检索结果-南通市图书馆

半理性改造提升细菌漆酶Lac15的催化活性

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2022年第4期62卷 1501-1512页

作者：谢雅楠王瑞李治李杰方泽民房伟张学成肖亚中安徽大学生命科学学院安徽合肥230601 安徽省微生物与生物催化工程技术研究中心安徽合肥230601 安徽省现代生物制造重点实验室安徽合肥230601

【目的】漆酶可氧化各种底物,在多个工业领域有很好的潜在应用价值。Lac15是一种微生物漆酶,已表现出可观的应用潜能,可望通过蛋白质工程改造提升和拓展其应用。【方法】通过基于结构分析的半理性改造策略,选取推测与电子/质子转移或底... 详细信息

【目的】漆酶可氧化各种底物,在多个工业领域有很好的潜在应用价值。Lac15是一种微生物漆酶,已表现出可观的应用潜能,可望通过蛋白质工程改造提升和拓展其应用。【方法】通过基于结构分析的半理性改造策略,选取推测与电子/质子转移或底物结合直接或间接相关的位点进行定点突变,并测定突变酶对各种底物的活性及酶学性质。【结果】部分突变体对某些底物的活性显著提升,其中D216N对ABTS的催化效率提高了1.0倍,R178V和K433T对多巴胺的催化效率分别增加了1.2和11.1倍。同时,这些突变体保留了野生型酶在应用中的优点如中性最适pH和盐促活等性质。【结论】利用基于结构的半理性改造方法,可改善漆酶Lac15对某些底物的活性。漆酶中的一个保守Asp,对应于Lac15中的D216,可作为提升以ABTS为底物或介体时漆酶活性的一个共同改造目标。

关键词：细菌漆酶 Lac15 半理性改造活性特异性

漆酶在深共晶溶剂中的酶学特性及其在木质纤维素降解中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

漆酶在深共晶溶剂中的酶学特性及其在木质纤维素降解中的应用

作者：范欣阳东北林业大学

学位级别：硕士

漆酶是一种底物广泛的多酚氧化酶,在工业上有着广阔的应用前景。深共晶溶剂是一种新型的绿色溶剂,可以溶解多种底物并促进一些酶促反应的进行。木质纤维素生物质作为产量巨大的农林废弃物,本身又是一种可再生的芳烃类物质与碳水化合物... 详细信息

漆酶是一种底物广泛的多酚氧化酶,在工业上有着广阔的应用前景。深共晶溶剂是一种新型的绿色溶剂,可以溶解多种底物并促进一些酶促反应的进行。木质纤维素生物质作为产量巨大的农林废弃物,本身又是一种可再生的芳烃类物质与碳水化合物资源。本文探究了深共晶溶剂对于游离漆酶与固定化漆酶的影响,在此基础上还进一步探究了漆酶对木质素模型物的降解能力,以及漆酶与深共晶溶剂联合去除木质素与预处理水解木质素纤维素的应用。本研究培养了含有漆酶LC02基因的重组大肠杆菌,通过分离纯化获得了重组细菌漆酶LC02。使用重组漆酶筛选深共晶溶剂,选择了甜菜碱基深共晶溶剂中的甜菜碱:水:甘油(BHG),甜菜碱:水:木糖醇(BHX),甜菜碱:水:山梨醇(BHS)三种深共晶溶剂,漆酶在质量分数25%的三种深共晶溶剂中的活性为97%,126%和99%。进一步测试了漆酶在三种深共晶溶剂中的动力学参数与热稳定性,在深共晶溶剂中漆酶的底物亲和性降低但转化能力提高,漆酶的催化能力在BHG深共晶溶剂中有所提升,同时漆酶的热稳定性在深共晶溶剂获得了增强。通过圆二色光谱和荧光光谱分析可知漆酶在深共晶溶剂中具有更为稳定的二级与三级结构。固定化漆酶可以提升酶的稳定性,并且使酶可以在反应中重复利用。本文合成了金属-有机框架(Metal-Organic Frameworks,MOFs)固定化漆酶,优化了以丁香醛联氮(syringalazine,SGZ)为底物时MOFs固定化漆酶的条件。在优化后的合成条件下固定的化漆酶的酶活回收率为105.41%。通过扫描电子显微镜观察到了MOFs材料的不规则网状结。经过动力学及热稳定性的研究表明,MOFs固定化漆酶的活性,底物亲和性,催化能力和热稳定性相对于游离漆酶都有所提高,而深共晶溶剂的加入使得MOFs固定化漆酶的活性,底物亲和性,催化能力和热稳定性有着更为显著的提升。研究通过降解木质素模型物愈创木基丙三醇-β-愈创木基醚(GBGE)以探究漆酶降解木质素的机制,经过HPLC-MS检测可能的中间产物,推导了在有无介体条件下可能的降解途径。对处理前后的木质纤维素样品进行傅里叶变换红外光谱检测,并优化了木质素去除的条件,最终优化后条件为500U/L浓度的漆酶,25%(w/w)BHG的深共晶溶剂作为缓冲液,1 m M的ABTS介体,在此条件下样品中约25%的木质素被去除。测定了游离与固定化漆酶预处理木质纤维素被水解的产糖率,其中游离漆酶与深共晶溶剂共同预处理组的还原糖产率最高为355.35 mg/g。

