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硒蛋白p的研究进展

生物工程进展 2002年第1期22卷 49-52页

作者：顾鹏李志伟杨建国聂实践李东北京市营养源研究所 100054 北京市真菌工程高技术室

硒蛋白p(Sep)是从大鼠和人血浆中分离、纯化得到的一种糖蛋白 ,每个硒蛋白p多肽含有10个硒代半胱氨酸。硒蛋白p中的硒含量占大鼠和人血浆中硒含量的 5 0 %以上。在其mRNA开放阅读框架中克隆的cDNA的序列含有 10个UGA密码子。硒代半胱氨... 详细信息

硒蛋白p(Sep)是从大鼠和人血浆中分离、纯化得到的一种糖蛋白 ,每个硒蛋白p多肽含有10个硒代半胱氨酸。硒蛋白p中的硒含量占大鼠和人血浆中硒含量的 5 0 %以上。在其mRNA开放阅读框架中克隆的cDNA的序列含有 10个UGA密码子。硒代半胱氨酸在一个UGA密码子处嵌入蛋白的一级结构 ,尽管对硒蛋白p功能还没有彻底了解 ,它的一种非常可能的作用是作为一种胞外抗氧化剂。大鼠血浆中的硒蛋白p在体内实验中对Diquat诱导的脂质过氧化和肝损坏具有保护作用 ,人血浆中的硒蛋白p在体外实验中显示减少内毒素过氧化硝酸盐和磷脂氢过氧化物的活性。

关键词：硒蛋白硒蛋白p 硒硒代半胱氨酸研究进展

硒蛋白p与2型糖尿病及胰岛素抵抗的关系研究进展

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生命的化学 2015年第5期35卷 681-685页

作者：王珊俱博苗万娟王雪姣王韬封文佳陕西师范大学生命科学学院西安710119

硒是人体必需的一种微量元素,早期研究证明硒蛋白具有类胰岛素样作用,补充硒及硒蛋白在2型糖尿病的治疗中具有一定的作用,然而进一步研究证实硒蛋白对于糖尿病的治疗并非完全起到积极的作用。硒蛋白p(selenoprotein p,Selp)在肝脏合成,... 详细信息

硒是人体必需的一种微量元素,早期研究证明硒蛋白具有类胰岛素样作用,补充硒及硒蛋白在2型糖尿病的治疗中具有一定的作用,然而进一步研究证实硒蛋白对于糖尿病的治疗并非完全起到积极的作用。硒蛋白p(selenoprotein p,Selp)在肝脏合成,是血浆硒的主要运输和存在形式。近年来研究发现,硒蛋白p具有减弱AMpK激酶的活化并加重促进胰岛素的抵抗作用。本文对硒蛋白p基因Sepp1的表达调节、糖脂代谢以及胰岛素抵抗等关系研究进行综述。

关键词：硒蛋白p 糖尿病胰岛素抵抗代谢血浆硒

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硒蛋白p的研究进展

国外医学（医学地理分册） 1992年第1期13卷 5-6页

作者：韩锋产咸阳市第二人民医院

血清硒蛋白p与老年2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病的相关性研究

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中国糖尿病杂志 2019年第4期27卷 250-253页

作者：樊华英施毕旻李慧娟孙红苏州大学附属第一医院内分泌科 215006

目的分析老年T2DM患者血清硒蛋白p(Sep)与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的相关性。方法选取2016年5月至2017年10月于苏州大学附属第一医院内分泌科住院治疗的≥60岁T2DM患者140例,分为T2DM合并NAFLD组(NAFLD组,n=79)和单纯T2DM组(T2DM组,n=... 详细信息

目的分析老年T2DM患者血清硒蛋白p(Sep)与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的相关性。方法选取2016年5月至2017年10月于苏州大学附属第一医院内分泌科住院治疗的≥60岁T2DM患者140例,分为T2DM合并NAFLD组(NAFLD组,n=79)和单纯T2DM组(T2DM组,n=61)。检测代谢相关指标及肝酶水平,ELISA检测血清Sep浓度,稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),磁共振多回波肝脏内插容积激发(mLIVE)技术检测肝脂肪含量(LFC)。结果NAFLD组血清Sep高于T2DM组[(1341. 11±290. 51)vs(755. 77±184. 90)ng/ml,pp与LFC、HOMA-IR、LDL-C呈正相关(r=0. 699、0. 613、0. 218,pp是T2DM合并NFALD的危险因素[OR(95%CI)1. 028(1. 015～1. 041),pp升高是老年T2DM合并NAFLD的危险因素,且Sep水平与肝脂肪含量呈正相关。

