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穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠钠离子通道基因表达影响的研究

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穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠钠离子通道基...

作者：侯丽辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经电压门控钠离子通道mRNA表达的影响。材料与方法:选择SPF级雄性Wistar大鼠100只,体重180-200g,随机分成正常对照组、模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组、... 详细信息

目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经电压门控钠离子通道mRNA表达的影响。材料与方法:选择SPF级雄性Wistar大鼠100只,体重180-200g,随机分成正常对照组、模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组、强的松组,每组20只。通过腹腔内一次性注射2%链脲佐菌素溶液(Streptozotocin,STZ)53mg/kg(PH4.2的0.1mol/l枸椽酸缓冲液配制)造模。观察给药后4周、8周、12周大鼠行为特征、血糖、体重、神经传导速度、痛阈情况的变化,并采用RT-PCR技术检测穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经电压门控钠离子通道mRNA表达的影响。结果:1.模型组大鼠精神状态差,多饮、多食、多尿、毛色暗黄无光泽,蜷卧弓背等,给药组大鼠状态优于模型组,其中薯蓣皂苷高剂量组和强的松组大鼠状态改善明显。2.模型组和各给药组较正常对照组大鼠血糖水平有明显的提高(P0.05);12周时薯蓣皂苷高剂量组和强的松组较模型组大鼠血糖水平明显降低(P薯蓣皂苷高、低剂量组、强的松组较同期模型组大鼠神经传导速度(MNCV)呈升高趋势(P薯蓣皂苷高、低剂量组较同期模型组大鼠神经传导速度(MNCV)呈升高趋势(P薯蓣皂苷高、低剂量组、强的松组较同期模型组大鼠神经传导速度(MNCV)呈升高趋势(P0.05);强的松组较同期低剂量组大鼠痛阈明显降低(P薯蓣皂苷高、低剂量组、强的松组较同期模型组大鼠坐骨神经Nav1.7、Nav1.8、Nav1.9mRNA表达水平下调(P0.05),4周、12周时强的松组较同期高剂量组大鼠坐骨神经Nav1.9mRNA表达水平上调(P0.05);4周、12周时强的松组较同期低剂量组大鼠坐骨神经Nav1.7、Nav1.8mRNA表达水平下调(P穿山龙提取物薯蓣皂苷可下调痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经Nav1.7、Nav1.8、Nav1.9mRNA的表达,延缓神经损伤的进程。

关键词：穿山龙提取物薯蓣皂苷痛性糖尿病周围神经病变 Nav1.7 Nav1.8 Nav1.9

穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经抗氧化作用影响的研究

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穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经抗氧化作用影响的研究

作者：初阳辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变小鼠坐骨神经中氧化应激相关指标表达的影响及其作用机制,为单味中药治疗痛性糖尿病周围神经病变奠定理论基础,为临床诊疗用药找到新的方向。材料与方法:选取SPF级C57BL/6雄性小... 详细信息

