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补肾益气方对正常早孕期人细胞滋养层细胞生物学行为的影响

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中国中西医结合杂志 2004年第6期24卷 525-528页

作者：王海燕归绥琪徐丛剑储以微复旦大学附属妇产科医院中西医结合科上海200011 复旦大学上海医学院免疫教研室

目的探讨补肾益气方对正常早孕期人细胞滋养层细胞增殖、侵袭、分化等生物学行为的影响。方法体外培养正常早孕期人细胞滋养层细胞 ,分别设空白对照组、5 %含药血清组、10 %含药血清组、2 0 %含药血清组 ,用扫描电镜、噻唑蓝 (MTT)法、... 详细信息

目的探讨补肾益气方对正常早孕期人细胞滋养层细胞增殖、侵袭、分化等生物学行为的影响。方法体外培养正常早孕期人细胞滋养层细胞 ,分别设空白对照组、5 %含药血清组、10 %含药血清组、2 0 %含药血清组 ,用扫描电镜、噻唑蓝 (MTT)法、流式细胞仪、Transwell侵袭实验检测含药血清作用 2 4h、4 8h、72h后细胞的形态、增殖活性及侵袭力的变化。结果含药血清培养 2 4h、4 8h、72h后 ,细胞滋养层细胞微绒毛变丰富 ,伪足增多、延长 ;细胞在酶联免疫分析仪 4 90nm波长的吸光度值增加 (P 细胞减少 (P 细胞增加 (P 细胞明显减少 (P 细胞数明显增多 (P 细胞滋养层细胞增殖及侵袭力。

关键词：补肾益气方早孕期细胞滋养层细胞生物学行为胎盘功能

患先兆子痫的妇女血液中的合体细胞滋养层微绒毛膜刺激中性白细胞产生氧化物

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实用妇产科杂志 2004年第5期20卷 i005-i006页

作者：左万兴

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不同细胞滋养层对人角朊细胞体外培养的影响

不同细胞滋养层对人角朊细胞体外培养的影响

作者：汪培铭第四军医大学

学位级别：硕士

目前，在烧伤创面治疗中取自体皮片移植仍是最主要的方法，对于大面积烧伤患者来说自体皮源远远不能满足临床需求，组织工程技术的发展使体外培养人表皮细胞的技术不断得以完善，自体皮肤(主要是角朊细胞)体外快速扩增为烧伤治疗提供了... 详细信息

