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线粒体融合素基因-2对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖与化疗敏感性的影响

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癌症 2007年第8期26卷 815-819页

作者：夏耘吴亚群张林李小兰袁惠玲何小军陶德定龚建平裘法祖华中科技大学同济医学院附属同济医院甲乳外科湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤研究所湖北武汉430030

背景与目的:线粒体融合素基因-2(mitofusin-2gene,mfn2)是作用于线粒体外膜的一种增殖抑制基因,mfn2过表达可抑制血管平滑肌细胞的增殖。本研究探讨外源性mfn2对人乳腺癌细胞MCF-7增殖以及化疗敏感性的影响。方法:将含有mfn2cDNA的质粒... 详细信息

背景与目的:线粒体融合素基因-2(mitofusin-2gene,mfn2)是作用于线粒体外膜的一种增殖抑制基因,mfn2过表达可抑制血管平滑肌细胞的增殖。本研究探讨外源性mfn2对人乳腺癌细胞MCF-7增殖以及化疗敏感性的影响。方法:将含有mfn2cDNA的质粒在阳离子聚合物的介导下体外转染MCF-7细胞,Westernblot法检测绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)的表达,细胞计数及MTT法检测mfn2对MCF-7细胞增殖的影响,流式细胞术检测MCF-7细胞周期分布及喜树碱处理前后细胞凋亡的变化。结果:转染mfn2基因的MCF-7细胞可以稳定高表达GFP。MTT实验提示转染mfn2cDNA后,MCF-7细胞增殖明显受到抑制,DNA直方图显示细胞停滞于S期,转染mfn2cDNA组S期细胞比率为(42.7±1.3)%,高于转染空质粒组的(17.2±2.0)%和空白对照组的(19.6±1.7)%(P基因转染后诱导的细胞凋亡率从(3.6±0.6)%升高到(16.0±0.3)%;加入喜树碱4h后转染mfn2基因的细胞凋亡率为(69.6±4.3)%,高于转染空质粒组的(31.0±1.8)%和空白对照组的(23.4±2.8)%(P基因可以明显抑制MCF-7细胞的增殖,增强MCF-7细胞对喜树碱的敏感性。

关键词：乳腺肿瘤线粒体融合素基因-2 MCF-7细胞细胞增殖药物敏感性

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线粒体融合素基因-2与肿瘤

中国肿瘤生物治疗杂志 2013年第6期20卷 735-738页

作者：周立艳(综述) 邱梅清(综述) 贾勇圣(审阅) 佟仲生(审阅) 天津医科大学肿瘤医院乳腺肿瘤内科国家肿瘤临床医学研究中心乳腺癌防治教育部重点实验室天津市肿瘤防治重点实验室天津300060

线粒体融合素基因-2(mitofusin-2 gene,Mfn-2)是作用于线粒体外膜的一种增殖抑制基因,在维持线粒体的形态、功能等方面起着重要作用。随着研究的不断深入,Mfn-2在细胞信号转导、能量代谢、增殖及凋亡等生命过程中的作用日益显现。而肿... 详细信息

线粒体融合素基因-2(mitofusin-2 gene,Mfn-2)是作用于线粒体外膜的一种增殖抑制基因,在维持线粒体的形态、功能等方面起着重要作用。随着研究的不断深入,Mfn-2在细胞信号转导、能量代谢、增殖及凋亡等生命过程中的作用日益显现。而肿瘤发生与细胞过度增殖及凋亡不足等密切相关,因此,如何抑制肿瘤细胞的过度增殖和促进细胞凋亡已成为目前的研究热点。Mfn-2通过多条通路参与多种肿瘤传代细胞系的增殖和凋亡,其表达异常或功能缺失可能是肿瘤发生、发展的重要原因。Mfn-2在许多肿瘤组织中低表达,且表达情况与肿瘤病理类型及生物学行为密切相关,提示其有可能是新的抑癌基因;同时,Mfn-2过表达与喜树碱、放线菌酮(cycloheximide,CHX)等化疗药物联用具有协同作用,提示具有成为化疗增敏靶点的潜力。本文就Mfn-2的功能与肿瘤发生、发展的关系及其治疗学意义的相关研究进展进行综述。

关键词：线粒体融合素基因-2 肿瘤信号通路基因治疗

线粒体融合素基因-2对乳腺癌细胞RECK基因表达的影响

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肿瘤防治研究 2009年第10期36卷 818-820页

作者：张勇郑启昌王尧胡文君胡青钢华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科武汉430022

目的探讨线粒体融合素基因-2(mfn2)对乳腺癌细胞株MCF-7细胞中RECK表达的影响。方法利用脂质体lipofectamine2000将构建的重组真核表达质粒pEGFP-mfn2转染MCF-7细胞。RT-PCR检测细胞mfn2和RECK基因mRNA的转录水平;Weastern blot法检测m... 详细信息

