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农业工程学报 2024年第1期40卷 310-319页

作者：康乐天王威皓刘婷张台武赵欣翟茂琴李军靳烨段艳内蒙古农业大学食品科学与工程学院呼和浩特010018 农业农村部生鲜牛羊肉加工技术集成科研基地呼和浩特010018 内蒙古苏尼特右旗荣宇现代生态畜牧业有限公司苏尼特右旗011200

瘤胃细菌在绵羊骨骼肌脂肪酸沉积中起着重要作用。为研究精氨酸对绵羊胴体品质、肉质特性和瘤胃细菌组成的影响,探究瘤胃细菌变化与脂肪酸沉积之间的关系,利用宏基因组测序、气相色谱技术分析绵羊补饲精氨酸后瘤胃细菌组成和肌肉脂肪酸... 详细信息

瘤胃细菌在绵羊骨骼肌脂肪酸沉积中起着重要作用。为研究精氨酸对绵羊胴体品质、肉质特性和瘤胃细菌组成的影响,探究瘤胃细菌变化与脂肪酸沉积之间的关系,利用宏基因组测序、气相色谱技术分析绵羊补饲精氨酸后瘤胃细菌组成和肌肉脂肪酸谱的变化,建立两者间的关联性。选取16只健康且体质量相近的3月龄绵羊,随机分为对照组(基础饲粮)和精氨酸组(基础饲粮+1%精氨酸),进行90 d的饲养试验。结果表明,与对照组相比,精氨酸组绵羊的背膘厚显著降低(P<0.05),背最长肌的亮度(L^(*))值、黄度(b^(*))值及剪切力值均显著减小(P<0.05),红度(a^(*))值显著增加(P<0.05)。精氨酸组背最长肌十五烷酸、十七烷酸和十七碳烯酸的含量显著低于对照组(P<0.05),二十四碳烯酸、α-亚麻酸、二十二碳六烯酸和n-3多不饱和脂肪酸的含量显著高于对照组(P<0.05);精氨酸组n-6/n-3多不饱和脂肪酸的比值显著降低(P<0.05)。宏基因组分析显示,补充精氨酸显著提高了瘤胃中梭菌属、月形单胞菌属、瘤胃球菌属和密螺旋体属的丰度(P<0.05),降低了丁酸弧菌属、副拟杆菌属、解琥珀酸菌属、甲烷短杆菌属和Butyrivibrio proteoclasticus的丰度(P<0.05)。此外,精氨酸组瘤胃中丁酸的含量显著增加(P<0.05)。关联性分析显示,丁酸弧菌属与n-3多不饱和脂肪酸呈显著负相关(P<0.05)与饱和脂肪酸呈显著正相关(P<0.05);脂肪酸含量对肉的色泽和pH值有较大的影响。综上所述,精氨酸通过降低瘤胃氢化菌的数量,减少氢化的发生,促进肉中有益脂肪酸沉积,进而改善羊肉品质。研究结果为今后通过饲粮营养干预靶向调控瘤胃细菌提高羊肉品质提供参考。

关键词：肉品质控制精氨酸脂肪酸谱瘤胃生物氢化绵羊

葡萄籽原花青素对高精料育肥绵羊肝脏炎症反应、抗氧化功能的影响及代谢组学分析

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动物营养学报 2024年第7期36卷 4447-4461页

作者：牟春堂谢蕴哲申玉萍张建新郝小燕山西农业大学动物科学学院晋中030801

本试验旨在研究葡萄籽原花青素(GSPs)对高精料育肥绵羊肝脏形态结构、肝脏功能、抗氧化功能及炎症反应的影响,通过非靶向代谢组学分析肝脏代谢变化。试验选取48只日龄、体重[(22.75±1.20)kg]相近的杜寒F1代杂交公羔羊,随机分为4组,每... 详细信息

