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细胞周期素d_2在霍奇金淋巴瘤及间变性大细胞淋巴瘤中的表达及其意义探讨

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肿瘤防治研究 2004年第6期31卷 345-347页

作者：郭红革曾子华郑佩娥李辉郭莉广东珠海市结防所 519000 暨南大学医学院病理学教研室暨南大学第一附属医院耳鼻喉科

目的　检测细胞周期素d2 (cyclind2 )在霍奇金淋巴瘤 (HL)及间变性大细胞淋巴瘤 (ALCL)中蛋白质水平的表达情况 ,探讨其表达在HL和ALCL的发生发展中所起的作用。方法　收集 2 88例恶性淋巴瘤石蜡包埋标本 ,筛选出HL2 6例 ,ALCL19例 ,切... 详细信息

目的　检测细胞周期素d2 (cyclind2 )在霍奇金淋巴瘤 (HL)及间变性大细胞淋巴瘤 (ALCL)中蛋白质水平的表达情况 ,探讨其表达在HL和ALCL的发生发展中所起的作用。方法　收集 2 88例恶性淋巴瘤石蜡包埋标本 ,筛选出HL2 6例 ,ALCL19例 ,切片经微波抗原修复 ,cyclind2 免疫组化染色 ,光学显微镜镜下计数阳性细胞。结果　cyclind2 在HL病例组中的表达率为 92 .3% (2 4 / 2 6 ) ,在ALCL组中阳性率为 (36 .8% ) 7/ 19,两组病例的表达差异有统计学意义 (P d2 在HL和ALCL中的表达差异提示HL和ALCL在发生过程中起因不同并存在不同的生长调控机制。 (2 )cyclind2 在HL和ALCL表达的差异对两者的鉴别诊断有帮助。 (3)HL与ALCL的细胞起源不同 ,但两者也可能存在一些重叠与过渡的形式。

关键词：细胞周期素d2 霍奇金淋巴瘤间变性大细胞淋巴瘤免疫组化

ABCG2在人脑胶质瘤中的表达及其与Cyclin d_2的关系

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华中科技大学学报（医学版） 2010年第2期39卷 236-238,242页

作者：王鹏饶竟赵洪洋张方成杨林徐卫明华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科武汉430022

目的探讨ABCG2在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤分级和Cyclin d2表达的关系。方法实时荧光定量PCR法检测ABCG2在52例不同病理级别胶质瘤及8例正常脑组织中的mRNA表达;免疫组织化学SABC法检测ABCG2和Cyclin d2的蛋白表达;SPSS统计... 详细信息

目的探讨ABCG2在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤分级和Cyclin d2表达的关系。方法实时荧光定量PCR法检测ABCG2在52例不同病理级别胶质瘤及8例正常脑组织中的mRNA表达;免疫组织化学SABC法检测ABCG2和Cyclin d2的蛋白表达;SPSS统计分析其表达的相关性。结果ABCG2在脑胶质瘤中的mRNA表达与正常脑组织相比存在过表达(P2在52例胶质瘤中的阳性表达率为32.7%(17/52),与病理级别具有明显相关性(χ2=4.62,P2的表达与Cyclin d2的表达具有一定的相关性(P2在人脑胶质瘤中的表达随着病理级别的升高而逐渐增加,且与Cyclin d2的表达呈正相关,表明以ABCG2为标志物的脑肿瘤干细胞具有较高的增殖能力。

关键词： ABCG2 胶质瘤脑肿瘤干细胞细胞周期素d2

Cyclind2和IGFBP2在HL及ALCL中的表达及其意义探讨

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CyclinD2和IGFBP2在HL及ALCL中的表达及其意义探讨

作者：郭红革暨南大学

学位级别：硕士

目的在利用基因芯片技术研究霍奇金氏淋巴瘤(HL)及间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)细胞株凋亡相关基因表达谱的基础上，检测细胞周期素d(cyclind)和胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP)在此两种淋巴瘤组织中蛋白质水平的表达情况，探讨此两种... 详细信息

