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老年骨质疏松患者血清瘦素、胰岛素样生长因子-Ⅰ、组织蛋白酶K和氧化应激指标的水平及意义

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中国老年学杂志 2018年第12期38卷 2954-2956页

作者：江孝龙蒋国华浙江省荣军医院骨科浙江嘉兴314000

目的探讨老年骨质疏松(OP)患者血清瘦素、胰岛素样生长因子(IGF)-Ⅰ、组织蛋白酶(Cathe)k和氧化应激指标的水平及意义。方法选择老年OP患者200例作为研究组;另选同期健康体检者120例作为对照组。采用放射免疫法测定骨形成蛋白(BGP)含量... 详细信息

目的探讨老年骨质疏松(OP)患者血清瘦素、胰岛素样生长因子(IGF)-Ⅰ、组织蛋白酶(Cathe)k和氧化应激指标的水平及意义。方法选择老年OP患者200例作为研究组;另选同期健康体检者120例作为对照组。采用放射免疫法测定骨形成蛋白(BGP)含量,采用免疫分析法测定骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)含量,采用酶联免疫吸附试验测定人工型前胶原N端前肽(PINP)、Cathe k含量,采用放射免疫分析法测定瘦素和IGF-Ⅰ含量,采用酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,采用骨密度仪测定患者腰椎L1～4和股骨颈骨密度(BMD)。结果研究组血清BGP、B-ALP和PINP水平明显高于对照组(Pk水平显著高于对照组而IGF-Ⅰ水平显著低于对照组(Pk和MDA与BMD呈线性负相关,IGF-Ⅰ和SOD与BMD呈线性正相关(Pk降低、IGF-Ⅰ升高及氧化应激失衡是造成骨量下降和骨形成障碍的重要因素,可作为老年OP辅助诊疗指标。

关键词：骨代谢标志物瘦素胰岛素样生长因子Ⅰ 组织蛋白酶K 氧化应激骨质疏松

UVA照射对皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K表达的影响

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中华皮肤科杂志 2013年第9期46卷 652-655页

作者：许庆芳侯巍刘晨郑跃龚子鉴赖维中山大学附属第三医院皮肤性病科广州510630

目的探讨皮肤成纤维细胞中组织蛋白酶K（Cathepsin k，Catk）的表达随UVA照射后时间及其剂量的变化。方法原代培养的皮肤成纤维细胞来自儿童包皮，10代以内的细胞行后续实验。先以10J／em2UVA照射皮肤成纤维细胞，在照射后24、48、72h... 详细信息

目的探讨皮肤成纤维细胞中组织蛋白酶K（Cathepsin k，Catk）的表达随UVA照射后时间及其剂量的变化。方法原代培养的皮肤成纤维细胞来自儿童包皮，10代以内的细胞行后续实验。先以10J／em2UVA照射皮肤成纤维细胞，在照射后24、48、72h提取照射组和对照组细胞蛋白和mRNA。再以10J／cm2、20J／cm2、30J／cm2UVA照射皮肤成纤维细胞，在照射后48h收集细胞。用RT—PCR和Western印迹法分别检测各组间CatkmRNA、蛋白的表达的差异。结果10J／cm2UVA照射后1、2、3d，照射组CatkmRNA表达分别为0．351±0．038（对照组0．177±0．006）、0．510±0．017（对照组0．176±0．002）、0．313±0．012（对照组0．173±0．002）。照射组Catk蛋白灰度值分别为1．76±0．27（对照组0．82±0．45）、2．97±0．36（对照组1．58±0．15）、2．23±0．14（对照组1．29±0．32），照射组CatkmRNA、蛋白表达均较对照组升高（P〈0．05），且以照射后第2天表达最高。10、20、30J／cmzUVA照射后，48h皮肤成纤维细胞中CatkmRNA表达分别为对照组的2．34、2．91、3．18倍，Catk蛋白表达分别为对照组的1．77、2．82、3．64倍，均随UVA剂量的升高而增加，其差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Catk在UVA照射后皮肤成纤维细胞中的表达升高。

关键词：成纤维细胞弹性组织组织蛋白酶K 紫外线

双膦酸盐对破骨细胞分化中组织蛋白酶K及骨吸收功能的影响

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中国组织工程研究 2014年第33期18卷 5293-5298页

作者：董伟冯晓洁梁永强彭宏峰邓久鹏温黎明戚孟春河北联合大学口腔医学院河北省唐山市063000

背景:有研究表明双膦酸盐可抑制破骨细胞的骨吸收功能,但对其骨吸收功能关键细胞因子组织蛋白酶K是否产生作用,至今少有报道。目的:观察双膦酸盐对破骨细胞分化中组织蛋白酶K及骨吸收功能影响。方法:用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导培... 详细信息