目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变小鼠坐骨神经中氧化应激相关指标表达的影响及其作用机制,为单味中药治疗痛性糖尿病周围神经病变奠定理论基础,为临床诊疗用药找到新的方向。材料与方法:选取SPF级C57BL/6雄性小鼠（周龄6-8周,体重20-25g）83只,在适应性喂养一周后随机选取12只设定为正常对照组,其余71只高脂饲料喂养8周后连续两日进行腹腔内单次注射1%的链脲佐菌素溶液（Streptozotocin,STZ）70mg/kg（PH4.2的0.1mol/L枸椽酸缓冲液配制）,每次注射前均禁食12小时。第二次注射后72h测血糖,血糖大于16.7 mmol/L的小鼠证明糖尿病小鼠模型制备成功。6周后用Von Frey纤维丝测定机械痛阈,机械痛阈值下降超过50%者为PDPN小鼠成模,将它们随机分为模型对照组、薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组和α-硫辛酸组。分别按照0周、2周、4周、6周、8周五个时间点观察各组小鼠的一般情况（包括毛色、精神状态、摄食、体重、尿量及日常活动情况等）和血糖,于0周、4周、8周三个时间点监测小鼠痛阈水平,于8周时采用比色法检测穿山龙提取物薯蓣皂苷对小鼠坐骨神经匀浆样本中SOD、GSH-Px酶活性及MDA表达的影响。结果:1.模型组小鼠的精神状态不佳,出现多饮、多食、多尿及消瘦症状,毛色枯萎无光泽,并出现蜷卧拱背、行动迟缓、气味较重等症状;治疗组小鼠也均出现上述症状,但程度较模型组轻,其中薯蓣皂苷高剂量组和α-硫辛酸组的小鼠上述症状的改善程度相对明显。2.造模组血糖水平与正常组小鼠相比均有明显提高（P＜0.01）;治疗组2周、4周、6周、8周血糖水平与模型组相比有明显降低（P＜0.05）。3.造模组体重水平与正常组小鼠相比均有明显降低（P＜0.01）;治疗组4周、6周、8周体重水平与模型组相比有明显升高（P＜0.01）。4.造模组热痛阈和机械痛阈水平与正常组小鼠相比均有明显降低（P＜0.01）;治疗组4周、8周热痛阈和机械痛阈水平与模型组相比有明显升高（P＜0.01）。5.8周时,各组小鼠坐骨神经组织匀浆中的SOD、GSH-Px酶活性、MDA水平比较:模型组及薯蓣皂苷低剂量组小鼠坐骨神经组织匀浆中SOD的水平明显低于正常组（P＜0.01）,薯蓣皂苷高剂量组及α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中SOD的水平低于正常组但其差异无统计学意义（P＞0.05）;薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组、α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中SOD的水平均明显高于模型组（P＜0.05）。模型组、薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组和α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中GSH-Px酶活性的水平均明显低于正常组（P＜0.05）,薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组、α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中GSH-Px酶活性的水平均明显高于模型组（P＜0.01）。模型组及薯蓣皂苷低剂量组小鼠坐骨神经组织匀浆中MDA的水平明显高于正常组（P＜0.05）,薯蓣皂苷高剂量组及α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中MDA的水平高于正常组但其差异无统计学意义（P＞0.05）;薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组、α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中MDA水平明显低于模型组（P＜0.01）。结论:穿山龙提取物薯蓣皂苷能够抑制氧化应激的发生发展,缓解痛性糖尿病周围神经病变小鼠的疼痛症状,减轻痛性糖尿病周围神经病变小鼠的神经损伤。

关键词：穿山龙提取物薯蓣皂苷痛性糖尿病周围神经病变超氧化物歧化酶谷胱甘肽过氧化物酶丙二醛

穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经JAK/STAT信号通路的影响

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穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经JAK/STAT信号通路的影响

作者：李建辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:运用网络药理学研究方法预测穿山龙的活性成分、作用靶点和信号通路,探讨穿山龙治疗PDPN的作用机制,为下一步动物实验奠定理论基础;根据预测结果,选择穿山龙中的主要活性成分薯蓣皂苷进行动物实验,深入研究薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨... 详细信息

