5-HT1A受体细胞膜色谱模型的构建与应用

作     者：黄浙杰 

作者单位：浙江工业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：单伟光

授予年度：2015年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100205[医学-精神病与精神卫生学] 10[医学] 

主      题：5-HT1A受体 细胞膜色谱模型 抑郁症 激动剂 

摘      要：5-羟色胺(5-HT)亦称血清素,在脑中参与多种生理功能活动及病理状态的调节,其中5-HT含量过低及其受体功能低下被认为是抑郁症的病因之一。5-羟色胺1A(5-HT1A)受体是主要的5-羟色胺受体亚型,与抑郁症关系密切,其激动剂用于抑郁症的治疗。5-HT1A受体表达于人淋巴结的浅层皮质生发中心的B淋巴细胞,副皮质区的T淋巴细胞中,表达的阳性率为86.25%。抑郁症是情感性精神障碍疾病,具有高发病率、高自杀率和低治疗率等特点,迄今为止,发病机理尚不明确。因此,以5-HT1A受体为靶点,筛选能够作用于该靶点的化合物,是研究发现激动剂类抗抑郁药的途径之一。细胞膜色谱法(cell membrane chromatography,CMC),是以固定在硅胶表面的细胞膜为固定相,通过药物在固定相上的色谱行为有效地进行药物与受体间相互作用的研究方法。目前,CMC法已成功应用于天然药物中活性成分的筛选。药物作用于受体显效的前提是药物分子与受体之间的结合作用。细胞膜色谱法通过色谱保留行为筛选出能与细胞膜及膜受体发生结合作用的化合物,然后对这些有潜在药理活性的化合物进行体外药理实验验证,以发现先导化合物。本研究利用人T淋巴细胞构建5-HT1A受体细胞膜色谱模型,5-HT、丁螺环酮、8-OH-DPAT三种5-HT1A受体激动剂用于验证该模型的有效性,并以分别含有上述三种激动剂的枸杞提取液考察该模型的药物筛选能力,及对该模型进行了初步的药物筛选应用。论文的第一部分,概述抑郁症的研究进展(包括定义、分类、发病机制、及5-HT1A受体激动剂等)和细胞膜色谱法的研究进展(包括定义、特点、应用等)。第二部分,介绍5-HT1A受体细胞膜色谱模型的构建方法,包括细胞培养、细胞膜的提取分离、细胞膜固定相的制备、色谱柱的填装,模型有效性的验证。第三部分,研究5-HT1A受体细胞膜色谱模型的药物筛选能力。第四部分,对5-HT1A受体细胞膜色谱模型进行初步的药物筛选应用。第五部分,对论文进行了总结和展望。5-HT1A受体细胞膜色谱模型构建成功,其药物筛选能力较强,并且成功地筛选到了保留情况类似于模型分子的化合物,结果令人满意。5-HT1A受体细胞膜色谱法是一种快速、简便、有效的药物筛选方法,可以把药物与细胞膜受体的相互作用在体外用色谱的方法进行模拟,筛选能力强,该模型可用于特异性筛选具有5-HT1A受体结合能力的药物,从而缩小5-HT1A受体激动剂类化合物的筛选范围,提高筛选效率,减少工作量。