目的探讨线粒体融合素基因-2(mfn2)对乳腺癌细胞株MCF-7细胞中RECK表达的影响。方法利用脂质体lipofectamine2000将构建的重组真核表达质粒pEGFP-mfn2转染MCF-7细胞。RT-PCR检测细胞mfn2和RECK基因mRNA的转录水平;Weastern blot法检测mfn2及RECK蛋白的表达。结果转染pEGFP-mfn2质粒的MCF-7细胞可以稳定高表达mfn2,RECK基因在转染空质粒组和未转染组细胞中无表达,转染mfn2基因后RECK基因mRNA转录及蛋白的表达显著升高。结论mfn2基因可激活MCF-7细胞中RECK基因的表达。

关键词：线粒体融合素基因-2 MCF-7 RECK

线粒体融合素基因-2在正常体重和肥胖乳腺癌患者不同组织中表达的研究

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线粒体融合素基因-2在正常体重和肥胖乳腺癌患者不同组织中表达的...

作者：张玮华中科技大学

学位级别：硕士

【目的】研究线粒体融合素基因-2(mfn2)在正常体重和肥胖乳腺癌患者的不同组织中的表达情况,探讨mfn2基因与乳腺癌发生的关系及评价肥胖与乳腺癌发病的关系。【方法】采用RT-PCR技术对20例正常体重乳腺癌患者及20例肥胖乳腺癌患者的胸... 详细信息

【目的】研究线粒体融合素基因-2(mfn2)在正常体重和肥胖乳腺癌患者的不同组织中的表达情况,探讨mfn2基因与乳腺癌发生的关系及评价肥胖与乳腺癌发病的关系。【方法】采用RT-PCR技术对20例正常体重乳腺癌患者及20例肥胖乳腺癌患者的胸大肌组织,脂肪组织,正常乳腺组织,癌旁组织和癌组织的mfn2的表达水平进行了测定和对比分析。【结果】两组乳腺癌患者不同组织的mfn2的表达水平有差异。在正常体重组内,胸大肌组织和正常乳腺组织内的表达无显著性差异(P=0.101),但显著高于脂肪组织(P=0.016),高于癌旁组织(P=0.027),高于癌组织(P=0.002)。肥胖组内,胸大肌组织、脂肪组织、正常乳腺组织内的表达无显著性差异(P>0.05),但显著高于癌旁组织(P=0.003),高于癌组织(P=0.001)。两组间比较,mfn2在肥胖组患者的五种组织中的表达较正常体重组均有显著性降低(P2基因在癌组织中低表达,且在肥胖患者组织中表达更低,mfn2与乳腺癌的发生有关且肥胖可能增加患乳腺癌的风险。

关键词：线粒体融合素基因-2 乳腺癌肥胖

流体力学介导的RNA干扰对小鼠肝脏线粒体融合素基因-2、空腹血糖和血清甘油三酯水平的影响

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中华肝脏病杂志 2010年第10期18卷 778-782页

作者：陈小琳雷幼蓉武汉大学人民医院内分泌科 430060

目的观察流体力学介导的RNA干扰（RNAi）对小鼠肝脏线粒体融合素基因-2（Mfn2）、空腹血糖（FBS）和血清甘油三酯（TG）水平的影响.方法将56只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组（NC组,n=8）、阴性对照组（HK组,n=24）和Mfn2质粒干扰... 详细信息