目前，在烧伤创面治疗中取自体皮片移植仍是最主要的方法，对于大面积烧伤患者来说自体皮源远远不能满足临床需求，组织工程技术的发展使体外培养人表皮细胞的技术不断得以完善，自体皮肤(主要是角朊细胞)体外快速扩增为烧伤治疗提供了广阔的前景。经典的角朊细胞培养方法以放射线处理的3T3细胞作为滋养层，以FAD作为培养基，角朊细胞体外培养周期一般需要2周，不能及时满足临床需要。本实验研究的目的即对传统的人角朊细胞体外培养方法进行研究及改进，利用丝裂霉素处理的3T3细胞和人成纤维细胞分别作为滋养层，比较人角朊细胞在两种细胞滋养层上体外培养融合的周期，以期找到能使人皮肤角朊细胞体外培养更快融合的培养体系。探索和寻找人角朊细胞体外培养适宜的滋养层细胞，完善人角朊细胞体外培养快速扩增的技术和方法。本实验分别在3T3细胞、原代培养的人成纤维细胞上接种原代人角朊细胞，并设无滋养层细胞的空白对照。通过角朊细胞在不同滋养层上贴壁生长及融合时间的观察，确定适合角朊细胞生长的最佳细胞滋养层。在对不同滋养层细胞的处理上分别采用了钴60放射线照射的传统方法和丝裂霉素C处理，通过对处理前后成纤维细胞形态的改变以及存活时间的观察，比较两种处理方法对滋养层细胞生物活性的影响。我们还在丝裂霉素对同一个体相同代数人成纤维细胞适宜的作用浓度方面进行了研究，设计了3个实验浓度的丝裂霉素C(5μg／ml、10μg／ml、15μg／ml)，第四军医大学硕士学位论文分别处理人成纤维细胞及3T3细胞，以处理后细胞失去增殖能力为标准，确定适宜的作用浓度。并对处理后成纤维细胞的存活时间进行了观察。实验结果发现:1.对于不同的滋养层细胞，丝裂霉素C 的适宜作用浓度，人成纤维细胞为15抖g/ml;3T3细胞为10 pg/ml。应用适宜浓度的丝裂霉素C处理成纤维细胞，细胞至少可以存活3周以上，适宜浓度丝裂霉素处理的3T3细胞可以存活大约10天左右。2.以丝裂霉素C处理成纤维细胞和放射线处理均可以抑制成纤维细胞的分裂、增殖，而且用丝裂霉素处理的成纤维细胞存活时间比用放射线处理明显延长，在细胞滋养层的制备上，两种处理方法均可以满足培养角肮细胞的需要。3. 人角肮细胞在3T3细胞滋养层及人成纤维细胞滋养层上均可良好地生长融合，成片的皮肤角肮细胞具有典型的上皮样特征:高核浆比，细胞排列紧密，轮廓分明。镜下呈铺路石样。在不更换滋养层细胞的前提下，以人成纤维细胞做滋养层，角肮细胞生长融合速度明显快于3T3细胞做滋养层及无滋养条件。相同条件下角肮细胞贴壁生长在人成纤维细胞滋养层上约需要30小时，在3T3细胞滋养层上约需要55小时，无滋养层细胞条件下70 小时后仅有少量细胞贴壁。相同接种密度条件下角肮细胞生长融合成片，在人成纤维细胞滋养层上约需要10天，在3T3细胞滋养层上约需要巧天，无滋养层细胞条件下大于20天。培养融合的细胞CK10染色阳性，证明为人皮肤角肮细胞。结论:经丝裂霉素处理的原代培养人成纤维细胞是体外扩增人角肮细胞的理想滋养层细胞。在相同接种密度条件下，角肮细胞生长融合的时间较以3T3细胞作滋养层明显缩短。

关键词：角朊细胞细胞培养细胞滋养层

人细胞滋养层的腺苷酸环化酶：特性及在调节HCG分泌中的作用

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国外医学.妇产科学分册 1989年第1期 56-57页

作者：樊庆华

人胎盘是个独特的内分泌器官,在妊娠期完成着重要的代谢功能,包括分泌 hCC 和孕酮。本文旨在研究纯化的细胞滋养层是否具有腺苷酸环化酶和鸟苷酸调节蛋白(即 G 蛋白),进而以测定 hCG分泌水平弄清激活腺苷酸环化酶是否刺激细胞滋养层的... 详细信息

人胎盘是个独特的内分泌器官,在妊娠期完成着重要的代谢功能,包括分泌 hCC 和孕酮。本文旨在研究纯化的细胞滋养层是否具有腺苷酸环化酶和鸟苷酸调节蛋白(即 G 蛋白),进而以测定 hCG分泌水平弄清激活腺苷酸环化酶是否刺激细胞滋养层的内分泌功能。从妊娠38周自然阴道分娩或剖腹产的胎盘立即分离出细胞滋养层。经消化,离心获得高度浓缩的细胞滋养层,置于-70℃待用,或立即培养。培养中分别加入不同药品,如8-溴-cAMP(1.5mmol/1)、Forskolin(10～500μmol/l)、霍乱毒素(10～500ng/ml)、异丙肾上腺素(10～500μmol/l),百日咳毒素(100ng/ml)等。每次试验结束时,将滋养层细胞经清洗、离心后贮于-70℃。将纯化的滋养细胞用于测定腺苷酸环化酶及鉴定 G蛋白。

关键词：细胞滋养层 HCG 内分泌蛋白滋养层细胞环化酶裂合酶

炎性细胞因子对先兆子痫患者滋养层血栓形成的效应

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世界核心医学期刊文摘（妇产科学分册） 2005年第5期1卷 11-12页