关键词：细菌漆酶金属-有机框架材料深共晶溶剂木质素模型物木质纤维素

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

细菌漆酶的结构设计与功能进化

细菌漆酶的结构设计与功能进化

作者：金兰娜吉林大学

学位级别：硕士

枯草杆菌漆酶是一种蓝色多铜氧化酶,它能够参与木质素的降解,并且催化多种芳胺类小分子物质的氧化,是一种环境友好型酶。本论文从原始的产漆酶菌株CAR2出发,通过紫外线诱变的方法得到具有较高漆酶活性的菌株ZNXH1,两者所产漆酶分别为CAR... 详细信息

枯草杆菌漆酶是一种蓝色多铜氧化酶,它能够参与木质素的降解,并且催化多种芳胺类小分子物质的氧化,是一种环境友好型酶。本论文从原始的产漆酶菌株CAR2出发,通过紫外线诱变的方法得到具有较高漆酶活性的菌株ZNXH1,两者所产漆酶分别为CAR2(R155)、CAHH1(R155H、M157H、A158T),而后者的催化活力明显高于前者。为了建立漆酶功能与结构的相关性,我们利用定点突变的方法在漆酶的第二保守区选定了155、157、158三个关键位点,设计并获得了六种突变体漆酶:CAW(R155W)、CAWH(R155W,M157H)、CAWH1(R155H、M157H、A158E)、CAHE(R155H、A158E)、CAHH(R155H、M157H)和CAH2(R155H),其中CAR2、CAH2(R155H)为共享的原始漆酶和对照突变体漆酶。上述八种漆酶在大肠杆菌中实现了有效的活性表达,其分子量均约为66 kDa。对上述八种漆酶的性质与功能进行了对比分析,取得如下结果:(1)CAHH1及所有六种突变体漆酶(CAW、CAWH、CAWH1、CAHE、CAHH、CAH2)的催化活力均高于野生型漆酶CAR2,其中尤以CAHH1及CAHH的催化活力为高,其次为CAH2与CAWH,说明枯草杆菌漆酶的His155、His157、Thr158位点对漆酶活性有明显的正效应或对于漆酶的催化活性是必需的;(2)除野生型菌株CAR2的最适温度为50℃,另外七种漆酶的最适温度均为60℃,而且CAHH1、CAHH、CAH2的热稳定性最高,其次是CAWH1与CAHE,它们在40-80℃下孵育1h后,均可以保持约70%以上的活力,说明枯草杆菌漆酶的His155、His157位点对漆酶的热稳定性也有较大的贡献;(3)野生型漆酶CAR2的最适pH为4.0,剩余七种漆酶的最适pH为4.6,说明CAHH1与所有突变体漆酶的催化条件略有碱移,这显然对漆酶的应用是有益的。W155类突变体漆酶(CAW、CAWH、CAWH1)的酸碱稳定性明显高于其它漆酶,说明W155位点对提高漆酶的酸碱稳定性,特别是在弱碱性条件下的稳定性有明显贡献;(4)Co、Mn和Mg对漆酶有激活作用,其中Mn的激活作用最为显著;(5)动力学分析表明,His155、His157、Glu158/Thr158位点对提高漆酶的催化效率是有利或必须的;(6)在漆酶通用介体ABTS存在下,原始漆酶和突变体漆酶均在3 h之内可以使靛蓝胭脂红(蒽醌类)、刚果红(偶氮类)、结晶紫(三苯甲烷类)染料有效脱色,脱色率达70%以上,其中CAHH和CAHH1对靛蓝胭脂红和刚果红的脱色率达到了90%以上,对结晶紫的脱色率可达80%以上,然而所有漆酶对活性亮蓝(蒽醌类)、甲基红(偶氮类)的脱色效果较低(低于20%),说明漆酶的第二保守区对漆酶催化的底物有一定的选择性,同时His155、His157、Thr158位点对提高漆酶的应用性也是有利的。另一方面,所有漆酶对靛蓝胭脂红的脱色均不依赖介体ABTS的存在,但催化结晶紫时确是非常依赖介体ABTS存在的。在有Mn存在的条件下,除了原始漆酶CAR2外,其它漆酶对靛蓝胭脂红、刚果红和结晶紫的脱色率均有明显提高,催化3 h后,脱色率均接近100%,其中突变漆酶CAHH和CAHH1对结晶紫的脱色率效力最高,作用1.5 h后达到100%。这些结果说明,这些漆酶,尤其是第二组(CAWH、CAWH1、CAHE)和第三组漆酶(CAHH1、CAHH、CAH2)有望成为有潜力的工业用酶。总体上来说,我们得到的突变体漆酶CAHH和CAHH1在比活力、热稳定性以及脱色率、对环境的敏感性等方面都表现较突出的特性,更好的满足了工业需要。通过对漆酶第二保守区关键位点氨基酸残基的设计改造,通过对比分析所有漆酶在活力、温度稳定性以及脱色率、对环境的敏感性等方面的差异,建立了漆酶在该区域的结构与功能的相关性,为提高漆酶的应用性,并针对不同的目的及漆酶应用条件,设计出不同的高效漆酶等奠定了基础。

