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灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)诱导K562细胞发生细胞核介导的细胞凋亡的研究

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中国免疫学杂志 2010年第7期26卷 616-618,623页

作者：王晓林梁重阳李泓睿李柏志孙非长春医学高等专科学校长春130031 吉林大学再生医学科学研究所长春130021

目的:探讨重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)诱导K562细胞发生细胞凋亡相关机制的研究。方法:采用MTT法检测rLZ-8对K562细胞的体外杀伤作用;通过Annexin V/PI双染检测细胞凋亡率;应用钙离子荧光探针Fluo-3/AM染色,检测了rLZ-8作用K562细胞后... 详细信息

目的:探讨重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)诱导K562细胞发生细胞凋亡相关机制的研究。方法:采用MTT法检测rLZ-8对K562细胞的体外杀伤作用;通过Annexin V/PI双染检测细胞凋亡率;应用钙离子荧光探针Fluo-3/AM染色,检测了rLZ-8作用K562细胞后细胞内钙离子浓度变化,分光光度法测定细胞caspase-3活性,还利用激光扫描共聚焦显微镜确定了rLZ-8在K562细胞内的亚细胞定位。结果:rLZ-8可明显杀伤K562细胞,并诱导其发生细胞凋亡;rLZ-8可提高K562细胞内的caspase-3活性,进一步确证了细胞凋亡的发生;激光扫描共聚焦显微镜下观察,rLZ-8可定位在细胞核中,并引起细胞内钙离子水平升高。结论:rLZ-8具有诱导K562细胞发生凋亡的作用,这种杀伤肿瘤细胞的作用可能与rLZ-8可富集在细胞核上的特性有关。

关键词：灵芝免疫调节蛋白凋亡 K562细胞细胞核

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基于卷积神经网络的细胞核智能分割研究

计算机科学与应用 2018年第11期8卷 1643-1649页

作者：麦伟东陈冠叶伟杰广东财经大学统计与数学学院广东广州

在许多疾病的病理学诊断中,细胞核的形状、特征的变化是病变发生与否的重要依据,利用计算机智能分割出病理组织切片中的细胞核能为疾病诊断提供更多的参考。本研究将卷积神经网络应用在乳腺癌病理组织切片图像中的细胞核分割上。在对图... 详细信息

在许多疾病的病理学诊断中,细胞核的形状、特征的变化是病变发生与否的重要依据,利用计算机智能分割出病理组织切片中的细胞核能为疾病诊断提供更多的参考。本研究将卷积神经网络应用在乳腺癌病理组织切片图像中的细胞核分割上。在对图像进行光学预处理后,将其分割成多个小图像输入到改进的Alexnet模型中对模型进行训练,使其能自动识别细胞核特征。随后,将训练后的模型用于测试集图像的细胞核分割中,把图像分割成多个小图像让模型并行处理,并最终整合所有的输出结果生成一张完整的细胞核分割图,达到细胞核分割的目的。结果表明,模型对训练集中的细胞核识别率达到92%,训练后的模型对人工标记图像中并没有标记出来的细胞核都能准确地识别出来,表明模型已成功的学习到细胞核的主要特征。最后,对测试集图片进行分割的结果显示,训练后的模型成功地把病理组织切片图像中的细胞核准确且快速地分割出来,证明这种切分图像进行细胞核分割最后再整合的方法在保证准确性的同时也能提高计算效率。

关键词：细胞核病理组织切片 AlexNet 特征检测

浅谈STEAM教育理念下的课堂探究——以“细胞核——系统的控制中心”为例

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中学生物教学 2019年第10期 20-22页

作者：党鹏辉雷超陕西省洛川县中学 727400 陕西省西咸新区秦汉中学 712000

面对课程改革及新时代对创新型人才的要求,受STEAM教育理念的启发,在高中生物学教学实践中应用探究式教学法,以“细胞核——系统的控制中心”一节新授课为例,结合日常教学实践,有效地把握学情与课堂节奏,关注学生多方面能力的发展,穿插... 详细信息

面对课程改革及新时代对创新型人才的要求,受STEAM教育理念的启发,在高中生物学教学实践中应用探究式教学法,以“细胞核——系统的控制中心”一节新授课为例,结合日常教学实践,有效地把握学情与课堂节奏,关注学生多方面能力的发展,穿插学科间思想,优化课堂教学,打造智慧化课堂,促进学生有效学习。