背景:有研究表明双膦酸盐可抑制破骨细胞的骨吸收功能,但对其骨吸收功能关键细胞因子组织蛋白酶K是否产生作用,至今少有报道。目的:观察双膦酸盐对破骨细胞分化中组织蛋白酶K及骨吸收功能影响。方法:用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导培养破骨细胞。实验分2组:对照组加入质量浓度100μg/L核因子κB受体活化因子配体进行诱导至收获细胞,双膦酸盐组在对照组的基础上加入10-7 mol/L阿仑膦酸盐处理至收获细胞。培养第7天检测各组破骨细胞生成和骨吸收功能,培养72 h免疫荧光检测两组组织蛋白酶K表达差异,Western blot检测组织蛋白酶K蛋白表达情况。结果与结论:两组均有抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核破骨细胞生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但对照组抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积均大于双膦酸盐组(P组织蛋白酶K表达对照组强于双膦酸盐组(P组织蛋白酶K表达双膦酸盐组低于对照组(P组织蛋白酶K因子的表达,阻碍破骨细胞的骨吸收功能。

关键词：组织构建骨组织工程双膦酸盐破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶组织蛋白酶K 骨吸收陷窝免疫印迹免疫荧光化学骨质疏松扫描电镜牙本质磨片国家自然科学基金

组织蛋白酶K、胱抑素C与冠心病及其危险因素的相关性分析

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组织蛋白酶K、胱抑素C与冠心病及其危险因素的相关性分析

作者：袁琳延边大学

学位级别：硕士

目的:探讨组织蛋白酶K（Cathepsin k,Catk）、胱抑素C（Cystatin C,CysC）与冠状动脉粥样硬化性心脏病（Coronary artery heart disease,CAD）发病、冠状动脉狭窄程度以及冠心病危险因素之间的关系。方法:采用酶联免疫吸附测定（Enzyme ... 详细信息

目的:探讨组织蛋白酶K（Cathepsin k,Catk）、胱抑素C（Cystatin C,CysC）与冠状动脉粥样硬化性心脏病（Coronary artery heart disease,CAD）发病、冠状动脉狭窄程度以及冠心病危险因素之间的关系。方法:采用酶联免疫吸附测定（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定252例冠心病患者和135例对照组血清Catk水平。同时测定CysC、血脂、高敏C反应蛋白、糖化血红蛋白（Glycosylated hemoglobin,HbA1C）以及肌酐（Creatinine,Cr）水平。所有受试者均行冠脉造影,以Syntax评分评估冠脉狭窄程度。结果:冠心病组与对照组比较糖尿病和高血压发病率显著增高（P＜0.01）;冠心病组与对照组比较LDL-C、HbA1C、hs-CRP、Cat k水平明显升高（P＜0.05）。冠心病组与对照组比较Cys C水平较为显著下降（P＜0.001）。急性冠脉综合征组与稳定型心绞痛组比较糖尿病发病率显著增高（P＜0.01）;急性冠脉综合征组与稳定型心绞痛组分析对比Cys C、hs-CRP以及Cat k水平显著上升（P＜0.05）;急性冠脉综合征组与稳定型心绞痛组比较血管直径明显狭窄（P＜0.05）;急性冠脉综合征组与稳定型心绞痛组比较病变长度和Syntax评分有显著性差异（P＜0.01）。冠心病患者的血清Catk水平与评估冠脉狭窄的Syntax评分呈显著正相关（r=0.236,P＜0.01）;血清CysC水平与Syntax评分呈显著负相关（r=-0.197,P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示:糖尿病（OR,7.69;95%CI,1.89 到 40.10;P＜0.01）,高血压（OR,9.86;95%CI,3.43 到 64.93;P＜0.01）,hs-CRP（OR,4.25;95%CI,2.97 到 7.67;P＜0.01）,高密度脂蛋白（OR,0.83;95%CI,0.82 到 0.98;P＜0.05）,Cat k（OR,1.72;95%CI,1.14 到 1.56;P＜0.01）和 Cys C（OR,1.68;95%CI,1.08到1.42;P＜0.01）水平与CAD显著相关。结论:Catk、CysC可能与冠心病的发病独立相关,其血清水平可反映冠心病患者冠状动脉病变狭窄程度,可作为诊断及判断预后的新的生物标记物。

关键词：组织蛋白酶K 胱抑素C 冠心病危险因素

三七总皂苷对肺纤维化小鼠肺组织蛋白酶K表达的影响

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时珍国医国药 2014年第1期25卷 53-55页

作者：孙晓芳杨会慈段斐刘嘉林党志勇河北大学基础医学院河北保定071000 河北省保定市第二医院071000

目的探讨三七总皂苷(Panax Notoginseng Saponins,PNS)对肺纤维化小鼠肺组织蛋白酶K(cathepsin k,Catk)表达的影响。方法 C57BL/6雄性小鼠90只,分为假手术组、模型组和PNS组,每组30只。除假手术组外其余各组小鼠气管内一次性滴注盐酸博... 详细信息

