流体力学介导的RNA干扰对小鼠肝脏线粒体融合素基因-2、空腹血糖和血清甘油三酯水平的影响

作     者：陈小琳 雷幼蓉 CHEN Xiao-lin;LEI You-rong

作者机构：武汉大学人民医院内分泌科430060 

出 版 物：《中华肝脏病杂志》 (Chinese Journal of Hepatology)

年 卷 期：2010年第18卷第10期

页      面：778-782页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：基金项目:湖北省科技厅自然科学基金(2008CDB128) 

主　　题：血糖 甘油三酯类 RNA干扰 线粒体融合素基因-2 

摘      要：目的 观察流体力学介导的RNA干扰（RNAi）对小鼠肝脏线粒体融合素基因-2（Mfn2）、空腹血糖（FBS）和血清甘油三酯（TG）水平的影响.方法 将56只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组（NC组,n=8）、阴性对照组（HK组,n=24）和Mfn2质粒干扰组（Mfn2组,n=24）.HK组小鼠利用流体力学注射75μg阴性对照质粒溶液1.5 ml,Mfn2组小鼠利用流体力学注射75 μg Mfn2 shRNA质粒溶液1.5 ml.应用逆转录-聚合酶链反应和Western blot方法分别测定注射24、72、120 h后,小鼠肝脏Mfn2的mRNA和蛋白质表达;同时分别取血测定小鼠FBS和TG水平.多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用Scheffe＇s t检验.结果 质粒注射72、120 h后,Mfn2组小鼠肝组织Mfn2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.03和1.01±0.053,较HK组（分别为1.14±0.07和1.18±0.07）明显下降（f值分别为4.027和4.234,P值均0.01）; Mfn2蛋白分别为7.81±0.80和8.05±0.15,较HK组（分别为8.01±0.08和8.56±0.01）也明显下降（f值分别为2.941和4.883,P值均0.05）.注射24 h后,Mfn2组小鼠FBS低于HK组[（2.65±0.70）mmol/L比（5.28±0.82）mmol/L,t=6.879,P0.01],TG高于HK组[（1.96±0.32）mmol/L比（1.12±0.16）mmol/L,t=-6.711,P0.01）],HK组与NC组之间FBS和TG差异无统计学意义（F值分别为1.412和2.711,P值均0.05）;注射72、12h后,Mfn2组小鼠FBS高于HK组（7.23±0.82）mmol/L比（5.18±0.69）mmol/L,t=2.050,P0.01;（7.00±0.67）mmol/L比（6.05±0.76）mmol/L,t=3.57,P0.05）],血清TG高于HK组,但差异无统计学意义[（1.53±0.27）mmol/L比（1.37±0.18）mmol/L,t=0.160,P0.05;（1.84±0.30）mmol/L比（1.52±0.37）mmol/L,t=0.330,P0.05）].结论 流体力学介导的RNAi在干扰72、120h后可有效抑制肝脏目的基因的表达,抑制Mfn2表达可导致小鼠葡萄糖和脂肪代谢异常.