关键词：糖尿病,2型老年非酒精性脂肪性肝病硒蛋白p

妊娠期糖尿病孕妇产后糖代谢异常的危险因素和孕中期血清硒蛋白p的预测价值

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郑州大学学报（医学版） 2019年第5期54卷 750-753页

作者：朱洁高伟娜刘冲杨再刚郑州大学第一附属医院产科郑州450052 郑州大学第一附属医院老年内分泌科郑州450052

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇产后糖代谢异常的危险因素和孕中期血清硒蛋白p的预测价值。方法:回顾性分析GDM孕妇400例,根据产后1 a的75 g葡萄糖耐量结果将其分成糖代谢正常组282例和糖代谢异常组118例。比较两组患者基线资料和孕中... 详细信息

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇产后糖代谢异常的危险因素和孕中期血清硒蛋白p的预测价值。方法:回顾性分析GDM孕妇400例,根据产后1 a的75 g葡萄糖耐量结果将其分成糖代谢正常组282例和糖代谢异常组118例。比较两组患者基线资料和孕中期血清硒蛋白p水平,logistic回归分析GDM患者产后糖代谢异常的危险因素。结果:两组患者孕前BMI、有糖尿病家族史、孕期增重、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和孕中期血清硒蛋白p水平等差异有统计学意义(p24 kg/m^2(OR=1.408,95%CI=1.137~1.743)、有糖尿病家族史(OR=1.718,95%CI=1.443~2.045)、孕中期TG>1.02 mmol/L(OR=1.259,95%CI=1.182~1.340)和血清硒蛋白p>2.69 mmol/L(OR=2.010,95%CI=1.168~3.459)是GDM孕妇产后糖代谢异常的危险因素。孕中期血清硒蛋白p对GDM孕妇产后糖代谢异常诊断的临界值为3.55 mmol/L,敏感度为79.66%,特异度为87.94%,AUC为0.856(95%CI=0.825~0.886)。结论:孕前高BMI、有糖尿病家族史、孕中期TG>1.02 mmol/L和血清硒蛋白p>2.69 mmol/L是GDM孕妇产后糖代谢异常的危险因素,孕中期血清硒蛋白p对预测产后糖代谢异常有一定的价值。

关键词：硒蛋白p 妊娠期糖尿病糖代谢异常

在自身免疫甲状腺炎中硒蛋白p对ICAM1的影响及作用机制研究

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在自身免疫甲状腺炎中硒蛋白P对ICAM1的影响及作用机制研究

作者：赵建伟中国医科大学

学位级别：硕士

目的:自身免疫甲状腺炎（Autoimmune Thyroiditis,AIT）是常见的内分泌系统疾病之一。AIT主要特征是甲状腺中存在浸润的淋巴细胞且血清中存在过氧化物酶抗体（Thyroglobulin antibody,TpOAb）、甲状腺球蛋白抗体（Thyroid peroxidase an... 详细信息