关键词：枯草芽孢杆菌突变体细菌漆酶活性脱色

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

细菌漆酶的研究及应用进展

生物技术通报 2013年第2期29卷 41-48页

作者：马莹莹贾红华韦萍南京工业大学生物与制药工程学院南京211816

漆酶作为一种绿色环保的多酚氧化酶类,目前被广泛地应用于染料降解、造纸等领域。细菌漆酶与真菌漆酶相比,有更好的热稳定性和更宽的最适pH范围。因此,在工业应用方面更具优势与潜力。综述细菌漆酶的来源、分布、分子结构等基本信息,以... 详细信息

漆酶作为一种绿色环保的多酚氧化酶类,目前被广泛地应用于染料降解、造纸等领域。细菌漆酶与真菌漆酶相比,有更好的热稳定性和更宽的最适pH范围。因此,在工业应用方面更具优势与潜力。综述细菌漆酶的来源、分布、分子结构等基本信息,以及目前细菌漆酶发酵生产水平,并对固定化细菌漆酶进行总结。此外,对细菌漆酶在染料废水、电化学应用及造纸等工业生产方面的应用作简要的介绍。

关键词：细菌漆酶固定化应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细菌漆酶结构多样性及其功能研究

细菌漆酶结构多样性及其功能研究

作者：张妍吉林大学

学位级别：硕士

枯草芽孢杆菌漆酶由于其底物范围广泛、稳定性良好、产物无污染等天然优势,越来越受到人们关注,在多个工业领域也有着广泛的应用。本论文作者所在课题组前期已从土壤枯草芽孢杆菌中提取了野生型的漆酶基因CAR2（Genbank登录号:MG571271... 详细信息

