葡聚糖酶转化,采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF/M... 详细信息

目的探讨β-葡聚糖酶26130 CN对绞股蓝中三萜皂苷的转化及其规律,并基于此酶制备部分次生皂苷,为后续活性研究提供物质基础。方法利用绞股蓝总皂苷进行β-葡聚糖酶转化,采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF/MSE)对转化产物进行检测鉴定;以绞股蓝中主成分绞股蓝皂苷XLIX和A为底物进行制备转化,利用制备液相色谱对转化产物进行分离,并利用核磁、质谱对产物进行结构鉴定。结果依据质谱数据以及与相关文献数据比对,鉴定了绞股蓝总皂苷酶解产物中的三萜皂苷28个,其中7个明确为转化产物,发现β-葡聚糖酶26130 CN具有水解绞股蓝皂苷结构中末端葡萄糖或木糖的能力;通过酶转化制备得到了主要成分绞股蓝皂苷XLIX的葡萄糖水解产物长梗绞股蓝皂苷Ⅰ以及绞股蓝皂苷A的木糖水解产物绞股蓝皂苷UL1。结论β-葡聚糖酶26130 CN可有效水解绞股蓝三萜皂苷中的末端葡萄糖基和木糖基,且转化率相对较高,可用于制备次生皂苷或苷元。

关键词：绞股蓝三萜皂苷 β-葡聚糖酶绞股蓝皂苷XLIX 绞股蓝皂苷A

绞股蓝内生真菌多样性与其活性成分绞股蓝皂苷A的相关性研究

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中药材 2015年第3期38卷 476-480页

作者：马生龙王凤霞杨雪万陕宁魏希颖陕西师范大学生命科学学院陕西西安710062

目的:探讨不同产地不同类型绞股蓝内生真菌多样性与其有效成分绞股蓝皂苷A的关系。方法:采用常规分离法对绞股蓝根茎叶内生真菌进行分离,用插片法和点植法分类鉴定,用HPLC法测定绞股蓝皂苷A含量。结果:绞股蓝根茎叶分离得到的125株内生... 详细信息

目的:探讨不同产地不同类型绞股蓝内生真菌多样性与其有效成分绞股蓝皂苷A的关系。方法:采用常规分离法对绞股蓝根茎叶内生真菌进行分离,用插片法和点植法分类鉴定,用HPLC法测定绞股蓝皂苷A含量。结果:绞股蓝根茎叶分离得到的125株内生真菌经过菌落形态、显微特征等鉴定为2纲7目10科22属。镰孢菌属Fusarium是绞股蓝的优势菌属,占总数的22.4%,其次为青霉属Penicillium 12.8%,小球腔菌属Leptosphaeria9.6%。绞股蓝内生真菌种群与绞股蓝皂苷A存在相关性。结论:绞股蓝内生真菌在数量和种群上存在丰富的多样性,而不同内生真菌种群与其品质有关。

关键词：绞股蓝内生真菌绞股蓝皂苷A 多样性相关性

绞股蓝皂苷A通过调节线粒体功能改善ox-LDL诱导的EA.hy926细胞损伤的机制研究

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中华中医药学刊 2020年第1期38卷 77-80页

作者：孙晓宁宋囡杨潇陈语柔陈宁曹慧敏辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学附属第二医院辽宁沈阳110034

目的探讨绞股蓝皂苷A(GpA)通过保护线粒体功能对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导过后血管内皮细胞(ECs)(EA.hy926)损伤的保护作用。方法采用ox-LDL诱导ECs(EA.hy926)损伤模型,GpA组予GpA处理24 h。使用Elisa法检测ATP含量;使用紫外分光光... 详细信息

目的探讨绞股蓝皂苷A(GpA)通过保护线粒体功能对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导过后血管内皮细胞(ECs)(EA.hy926)损伤的保护作用。方法采用ox-LDL诱导ECs(EA.hy926)损伤模型,GpA组予GpA处理24 h。使用Elisa法检测ATP含量;使用紫外分光光度法检测线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、复合物Ⅱ、复合物Ⅲ、复合物Ⅳ及复合物Ⅴ活性发生的变化;同时应用免疫印迹(Western Blotting)检测视神经萎缩蛋白1(OPA1)以及线粒体分裂蛋白1(Fis1)表达的变化情况。结果与正常组对比,模型组的ATP含量降低,与模型组对比GpA组的ATP含量升高。与正常组对比,模型组的呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的活性有明显的降低。与模型组对比GpA组的呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的活性有所升高。与正常组对比,模型组Fis1的表达发生了上调,与模型组对比GpA组Fis1的表达发生了下调。与正常组对比模型组OPA1的表达发生了下调,与模型组对比GpA组OPA1的表达发生了上调。结论 GpA可能通过影响线粒体能量代谢及融合裂解对ox-LDL诱导的EA.hy926发挥保护作用进而防治动脉粥样硬化(AS)。

关键词：绞股蓝皂苷A 线粒体能量代谢血管内皮细胞动脉粥样硬化

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HPLC法同时测定降脂颗粒中5种成分

中成药 2017年第3期39卷 532-535页

作者：马赟王起文徐国华纪乐军陈建伟李祥南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏神华药业有限公司江苏淮安211600

目的建立HPLC法同时测定降脂颗粒(丹参、虎杖、茵陈等)中5种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Hanbon-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长286 n... 详细信息