本试验旨在研究葡萄籽原花青素(GSPs)对高精料育肥绵羊肝脏形态结构、肝脏功能、抗氧化功能及炎症反应的影响,通过非靶向代谢组学分析肝脏代谢变化。试验选取48只日龄、体重[(22.75±1.20)kg]相近的杜寒F1代杂交公羔羊,随机分为4组,每组12只羊。基础饲粮精粗比为70∶30,对照组饲喂基础饲粮,各试验组在饲喂基础饲粮的同时分别再每天补饲10(LGSPs组)、20(MGSPs组)、40 mg/kg BW GSPs(HGSPs组)。试验羊单栏饲养,自由采食、饮水,GSPs于每次晨饲前单独混合于100 g基础饲粮中饲喂。试验期60 d,其中预试期15 d。结果表明:1)对照组绵羊肝细胞肿胀、空泡化严重,各GSPs添加组肝脏组织损伤均有不同程度缓解。2)随着GSPs添加水平的提高,绵羊血清总蛋白和白蛋白含量线性升高(P绵羊肝脏抗氧化功能,降低炎症因子含量,并可能通过调节肝脏脂质代谢、胆碱代谢及肝细胞自噬共同应答肝脏炎性反应和氧化应激,缓解炎性损伤。

关键词：葡萄籽原花青素高精料绵羊肝脏功能代谢组

高精料饲粮中添加辣蓼对绵羊生长性能及血清生化、免疫、炎症和抗氧化指标的影响

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动物营养学报 2024年第4期36卷 2551-2560页

作者：于天力何振莲韩怡静任靖宇夏呈强裴彩霞山西农业大学动物科学学院太谷030801

本试验旨在研究高精料饲粮中添加辣蓼对绵羊生长性能及血清生化、免疫、炎症和抗氧化指标的影响。选取40只体重为(23.26±0.33)kg的3月龄杜寒杂交公羔,随机分为4组,每组10只。基础饲粮精粗比为75∶25,辣蓼添加量分别为0(对照组)、5(L1组... 详细信息

本试验旨在研究高精料饲粮中添加辣蓼对绵羊生长性能及血清生化、免疫、炎症和抗氧化指标的影响。选取40只体重为(23.26±0.33)kg的3月龄杜寒杂交公羔,随机分为4组,每组10只。基础饲粮精粗比为75∶25,辣蓼添加量分别为0(对照组)、5(L1组)、10(L2组)、15 g/d(L3组)。试验期75 d,其中预试期15 d,正试期60 d。结果显示:L3组的后期平均日增重和后期增重均显著高于其他3组(P绵羊的抗氧化能力和免疫功能,降低血清中促炎因子的含量,缓解采食高精料带来的机体炎症,提高绵羊的平均日增重和总增重,对保持绵羊机体健康有积极影响。在本试验条件下,辣蓼不会对机体产生不良影响,15 g/d的添加量最优。

关键词：高精料辣蓼绵羊免疫抗氧化

雌激素介导circZNF423作为ceRNA调控oar-miR-541-3p/CALM3通路促进绵羊成肌细胞增殖

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中国农业科学 2024年第3期57卷 597-612页

作者：池润清韩海银王鹏李凯扬储明星刘玉芳河北工程大学生命科学与食品工程学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室北京市畜牧总站

【背景】雌激素是雌性哺乳动物卵巢组织分泌的主要激素，其对肌肉的生长发育起着重要的调控作用，circRNA已被发现参与多种与肌肉生长发育相关的信号通路。【目的】根据团队前期卵巢摘除苏尼特羊与假手术苏尼特羊全转录组整合分析发现ci... 详细信息