作者： Kwaan H.C Boggio L 朱晓明

This study was undertaken to investigate whether the increased thrombogenic po tential of cytotrophoblastic cells of women with preeclampsia can be accounted f or by increased rates of apoptosis. Cytotrophoblasts were isolated from the plac enta of (a) nulliparous women without hypertensive disease who were delivered at term and (b) nulliparous women with preeclampsia. The cytotrophoblasts were ide ntified by morphology, and cytokeratin and gonadotropin-releasing hormone posit ivity. The inflammatory cytokine tumor necrosis factor-α.(TNF-α)was added to cytotrophoblasts in vitro and incubated for 24 hours. Tissue factor antigen, activity, and amount of apoptosis were evaluated both before and after TNF-α.stimulation. TNF-α.simulation significantly inc reased tissue factor activity both in the cytotrophoblasts of women with (0.08 ±0.04 pmol/min/106 cells to 0.53 ±.0.19 pmol/min/106 cells) and without (0.07 ±0.04 pmol/min/106 cells to 0.30 ±0.16 pmol/min/106 cells)-preeclampsia. TNF -αstimulation of the cytotrophoblasts also significantly increased tissue fact or antigen in the cytotrophoblasts of both groups of women (3.6 ±0.9 fmol/106 c ells to 34.0 ±7.5 fmol/106 cells, and 7.5 ±1.4 fmol/106 cells to 25.4 ±2.2 fm ol/106 cells, respectively). For both tissue factor antigen and activity, the ma gnitude of increase after stimulation was significantly greater in the preeclamp tic cytotrophoblasts. In contrast, both normal and preeclamptic cytotrophoblasts showed similar increases in their apoptotic indices (approximately 2-fold) aft er induction by TNF-α. The greater response of tissue factor activity and anti gen to TNF-αby preeclamptic cytotrophoblasts cannot be accounted for by the in crease in apoptosis. These data suggest that preeclamptic cytotrophoblasts are i nherently more thrombogenic and more sensitive to TNF-αstimulation.

关键词：滋养层细胞先兆子痫炎性细胞因子血栓形成细胞滋养层胎盘组织初产妇刺激细胞肿瘤坏死因子体外培养

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胎盘滋养层细胞激素和蛋白质的生成与分泌

国外医学(计划生育分册) 1987年第1期 24-27页

作者：刘承权上海市计划生育科研所

胎盘是母体和子体进行物质交换的重要结构,又是一个重要的内分泌器官。滋养层细胞为胎盘具有分泌功能的细胞,它能分泌各种多肽及甾体激素及数种胎盘特异性蛋白质早已被证实。随着对胎盘滋养层生理功能研究的深入发展,人们对其激素和特... 详细信息

胎盘是母体和子体进行物质交换的重要结构,又是一个重要的内分泌器官。滋养层细胞为胎盘具有分泌功能的细胞,它能分泌各种多肽及甾体激素及数种胎盘特异性蛋白质早已被证实。随着对胎盘滋养层生理功能研究的深入发展,人们对其激素和特异性蛋白质的分泌功能也有了进一步的认识。本文简述这方面的某些进展。一、胎盘滋养层细胞的激素分泌现已证明,胎盘滋养层细胞除能分泌绒毛膜促性腺激素(hCG)及胎盘泌乳素(hPL)外,还能分泌其它多种激素。 (一)多肽激素 1.下丘脑多肽激素类似物:早在1970年就发现大鼠胎盘提取物能刺激垂体释放LH,后又发现人及羊绒毛膜提取物也有

关键词：胎盘滋养层细胞特异性合体胎盘蛋白细胞滋养层激素类似物 GnRH 蛋白质绒毛

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在绒毛和胎盘组织中的表达

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中华妇产科杂志 2005年第7期40卷 457-459页

作者：王永清李俊尚涛王雁玲中国医科大学第二医院妇产科中国科学院动物研究所生育生殖生物学国家重点实验室

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在绒毛及胎盘组织中的表达以及表达部位。方法分别取36例妊娠6～9周妇女的早孕绒毛组织、7例因病理指征行中期引产妇女的胎盘组织和11例足月妊娠妇女的胎盘组织,免疫组化方法检测绒毛组... 详细信息

