检索结果-南通市图书馆

粉纹夜蛾细胞系QB-Tn9-4s的克隆以及克隆株生物学特性的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

粉纹夜蛾细胞系QB-Tn9-4s的克隆以及克隆株生物学特性的研究

作者：马明青岛农业大学

学位级别：硕士

QB-Tn9-4s为本实验室建立的粉纹夜蛾悬浮性新细胞系,其苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus, AcMNPV)产量和重组蛋白表达量与目前国际上应用最多的BTI-Tn5B1-4细胞相当。该细胞系... 详细信息

QB-Tn9-4s为本实验室建立的粉纹夜蛾悬浮性新细胞系,其苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus, AcMNPV)产量和重组蛋白表达量与目前国际上应用最多的BTI-Tn5B1-4细胞相当。该细胞系在有血清培养条件下达到最高密度时不结块,是一株有潜力的进行大规模细胞培养的新细胞系。本试验对该细胞系进行克隆,并对克隆株的生物学特性进行研究,主要结果如下: 1.利用24孔细胞克隆板对低传代悬浮细胞系QB-Tn9-4s进行克隆,获得8个克隆株,分别命名为克隆株QB-Tn-A、QB-Tn-B、QB-Tn-C、QB-Tn-D、QB-Tn-E、QB-Tn-F、QB-Tn-G和QB-Tn-H。 2.对各克隆株基因组DNA进行RAPD-PCR鉴定,结果表明各细胞克隆株与原始细胞系QB-Tn9-4s具有相同的DNA扩增谱带。 3.各克隆株的形态具有一定差异:克隆株QB-Tn-B为贴壁性细胞,其余7个均为悬浮性克隆株;克隆株QB-Tn-A、B、C、D和E以梭形细胞为主,大约占细胞总数的60% 80%;QB-Tn-F、G和H以棒状细胞为主,比例分别为44.5%、49.5%和80.0%。 4.测定了6个克隆株的生长曲线和群体倍增时间,其中克隆株QB-Tn-A的群体倍增时间最短为21.37h,且与BTI-Tn5B1-4细胞相当;克隆株QB-Tn-E的群体倍增时间次之(22.04h),倍增速度快于原始细胞系QB-Tn9-4s(23.60h);其余克隆株的群体倍增速度均慢于原始细胞系。 5.病毒侵染试验表明,各细胞克隆株对AcMNPV均较敏感,感染率在92%以上,平均每个细胞病毒多角体(OBs)产量在8510个之间,其中克隆株QB-Tn-A多角体产量略高于BTI-Tn5B1-4和QB-Tn9-4s。克隆株QB-Tn-A和QB-Tn-E的出芽性病毒(BV)产量与原始细胞系(3.37×107 TCID50/mL)接近,而其余4株均低于原始细胞系。 6.重组蛋白表达水平测定表明,克隆株QB-Tn-A的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)表达量最高为1.91×104 IU/mL,是原始细胞QB-Tn9-4s蛋白表达量(1.38×104 IU/mL)的1.39倍,具有差异显著性;克隆株QB-Tn-B第7d的分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)表达量最高为2.69 IU/mL,是原始细胞QB-Tn9-4s蛋白表达量(0.76 IU/mL)的3.51倍,与BTI-Tn5B1-4的蛋白表达量没有差异显著性。

关键词：粉纹夜蛾 QB-Tn9-4s 悬浮细胞细胞克隆病毒产量重组蛋白

抗Bt Cry1Ac毒素粉纹夜蛾离体细胞与敏感细胞的差异蛋白定量分析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

植物保护学报 2011年第3期38卷 281-282页

作者：刘凯于吴彦艳彭建新洪华珠华中师范大学农药与化学生物学教育部重点实验室武汉430079

苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）产生的毒素对许多昆虫具有特异性高效毒杀作用[1-2],但是随着Bt杀虫毒素的广泛使用,昆虫对Bt的抗性风险越来越高。这种抗性机制非常复杂[3],而蛋白质组学技术可较全面揭示昆虫细胞抗Bt毒素... 详细信息

苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）产生的毒素对许多昆虫具有特异性高效毒杀作用[1-2],但是随着Bt杀虫毒素的广泛使用,昆虫对Bt的抗性风险越来越高。这种抗性机制非常复杂[3],而蛋白质组学技术可较全面揭示昆虫细胞抗Bt毒素的分子机制。