【背景】雌激素是雌性哺乳动物卵巢组织分泌的主要激素，其对肌肉的生长发育起着重要的调控作用，circRNA已被发现参与多种与肌肉生长发育相关的信号通路。【目的】根据团队前期卵巢摘除苏尼特羊与假手术苏尼特羊全转录组整合分析发现circZNF423可作为内源性竞争RNA(ceRNA)调控oar-miR-541-3p/CALM3的表达。为进一步探究雌激素在绵羊肌肉生长中分子机制，通过体外培养绵羊原代成肌细胞，检测成肌细胞中外源添加雌激素介导circZNF423调控oar-miR-541-3p/CALM3对成肌细胞增殖的影响，为进一步研究雌激素及circRNA在绵羊生长发育性状中的作用机制提供理论依据，为绵羊分子设计育种提供新的研究思路。【方法】采集绵羊背最长肌组织，对绵羊原代成肌细胞进行体外分离培养，通过免疫荧光染色、RNA原位杂交（FISH）和核质分离试验确定circZNF423在成肌细胞中的表达位置；RNAhybrid在线软件预测circZNF423、oar-miR-541-3p和CALM3存在结合关系，通过双荧光素酶活性检测和生物素标记的miRNA下拉试验验证circZNF423和oar-miR-541-3p、oar-miR-541-3p和CALM3结合情况；体外构建合成circZNF423过表达或干扰载体、oar-miR-541-3p的模拟物（mimics）或抑制剂（inhibitor）、CALM3过表达或干扰载体，在绵羊原代成肌细胞中进行转染，利用RT-qPCR、Western blot、EdU和CCK-8检测绵羊成肌细胞增殖标志因子的表达和成肌细胞增殖情况；为进一步明确雌激素在绵羊肌肉生长发育中的作用，体外添加不同浓度的外源性雌二醇（E2），利用RT-qPCR、Western blot、CCK-8和EdU检测绵羊肌细胞增殖标志基因的表达变化。【结果】免疫荧光染色显示分离的原代细胞为绵羊成肌细胞，可用于后续功能验证；RNA原位杂交和核质分离试验表明，circZNF423主要在绵羊成肌细胞质中表达。RNAhybrid、双荧光素酶活性检测和生物素标记的miRNA下拉试验结果表明，circZNF423与oar-miR-541-3p、oar-miR-541-3p与CALM3 3’UTR之间均存在显著的结合关系；抑制circZNF423/CALM3表达或过表达oar-miR-541-3p后，绵羊成肌细胞增殖标志因子PCNA、CDK2和Pax7 mRNA与蛋白表达水平一致，均显著上调（P绵羊成肌细胞增殖率显著上升（P绵羊成肌细胞增殖标志因子表达最高，显著高于1和100 nmol·L-1的添加浓度（P绵羊肌细胞增殖标志因子PCNA、CDK2和Pax7mRNA和蛋白表达水平一致，均显著上调，circZNF423和CALM3的表达量显著降低，oar-miR-541-3p的表达量显著升高（P绵羊成肌细胞增殖率显著升高（P绵羊成肌细胞中circZNF423作为ceRNA调控oar-miR-541-3p和CALM3的结合及表达，添加外源雌激素可通过抑制circZNF423/oar-miR-541-3p/CALM3通路促进绵羊肌肉细胞的增殖。这些结果为揭示雌激素及circZNF423在绵羊骨骼肌发育性状中的分子机制提供理论基础。

关键词：绵羊肌肉发育雌激素 circZNF423 oar-miR-541-3p CALM3

绵羊肝细粒棘球蚴包囊形成不同时期的病理学变化观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第3期42卷 316-324页

作者：候梦丹吉古孝安刘伟伟邱美龄胡美荷李昆雷加依娜尔·吉克散巴依翟少华新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 和田地区中等职业技术学校新疆和田848000

目的观察绵羊细粒棘球蚴包囊形成不同时期的肝细胞损伤、局部炎症反应,以及包囊纤维蛋白组成的病理学特征。方法收集新疆乌鲁木齐市某屠宰场阿勒泰羊中有明显细粒棘球蚴包囊的肝脏,根据包囊的形态特征分为包囊发育期组、包囊形成期组... 详细信息