目的在利用基因芯片技术研究霍奇金氏淋巴瘤(HL)及间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)细胞株凋亡相关基因表达谱的基础上，检测细胞周期素d(cyclind)和胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP)在此两种淋巴瘤组织中蛋白质水平的表达情况，探讨此两种凋亡相关基因的表达在HL和ALCL的发生发展中所起的作用。方法收集288例恶性淋巴瘤石蜡包埋标本，作HE及Cd30、Cd15、Cd20、Cd45RO免疫组化染色，筛选出HL和ALCL病例，然后作4微米厚连续切片，切片经微波抗原修复，分别用抗cyclind2和IGFBP2抗体染片，dAB显色，光学显微镜高倍镜下计数阳性细胞，Mann-Whitney Test法(SPSS8．0软件包)统计结果。结果共筛选出HL26例，ALCL19例。cyclind2在26例HL病例组中的表达数为24例(92％)，15例为“+++”，7例阳性“++”，2例阳性“+”，2例为阴性;在ALCL组1例为“+++”，2例阳性“++”，4例阳性“+”，阳性率36.8％，其余12例为阴性，两组病例的表达有统计学差异(p=0.000＜0.05)。IGFBP2在HL组有23例阳性表达(88.5％)，14例“+++”，9例“++”;而在ALCL病例组中4例阳性表达“+”，2例“++”，阳性率36.8％。两者表达差异有统计学意义(P=0.000＜0.05)。结论 (1)HL与ALCL的细胞起源不同，存在不同的发病机制，但两者也可能存在一些重叠与过渡的形式，还有可能存在两种肿瘤的混合类型。(2) cyclind2和IGFBP2在HL和ALCL中的表达显著不同，其差异性具有统计学意义，同时也验证了体外实验此两种肿瘤细胞株mRNA水平上这两种基因表达的差异，提示HL和ALCL在发生过程中起因不同并存在不同的生长调控机制。(3)cyclind2和IGFBP2在HL和ALCL表达的差异对两者的鉴别诊断有帮助。

关键词：细胞周期霍奇金氏淋巴瘤间变性大细胞淋巴瘤细胞周期素d2 胰岛素样生长因子结合蛋白2 免疫组化

慢性粒细胞白血病cyclin d2 的表达研究

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慢性粒细胞白血病cyclin D2 的表达研究

作者：宋俊敏河北医科大学

学位级别：硕士

目的：细胞周期素d2(cyclin d2)是人类G1期细胞周期蛋白cyclin d家族的一个重要成员，与正常细胞周期进展中G1／S检测调控点的功能密切相关。cyclin d2的表达与成人T淋巴细胞白血病病毒(HTLVⅠ)原癌基因产物Tax以及与各型B淋巴细胞白血... 详细信息

目的：细胞周期素d2(cyclin d2)是人类G1期细胞周期蛋白cyclin d家族的一个重要成员，与正常细胞周期进展中G1／S检测调控点的功能密切相关。cyclin d2的表达与成人T淋巴细胞白血病病毒(HTLVⅠ)原癌基因产物Tax以及与各型B淋巴细胞白血病、成人生殖细胞肿瘤的相关性已被证实。慢性粒细胞白血病是一种原发于造血干祖细胞的恶性克隆性疾病。其中，BCR／ABL融合基因产物蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性异常增高，导致底物信号分子磷酸化，在BCR／ABL恶性转化过程中起着极为重要的作用。本研究是建立在赵春华教授在国际上首次建立的表达b3a2 BCR／ABL cdNA的人慢性粒细胞白血病原代造血干祖细胞模型以及表达抗ABL蛋白酪氨酸激酶区胞内单克隆抗体MSCV-ib-IRES-eGFP逆转录病毒载体的工作基础上。我们进一步将此逆转录病毒载体转导人BCR／ABL+的K562慢性髓系白血病细胞系，建立了表达抗ABL蛋白酪氨酸激酶胞内单克隆抗体的K562-ib-eGFP体外细胞模型，并以这两种模型为基础研究了cyclin d2在慢性粒细胞白血病中的表达及其与BCR／ABL融合基因产物蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性之间的关系。方法：以半定量逆转录-聚合酶链(RT-PCR)法检测cyclin d2 mRNA在人慢性粒细胞白血病原代造血干祖细中文摘要胞模型以及对照模型中的表达。以碱裂解法大量扩增表达抗ABL蛋白酪氨酸激酶区胞内单克隆抗体的逆转录病毒载体MSCV－fo－IRES七GFP 以及对照载体MSCV－IRES七GFP。采用聚己二醇沉淀法纯化提取的质粒。采用 PCL－AmphO质粒快速转染系统，共转染 293hi包装细胞系，将获得的病毒上清转导K562细胞系，建立了表达抗ABL 蛋白酪氨酸激酶胞内单克隆抗体的K562－fo七GFP细胞模型。同时，采取同样方法建立对照模型K562七GFP。通过合成胞内抗体特异性引物，以PCR的方法，检测胞内抗ABL蛋白单克隆抗体的表达。以免疫印迹法检狈K562，K562－ibeGFP及K562－eGFP细胞中BCR朋L及C－ABL蛋白的表达，以PTK特异性底物l;***法检测抗体模型中BCRABL及0ABL蛋白酪氨酸激酶活性的变化。以半定量逆转录－聚合酶链（RTPCR）法检狈K562细胞、K562－ibeGFP细胞、K562－eGFP细胞以及 15例 CML患者骨髓细胞、12例正常人骨髓标本中cyclin dZ IlllLrvA的表达。以免疫印迹法检测 K562细胞。K562一七GFP细胞、K562《GFP细胞 cyclin dZ蛋白质表达。以流式细胞术间接免疫荧光标记法检测上述标本cyclin dZ蛋白质水平的变化。应用FACS calibur流式细胞仪，cellquest软件，分析K562细胞、K562－ibeGFP细胞以及K562《GFP细胞周期分布以及 cyclin dZ细胞周期时相性表达。结果：以RT干CR法，在人CML原代造血于祖细胞模型中能检测到 cyclin dZ基因的表达，在转染空载体MSCV七GFP 的脐血Cd34＋七GFP 细胞以及脐血 2 中文摘要 Cd34”七GFP细胞中，末能检测到 cyclin dZ基因表达。在表达抗ABL 蛋自酪氨酸激酶胞内抗体的 ***七GFP细胞模型中，用PCR的方法，能够检测到胞内单克隆抗体的表达。通过免疫印迹法检测 KS 62－fo七GFP抗体模型中BCRABL及c－ABL蛋白的表达，我们发现，表达抗人ABL酪氨酸激酶区胞内单克隆抗体的K562－ibeGFP细胞与K562细胞以及K562干GFP 细胞相比，其 pZIO队…‘及 ABL蛋白的