关键词： Bt毒素杀虫毒素离体细胞定量分析差异蛋白粉纹夜蛾苏云金芽胞杆菌蛋白质组学技术

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

EGFP基因在粉纹夜蛾细胞中的高效表达

Zoological Research 1999年第6期20卷 468-470页

作者：张传溪孙建新施惠娟陈哲宇吴祥甫浙江大学应用昆虫学研究所杭州310029 中国科学院上海生物化学研究所上海200031

绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因是从一种水母体内分离的新型报告基因(report gene)(Chalfie 等,1994),其编码的、由238个氨基酸组成的GFP是一种对光稳定的可溶性蛋白,在长波紫外光或蓝光激发下就能发出绿色荧光,而不... 详细信息

绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因是从一种水母体内分离的新型报告基因(report gene)(Chalfie 等,1994),其编码的、由238个氨基酸组成的GFP是一种对光稳定的可溶性蛋白,在长波紫外光或蓝光激发下就能发出绿色荧光,而不需添加任何酶或底物,因而检测十分方便快速,无背景干扰.

关键词：杆状病毒粉纹夜蛾昆虫细胞 EGFP 基因表达

粉纹夜蛾核型多角体病毒在同源寄主细胞系中复制和连续传代的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

东北农学院学报 1992年第2期23卷 135-140页

作者：李国勋东北农学院植物保护系哈尔滨150030

本文研究了粉纹夜蛾单粒包埋核型多角体病毒(TnSNPV)在同源寄主细胞系Tn5B_(1—4)中的生长特性。结果表明,接种36h 后,无包涵体游离病毒(TnSNPV—NOV)的增殖达到高峰;在60代的连续传递过程中,TnSNPV-NOV 毒力随传递代数的增加而减低,但... 详细信息

本文研究了粉纹夜蛾单粒包埋核型多角体病毒(TnSNPV)在同源寄主细胞系Tn5B_(1—4)中的生长特性。结果表明,接种36h 后,无包涵体游离病毒(TnSNPV—NOV)的增殖达到高峰;在60代的连续传递过程中,TnSNPV-NOV 毒力随传递代数的增加而减低,但不明显。传至60代时仍可保持感染力1×10~5TCID_(50)(组织感染中量)/mL;而多角体的毒力变化十分显著,前几代能使粉纹夜蛾幼虫死亡率迭95%以上,传递到30代以后产生的多角体对粉纹夜蛾的幼虫几乎失去毒力;多角体的产量也明显降低,前几代病毒在每个细胞中可达670PIB,但20代以后,每细胞中多角体的产量仅在100PIB 以下.

关键词：病毒连续传代粉纹夜蛾

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

粉纹夜蛾离体细胞抗菌肽的抗菌谱测定

生物技术通报 2002年第6期18卷 36-38页

作者：彭蓉洪华珠华中师范大学生命科学学院武汉430079

用热灭活的大肠杆菌DH5α诱导粉纹夜蛾 (Trichoplusiani)离体细胞产生抗菌肽 ,用三氯乙酸沉淀法提取出该活性物质 ,采用琼脂糖孔穴扩散法和生长抑制测定法测定其抗菌谱 ,发现该抗菌物质具有较广的抗微生物活性 ,其中特别是对革兰氏阴性... 详细信息

用热灭活的大肠杆菌DH5α诱导粉纹夜蛾 (Trichoplusiani)离体细胞产生抗菌肽 ,用三氯乙酸沉淀法提取出该活性物质 ,采用琼脂糖孔穴扩散法和生长抑制测定法测定其抗菌谱 ,发现该抗菌物质具有较广的抗微生物活性 ,其中特别是对革兰氏阴性菌中的沙门氏菌和大肠杆菌 ,酵母菌中的白色念珠菌 ,植物病源真菌中的花生白绢病菌和小麦赤霉病菌具有较强的抑菌活性 ,从而表明该物质是一种既抗细菌 ,又抗真菌的抗微生物肽。

关键词：大肠取出白色念珠菌抗菌谱诱导生长抑制抗微生物肽粉纹夜蛾小麦赤霉病花生

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

粉纹夜蛾微孢子虫的分离及其初步分类鉴定

昆虫天敌 2007年第3期29卷 133-137页

作者：姚丹丹罗丽赵远超温小昭陈其津中山大学昆虫学研究所广东省农业科学院植物保护研究所广州510640

从粉纹夜蛾(Trichoplusia ni,Tn)幼虫中分离纯化得到一种微孢子虫,孢子形状为卵圆形,大小为(2.832±0.486)μm×(1.947±0.317)μm。它能寄生粉纹夜蛾的大多数组织器官,在虫体内的发育过程具有微粒子属Nosema的分类特征,并初步命名为Nos... 详细信息