枯草芽孢杆菌漆酶由于其底物范围广泛、稳定性良好、产物无污染等天然优势,越来越受到人们关注,在多个工业领域也有着广泛的应用。本论文作者所在课题组前期已从土壤枯草芽孢杆菌中提取了野生型的漆酶基因CAR2（Genbank登录号:MG571271）,并获得了其高活力的突变体CAH2。通过对CAH2分子进行空间构象模拟,我们发现:CAH2分子中铜I位点（Cu2+I）附近的区域以及底物结合通道部位的构象具有很大的定向进化空间,通过进一步的理性设计确定两类CAH2突变的方向。一类是对漆酶CAH2的底物结合通道门上的212、217、222位点的脯氨酸位点进行突变,获得突变体漆酶A3（P212A、P217A、P222A）和G3（P212G、P217G、P222G）;另一类是对漆酶CAH2分子上制约底物结合通道门的、类似于“合页”的位置进行改变,获得突变体漆酶SP（S360P）。对于CAH2的不同突变位点,设计相应引物。采用重叠延伸PCR（SOE-PCR）方法获得了相应的三种突变体基因a3、g3及sp,将其与空表达载体pET-28a重组,得到相应的重组表达载体,最后通过诱导表达与纯化,获得了相应的突变体漆酶A3、G3及SP。通过对它们酶活力分析,我们发现:三种突变体漆酶的催化活力均较原始漆酶CAH2有显著的提高,尤其是漆酶G3与SP。因此我们进一步以g3为模板,对其再进行S360P突变,又获得了突变体漆酶GSP。活力比较结果显示,漆酶GSP的催化活力提高得非常显著。对原始漆酶CAH2及其四种突变体漆酶A3、G3、SP、GSP的基本酶学性质与功能进行了测定与对比分析。结果表明:（1）A3、G3、SP和GSP中相应位点氨基酸的改变虽然没有对漆酶的最适温度及最适pH值产生影响,但却在一定范围降低了漆酶对环境的温度或酸碱性的敏感性。（2）海洋与土壤中常见的金属离子Na+和K+对漆酶活性几乎无影响,而Mn2+和Mg2+对漆酶的活性有不同程度的激活作用或无影响,但Zn2+和Ni2+对漆酶的活性均有明显的抑制作用。（3）与原始漆酶CAH2相比,四种突变体漆酶的kcat值均变大了,表明这些突变体催化结合底物的反应速率均提高了,其中G3提高得最为显著。动力学分析表明,Pro突变为Gly或Ala（P212G/A、P217 G/A、P222 G/A）可以降低底物结合通道的空间位阻,有利于底物与漆酶的结合,而Pro→Gly突变较Pro→Ala突变更有优势;Ser360Pro突变可增强底物结合通道构象的稳定性,有助于电子从底物到T1 Cu的转移,因此突变体漆酶G3、SP、GSP的底物结合效率以及催化效率均得到了提高,但SP显示出较高的底物选择性。最后,分别通过染料脱色与石油降解测定了五种漆酶的应用性。对五种染料（靛蓝胭脂红、刚果红、结晶紫、甲基红和活性亮蓝）的脱色结果显示,五种漆酶对这些染料的作用相似,但不同的突变体漆酶对不同染料的作用略有提高。五种漆酶对刚果红和靛蓝胭脂红染料的脱色效果比较理想,而且不依赖于2,2’-连氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）（2,2’-azino-bis（3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid）,ABTS）的介导,脱色率可达到80%以上。五种漆酶对于结晶紫的脱色效率均依赖于ABTS的介导,在ABTS存在的条件下,它们可使结晶紫的脱色率提高70%以上。相对而言,五种漆酶对甲基红和活性亮蓝的脱色率相对较低,其中突变体漆酶A3（P212A、P217A、P222A）有利于对甲基红类难脱色染料的脱色,而突变体漆酶SP（S360P）有利于对活性亮蓝类难脱色染料的脱色。选用原始漆酶CAH2以及突变体漆酶G3和GSP,分别分析它们对石油（轻质油1号和轻质油2号）的降解作用,测定相应的石油降解率。结果表明:（1）在石油体积分数与酶活力单位的比值分别为1%:2U、10%:2U以及25%:0.5U时,石油体积分数与酶活力单位的比值越大,漆酶对石油的降解率越高,显示了漆酶对石油的有效降解;（2）无论是轻质油1号还是2号,突变体漆酶G3和GSP对它们的降解率均高于原始漆酶CAH2的降解率,说明有效地降低底物结合通道的空间位阻以及增强门控肽段的柔性都可提高漆酶对石油的降解作用。（3）三种漆酶对轻质油1号和2号的降解率存在一定差异,原因是石油属于多组分烃的混合物,能被漆酶降解的组分可能不尽相同。石油降解体系中特定石油烃组分的含量越高,表现出的降解率也会相应提高。本论文的研究结果提示,在漆酶分子中,212、217、222和360位点对漆酶的催化活力、稳定性、应用性等有不同的影响,其变化及其规律对发掘漆酶的应用潜力,扩大漆酶的使用价值具有一定的指导意义。

