检索结果-南通市图书馆

科学通报 2007年第4期52卷 410-415页

作者：李义平贺浪冲西安交通大学医学院西安710061

用体外培养的ECV304细胞,以硅胶为载体制备ECV304细胞膜固定相,建立了血管内皮细胞膜色谱模型,并对固定相的表面特性和色谱特征进行考察.应用血管内皮细胞膜色谱模型筛选药用植物红毛七中的活性成分,通过色谱置换实验比较活性成分的竞... 详细信息

用体外培养的ECV304细胞,以硅胶为载体制备ECV304细胞膜固定相,建立了血管内皮细胞膜色谱模型,并对固定相的表面特性和色谱特征进行考察.应用血管内皮细胞膜色谱模型筛选药用植物红毛七中的活性成分,通过色谱置换实验比较活性成分的竞争性作用,并通过血管内皮细胞管腔形成实验进行初步药理学验证.结果显示,ECV304细胞膜色谱模型在体外模拟配体与受体的相互作用,在色谱条件下塔斯品碱有类似模型分子的保留行为,能够选择性地作用于VEGFR2,并显著抑制VEGF诱导的血管内皮细胞管腔形成,表明血管内皮细胞膜色谱模型可以作为研究寻找特定活性分子的筛选模型.

关键词：血管内皮细胞细胞膜色谱模型

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

高表达胰岛素受体细胞膜色谱模型的建立

高表达胰岛素受体细胞膜色谱模型的建立

引用

作者：王石全西华大学

学位级别：硕士

目的:胰岛素是人体内的重要的多肽,在治疗Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病方面发挥了重要作用。但作为药物用于糖尿病治疗有其固有的缺点,研究激活胰岛素受体的小分子化合物在一定程度上可以克服胰岛素在生产和使用上存在的问题,不失为开发药物的又一... 详细信息

目的:胰岛素是人体内的重要的多肽,在治疗Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病方面发挥了重要作用。但作为药物用于糖尿病治疗有其固有的缺点,研究激活胰岛素受体的小分子化合物在一定程度上可以克服胰岛素在生产和使用上存在的问题,不失为开发药物的又一途径。细胞膜色谱(CMC)是一种生物色谱,它将药物效应成分的分离和筛选结合到了一起,可以直接从天然产物中筛选特定的效应成分,而采用高表达受体细胞系建立细胞膜色谱模型更是提高了靶点的特异性和效率,为抗糖尿病药物研究开发提供了新的细胞膜色谱模型。方法:(1)胰岛素与高表达胰岛素受体CHO(IR-CHO)细胞特异性作用研究:用HPLC检测IR-CHO细胞和CHO细胞对低浓度胰岛素的吸附量,以及高浓度的胰岛素液与IR-CHO细胞和CHO细胞作用后洗脱液中胰岛素的含量。(2)高表达胰岛素受体CMC模型的建立和评价:制备IR-CHO细胞膜,将活性细胞膜固定在硅胶载体表面,形成硅胶载体细胞膜固定相(CMSP),并将CMSP装填入色谱柱中,建立CMC模型。通过考察CMSP上NaK-ATP酶活性性随时间变化规律,从而确定CMC模型的寿命;测定CMSP柱前、柱后其上的蛋白含量,以此考察CMC系统的稳定性;测定胰岛素和对照品在CMC上的保留特性来考察模型的特异性。结果:(1)低浓度的胰岛素与CHO细胞和IR-CHO细胞结合后,HPLC检测到IR-CHO细胞吸附的胰岛素远高于CHO细胞吸附的胰岛素。(2)高浓度的胰岛素与CHO细胞和IR-CHO细胞结合后,用pH3.4的磷酸盐缓冲液进行洗脱,HPLC检测到IR-CHO细胞的洗脱液中有胰岛素,而CHO细胞的洗脱液中未检测到胰岛素。(3)CMC模型具有细胞膜活性和色谱分离双重特性,与硅胶柱具有完全不同的分离特性。(4)CMSP酶活性随放置时间延长其酶活性越低,同时,CMSP放置的温度越低,CMSP酶活性降低越缓慢。(5)胰岛素在所建立的CMC模型上具有保留特性,而对照品不与IR-CHO上的胰岛素受体发生作用,在CMC模型上无任何保留特性。(6)胰岛素在CMC柱上的保留时间变化规律与CMSP酶活性随时间变化规律一致。结论:胰岛素能与IR-CHO细胞发生特异性吸附作用,建立了筛选IR激活剂的高表达IR细胞膜色谱模型,其保留值可作为配体与受体作用的指标,此模型在有效期内稳定,能特异的筛选作用于胰岛素受体的小分子化合物。