从粉纹夜蛾(Trichoplusia ni,Tn)幼虫中分离纯化得到一种微孢子虫,孢子形状为卵圆形,大小为(2.832±0.486)μm×(1.947±0.317)μm。它能寄生粉纹夜蛾的大多数组织器官,在虫体内的发育过程具有微粒子属Nosema的分类特征,并初步命名为Nosema sp.。

关键词：粉纹夜蛾微孢子虫纯化超微结构

天然醌类和合成醌类物质对粉纹夜蛾的拒食与毒性作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

世界农药 2013年第2期35卷 22-27页

作者：汪浩赖多徐汉虹华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室

一些植物次生代谢物对植食性害虫有防御作用。众所周知,它们可阻止害虫取食和产卵,或抑制幼虫生长,但不完全灭杀害虫。拒食剂被认为是可以减少害虫取食的物质,这些物质主要是次生代谢物中几大类,如生物碱类、酚类和萜类化合物,而萜类化... 详细信息

一些植物次生代谢物对植食性害虫有防御作用。众所周知,它们可阻止害虫取食和产卵,或抑制幼虫生长,但不完全灭杀害虫。拒食剂被认为是可以减少害虫取食的物质,这些物质主要是次生代谢物中几大类,如生物碱类、酚类和萜类化合物,而萜类化合物是拒食剂中活性最强以及类型最多。目前,具有干扰取食特性的化合物引起人们的兴趣,

关键词：粉纹夜蛾幼虫胡桃酮取食行为毒性作用天然

粉纹夜蛾核型多角体病毒p35基因的克隆与序列分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

病毒学报 1997年第3期13卷 262-264页

作者：施宪宗龙綮新代小江曲士芮陈曲侯庞义中山大学生物防治国家重点实验室华中师范大学昆虫学研究所

粉纹夜蛾核型多角体病毒ｐ３５基因的克隆与序列分析施宪宗１王王旬章龙綮新２代小江曲士芮陈曲侯１庞义（中山大学生物防治国家重点实验室，广州５１０２７５）关键词ＴｎＮＰＶｐ３５基因，序列分析，细胞凋亡目前所知，杆状病毒编码... 详细信息

粉纹夜蛾核型多角体病毒ｐ３５基因的克隆与序列分析施宪宗１王王旬章龙綮新２代小江曲士芮陈曲侯１庞义（中山大学生物防治国家重点实验室，广州５１０２７５）关键词ＴｎＮＰＶｐ３５基因，序列分析，细胞凋亡目前所知，杆状病毒编码两种阻遏宿主细胞因病毒感染而诱发细...

关键词：昆虫病毒粉纹夜蛾核型多角体病毒基因p35

花木害虫粉纹夜蛾抗生物农药Bt抗性机制的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

花卉 2017年第20期 207-208页

作者：韩端丹武汉东湖学院

苏云金芽孢杆菌（Bt）产生的伴孢晶体蛋白（Cry毒素）具杀虫活性,对昆虫有高度选择性而对人畜无害,已开发成生物农药广泛使用。随着Bt农药全世界大量,应用,部分昆虫产生了抗药性。粉纹夜蛾在我国广泛分布且危害较大,已发现其对Bt农药和... 详细信息

苏云金芽孢杆菌（Bt）产生的伴孢晶体蛋白（Cry毒素）具杀虫活性,对昆虫有高度选择性而对人畜无害,已开发成生物农药广泛使用。随着Bt农药全世界大量,应用,部分昆虫产生了抗药性。粉纹夜蛾在我国广泛分布且危害较大,已发现其对Bt农药和转Bt基因植物产生抗性。本文比较粉纹夜蛾抗Bt毒素细胞与敏感细胞的各项差异,应用蛋白组学和mRNA组学的方法技术,分析发现敏感细胞与抗性细胞的大部分差异蛋白,都与糖蛋白、胞质结合蛋白、脂蛋白、脂多糖蛋白相关,提示昆虫对Bt抗性的形成可能与膜蛋白有关。

关键词：粉纹夜蛾 Bt 抗性 Cry毒素