目的探讨三七总皂苷(Panax Notoginseng Saponins,PNS)对肺纤维化小鼠肺组织蛋白酶K(cathepsin k,Catk)表达的影响。方法 C57BL/6雄性小鼠90只,分为假手术组、模型组和PNS组,每组30只。除假手术组外其余各组小鼠气管内一次性滴注盐酸博莱霉素(Bleomycin,BLM),假手术组小鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后第2天开始给药,持续到处死动物的前1天。假手术组、模型组分别灌服等体积的生理盐水。各组动物于7,14,28 d随机取10只摘眼球取血,分离血清,采用放免法检测血清中层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)的含量;并处死取肺组织进行HE染色,免疫组织化学法和Western-blot法检测Catk蛋白表达情况。结果 PNS组血清中LN和HA的含量较模型组明显降低(Pk的表达升高(Pk的表达有关。

关键词：关键词三七总皂苷肺纤维化细胞外基质组织蛋白酶K

组织蛋白酶K在黑色素细胞病变中的表达及意义

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诊断病理学杂志 2015年第5期22卷 269-271,275页

作者：李良缪国良饶秋余波何燕陆珍凤吴波南京军区南京总医院病理科南京210002 南京市大厂医院病理科

目的研究组织蛋白酶K在黑色素细胞病变中的表达情况,评价其在黑色素细胞病变诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法收集41例恶性黑色素瘤、29例色素痣(6例非典型性痣及23例普通痣)的存档蜡块、病理及临床资料,应用免疫组化方法检测组织蛋白... 详细信息

目的研究组织蛋白酶K在黑色素细胞病变中的表达情况,评价其在黑色素细胞病变诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法收集41例恶性黑色素瘤、29例色素痣(6例非典型性痣及23例普通痣)的存档蜡块、病理及临床资料,应用免疫组化方法检测组织蛋白酶K、S-100、HMB45、melan-A在黑色素细胞病变中的表达,同时与多种非黑色素细胞肿瘤进行对照。结果 70例黑色素细胞病变中组织蛋白酶K的平均阳性率为87.8%,S-100、HMB45和melan-A的平均阳性率分别为90.2%、58.5%和68.3%(P组织蛋白酶K在黑色素细胞病变中的表达具有较高的敏感性和特异性,对黑色素细胞病变的诊断、鉴别诊断具有较高的应用价值。

关键词：黑色素细胞病变组织蛋白酶K 免疫组化

敲除组织蛋白酶K基因对口腔癌抑制作用及其肿瘤免疫的机制研究

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敲除组织蛋白酶K基因对口腔癌抑制作用及其肿瘤免疫的机制研究

小干扰RNA抑制骨肉瘤细胞组织蛋白酶K表达及生长与侵袭的研究

2019第一届全国口腔颌面-头颈肿瘤学术大会——聚合引领、协同发展

作者：杨文宾曹玉彬韩波李春洁李龙江四川大学华西口腔医院

研究目的:研究敲除组织蛋白酶K（Ctsk）基因对口腔癌抑制作用及其肿瘤免疫机制研究方法:使用致癌剂4NQO诱导Ctsk-/-/C57与WT/C57小鼠口腔癌的发生,统计两组小鼠口腔癌发病率的差别,同时检测Ctsk抑制剂对小鼠口腔癌的影响。通过免疫荧光... 详细信息

研究目的:研究敲除组织蛋白酶K（Ctsk）基因对口腔癌抑制作用及其肿瘤免疫机制研究方法:使用致癌剂4NQO诱导Ctsk-/-/C57与WT/C57小鼠口腔癌的发生,统计两组小鼠口腔癌发病率的差别,同时检测Ctsk抑制剂对小鼠口腔癌的影响。通过免疫荧光和流式分析检测实验小鼠相关免疫细胞的变化,包括CD4+T、CD8+T细胞,树突状细胞（DC）和巨噬细胞;通过ELISA实验检测细胞因子IL6、IL10等的变化,qRT-PCR和WB检测JAk/STAT3通路以及抑癌基因SOCS3等蛋白的表达情况。

关键词：组织蛋白酶K 小鼠口腔癌肿瘤免疫树突状细胞 STAT3细胞通路

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中华实验外科杂志 2015年第3期32卷 579-581页