目的观察流体力学介导的RNA干扰（RNAi）对小鼠肝脏线粒体融合素基因-2（Mfn2）、空腹血糖（FBS）和血清甘油三酯（TG）水平的影响.方法将56只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组（NC组,n=8）、阴性对照组（HK组,n=24）和Mfn2质粒干扰组（Mfn2组,n=24）.HK组小鼠利用流体力学注射75μg阴性对照质粒溶液1.5 ml,Mfn2组小鼠利用流体力学注射75 μg Mfn2 shRNA质粒溶液1.5 ml.应用逆转录-聚合酶链反应和Western blot方法分别测定注射24、72、120 h后,小鼠肝脏Mfn2的mRNA和蛋白质表达;同时分别取血测定小鼠FBS和TG水平.多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用Scheffe＇s t检验.结果质粒注射72、120 h后,Mfn2组小鼠肝组织Mfn2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.03和1.01±0.053,较HK组（分别为1.14±0.07和1.18±0.07）明显下降（f值分别为4.027和4.234,P值均＜0.01）; Mfn2蛋白分别为7.81±0.80和8.05±0.15,较HK组（分别为8.01±0.08和8.56±0.01）也明显下降（f值分别为2.941和4.883,P值均＜0.05）.注射24 h后,Mfn2组小鼠FBS低于HK组[（2.65±0.70）mmol/L比（5.28±0.82）mmol/L,t=6.879,P＜0.01],TG高于HK组[（1.96±0.32）mmol/L比（1.12±0.16）mmol/L,t=-6.711,P＜0.01）],HK组与NC组之间FBS和TG差异无统计学意义（F值分别为1.412和2.711,P值均＞0.05）;注射72、12h后,Mfn2组小鼠FBS高于HK组（7.23±0.82）mmol/L比（5.18±0.69）mmol/L,t=2.050,P＜0.01;（7.00±0.67）mmol/L比（6.05±0.76）mmol/L,t=3.57,P＜0.05）],血清TG高于HK组,但差异无统计学意义[（1.53±0.27）mmol/L比（1.37±0.18）mmol/L,t=0.160,P＞0.05;（1.84±0.30）mmol/L比（1.52±0.37）mmol/L,t=0.330,P＞0.05）].结论流体力学介导的RNAi在干扰72、120h后可有效抑制肝脏目的基因的表达,抑制Mfn2表达可导致小鼠葡萄糖和脂肪代谢异常.

关键词：血糖甘油三酯类 RNA干扰线粒体融合素基因-2

线粒体融合素基因-2对人骶韧带成纤维细胞增殖及功能的影响

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中国性科学 2014年第6期23卷 22-26页

作者：陈华云陆叶廖秦平北京大学第一医院妇产科北京100034

目的：研究外源性线粒体融合素基因-2（Mfn2）表达对骶韧带成纤维细胞的增殖及其合成前胶原蛋白功能的影响。方法：取新鲜骶韧带组织，用组织块法在体外培养出成纤维细胞。将第2～4代细胞分组：转染LV-Mfn2-GFP组（Mfn2＋组），转染LV-... 详细信息

目的：研究外源性线粒体融合素基因-2（Mfn2）表达对骶韧带成纤维细胞的增殖及其合成前胶原蛋白功能的影响。方法：取新鲜骶韧带组织，用组织块法在体外培养出成纤维细胞。将第2～4代细胞分组：转染LV-Mfn2-GFP组（Mfn2＋组），转染LV-GFP组（Mfn2-组）和未转染组（对照组）。流式细胞仪检测细胞绿色荧光蛋白（GFP）表达，RT-PCR和Western blot检测Mfn2表达。细胞计数和cck-8法检测Mfn2对细胞增殖的影响，流式细胞术检测细胞周期分布。RT-PCR和Western blot检测细胞前胶原1 A1/1A2/3A1的表达。结果：转染慢病毒的成纤维细胞GFP蛋白表达率73.2％～79.1％，转染Mfn2＋组成纤维细胞稳定高表达Mfn2蛋白，显著高于Mfn2-组和对照组（P＜0.05，both）。cck-8实验提示，转染表达Mfn2基因96h后，成纤维细胞增殖明显受到抑制，Mfn2＋组细胞数显著低于 Mfn2-组和未转染组（P＜0.05 both）；DNA直方图分析法测定显示转染Mfn2基因的细胞大部分停滞于G0/G1期，Mfn2＋组G0/G1期细胞比例（60.7％±3.26％），显著高于 Mfn2-组（43.2％±3.32％）和对照组（40.8％±2.28％），（P＜0.05， both）。半定量RT-PCR和Western blot示Mfn2＋组成纤维细胞合成表达前胶原1A1/1A2/3A1显著低于Mfn2-组和对照组（P＜0.05，all）。结论：Mfn2基因在体外转染成纤维细胞后，抑制细胞增殖并使成纤维细胞前胶原蛋白表达下降，可能是导致骶韧带细胞外基质减少，影响韧带纤维数量和质量的重要原因。

关键词：线粒体融合素基因-2 成纤维细胞前胶原蛋白增殖细胞周期

线粒体融合素基因-2启动子区域甲基化与食管鳞状细胞癌的关系研究

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中国中西医结合消化杂志 2016年第12期24卷 923-925页

作者：李爽杨继元长江大学附属第一医院荆州市第一人民医院肿瘤科湖北荆州434000

[目的]检测食管鳞状细胞癌线粒体融合素基因-2（mitofusion2,Mfn2）基因启动子区域甲基化的情况,探讨其相关的临床意义。[方法]选取2014年2月~2016年3月我院收治的食管鳞状细胞癌患者116例组织蜡块,另取同期我院因食管良性病变切除的食... 详细信息