关键词： STEAM教育探究细胞核实践方法

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植物细胞核与叶绿体基因的双向调控作用

生物学通报 2011年第6期46卷 11-14页

作者：于惠敏石竹邵洪伟齐鲁师范学院生物科学与技术系山东济南250013

在长期进化过程中,叶绿体与细胞核已形成高度适应性。在分子水平上,两者的基因表达存在着复杂的双向调控作用。细胞核的众多基因对叶绿体基因的转录、转录后加工以及翻译等过程发挥着普遍的调节作用,而叶绿体通过四吡咯信号以及自身氧... 详细信息

在长期进化过程中,叶绿体与细胞核已形成高度适应性。在分子水平上,两者的基因表达存在着复杂的双向调控作用。细胞核的众多基因对叶绿体基因的转录、转录后加工以及翻译等过程发挥着普遍的调节作用,而叶绿体通过四吡咯信号以及自身氧化还原状态的改变调控着细胞核基因的表达。双向调节方式的存在从分子水平上说明了细胞核与叶绿体在功能上的相互适应。然而,细胞核与叶绿体基因表达双向调控的详细机制还有待研究。

关键词：细胞核叶绿体基因表达双向调节

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离子注入对黑松花粉粒细胞核的损伤效应

原子核物理评论 2009年第1期26卷 76-79页

作者：黄群策梁秋霞李国平郑州大学河南省离子束生物工程重点实验室河南郑州450052 莆田学院环境与生命科学系福建莆田351100

利用激光扫描共聚焦显微技术和碱性单细胞凝胶电泳技术对经过离子注入后的黑松花粉粒内细胞核的直接损伤效应进行了观察鉴定。研究结果表明,离子注入后可以直接损伤细胞核结构,导致细胞核裂解。细胞核的损伤程度与注入离子的剂量密切相... 详细信息

利用激光扫描共聚焦显微技术和碱性单细胞凝胶电泳技术对经过离子注入后的黑松花粉粒内细胞核的直接损伤效应进行了观察鉴定。研究结果表明,离子注入后可以直接损伤细胞核结构,导致细胞核裂解。细胞核的损伤程度与注入离子的剂量密切相关,即细胞核DNA分子的损伤程度随着注入离子剂量的增加而提高。

关键词：黑松花粉粒细胞核离子注入损伤效应

穿透性角膜移植术后共焦显微镜下角膜移植片内皮细胞核异常显现的临床分析

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穿透性角膜移植术后共焦显微镜下角膜移植片内皮细胞核异常显现的...

作者：潘飞浙江大学

学位级别：硕士

目的应用活体共焦显微镜观察穿透性角膜移植(Penetrating Keratoplasty,PKP)术后角膜移植片内皮细胞的形态学变化,研究术后角膜移植片内皮细胞核异常显现的共焦显微镜图像特征及变化规律,探讨该现象发生的影响因素、临床意义和可能机制... 详细信息