目的:运用网络药理学研究方法预测穿山龙的活性成分、作用靶点和信号通路,探讨穿山龙治疗PDPN的作用机制,为下一步动物实验奠定理论基础;根据预测结果,选择穿山龙中的主要活性成分薯蓣皂苷进行动物实验,深入研究薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经p-JAK2和p-STAT3蛋白表达的影响,以进一步探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷治疗PDPN的作用机制,从而为中医药防治PDPN提供新的手段。材料与方法:1.网络药理学研究检索中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）和台湾中医药资料（TCM Database@taiwan）,并参考国内外文献,收集穿山龙的化学成分信息。按照Lipinski类药性五规则并结合文献报道,筛选出穿山龙的活性成分。利用Pharm Mapper数据库和Genecards数据库预测并筛选出穿山龙治疗PDPN的潜在靶点;通过DAVID 6.8数据库对获得的靶点蛋白进行KEGG通路注释;采用String 10.5数据库和Cytoscape 3.5.1软件绘制“活性成分-靶点-信号通路”网络图和“蛋白质-蛋白质相互作用”网络图。2.动物实验选择体重为20-25g的SPF级雄性C57BL/6小鼠83只,适应性喂养一周后,随机选取12只为正常对照组,其余小鼠通过腹腔内连续两日注射1%链脲佐菌素溶液（Streptozotocin,STZ）70mg/kg（用PH4.2,0.1mol/L的枸椽酸缓冲液配制）诱导PDPN模型。成模后按随机数字表法,将小鼠分成4组,每组12只,分别为模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组和α-硫辛酸组。观察给药前0周和给药后2周、4周、6周、8周小鼠行为特征、血糖值、体重,检测给药前0周和给药后4周、8周机械痛阈值和热痛阈值,8周时采用Western Blot技术检测小鼠坐骨神经p-JAK2和p-STAT3蛋白表达。结果:1.穿山龙治疗PDPN网络药理学研究穿山龙27个活性成分可通过调控SRC、PIK3R1、STAT1、MAPK1、JAK2、IGF1、IL2等靶点,干预PI3K/AKT信号通路、MAPK信号通路、VEGF信号通路、TLRS信号通路、JAK/STAT信号通路、PPAR信号通路等相关信号通路,发挥治疗PDPN的作用。2.动物实验研究2.1.模型组与各治疗组小鼠均出现精神萎靡不振,动作迟钝,反应能力差,倦怠嗜卧,蜷卧拱背,摄食及尿量增加,毛色枯萎无光泽,其中以模型组症状最重,并随着时间推移而逐渐加重,各治疗组在给药2周、4周、6周、8周后,上述症状较模型组有明显改善。2.2.模型组和治疗组较正常对照组小鼠血糖水平有明显的升高（P＜0.01）;2周、4周、6周、8周时各治疗组较模型组小鼠血糖水平有明显改善（P＜0.01）;8周时薯蓣皂苷高剂量组小鼠血糖水平降低最明显（P＜0.01）。2.3.模型组和治疗组较正常对照组小鼠体重水平有明显的减轻（P＜0.01）,随着病程的延长,模型组小鼠体重不断下降,4周、6周、8周时各治疗组与同期模型组相比较小鼠的体重明显增加（P＜0.01）。2.4.模型组、各治疗组与正常对照组相比小鼠的机械痛阈值明显降低（P＜0.01）;4周、8周时各治疗组与模型组相比小鼠的机械痛阈值明显升高（P＜0.01）,8周时薯蓣皂苷高剂量组与薯蓣皂苷低剂量组相比小鼠的机械痛阈值明显升高（P＜0.05）。2.5.模型组、各治疗组与正常组小鼠相比热痛阈值明显下降（P＜0.01）;4周、8周时各治疗组与模型组相比小鼠的热痛阈值明显升高（P＜0.01）,薯蓣皂苷高剂量组与低剂量组相比小鼠的热痛阈明显升高（P＜0.05）。2.6.模型组、各治疗组与正常组小鼠相比坐骨神经p-JAK2蛋白表达量显著增加（P＜0.05）,其中模型组表达量在其余四组中最大（P＜0.01）;薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组与模型组小鼠相比坐骨神经p-JAK2蛋白表达量明显下降,其中薯蓣皂苷高剂量组下降最明显（P＜0.01）。与正常组相比,模型组小鼠坐骨神经p-STAT3蛋白表达量显著增加（P＜0.01）,各治疗组小鼠坐骨神经p-STAT3蛋白表达量略有升高,但结果无统计学意义;与模型组相比,薯蓣皂苷低剂量组小鼠坐骨神经p-STAT3蛋白表达量下降,但结果无统计学意义,薯蓣皂苷高剂量组及α-硫辛酸组小鼠坐骨神经p-STAT3蛋白表达量明显下降（P＜0.01）。结论:1.穿山龙27个活性成分可通过参与炎症、免疫、氧化应激等过程来发挥治疗PDPN的作用。2.穿山龙提取物薯蓣皂苷可下调PDPN小鼠坐骨神经p-JAK2、p-STAT3蛋白表达,提高热痛阈值和机械痛阈值,从而延缓神经损伤的进程。

关键词：穿山龙提取物薯蓣皂苷痛性糖尿病周围神经病变网络药理学 p-JAK2 p-STAT3

穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经中炎症因子表达的影响

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穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经中炎症因子表达的影响

作者：张苏辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变小鼠坐骨神经中NF-κB、pro-IL-1β、NLRP3、IL-1β炎症因子表达的影响。材料与方法:选取83只SPF级雄性C57BL/6小鼠（20-25g）,将小鼠饲养在23±0.5℃,12h循环光照的SPF级环境中... 详细信息