[目的]检测食管鳞状细胞癌线粒体融合素基因-2（mitofusion2,Mfn2）基因启动子区域甲基化的情况,探讨其相关的临床意义。[方法]选取2014年2月~2016年3月我院收治的食管鳞状细胞癌患者116例组织蜡块,另取同期我院因食管良性病变切除的食管组织40例为对照组。Mfn2基因启动子区域甲基化使用亚硫酸盐修饰后PCR检测。[结果]食管鳞癌患者中Mfn2基因启动子区域甲基化率为37.1%（43/116）,显著高于对照组的16.4%（19/116）（P〈0.05）。食管鳞癌患者男女性别和不同年龄之间Mfn2基因启动子区域甲基化率差异无统计学意义（P〉0.05）。T3、T4临床分期患者Mfn2基因启动子区域甲基化率为46.2%（24/52）,显著高于T1、T2临床分期患者的29.7%（19/64）（P〈0.05）。有淋巴结转移患者Mfn2基因启动子区域甲基化率为44.4%（28/63）,显著高于无淋巴结转移患者的28.3%（15/53）（P〈0.05）。肿瘤中、低分化患者Mfn2基因启动子区域甲基化率44.3%（31/70）,显著高于高分化患者的26.1%（12/46）（P〈0.05）。[结论]Mfn2基因启动子区域在食管鳞癌组织中高甲基化,Mfn2基因启动子区域高甲基化与食管鳞癌的临床分期、肿瘤分化程度以及有无淋巴结转移密切相关。

关键词：食管鳞状细胞癌线粒体融合素基因-2 甲基化

腺病毒介导的线粒体融合素基因-2诱导大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡

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中华急诊医学杂志 2006年第6期15卷 506-509页

作者：廖华曹文静陈莉莉陈光慧郭小梅华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科武汉430030

目的研究腺病毒介导的线粒体融合素基因2(mitofusin2gene,Mfn2)对大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)凋亡的影响。方法建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,用携带大鼠Mfn2基因(rMfn2)的重组腺病毒Adv rMfn2... 详细信息

目的研究腺病毒介导的线粒体融合素基因2(mitofusin2gene,Mfn2)对大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)凋亡的影响。方法建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,用携带大鼠Mfn2基因(rMfn2)的重组腺病毒Adv rMfn2GFP和含有绿色荧光蛋白基因的对照腺病毒Adv GFP分别感染球囊损伤动脉段,以磷酸缓冲液(PBS)作为未感染对照组,假手术组作为正常对照组,采用免疫组织化学方法检测外源基因表达水平;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞;Image Pro图像分析系统进行血管定量组织形态学分析。结果病毒感染后5d,免疫组织化学证实Adv rMfn2GFP组Mfn2蛋白表达水平明显;TUNEL染色显示,Adv rMfn2GFP组的VSMCs凋亡率明显高于PBS组和Adv GFP组,假手术组未见TUNEL阳性VSMCs(n=10,P基因可诱导大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡。

关键词：线粒体融合素基因-2 血管平滑肌细胞凋亡腺病毒科基因治疗

线粒体融合素-2对裸鼠成瘤性及增殖、转移的影响

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中华实验外科杂志 2009年第4期26卷 419-421,545页

作者：夏耘龚建平吴亚群华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科武汉430030

目的观察线粒体融合素（mfn）-2对裸鼠成瘤性及增殖瘤的增殖、转移的影响。方法裸鼠共分为3组：实验组、空载体对照组、空白对照组，分别将3组MCF-7细胞异种移植到无胸腺小鼠体内，建立裸鼠人乳腺癌移植瘤模型，比较3组裸鼠之间肿瘤的... 详细信息

目的观察线粒体融合素（mfn）-2对裸鼠成瘤性及增殖瘤的增殖、转移的影响。方法裸鼠共分为3组：实验组、空载体对照组、空白对照组，分别将3组MCF-7细胞异种移植到无胸腺小鼠体内，建立裸鼠人乳腺癌移植瘤模型，比较3组裸鼠之间肿瘤的大小和重量，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测3组肿瘤组织mfn2的表达，免疫组织化学半定量检测核增殖抗原（Ki-67）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果实验组、空载体对照组、空白对照组3组肿瘤瘤体质量（单位：g）分别为1．78±0．13、2．84±0．16、2．77±0．12，实验组裸鼠肿瘤重量明显低于对照组（P〈0．05），实验组瘤体的体积与两对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），实验组mfn2基因高表达（P〈0．05），两对照组低表达，两对照组之间差异无统计学意义（P〉0．05），实验组与两对照组比较，实验组Ki-67的表达升高，而VEGF的表达明显降低（P〈0．05）。结论mfn2基因可明显抑制人乳腺癌成瘤，对人乳腺癌裸鼠移植成瘤后的增殖和转移能力有影响。

关键词：线粒体融合素基因-2 成瘤基因治疗