目的:自身免疫甲状腺炎（Autoimmune Thyroiditis,AIT）是常见的内分泌系统疾病之一。AIT主要特征是甲状腺中存在浸润的淋巴细胞且血清中存在过氧化物酶抗体（Thyroglobulin antibody,TpOAb）、甲状腺球蛋白抗体（Thyroid peroxidase antibody,TGAb）等甲状腺自身抗体,其症状以炎症破坏为主,女性患病率高于男性。浸润的淋巴细胞主要为T细胞和B细胞,其中T细胞在甲状腺自身抗原的刺激下产生并释放细胞因子,如干扰素-γ（Interferon-γ,IFN-γ）、白介素-1β（Interleukin-1β,IL1-β）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）等。在这些细胞因子的刺激下,原本在甲状腺细胞中不表达的炎症因子出现了高表达的现象,如细胞间黏附分子1（intercellular adhesion molecule 1,ICAM1）。这些炎症因子又可以进一步促进炎症的发展。研究表明,AIT患者甲状腺细胞ICAM1高表达的原因是表观遗传学修饰发生异常。在甲状腺细胞中本应被高甲基化修饰的ICAM1启动子区域改变了正常应维持的甲基化状态,导致基因异常高表达。IFN-γ等细胞因子是否通过降低甲基化状态来刺激ICAM1的高表达尚不明确。硒是人体必需的微量元素,在体内发挥着重要的生理、生化功能,如抗氧化、抗衰老等作用。硒主要以硒蛋白形式在机体内发挥其生物学功能。其对生殖系统、免疫系统和甲状腺功能的重要性已经确立,对人类健康极为重要。硒蛋白如硒蛋白p（Selenoprotein p,SEpp1）可以保护甲状腺细胞免受氧化损伤,调节甲状腺激素的合成、活化和代谢过程。有研究报道,硒状态对于整体和基因特异性甲基化有影响。然而,SEpp1是否能够通过改变ICAM1启动子区域甲基化水平从而下调其表达水平,进而保护甲状腺细胞免受炎症损伤,尚有待证实。本研究采用体内外实验相结合的方式,探究SEpp1的抗AIT作用及其可能的机制,研究结果可以进一步阐述AIT的发病机制以及为探寻该疾病的有效防治方案提供理论依据。方法:1.人群研究:本研究纳入40例女性研究对象,研究对象的甲状腺功能指标FT3、FT4和TSH均在正常范围内,其中20例TpOAb或TGAb高并且HE染色可见淋巴细胞浸润的甲状腺组织纳入自身免疫甲状腺炎组（AIT组）,20例TpOAb或TGAb在正常范围并且HE染色未见淋巴细胞浸润的甲状腺组织纳入对照组（Control组）。于手术中获取甲状腺组织,分离甲状腺细胞。qRT-pCR和免疫组化方法检测ICAM1 mRNA和蛋白表达水平,一代测序方法检测ICAM1启动子区域甲基化率,qRT-pCR和免疫组化方法检测硒蛋白SEpp1 mRNA和蛋白表达水平。2.体外研究:设立IFN-γ处理组和对照组,两组中的Nthy-ori 3-1甲状腺细胞系分别用含1000U/ml IFN-γ的无血清培养基和无血清培养基处理24h,按上述方法检测ICAM1mRNA表达水平,ICAM1启动子区域甲基化率,SEpp1 mRNA表达水平。用IFN-γ诱导ICAM1高表达的细胞模型后,给予0μM、0.5μM、1.5μM、5μM亚硒酸钠处理24h、48h、72h、96h,检测ICAM1 mRNA表达水平,按上述方法检测ICAM1启动子区域甲基化率。3.用SpSS 20.0对结果进行统计分析,p＜0.05时判定差异有统计学意义。结果:1.人群研究:1.1 AIT组研究对象年龄和性别与Control组无统计学差异,AIT组血清中TSH、FT4水平与Control组无统计学差异,血清中FT3水平虽然有统计学差异,但是入选人群的FT3水平均在正常范围内。AIT组血清中的TpOAb、TGAb表达高于Control组,差异有统计学意义（p＜0.05）;1.2 AIT组甲状腺细胞中ICAM1 mRNA和蛋白表达水平高于Control组,差异有统计学意义（p＜0.05）;1.3AIT组甲状腺细胞中ICAM1转录起始位点（TSS）上游-163bp、-64 bp、-20 bp、-18bp处甲基化率低于Control组,差异有统计学意义（p＜0.05）;1.4 AIT组甲状腺细胞中SEpp1 mRNA和蛋白表达水平低于Control组,差异有统计学意义（p＜0.05）。2.体外研究:2.1 IFN-γ处理组SEpp1 mRNA表达水平低于Control组,差异有统计学意义（p＜0.05）,ICAM1 mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义（p＜0.01）;ICAM1转录起始位点（TSS）上游-179bp、-163 bp、-125 bp、-102 bp甲基化率低于Control组,差异有统计学意义（p＜0.05）;2.2亚硒酸钠处理甲状腺细胞系72h和96h后,ICAM1 mRNA表达水平呈浓度

关键词：自身免疫甲状腺炎硒蛋白p DNA甲基化细胞间黏附分子1

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作者：李丽佳木斯大学

学位级别：硕士

目的：克隆RpL30、SBp2和EFsec三个反式作用因子基因，并构建其哺乳动物细胞表达载体，然后与重组质粒pcDNA3.1-iGFp-Sepp1共转染HEK293细胞，研究三个反式作用因子对硒蛋白p基因表达的影响。为实现硒蛋白p在哺乳动物细胞中高效表达奠... 详细信息