作者：李振伟吴学建肖鹏朱旭郑州大学第一附属医院骨科 450052

目的观察人小干扰RNA （siRNA）沉默入骨肉瘤细胞株MG63组织蛋白酶K（Cathepsin k）对增殖和侵袭影响.方法利用脂质体将Cathepsin k siRNA转染MG63,通过反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）与Western blot分别检测Cathepsin k mRNA及蛋白... 详细信息

目的观察人小干扰RNA （siRNA）沉默入骨肉瘤细胞株MG63组织蛋白酶K（Cathepsin k）对增殖和侵袭影响.方法利用脂质体将Cathepsin k siRNA转染MG63,通过反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）与Western blot分别检测Cathepsin k mRNA及蛋白质表达,增殖与迁移实验评估沉默Cathepsin k后MG63增殖与侵袭改变.结果 siRNA能有效地抑制Cathepsin kmRNA及蛋白质表达（0.05±0.16、4.00±0.08）,与对照组（1.10 ±0.06、1.00±0.21）比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;沉默Cathepsin k细胞增殖（100.00±0.09）明显低于对照组（40.00±0.13,P＜0.01）;Cathepsin k siRNA组迁移细胞数[（45.0±4.9）个]明显低于对照组[（112.0±8.0）个,P＜0.01].结论 siRNA可有效抑制Cathepsin k表达,降低MG63增殖与侵袭能力.

关键词：骨肉瘤组织蛋白酶K RNA干扰增殖侵袭

组织蛋白酶K对老龄小鼠缺血性血管再生的影响

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组织蛋白酶K对老龄小鼠缺血性血管再生的影响

作者：岳学玲延边大学

学位级别：硕士

[目的]随着社会老龄化程度的不断加深,下肢动脉硬化性疾病(lower extremity atherosclerotic disease,LEAD)等缺血性疾病的发病率逐年上升。组织蛋白酶K(cathepsin k,Catk)属于半胱氨酸蛋白酶家族一员,广泛分布在心血管细胞和炎症细胞... 详细信息

[目的]随着社会老龄化程度的不断加深,下肢动脉硬化性疾病(lower extremity atherosclerotic disease,LEAD)等缺血性疾病的发病率逐年上升。组织蛋白酶K(cathepsin k,Catk)属于半胱氨酸蛋白酶家族一员,广泛分布在心血管细胞和炎症细胞为主的机体各种细胞内,是机体主要的弹性蛋白酶和胶原酶,参与细胞外基质降解、细胞迁移、增殖和凋亡等生物功能。众所周知,Notch信号通路在血管再生过程中发挥重要作用。衰老严重影响血管再生及LEAD预后,然而其分子机制尚不清楚。本研究利用Catk基因敲除老龄小鼠下肢缺血性血管再生模型,探讨老化对缺血性血管再生作用是否与Catk激活Notch1及其下游信号通路有关。本研究将为寻找老年性下肢缺血疾病细胞治疗的新分子靶点提供理论依据。[方法]野生型(Catk+/+)和组织蛋白酶K基因敲除型(Catk-/-)老龄小鼠(96周龄)制备单侧下肢缺血性血管再生模型。应用激光多普勒血流测定仪(laser dopplar blood flowmetry,LDBF)扫描测定双侧下肢血流,分析缺血下肢血流恢复情况;免疫组织化学染色方法观察缺血下肢新生毛细血管数量及密度;分别体外培养两组小鼠主动脉血管环,观察两组主动脉环微血管芽的生成情况;流式细胞术观察骨髓和外周血液中内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的分布,分析EPCs动员和归巢能力;免疫印迹(Western blotting,WB)法检测缺血组织及 EPCs 的 Notch1,c-Notch1(cleaved Notch1),血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、Akt 等信号蛋白表达。[结果]1.缺血性血管再生模型制备第4天开始可见两组缺血下肢的血流逐渐恢复,Catk-/-组血流恢复程度明显弱于野生型组(P组织化学染色法观察到Catk-/-组缺血下肢的毛细血管数量和密度显著低于野生型组(Pk-/-组主动脉环血管芽生成面积明显少于野生型组(Pk基因缺失显著降低缺血组织c-Notch1、p-Akt及VEGF蛋白表达水平(Pkt蛋白表达水平无差异;5.流式细胞术观察骨髓和外周血的CD31、c-kit双标EPCs数量可见,Catk-/-组外周血中CD31和c-kit双阳性细胞数量明显少于野生型(Pkit双阳性EPCs数量两组之间无显著性差异;6.免疫印迹法观察EPCs的c-Notch1、Notch1蛋白表达可见,Catk-/-组c-Notch1蛋白表达水平明显降低,与野生型组相比具有统计学意义(P组织蛋白酶K激活Notch1及下游信号通路,调节内皮细胞和内皮祖细胞的生物学功能,影响老龄小鼠缺血性血管再生过程。

关键词：组织蛋白酶K Notch1 血管再生衰老