关键词：细菌漆酶突变体比活力结构功能

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

细菌漆酶的结构、催化性能及其应用

分子催化 2014年第2期28卷 188-196页

作者：高键关可兴焦晶姜文洙张应玖吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室吉林长春130012 吉林大学植物科学学院吉林长春130062

漆酶(laccase)(EC 1.***.3.2)是一类含铜的多酚氧化酶(copper-containing polyphenol oxidase),属于蓝色多铜氧化酶(blue multi-copper oxidase,MCO)家族,能催化多种酚类、芳胺类化合物的氧化,同时将分子氧还原成水.漆酶突出的催化特性... 详细信息

关键词：细菌漆酶功能催化应用

重组漆酶OhLac的分子改造及其降解性能研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重组漆酶OhLac的分子改造及其降解性能研究

作者：张乐珊西北农林科技大学

学位级别：硕士

利用生物方法(如细菌和酶类)降解木质素相比于物理化学方法具有耗能低、污染小等优势,漆酶作为一种清洁高效且环保的降解木质素的方法近年来深受热捧,越来越多的不同来源的漆酶从自然环境中分离筛选而获得。但是随着研究的深入,野生漆... 详细信息

利用生物方法(如细菌和酶类)降解木质素相比于物理化学方法具有耗能低、污染小等优势,漆酶作为一种清洁高效且环保的降解木质素的方法近年来深受热捧,越来越多的不同来源的漆酶从自然环境中分离筛选而获得。但是随着研究的深入,野生漆酶的活力并不能满足实际工业的需求。因此,利用生物技术对于野生漆酶进行改造,为其未来发展提供新的可能。本研究基于实验室前期构建的含有漆酶基因的重组工程菌,该工程菌所产漆酶OhLac具有产量高、适应性强等优势,但是仍存在重组漆酶“酶活低”这一缺点。因此,本研究用理性设计方法来改造苍白杆菌(Ochrobactrum sp.J10)OhLac漆酶,构建重组突变菌株,以苯胺蓝板脱色能力为指标对诱导表达后的改性重组酶进行筛选,获取优势突变漆酶;分析优势突变漆酶的酶学特性及其突变催化机理,进一步研究突变漆酶的木质素原料降解能力以及染料脱色能力。主要研究结果如下:(1)通过同源建模和分子对接技术,在活性中心附近寻找可能影响酶促反应的关键氨基酸位点。同时结合优势漆酶氨基酸序列比对,最终对推测出七个位点、十个氨基酸进行定点突变,构建含有突变位点的目的基因,最终构建出27个突变菌株并在大肠杆菌中异源表达,通过粗酶液和纯化酶的两次苯胺蓝板脱色实验,最终筛选出Y179H、S187G、S187G-3三个潜力突变漆酶。(2)选取ABTS、2,6-DMP和愈创木酚三种底物对于突变漆酶性质进行测定。突变酶的最适温度处于50-70℃,最佳p H值处于3.0-5.0偏酸的环境中。低浓度的Cu环境中突变酶可以保持较高的酶活力,Fe对酶活表现出明显的抑制性。Y179H和S187G-3对于底物ABTS的最大反应速率和催化效率分别为16.03 U/mg,19.16 U/mg和8.27s,11.48 s较原始OhLac分别增加了1.32倍,1.58倍和1.33倍,1.85倍。S187G对于底物Gua的最大反应速率和催化效率分别提高了3.26倍和3.28倍。(3)突变酶对于碱木素的降解随着其浓度的增加,降解率减低。其中S187G表现出良好的降解能力,在碱木素最高浓度0.35 m M时,降解率仍可达到39.50%。而突变酶对于三种类型的木质纤维素原料的失重率均>20%,而降解率(除玉米秸秆外)均>10%,其中S187G-3对于小麦秸秆的失重率最高可达将近30%。同时电镜结果表明突变酶较原始OhLac对于秸秆表面的破坏程度更大,碎片化、分层化更加严重。(4)突变酶对于染料的脱色随时间的增减先增加后趋于平稳,脱色体系的最适p H值(4.0-5.0)和温度(40-50℃)与突变酶自身的最适条件较为一致。四种氧化还原介体的加入会不同程度的提高突变漆酶对于各染料的脱色效果。