关键词：细胞周期素d2 慢性粒细胞白血病 p210BCR/AB 酪氨酸激酶胞内抗体流式细胞术

乳腺导管内增生性病变及浸润性癌中cyclin d2和HIN-1基因甲基化的研究

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乳腺导管内增生性病变及浸润性癌中cyclin D2和HIN-1基因甲基化的...

作者：蔡敏山东大学

学位级别：硕士

【目的】乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，且发病率呈逐年上升趋势，严重威胁着妇女的健康和生命。早期诊断、早期治疗是乳腺癌防治的关键。乳腺导管内增生性病变和乳腺癌的发生发展密切相关，其发生乳腺癌的风险较正常者有不同程度... 详细信息

【目的】乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，且发病率呈逐年上升趋势，严重威胁着妇女的健康和生命。早期诊断、早期治疗是乳腺癌防治的关键。乳腺导管内增生性病变和乳腺癌的发生发展密切相关，其发生乳腺癌的风险较正常者有不同程度的增加。近来dNA甲基化是乳腺早期癌变研究的热点之一，许多研究证实dNA高甲基化与乳腺癌的发生密切相关，但由于基因甲基化有肿瘤特异性，当前尚无较好的甲基化谱来应用于乳腺癌的临床诊断。目前对导管内增生性病变到乳腺癌的发展过程中基因甲基化的研究还很少见。本实验选择细胞周期蛋白d2（cyclin d2）和HIN-1（high in normal-1）两种候选抑癌基因，通过检测乳腺普通型增生（usual ductal hyperplasia，UdH）、不典型增生（atypical ductal hyperplasia，AdH）、原位癌（ductal carcinoma in situ，dCIS）及浸润性癌（invasive breast cancer,IBC）中这两种基因甲基化，比较不同组织中cyclind2、HIN-1基因的甲基化率并进行研究分析，一方面期望可以了解这两种基因的甲基化与乳腺癌发生发展的关系，探讨这两种基因甲基化与乳腺癌癌变与演进的相关性，另一方面希望为乳腺癌基因甲基化谱的选择提供一个参考，为乳腺癌的早期诊断、预防和治疗提供理论依据。【方法】选取山东大学齐鲁医院2002～2005年64例外科手术切除标本，根据2003年WHO乳腺肿瘤病理诊断标准对所选病例的HE组织切片进行复习以确定诊断。其中44例乳腺导管内增生性病变（包括UdH 12例，AdH 8例，dCIS 24例）及14例浸润性乳腺癌病例和6例乳腺正常组织，用dNA抽提试剂盒对所有病例的石蜡包埋组织提取基因组dNA，采用甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR，MSP）检测cyclind2、HIN-1基因的甲基化率。用SPSS13.0统计软件包进行分析。【结果】正常乳腺组织、UdH、AdH、dCIS和IBC中，cyclin d2基因甲基化率分别为0％（0／6）、25.0％（3／12）、37.5％（3／8）、66.7％（16／24）和78.6％（11／14），HIN-1基因在正常乳腺组织、AdH、dCIS和IBC中甲基化率分别为0（0／6）、16.7％（2／12）、37.5％（3／8）、62.5％（15／24）和85.7％（12／14），经统计学分析显示，正常组织与dCIS、正常组织与IBC、UdH与dCIS、UdH与IBC之间cyclind2基因甲基化率差别有统计学意义（P＜0.05），其余各组之间无显著性差异（P＞0.05）。