目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变小鼠坐骨神经中NF-κB、pro-IL-1β、NLRP3、IL-1β炎症因子表达的影响。材料与方法:选取83只SPF级雄性C57BL/6小鼠（20-25g）,将小鼠饲养在23±0.5℃,12h循环光照的SPF级环境中。运用随机数字表法筛选出正常组后,其余小鼠高脂饲料饲养8周,禁食12h后,予腹腔内注射70 mg/kg 1%链脲佐菌素溶液,连续两次,用以诱发糖尿病。正常饲养6周后,检测MWT,其中血糖大于16.7mmol/L,且与基础值相比MWT下降50%者,为PDPN模型。随后将成模小鼠分成模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组、α-硫辛酸组,每组12只。检测给药前0w和给药后2w、4w、6w、8w小鼠行为、血糖、体重变化,同时检测给药前0w和给药后4w、8w小鼠的痛阈（机械痛阈、热痛阈）变化。在第8w,取材,采用HE染色观察小鼠坐骨神经组织病理形态变化,采用Western Blot技术检测穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变小鼠坐骨神经组织炎症因子NF-κB、pro-IL-1β、NLRP3、IL-1β的蛋白表达。结果:1.模型组小鼠多饮、多食、多尿、蜷缩弓背消瘦、精神不振、毛色暗黄,光泽欠佳等;治疗组小鼠状态明显比模型组小鼠状态佳。2.在整个实验过程中,除正常组外,其余组小鼠体重均有明显下降趋势（P＜0.01）;其中治疗组与模型组小鼠体重相比下降较缓慢（P＜0.01）。3.在给药过程中,各治疗组小鼠血糖呈下降趋势（P＜0.01）;其中薯蓣皂苷高剂量组和α-硫辛酸组小鼠的血糖下降趋势明显优于薯蓣皂苷低剂量组。4.正常组小鼠机械痛阈明显高于其余组（P＜0.01）;在治疗过程中,各治疗组小鼠的机械痛阈较模型组有明显的上升趋势（P＜0.01）。5.正常组小鼠热痛阈明显高于其余组（P＜0.01）;在治疗过程中,各治疗组小鼠的热痛阈较模型组有明显的上升趋势（P＜0.01）。6.与正常组相比,模型组小鼠坐骨神经组织中NF-κB、pro-IL-1β、NLRP3、IL-1β蛋白的表达情况均呈明显上升趋势（P＜0.01）;经治疗后,与模型组相比,各治疗组中小鼠坐骨神经的NF-κB、pro-IL-1β、NLRP3、IL-1β蛋白表达情况均有一定的减少的趋势（P＜0.01）。提示穿山龙提取物薯蓣皂苷可降低PDPN小鼠坐骨神经中的NF-κB、pro-IL-1β、NLRP3、IL-1β蛋白的表达的情况。7.正常组小鼠的坐骨神经纤维架构完整、排列整齐、分布均匀;模型组小鼠的坐骨神经纤维紊乱、分布不均匀且多处发生变性和断裂,纤维间隙增大;各治疗组的小鼠坐骨神经纤维与模型组比较,纤维间隙水肿减轻。提示穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经纤维的病理改变均有一定的治疗作用。结论:穿山龙提取物薯蓣皂苷可以缓解PDPN小鼠的体重下降趋势,还可降低PDPN小鼠的血糖,同时可以下调痛性糖尿病周围神经病变小鼠坐骨神经中炎性因子NF-κB、pro-IL-1β、NLRP3、IL-1β的表达,同时减轻坐骨神经纤维间的水肿,降低炎症反应,延缓神经损伤的进程。

关键词：穿山龙提取物薯蓣皂苷痛性糖尿病周围神经病变炎症因子(NF-κB、pro-IL-1β、NLRP3、IL-1β)

穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠血清中致痛物质的影响

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穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠血清中致痛物...