关键词：细菌漆酶定向改造木质素原料降解染料脱色

谷氨酸棒杆菌漆酶基因NCgl0908的克隆、表达及功能

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

生物学杂志 2021年第4期38卷 12-16页

作者：司雅楠刘秀霞杨艳坤詹锦玲白仲虎江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室无锡214122 江南大学工业生物技术教育部重点实验室无锡214122 江南大学生物工程学院无锡214122

漆酶(Laccase)是多铜氧化酶家族中的主要成员,能够催化多种酚类和芳香类化合物的氧化,因此具有很大的工业应用潜力。虽然对漆酶的研究及应用已获得一定进展,但主要集中在植物和真菌漆酶,对细菌漆酶的研究较少。研究从谷氨酸棒杆菌(Coryn... 详细信息

漆酶(Laccase)是多铜氧化酶家族中的主要成员,能够催化多种酚类和芳香类化合物的氧化,因此具有很大的工业应用潜力。虽然对漆酶的研究及应用已获得一定进展,但主要集中在植物和真菌漆酶,对细菌漆酶的研究较少。研究从谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中分离到一个漆酶基因NCgl0908,其全长1542 bp,编码513个氨基酸。将其氨基酸序列与几种已鉴定的细菌和真菌漆酶进行序列比对,发现它们的4个铜离子结合位点的氨基酸高度保守,推测NCgl0908是一个新的漆酶基因。把NCgl0908基因克隆入表达载体pColdⅡ,并在大肠杆菌BL21中诱导表达。利用镍柱亲和层析法纯化表达产物,并以2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)作为底物检测其漆酶活性以及酶动力学参数,发现其漆酶活性为25.4 U/mL,K m为2.22×10^(-4) mol/L,V max为2.432×10^(-6) mol/(L·min)。

关键词：谷氨酸棒杆菌细菌漆酶胞外表达酶动力学参数大肠杆菌

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细菌漆酶的研究进展、应用及展望

生物技术 2020年第6期30卷 609-614,587页

作者：王喜凤宋明珠秦志磊屈建航周佳王昊刘雅倩河南工业大学生物工程学院河南郑州450001

漆酶(EC1.***.3.2)属于蓝色多铜酶家族,可氧化多种酚类和非酚类化合物。近年来,细菌漆酶因其广泛的底物范围、热稳定性、碱性环境耐受性等特点受到了研究人员的密切关注。该文分析了细菌漆酶的序列特征、光谱学特征、酶学性质等方面的研... 详细信息

漆酶(EC1.***.3.2)属于蓝色多铜酶家族,可氧化多种酚类和非酚类化合物。近年来,细菌漆酶因其广泛的底物范围、热稳定性、碱性环境耐受性等特点受到了研究人员的密切关注。该文分析了细菌漆酶的序列特征、光谱学特征、酶学性质等方面的研究发现细菌漆酶与真菌漆酶具有相同的保守区域和相似的光谱学特征,并且能够在较极端的环境中保持酶的稳定性。细菌漆酶根据结构域的数量可分为三结构漆酶和二结构域漆酶,该文从氨基酸序列、蛋白质结构、酶学性质等方面对两类细菌漆酶进行了比较,同时对细菌漆酶的应用和发展前景进行了简要分析。

关键词：细菌漆酶细菌漆酶的分类三结构漆酶二结构域漆酶