关键词：糖尿病高表达胰岛素受体细胞膜色谱模型

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

5-HT1A受体细胞膜色谱模型的构建与应用

5-HT1A受体细胞膜色谱模型的构建与应用

引用

作者：黄浙杰浙江工业大学

学位级别：硕士

5-羟色胺(5-HT)亦称血清素,在脑中参与多种生理功能活动及病理状态的调节,其中5-HT含量过低及其受体功能低下被认为是抑郁症的病因之一。5-羟色胺1A(5-HT1A)受体是主要的5-羟色胺受体亚型,与抑郁症关系密切,其激动剂用于抑郁症的治疗。5... 详细信息

5-羟色胺(5-HT)亦称血清素,在脑中参与多种生理功能活动及病理状态的调节,其中5-HT含量过低及其受体功能低下被认为是抑郁症的病因之一。5-羟色胺1A(5-HT1A)受体是主要的5-羟色胺受体亚型,与抑郁症关系密切,其激动剂用于抑郁症的治疗。5-HT1A受体表达于人淋巴结的浅层皮质生发中心的B淋巴细胞,副皮质区的T淋巴细胞中,表达的阳性率为86.25%。抑郁症是情感性精神障碍疾病,具有高发病率、高自杀率和低治疗率等特点,迄今为止,发病机理尚不明确。因此,以5-HT1A受体为靶点,筛选能够作用于该靶点的化合物,是研究发现激动剂类抗抑郁药的途径之一。细胞膜色谱法(cell membrane chromatography,CMC),是以固定在硅胶表面的细胞膜为固定相,通过药物在固定相上的色谱行为有效地进行药物与受体间相互作用的研究方法。目前,CMC法已成功应用于天然药物中活性成分的筛选。药物作用于受体显效的前提是药物分子与受体之间的结合作用。细胞膜色谱法通过色谱保留行为筛选出能与细胞膜及膜受体发生结合作用的化合物,然后对这些有潜在药理活性的化合物进行体外药理实验验证,以发现先导化合物。本研究利用人T淋巴细胞构建5-HT1A受体细胞膜色谱模型,5-HT、丁螺环酮、8-OH-DPAT三种5-HT1A受体激动剂用于验证该模型的有效性,并以分别含有上述三种激动剂的枸杞提取液考察该模型的药物筛选能力,及对该模型进行了初步的药物筛选应用。论文的第一部分,概述抑郁症的研究进展(包括定义、分类、发病机制、及5-HT1A受体激动剂等)和细胞膜色谱法的研究进展(包括定义、特点、应用等)。第二部分,介绍5-HT1A受体细胞膜色谱模型的构建方法,包括细胞培养、细胞膜的提取分离、细胞膜固定相的制备、色谱柱的填装,模型有效性的验证。第三部分,研究5-HT1A受体细胞膜色谱模型的药物筛选能力。第四部分,对5-HT1A受体细胞膜色谱模型进行初步的药物筛选应用。第五部分,对论文进行了总结和展望。5-HT1A受体细胞膜色谱模型构建成功,其药物筛选能力较强,并且成功地筛选到了保留情况类似于模型分子的化合物,结果令人满意。5-HT1A受体细胞膜色谱法是一种快速、简便、有效的药物筛选方法,可以把药物与细胞膜受体的相互作用在体外用色谱的方法进行模拟,筛选能力强,该模型可用于特异性筛选具有5-HT1A受体结合能力的药物,从而缩小5-HT1A受体激动剂类化合物的筛选范围,提高筛选效率,减少工作量。

关键词： 5-HT1A受体细胞膜色谱模型抑郁症激动剂

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：