目的观察绵羊细粒棘球蚴包囊形成不同时期的肝细胞损伤、局部炎症反应,以及包囊纤维蛋白组成的病理学特征。方法收集新疆乌鲁木齐市某屠宰场阿勒泰羊中有明显细粒棘球蚴包囊的肝脏,根据包囊的形态特征分为包囊发育期组、包囊形成期组和包囊成熟期组,取各组包囊与健康肝组织交界处的病变组织制备切片,以健康羊肝组织为对照组。苏木素-伊红(HE)染色观察包囊周围肝细胞形态特征及周围组织形态学变化,Masson染色观察包囊形成不同时期囊壁的纤维化过程,透射电子显微镜观察肝细胞超微结构变化,免疫组织化学染色观察不同时期包囊及其周围组织的炎症细胞CD3^(+)T淋巴细胞(CD3^(+))、CD25^(+)调节性T细胞(CD25^(+))、CD56^(+)自然杀伤细胞(CD56^(+))、CD14^(+)单核巨噬细胞(CD14^(+))、嗜碱粒细胞CD63 (CD63),以及纤维化蛋白Ⅰ型胶原蛋白1 (COL1)、COL3、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、钙结合蛋白A4 (S100A4)、基质金属蛋白酶2 (MMP2)和细胞因子肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、血管内皮生长因子受体-3 (VEGFR-3)的表达变化。组间比较采用单因素ANOVA分析,两两比较采用LSD-t检验。结果 HE染色结果可见,包囊发育期,囊壁有明显的炎症反应带及炎症细胞团的形成,炎症细胞向囊外周肝实质扩散;包囊形成期,囊壁变薄,炎症细胞数量明显减少,炎症反应带变薄;包囊成熟期,囊壁纤维组织增生形成包囊的外壁角质层,炎症细胞数量减少。Masson染色结果可见,包囊发育期的囊壁外周有大量纤维组织产生,并向周围肝组织内延伸;包囊形成期包囊生长发育,炎症反应减弱,囊壁纤维组织发育成熟;包囊成熟期形成致密的纤维性囊壁。透射电子显微镜观察可见,随着包囊发育形成,肝细胞线粒体逐渐肿大、数量增多,肝细胞中的脂滴数量增多、体积增大。免疫组织化学染色结果显示,随着包囊的增大,囊壁炎症反应带变薄,炎症细胞阳性表达范围减小,表达量减少;包囊形成期、包囊发育期、包囊成熟期的炎症细胞平均光密度值,CD3^(+)分别为0.171±0.009、0.132±0.009、0.120±0.006 (F=1.640,P> 0.05),CD25^(+)分别为0.302±0.012、 0.174±0.009、 0.080±0.005 (F=49.051, P 0.05),CD63分别为0.318±0.007、0.096±0.013、0.086±0.011 (F=307.442,P 0.05),COL3分别为0.109±0.014、0.144±0.008、0.206±0.008 (F=42.116,P <0.01),α-SMA分别为0.255±0.008、0.283±0.009、0.301±0.022 (F=5.106,P <0.05),S100A4分别为0.210±0.012、0.248±0.004、0.258±0.007 (F=18.137 3,P <0.01),MMP2分别为0.155±0.002、0.172±0.011、0.185±0.008 (F=7.853,P <0.05);TNF-α在包囊周围组织表达,阳性表达范围增大,表达量增多,平均光密度分别为0.115±0.016、0.263±0.003、0.267±0.006 (F=145.627,P <0.01);VEGFR-3在包囊壁表达,包囊形成期表达最多,3个包囊期分别为0.248±0.009、0.357±0.045、0.268±0.004 (F=9.423,P <0.05);3个包囊期各指标的平均光密度值均高于健康肝脏(均P <0.01)。结论随着包囊发育,包囊及周围肝组织具有不同程度的肝细胞损伤、囊壁结构变化和纤维化反应,肝脏线粒体代谢加强,影响脂肪代谢。

关键词：细粒棘球蚴包囊病理学炎性细胞纤维化绵羊

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绵羊MYL基因家族的鉴定与组织表达分析

畜牧兽医学报 2024年第4期55卷 1551-1564页

作者：杨杨余乾刘昱成杨华赵卓王立民周平杨庆勇代蓉新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室石河子832000 华中农业大学信息学院武汉430070

为了解肌球蛋白轻链(myosin light chain,MYL)基因家族在绵羊中的分子进化关系及表达变化,本研究利用生物信息学方法对绵羊MYL基因家族进行鉴定和系统分析。各选取了3只军垦白肉羊、新疆细毛羊和湖羊成年公羊各组织样品,采用qRT-PCR方... 详细信息