目的建立HPLC法同时测定降脂颗粒(丹参、虎杖、茵陈等)中5种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Hanbon-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长286 nm(0~30、40~50 min)和203 nm(30~40 min)。结果绞股蓝皂苷A、绿原酸、虎杖苷、丹酚酸B、大黄素分别在0.176~2.46、0.056~0.84、0.36~5.40、0.192~2.88、0.12~1.80μg范围内线性关系良好(r>0.999 0),平均加样回收率97.17%~102.59%,RSD 1.9%~2.9%。结论该方法准确简便,可用于降脂颗粒的质量控制。

关键词：降脂颗粒绞股蓝皂苷A 绿原酸虎杖苷丹酚酸B 大黄素 HPLC

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绞股蓝总苷分散片中绞股蓝皂苷A含量测定

医药导报 2019年第10期38卷 1314-1316页

作者：徐文峰金鹏飞徐硕邝咏梅何笑荣北京医院药学部国家老年医学中心药物临床风险与个体化应用评价北京市重点实验室

目的建立高效液相色谱法测定绞股蓝总苷分散片中绞股蓝皂苷A的含量。方法采用Alltima C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(31:69),流速:1.0 mL·min^-1,检测波长:210 nm,进样体积20μL。结果制剂辅料不干扰绞股蓝皂苷A的测... 详细信息

目的建立高效液相色谱法测定绞股蓝总苷分散片中绞股蓝皂苷A的含量。方法采用Alltima C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(31:69),流速:1.0 mL·min^-1,检测波长:210 nm,进样体积20μL。结果制剂辅料不干扰绞股蓝皂苷A的测定,绞股蓝皂苷A在32.69~163.46μg·mL^-1的范围内线性良好,相关系数为1.000 0,精密度和稳定性良好,RSD均小于1.0%,绞股蓝皂苷A的平均加样回收率为97.2%(n=6);运用该方法测得3批绞股蓝总苷分散片中绞股蓝皂苷A的含量分别为4.05,3.88和3.21 mg·g^-1。结论该方法准确,简便,专属性强,可用于绞股蓝总苷分散片中绞股蓝皂苷A的含量测定。

关键词：绞股蓝皂苷A 绞股蓝总苷分散片含量测定色谱法,高效液相

绞股蓝皂苷A调控lncRNA TTTY15/miR-335-5p通路对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及机制

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河北医药 2022年第7期44卷 981-985页

作者：牛帅帅孙卓伟王承群济宁医学院附属医院骨关节科山东省济宁市272000 山东省桓台县人民医院骨二科

目的探讨绞股蓝皂苷A(GpA)对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及其对lncRNA TTTY15/miR-335-5p通路的调控作用。方法采用白介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,用不同剂量的GpA处理细胞,pcDNA、pcDNA-TTTY15分别转染... 详细信息

目的探讨绞股蓝皂苷A(GpA)对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及其对lncRNA TTTY15/miR-335-5p通路的调控作用。方法采用白介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,用不同剂量的GpA处理细胞,pcDNA、pcDNA-TTTY15分别转染入软骨细胞后用GpA与IL-1β共同处理细胞;qRT-PCR法检测TTTY15、miR-335-5p的表达量;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的水平;用试剂盒检测SOD、MDA的水平;CCK-8实验、流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡;双荧光素酶报告基因实验检测TTTY15与miR-335-5p的靶向关系;Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达量。结果IL-1β诱导的软骨细胞中TNF-α、IL-6、MDA的水平升高(P绞股蓝皂苷A可通过调控TTTY15/miR-335-5p通路而抑制炎性反应、氧化应激、凋亡及促进细胞增殖进而减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤。

关键词：绞股蓝皂苷A lncRNA TTTY15 miR-335-5p 骨关节炎软骨细胞增殖凋亡

绞股蓝总苷分散片指纹图谱及3个成分的定量分析

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中成药 2014年第4期36卷 758-762页

作者：于学海禹玉洪宋海龙辛艳李葆春孟亚雄马小乐王化俊甘肃农业大学甘肃兰州730070 亚宝药业集团股份有限公司山西运城044602

目的建立不同批次绞股蓝总苷分散片HPLc-ELsD指纹图谱，并对3种特征成分定量分析。方法采用HPLc-ELsD法，Phenomenex1unac18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲酸-异丙醇．水（1：8：91）和乙腈进行梯度洗脱，ELsD检测器；体积... 详细信息

目的建立不同批次绞股蓝总苷分散片HPLc-ELsD指纹图谱，并对3种特征成分定量分析。方法采用HPLc-ELsD法，Phenomenex1unac18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲酸-异丙醇．水（1：8：91）和乙腈进行梯度洗脱，ELsD检测器；体积流量0．8mL/min；柱温25℃；进样量10此。结果10批绞股蓝总苷分散片指纹图谱中标示出20个特征峰；绞股蓝皂苷A、人参皂苷Rd、人参皂苷F：的线性范围分别为2．04～7．14μg（r=0．9994）、1．01～3．53μg（r=0．9995）、0．48～1．69μg（r=0．9997）；平均加样回收率分别为98．67％、98．40％、98．92％、RsD分别为1．10％、0．78％、1．30％。结论该方法简便，重复性好，精密度高，可用于绞股蓝总苷分散片生产过程的质量控制与制剂质量控制。

关键词：绞股蓝总苷分散片指纹图谱绞股蓝皂苷A 人参皂苷Rd 人参皂苷F2 HPLC-ELSD