作者：李莹辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠血清中致痛物质水平的影响及其作用机制,为单味中药治疗痛性糖尿病周围神经病变提供了新的手段及思路,同时为临床诊疗用药的最优选择提供了深层次的理论基础。材料与方法:选... 详细信息

目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠血清中致痛物质水平的影响及其作用机制,为单味中药治疗痛性糖尿病周围神经病变提供了新的手段及思路,同时为临床诊疗用药的最优选择提供了深层次的理论基础。材料与方法:选取120只SPF级Wistar雄性大鼠,体重180-200g,适应性喂养一周后,随机选取24只,将其分成三组,每组8只,分别为2周、4周、8周正常对照组,其余96只进行造模,将造模成功后的大鼠,随机分为2周、4周、8周模型对照组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组、强的松组。通过单次腹腔内注射2%链脲佐菌素溶液(Streptozotocin,STZ)53 mg/kg(PH4.2的0.1 mol/l枸椽酸缓冲液配制)诱发糖尿病。观察给药后2周、4周、8周时大鼠的精神状态及日常活动情况、血糖、痛阈、神经传导速度的变化情况,并采用ELISA法检测薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠血清中致痛物质5-羟色胺、组胺、缓激肽表达的影响。结果:1.模型组大鼠的精神状态差,出现多饮、多食、多尿伴明显消瘦,毛色枯萎无光泽,蜷卧拱背,行动迟缓等症状,治疗组大鼠均出现上述症状,但较模型组程度轻,其中薯蓣皂苷高剂量组和强的松组大鼠症状改善相对明显。2.造模组血糖水平与正常组大鼠相比均有明显升高(P0.05)。3.造模组与正常组大鼠的运动神经传导速度(MNCV)相比均明显降低(P薯蓣皂苷高剂量组、强的松组与模型组相比大鼠的痛阈降低(P薯蓣皂苷低剂量组与高剂量组相比大鼠的痛阈明显升高(P薯蓣皂苷高剂量组相比大鼠的痛阈升高(P薯蓣皂苷低剂量组相比大鼠的痛阈降低(P薯蓣皂苷低剂量组与薯蓣皂苷高剂量组相比大鼠血清中5-羟色胺、组胺、缓激肽的水平均明显升高(P薯蓣皂苷高剂量组相比大鼠血清中5-羟色胺的水平明显升高(P薯蓣皂苷低剂量组相比大鼠血清中组胺、缓激肽的水平均明显降低(P薯蓣皂苷低剂量组、强的松组与薯蓣皂苷高剂量组相比大鼠血清中5-羟色胺、组胺、缓激肽的水平均明显升高(P薯蓣皂苷低剂量组相比大鼠血清中5-羟色胺、组胺、缓激肽的水平均明显降低(P薯蓣皂苷低剂量组、强的松组与薯蓣皂苷高剂量组相比大鼠血清中组胺、缓激肽的水平均明显升高(P薯蓣皂苷低剂量组相比大鼠血清中5-羟色胺、缓激肽的水平均明显升高(P穿山龙提取物薯蓣皂苷能够减轻痛性糖尿病周围神经病变大鼠的疼痛症状,改善痛性糖尿病周围神经病变大鼠的神经损伤。

关键词：穿山龙提取物薯蓣皂苷痛性糖尿病周围神经病变致痛物质

薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠血清炎症因子影响的研究

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薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠血清炎症因子影响的研究

作者：黄玉琪辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠血清中炎症因子水平的影响及其作用机制,为单味中药防治痛性糖尿病周围神经病变提供了新的手段及思路,同时为临床诊疗用药的最优选择提供了深层次的理论基础。材料与方法:选... 详细信息