同cyclin d2相似，正常组织中HIN-1基因甲基化率与dCIS和IBC相比有显著性差异（P＜0.05），UdH与dCIS、IBC相比有显著性差异（P＜0.05），其余各组之间甲基化率无显著性差异（P＞0.05）。在从正常、UdH、AdH、dCIS到IBC的发展过程中，cyclin d2、HIN-1基因甲基化率均逐渐增加，统计学分析呈线性相关（P＜0.001）。分析各组中cyclin d2和HIN-1基因综合甲基化情况，结果为6例正常组织中cyclin d2和HIN-1均未发生甲基化，25.0％（3／12）UdH至少发生一个基因甲基化，50.0％（4／8）AdH至少发生一个基因甲基化，dCIS为87.5％（21／24），IBC为92.9％（13／14），正常组织与dCIS、IBC之间，UdH与dCIS、IBC之间，以及AdH与dCIS、IBC之间甲基化率差别均有统计学意义（P＜0.05）。在正常、UdH、AdH、dCIS和IBC发展过程中，两个基因至少发生一个甲基化的几率逐步增高，统计学分析呈线性相关（P＜0.001）。相关性分析显示cyclin d2和HIN-1基因甲基化之间呈正相关性（r=0.469，P＜0.001）。【结论】1．乳腺正常组织中cyclin d2和HIN-1基因均未发现甲基化，而在dCIS和IBC这两种病变中呈高甲基化，且正常组织中甲基化率与dCIS、IBC之间差别具有显著性意义，提示cyclin d2、HIN-1基因甲基化在乳腺癌发生过程中起着一定的作用。 ***和AdH中cyclin d2、HIN-1基因有一定程度的甲基化，提示这两种基因甲基化是乳腺癌发生中的早期事件，其蓄积可能促进乳腺癌的恶性转化。 ***2和HIN-1基因甲基化联合分析可以更好的体现dNA高甲基化与乳腺癌发生发展的关系。cyclin d2基因甲基化和

关键词：细胞周期素d2 HIN—1 基因甲基化乳腺肿瘤增生非典型增生导管原位癌

夏枯草乙醇提取物抑制人结肠癌细胞HCT-8增殖及诱导细胞凋亡

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福建中医药 2016年第5期47卷 11-13页

作者：方翌张铃蔡巧燕彭军福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122

目的观察夏枯草乙醇提取物(EESP)对人结肠癌细胞HCT-8的增殖及凋亡的影响。方法 MTT法检测细胞活力,Hoechst 33258检测细胞凋亡,Ge XP系统分析EESP给药后细胞周期素d2和周期蛋白依赖性激酶4的基因表达水平。结果EESP抑制HCT-8细胞活力... 详细信息

目的观察夏枯草乙醇提取物(EESP)对人结肠癌细胞HCT-8的增殖及凋亡的影响。方法 MTT法检测细胞活力,Hoechst 33258检测细胞凋亡,Ge XP系统分析EESP给药后细胞周期素d2和周期蛋白依赖性激酶4的基因表达水平。结果EESP抑制HCT-8细胞活力呈剂量依赖效应,Hoechst 33258染色结果显示1mg/m L的EESP诱导的HCT-8细胞核内呈现明显染色质凝聚等凋亡特征,Ge XP系统分析发现EESP显著抑制CCNd2的水平,而CdK4与对照组比较无显著性差异。结论 EESP诱导人结肠癌细胞HCT-8凋亡,通过抑制CCNd2表达,干扰细胞周期素家族复合物的形成,抑制细胞增殖。

关键词：夏枯草提取物结肠癌 GenomeLabTM遗传分析系统细胞周期素d2