为了解肌球蛋白轻链(myosin light chain,MYL)基因家族在绵羊中的分子进化关系及表达变化,本研究利用生物信息学方法对绵羊MYL基因家族进行鉴定和系统分析。各选取了3只军垦白肉羊、新疆细毛羊和湖羊成年公羊各组织样品,采用qRT-PCR方法验证家族成员MYL1、MYL6B和MYLPF基因的表达情况。结果显示,12个MYL基因分布在9条染色体上,编码由147~211氨基酸组成的亲水性蛋白质,无信号肽和跨膜结构域,二级结构以α-螺旋为主。根据基因结构、保守结构域和基序分布等特征,可以将这些基因家族成员分为3个组。共线性分析结果表明,MYL2和MYL10、MYL2和MYLPF存在片段复制,且这些片段受到较强的选择压力。蛋白互作网络显示MYH10与绵羊MYL家族成员均存在互作关系。MYLs的组织表达模式差异较大,其中MYL1、MYL2、MYL6B和MYLPF在骨骼肌组织中高水平表达。基因克隆测序结果显示,扩增得到目的基因的CDS全长,qRT-PCR结果表明,MYL1、MYL6B和MYLPF在军垦白肉羊肌肉组织中的表达水平显著高于其他组织(P绵羊MYL基因家族的功能以及优化绵羊肉用性能提供了线索。

关键词：绵羊 MYL 基因家族生物信息学分析基因表达

PPARA基因对绵羊肌内脂肪沉积的影响及其多态性

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华北农学报 2024年第2期39卷 209-218页

作者：付玲娟史金平张全伟刘婷赵德宝马维华马海蛟孟泉禄唐致雄成述儒甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070 甘肃省临夏州康乐县畜牧兽医中心甘肃临夏731500

为研究PPARA对绵羊肌内脂肪(IMF)沉积的影响及作用机制,寻找绵羊肌内脂肪沉积相关分子标记,以小尾寒羊(STH)和萨寒杂交(STH×SFK)F1群体为研究对象,通过测定其肉品质,利用H&E染色和油红O染色比较2个绵羊群体背最长肌组织学结构及脂滴分... 详细信息

为研究PPARA对绵羊肌内脂肪(IMF)沉积的影响及作用机制,寻找绵羊肌内脂肪沉积相关分子标记,以小尾寒羊(STH)和萨寒杂交(STH×SFK)F1群体为研究对象,通过测定其肉品质,利用H&E染色和油红O染色比较2个绵羊群体背最长肌组织学结构及脂滴分布;利用qRT-PCR和WB技术检测PPARA mRNA水平和蛋白水平在不同群体间的表达差异,并分析PPARA基因与肌内脂肪的相关性;Sanger测序技术检测PPARA基因SNP位点以评估其作为绵羊肌内脂肪沉积相关遗传标记的可能性。结果表明:小尾寒羊剪切力和失水率极显著高于萨寒杂交,但是pH值极显著低于萨寒杂交,大理石花纹评分小尾寒羊低于萨寒杂交群体;组织学染色显示,小尾寒羊肌纤维较粗,排列紧密,肌内脂肪在肌纤维间隙集中分布;萨寒杂交肌纤维较细且结构松散,肌内脂肪在肌细胞间及肌纤维间隙均匀、广泛分布,含量更高;PPARA mRNA表达量小尾寒羊群体显著高于萨寒杂交群体,PPARA蛋白表达量小尾寒羊群体极显著高于萨寒杂交群体;相关性分析显示,PPARA基因表达量与绵羊脂滴面积比及pH值呈极显著负相关,与剪切力和失水率呈极显著正相关,与大理石花纹评分弱相关;Sanger测序结果分析显示,2个绵羊群体PPARA基因第2内含子T49885C、T50007C、G50013A、G50835A、G50942A及G51154C位置上发生碱基突变,但小尾寒羊群体未检测到C49885T突变。SNP遗传多样性分析显示,SNP位点群体纯合度均大于杂合度,在群体中处于中低度多态;除G50835A突变偏离了Hardy-Weinberg平衡,其余SNPs均符合Hardy-Weinberg平衡,遗传基础稳定。研究认为,PPARA基因对绵羊肌内脂肪沉积具有重要影响,可作为绵羊肌内脂肪性状选择的潜在分子遗传标记。