目的应用活体共焦显微镜观察穿透性角膜移植(Penetrating Keratoplasty,PKP)术后角膜移植片内皮细胞的形态学变化,研究术后角膜移植片内皮细胞核异常显现的共焦显微镜图像特征及变化规律,探讨该现象发生的影响因素、临床意义和可能机制。资料和方法回顾性病例研究。收集了自1999年4月至2008年4月期间在邵逸夫医院眼科首次接受PKP手术治疗,且术后规律随访超过一年的患者的临床资料。在术后随访期间,定期记录共焦显微镜的检查图像,分析角膜移植片内皮细胞核异常显现患者的内皮细胞和细胞核的形态学变化,以及内皮细胞的密度、面积、六边形细胞比例、面积多形性变异率和内皮细胞的丢失率。对术后角膜移植片的存活状态,术后并发症及再次手术的情况进行分析和统计学处理。结果符合纳入标准的病例共94例94眼,术后平均随访时间为11.2±15.2月。94例患者术后1个月时角膜移植片内皮细胞平均密度为2365.1±313.6个/mm2,细胞排列规则、大小均匀,共焦显微镜下观察不到角膜内皮细胞的细胞核。随访期间,角膜内皮细胞密度和六边形细胞的比例逐渐减少,细胞的面积增大。部分患者的角膜移植片内皮细胞核的形态发生改变,由正常情况下共焦显微镜观察不到内皮细胞核到异常显现细胞核的反光。到末次随访时,共有16例(16/94,17.0%)患者共焦显微镜下观察到角膜移植片内皮细胞核的反光,其中男性9例,女性7例,平均年龄为41.3±14.5岁。共焦显微镜下首次观察到角膜移植片内皮细胞核异常显现的平均时间为术后26.2±11.6月,检查发现角膜内皮细胞面积增大、多边多形,内皮细胞内可透见明亮的细胞核反光,异常显现的内皮细胞核呈球形或卵形,大小约为10-12μm。部分细胞面积增大的内皮细胞内出现多个细胞核的反光。首次观察到移植片内皮细胞核异常显现时患者的平均内皮细胞密度为878.2±193.9个/mm2,细胞面积为1140.3±296.4μm2,六边形细胞比例为32.6±12.1%,面积多形性变异率为46.8±9.7%,内皮细胞丢失率为61.6±16.8%,与术后角膜移植片内皮细胞核未显现患者末次随访的结果比较差异有统计学意义(P细胞核异常显现进行Cox危险因素分析,发现与术后继发性青光眼、排斥反应和再次手术的发生在统计学上有相关性。结论本研究首次分析了PKP术后角膜移植片内皮细胞核异常显现的共焦显微镜图像特征、变化规律及其影响因素。PKP术后角膜移植片内皮细胞密度下降到900个/mm2以下,角膜内皮细胞形态结构会发生异常改变,呈现出细胞核的反光,这一现象是否预示角膜内皮细胞整体代偿功能接近临界状态,需进一步的研究。

关键词：穿透性角膜移植活体共焦显微镜角膜内皮细胞细胞核形态

EGF刺激前后MDA-MB-468细胞核磷酸化蛋白质组学分析

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EGF刺激前后MDA-MB-468细胞核磷酸化蛋白质组学分析

作者：郭丹中国科学院北京基因组研究所

学位级别：硕士

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)具有酪氨酸激酶活性,是一种重要的跨膜受体。研究表明,在EGF刺激条件下,EGFR可以发生核转位现象,并可能通过磷酸化其底物进一步调控基因表达及其相应的生物学功能。然而,人们... 详细信息

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)具有酪氨酸激酶活性,是一种重要的跨膜受体。研究表明,在EGF刺激条件下,EGFR可以发生核转位现象,并可能通过磷酸化其底物进一步调控基因表达及其相应的生物学功能。然而,人们对于EGFR核转位所引发的细胞核内广泛磷酸化响应尚缺乏了解。本研究以人乳腺癌细胞系MDA-MB-468为靶标,采用iTRAQ标记的定量蛋白质组学技术,对EGF刺激MDA-MB-468前后的细胞核磷酸化蛋白质组学进行了初步分析。我们首先测试了在不同刺激时间内,EGF是否引起MDA-MB-468细胞核内发生明显的EGFR核转位。我们观察到,EGF对MDA-MB-468的刺激时间以15min为最适。在EGF最适刺激发生后,我们采用差速离心法制备细胞核,之后提取核蛋白并用胰蛋白酶进行消化,最后使用iTRAQ试剂对消化后的肽段进行标记。我们利用Ti02亲和技术富集细胞核内的磷酸化肽段,然后运用高精度质谱仪(TripleTOF 5600)分析鉴定肽段,并进一步采用Scaffold及Scaffold PTM软件对质谱信号进行了肽段搜索和蛋白质定量。Scaffold定性分析结果表明,在MDA-MB-468细胞核中共鉴定到了275个蛋白,其中磷酸化蛋白为242个,对应336个磷酸化肽段和405个磷酸化位点。Scaffold定量分析表明,EGF刺激后可引起87个磷酸化蛋白质(包含114个差异磷酸化肽段和137个差异磷酸化位点)呈显著的丰度变化。细胞器定位分析表明,在87个差异磷酸化蛋白中,有63个定位于细胞核,其中42个蛋白上游激酶为MAPK, GSK, PKC等,它们一般受胞浆EGFR信号的激活;有两个蛋白,KHDRBS1和TNKS1BP1可能是核内EGFR的间接底物;另外19个蛋白的上游激酶并不明确。据此我们推测,这些蛋白有可能是核转位EGFR的下游调控分子,对其进行深入研究将为探索核转位EGFR的分子调控机制提供重要线索。

关键词： EGFR 细胞核磷酸化蛋白质组