目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠血清中炎症因子水平的影响及其作用机制,为单味中药防治痛性糖尿病周围神经病变提供了新的手段及思路,同时为临床诊疗用药的最优选择提供了深层次的理论基础。材料与方法:选取136只SPF级Wistar雄性大鼠,体重180-200g,适应性喂养一周后,随机选取24只,将其分成三组,每组8只,分别为2周、4周、8周正常对照组,其余112只进行单次腹腔内注射2%链脲佐菌素溶液(Streptozotocin,STZ)53 mg/kg(PH4.2的0.1 mol/l枸椽酸缓冲液配制),将血糖大于16.7mmol/L的大鼠,随机分为模型对照组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组、强的松组。观察给药后2周、4周、8周时大鼠的精神状态及日常活动情况,并采用ELISA法检测薯蓣皂苷对PDPN大鼠血清中IL-6、VCAM-1、VEGF及脂连素表达的影响。结果:1.模型组大鼠的精神状态差,出现多饮、多食、多尿伴明显消瘦,毛色枯萎无光泽,蜷卧拱背,行动迟缓等症状,治疗组大鼠均出现上述症状,但较模型组程度轻,其中薯蓣皂苷高剂量组和强的松组大鼠症状改善相对明显。2.模型组大鼠血糖水平与正常组大鼠相比均有明显升高(P0.05)。3.模型组与正常组大鼠的运动神经传导速度(MNCV)相比均明显降低(P薯蓣皂苷高剂量组、强的松组与模型组相比大鼠的痛阈降低(P薯蓣皂苷低剂量组与高剂量组相比大鼠的痛阈明显升高(P薯蓣皂苷高剂量组相比大鼠的痛阈升高(P薯蓣皂苷低剂量组相比大鼠的痛阈降低(P薯蓣皂苷低剂量组、强的松组、与薯蓣皂苷高剂量组相比大鼠血清中IL-6、VCAM-1水平均明显升高(P薯蓣皂苷低剂量组、强的松组与薯蓣皂苷高剂量组相比大鼠血清中VEGF、脂连素的表达水平均明显下降(P薯蓣皂苷低剂量组与强的松组相比,IL-6水平明显升高(P薯蓣皂苷低剂量组、强的松组与薯蓣皂苷高剂量组相比大鼠血清中VEGF、脂连素的表达水平均明显下降(P薯蓣皂苷高剂量组、强的松组与薯蓣皂苷低剂量组相比大鼠血清中IL-6、VCAM-1水平均明显升高(P穿山龙提取物薯蓣皂苷能够抑制糖尿病大鼠血清中炎症反应的发生发展,能够减轻痛性糖尿病周围神经病变大鼠的疼痛症状,改善痛性糖尿病周围神经病变大鼠的神经损伤。

关键词：穿山龙提取物薯蓣皂苷痛性糖尿病周围神经病变炎症因子细胞因子

穿山龙薯蓣皂苷对PDPN大鼠坐骨神经形态及NF-κB蛋白表达影响的研究

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穿山龙薯蓣皂苷对PDPN大鼠坐骨神经形态及NF-κB蛋白表达影响的研...

作者：王宏伟辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:建立痛性糖尿病周围神经病变的大鼠实验动物模型,研究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经组织形态和痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经核转移因子NF-κB蛋白表达的影响。材料与方法:选择SPF级雄性Wistar... 详细信息

目的:建立痛性糖尿病周围神经病变的大鼠实验动物模型,研究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经组织形态和痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经核转移因子NF-κB蛋白表达的影响。材料与方法:选择SPF级雄性Wistar大鼠136只,体重180-200g,适应性喂养一周后,按照随机原则,选取24只,分成3组,每组8只,分别为2周、4周、8周对照组,其余112只进行造模,将造模成功后的大鼠,随机分为2周、4周、8周模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组、强的松组(每组不少于8只)。造模采用2%链脲佐菌素溶液(Streptozotocin,STZ)53mg/kg(PH4.2的0.1mol/l枸椽酸缓冲液配制),将其注入腹腔进行干预。观察给药后2周、4周、8周大鼠行为特征、血糖、体重、神经传导速度、痛阈情况的变化,采用光学显微镜观察大鼠坐骨神经组织形态,并采用免疫组化方法检测大鼠坐骨神经核转移因子NF-κB蛋白表达的变化。结果:1.模型组大鼠精神状态差,多饮、多食、多尿、毛色暗黄无光泽,行动迟缓,蜷卧弓背等,各给药组大鼠状态优于模型组,其中薯蓣皂苷高剂量组和西药强的松组大鼠状态改善较为明显。2.模型组、各给药组较正常对照组大鼠血糖水平有明显的提高(P0.05)。3.模型组、各给药组较正常对照组大鼠体重水平有明显的减轻(P薯蓣皂苷高剂量组、强的松组大鼠痛阈值与同期模型组比较降低(P薯蓣皂苷低剂量组和蓣皂苷高剂量组相比较,同期的大鼠痛阈值明显升高(P薯蓣皂苷高剂量组大鼠的痛阈值升高(P薯蓣皂苷低剂量组大鼠的痛阈值降低(P薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组、强的松组)的损伤程度,显著降低,可以看到神经细胞的排列渐渐紧凑规则,肿胀程度降低,在神经纤维四周,可见散在的雪旺氏细胞核,轴索变的清晰可见。在治疗组之间,高剂量组的效果显著,强的松组其次,低剂量组效果最弱,3个治疗组改善效果排列如下:20.05);4周、8周模型组与各治疗组比较,表达明显上升,具有显著性差异(P0.05),4周各治疗组之间比较,无统计学意义(P>0.05),8周各治疗组之间比较,也无统计学意义(P>0.05)。说明穿山龙提取物薯蓣皂苷对NF-κB的激活起到抑制作用;病程不断延长时,各治疗组NF-κB表达具有下降趋势。结论:穿山龙提取物薯蓣皂苷可提高痛性糖尿病周围神经病变大鼠神经传导速度,降低痛阈值,对受损的坐骨神经起到保护的作用,延缓神经损伤的进程。