关键词：绵羊肌内脂肪 PPARA 多态性

昼夜节律对绵羊营养物质消化利用效率、血液指标和免疫应答的影响

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动物营养学报 2024年

作者：姜露徐泽君杨斯涵陈其新王献伟胡业勇王林枫高腾云杨改青河南农业大学动物科技学院河南省畜牧技术推广总站河南省商丘市宁陵县豫东牧业开发有限公司河南农业大学实验室与设备管理办公室

为研究绵羊营养物质消化代谢、肉品质等受昼夜节律的影响以及绵羊在不同时间段的营养物质消化代谢水平,本试验选用体重为(43.00±2.42) kg、年龄(7月龄)相近的健康杜湖(杜泊■×湖羊♀)杂交公羊12只,单独饲养在代谢笼中,饲喂相同的饲粮... 详细信息

为研究绵羊营养物质消化代谢、肉品质等受昼夜节律的影响以及绵羊在不同时间段的营养物质消化代谢水平,本试验选用体重为(43.00±2.42) kg、年龄(7月龄)相近的健康杜湖(杜泊■×湖羊♀)杂交公羊12只,单独饲养在代谢笼中,饲喂相同的饲粮,适应期7 d,消化代谢试验14 d。之后做永久性瘤胃、十二指肠、回空肠瘘管。术后恢复期30 d,灌注期7 d,采样期4 d。采集的光照时段样品为白天组(DP组),黑暗时段的样品为夜间组(NP组)。结果表明:1)DP组和NP组间瘤胃和各肠段食糜流通量及胃区和各肠段表观消化率无显著差异(P>0.05)。2)NP组的粪磷含量显著高于DP组(P绵羊营养物质消化代谢水平以及血液代谢物水平具有昼夜差异,在白天对氮、粗脂肪的代谢能力更强,夜间绵羊免疫应答和抗氧化能力高于白天。

关键词：昼夜节律绵羊消化代谢血清代谢物抗氧化能力免疫应答

饲粮不同替代水平水培小麦苗对绵羊生长性能、养分表观消化率和血清生化指标的影响

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动物营养学报 2024年第8期36卷 5192-5206页

作者：庹勇郭同军臧长江侯良忠古再丽努尔·艾麦提李进龙辛洪泽新疆农业大学动物科学学院乌鲁木齐830052 新疆畜牧科学院饲料研究所乌鲁木齐830011 新疆饲料生物技术重点实验室乌鲁木齐830011 新疆柯米特农业科技有限公司乌鲁木齐830000

本试验旨在探究采用不同水平水培小麦苗替代基础饲粮对绵羊生长性能、养分表观消化率和血清生化指标的影响。选取体重[(27.93±2.16)kg]相近的4月龄湖羊公羔50只,随机分为5组,每组10个重复,每个重复1只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别... 详细信息

本试验旨在探究采用不同水平水培小麦苗替代基础饲粮对绵羊生长性能、养分表观消化率和血清生化指标的影响。选取体重[(27.93±2.16)kg]相近的4月龄湖羊公羔50只,随机分为5组,每组10个重复,每个重复1只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别用水培小麦苗按5%、10%、15%和20%的水平(干物质基础)替代基础饲粮。试验期77 d,其中预试期10 d,正试期67 d,并在正试期第61~67天进行消化试验。结果表明:1)与对照组相比,各水培小麦苗替代组绵羊平均日增重(ADG)显著或极显著提高(P绵羊血清甘油三酯(TG)含量极显著降低(P绵羊血清超氧化物歧化酶(SOD)活性极显著提高(P绵羊的经济效益最高。综上所述,采用水培小麦苗部分替代基础饲粮可提高绵羊饲粮消化利用率,降低血脂水平,提高蛋白质代谢利用率以及机体免疫性能和抗氧化能力,进而促进其生长,提高经济效益;在本试验条件下,水培小麦苗适宜添加水平为15%。

关键词：水培小麦苗绵羊生长性能表观消化率血清生化指标