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在绒毛及胎盘组织中的表达以及表达部位。方法分别取36例妊娠6～9周妇女的早孕绒毛组织、7例因病理指征行中期引产妇女的胎盘组织和11例足月妊娠妇女的胎盘组织,免疫组化方法检测绒毛组织和胎盘组织中EMMPRIN的表达部位变化特点。结果(1)表达部位:EMMPRIN在早孕绒毛组织、中期和足月妊娠的胎盘组织中均有高度表达。在早孕绒毛组织中的表达部位主要集中在绒毛内细胞滋养细胞、合体滋养细胞及细胞滋养层柱细胞;在中期和足月妊娠的胎盘组织中,主要表达于底蜕膜的绒毛外细胞滋养细胞。(2)表达特点:在早孕绒毛组织中细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的EMMPRIN阳性率随妊娠进展逐渐下降。在妊娠中期的胎盘组织中,细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的EMMPRIN阳性率分别为5/7、3/7、5/7;在足月妊娠的胎盘组织中,细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的EMMPRIN阳性率分别为73%、18%和82%。在中期和足月妊娠的底蜕膜中的EMMPRIN阳性率较弱,且趋于稳定。而早期妊娠阶段,侵入到底蜕膜的绒毛外细胞滋养细胞中EMMPRIN阳性表达则随孕周进展逐渐增强。结论EMMPRIN在妊娠早期与胚胎植入有关,在妊娠的中晚期则可能参与妊娠维持。

关键词：细胞外基质金属蛋白酶诱导因子胎盘组织 EMMPRIN 绒毛外细胞滋养细胞早孕绒毛组织合体滋养细胞细胞滋养层足月妊娠妇女免疫组化方法阳性率中期引产变化特点表达特点妊娠中期早期妊娠阳性表达胚胎植入妊娠早期

羊膜——易于获得的器官修复与重建的生物材料

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中华胸心血管外科杂志 2008年第6期24卷 423-424页

作者：崔永龚民首都医科大学附属北京友谊医院胸外科 100050

羊膜（amniofic membrane，AM）是两层胎膜的内层，从细胞滋养层衍化而来。早在20世纪初期就有用含羊膜的胎膜移植于烧伤和溃疡创面减轻疼痛、促进愈合的报道，之后羊膜在眼科、腹部外科、妇产科、泌尿外科及颅脑外科均有成功的应用报... 详细信息

羊膜（amniofic membrane，AM）是两层胎膜的内层，从细胞滋养层衍化而来。早在20世纪初期就有用含羊膜的胎膜移植于烧伤和溃疡创面减轻疼痛、促进愈合的报道，之后羊膜在眼科、腹部外科、妇产科、泌尿外科及颅脑外科均有成功的应用报道。近年来，随着生物工程和组织工程技术的发展，羊膜的应用更加广泛，研究也更加深入。

关键词：羊膜生物材料器官修复组织工程技术细胞滋养层减轻疼痛溃疡创面促进愈合

HLA-G、IL-10在急性白血病中的表达

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中华血液学杂志 2012年第2期33卷 135-137页

作者：杨晋赵绍林杨新玲郑萍张欢欢吴惠毅连云港市第一人民医院临床实验中心 222002

HLA-G为非经典的HLAI类分子，是一种重要的免疫抑制分子，主要在人类胎盘形成过程中侵入蜕膜和螺旋动脉的绒毛外细胞滋养层表达，依据结构及分布不同分为膜结合型HLA-G（mHLA-G）和可溶性HLA-G（sHLA-G）。近来研究发现HLA-G在多种肿瘤... 详细信息

HLA-G为非经典的HLAI类分子，是一种重要的免疫抑制分子，主要在人类胎盘形成过程中侵入蜕膜和螺旋动脉的绒毛外细胞滋养层表达，依据结构及分布不同分为膜结合型HLA-G（mHLA-G）和可溶性HLA-G（sHLA-G）。近来研究发现HLA-G在多种肿瘤细胞中表达，它参与调控肿瘤免疫逃逸^[1]，与肿瘤的大小、分化程度及肿瘤转移有密切关系。

关键词： HLA-G 急性白血病 IL-10 免疫抑制分子肿瘤免疫逃逸肿瘤细胞细胞滋养层螺旋动脉