关键词：穿山龙提取物薯蓣皂苷痛性糖尿病周围神经病变坐骨神经 NF-κB 动物模型痛阈组织形态

穿山龙薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠电压门控钾离子通道基因表达的影响

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世界中西医结合杂志 2018年第4期13卷 501-504,513页

作者：唐春颖冷锦红辽宁中医药大学附属医院辽宁沈阳110032

目的通过观察痛性糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经中钾离子通道蛋白表达,探究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变的治疗作用。方法实验参照Sally等造模方法诱发糖尿病大鼠,以钾离子皮下透入致痛,在James等方法的基础上... 详细信息

目的通过观察痛性糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经中钾离子通道蛋白表达,探究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变的治疗作用。方法实验参照Sally等造模方法诱发糖尿病大鼠,以钾离子皮下透入致痛,在James等方法的基础上略加改进测定神经传导速度,采用WQ-9E痛阈测定仪测定痛阈值,符合条件者列为PDPN模型大鼠。将大鼠分为模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组和强的松组。采用RT-PCR技术法分别于2周、4周、8周,检测各组大鼠坐骨神经中钾离子蛋白表达水平。结果与模型组比较,各治疗组的K离子通道mRNA表达在2周、4周、8周,3个时间点上呈上升趋势(P薯蓣皂苷高剂量组大鼠坐骨神经的K离子通道mRNA表达明显高于薯蓣皂苷低剂量组和强的松组(P薯蓣皂苷高剂量组和低剂量组钾离子通道mRNA表达水平均呈现逐渐升高的趋势,且高剂量组上升明显,效果明显优于强的松组。说明穿山龙提取物薯蓣皂苷可以升高痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经K离子通道mRNA表达,减轻神经性及炎症性疼痛,对痛性糖尿病周围神经病变有一定的治疗作用。

关键词：穿山龙提取物薯蓣皂苷痛性糖尿病周围神经病变电压门控钾离子通道

穿山龙薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠电压门控Ca2+通道基因表达的影响

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辽宁中医药大学学报 2018年第3期20卷 25-27页

作者：唐春颖冷锦红辽宁中医药大学附属医院

目的：通过观察痛性糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经中钙离子通道蛋白表达,探究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变（PDPN）的治疗作用。方法：实验参照Sally等造模方法诱发糖尿病大鼠,以钾离子皮下透入致痛,采用WQ-9E... 详细信息

目的：通过观察痛性糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经中钙离子通道蛋白表达,探究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变（PDPN）的治疗作用。方法：实验参照Sally等造模方法诱发糖尿病大鼠,以钾离子皮下透入致痛,采用WQ-9E痛阈测定仪测定痛阈值,符合条件者列为PDPN模型大鼠。将大鼠分为STZ模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组和强的松组。采用RT-PCR技术法分别于2周、4周、8周,检测各组大鼠坐骨神经中钙离子蛋白表达水平。结果：与模型组相比,各治疗组的钙离子通道m RNA表达在4周和8周两个时间点上呈下降趋势（P〈0.01）,8周时薯蓣皂苷高剂量组大鼠坐骨神经的钙离子通道m RNA表达低于薯蓣皂苷低剂量组和强的松组（P〈0.01,P〈0.05）。结论：高剂量组薯蓣皂苷对PDPN的作用优于低剂量组,同时优于强的松组,反映出穿山龙提取物薯蓣皂苷能够缓解PDPN,效果超过强的松。说明穿山龙提取物薯蓣皂苷可以下调痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经钙离子通道m RNA表达,对痛性糖尿病周围神经病变有一定的治疗作用。

关键词：穿山龙提取物薯蓣皂苷痛性糖尿病周围神经病变电压门控Ca^2+通道