目的：克隆RpL30、SBp2和EFsec三个反式作用因子基因，并构建其哺乳动物细胞表达载体，然后与重组质粒pcDNA3.1-iGFp-Sepp1共转染HEK293细胞，研究三个反式作用因子对硒蛋白p基因表达的影响。为实现硒蛋白p在哺乳动物细胞中高效表达奠定基础。方法：应用RT-pCR方法从人乳腺癌MCF-7细胞中扩增RpL30基因，利用双酶切法将其连入真核表达载体pcDNA3.1（+）;采用半合成-酶连法将EFsec基因中所缺失的片段补齐，用pCR方法扩增拼接产物，将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1（-）;真核表达载体pCMV-XL4-SBp2购自OriGene生物公司;将三个反式作用因子表达质粒与硒蛋白p表达质粒按照不同的组合方式，采用脂质体转染法瞬时转染HEK293细胞;采用RT-pCR法检测三个反式作用因子的表达及其对硒蛋白p基因转录水平的影响。结果：成功克隆RpL30基因并构建其表达载体pcDNA3.1-RpL30;准确地将EFsec-基因补齐了其5′端缺失的基因序列，并成功地构建了表达载体pcDNA3.1-EFsec;RT-pCR方法联合条带平均密度值分析证实，转染组与正常组相比，目的基因RpL30、SBp2和EFsec的mRNA水平显著增高，表明转染成功并有效表达。结论：反式作用因子RpL30、SBp2和EFsec基因哺乳动物细胞表达载体的成功构建以及其超表达后对硒蛋白p基因转录水平的作用分析，为深入研究硒蛋白p的生物合成机制打下了基础。

关键词：硒蛋白p 反式作用因子质粒构建转染高效表达

CCL20和硒蛋白p与冠脉病变程度相关性研究

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CCL20和硒蛋白P与冠脉病变程度相关性研究

作者：段雷鸣青海大学

学位级别：硕士

研究目的:本研究旨探讨研究组(冠脉病变组)CC趋化因子配体20(CCL20)和硒蛋白p在血清中浓度水平与冠脉病变狭窄程度的相关性。进一步了解冠脉病变相关发病因素,甄选出更有价值能够防治冠心病的新因子。研究方法:1.选取2019年08月至2020... 详细信息

研究目的:本研究旨探讨研究组(冠脉病变组)CC趋化因子配体20(CCL20)和硒蛋白p在血清中浓度水平与冠脉病变狭窄程度的相关性。进一步了解冠脉病变相关发病因素,甄选出更有价值能够防治冠心病的新因子。研究方法:1.选取2019年08月至2020年11月间,于我院心内科住院行冠脉造影检查者,确定研究对象80人,其中研究组为行冠脉造影检查并由两位及以上心内科专家进行评估左主干(LM)、前降支(LAD)、回旋支(LCX)和右冠(RCA)存在有病变狭窄程度≥50%以上者50例,收集冠脉造影结果,记录病变支数,依据Gensini评分算出每位患者得分,并进一步划分研究组亚组,根据病变支数分为单支病变组20例、双支病变组16例、三支病变组14例;依据Gensini评分将硒蛋白p水平。结果:1、与正常组一般资料对比,两组间性别、年龄、高血压、吸烟等无统计学意义(p>0.05)2、两组间TC、HDL、LDL、UA、WBC差异有统计学意义(ppLT、HB、RDW-CV(%)等差异无统计学意义(p>0.05)3、研究组亚组(病变支数组与)间差异一般资料比较,病变支数组和Gensini评分组间TC、LDL、HDL、UA、WBC差异无统计学意义(p>0.05)。4、研究组与正常组比较CCL20水平明显升高(p硒蛋白p水平呈显著降低(p硒蛋白p水平均差异有统计学意义(p硒蛋白p水平差异有统计学意义(p硒蛋白p水平差异有统计学意义(p硒蛋白p比较差异无统计学意义(p>0.05)。Gensini评分组间低分组与高分组间CCL20、硒蛋白p水平差异有统计学意义(pp硒蛋白p水平与Gensini评分呈负相关(r=-0.474,p硒蛋白p水平浓度具有差异性。说明CCL20及硒蛋白p可能均参与冠脉病变发生发展。2、研究组血清CCL20浓度水平与Gensini评分呈正相关,可能为加速冠脉粥样硬化发展因素之一;血清硒蛋白p浓度水平与Gensini评分呈负相关。可能为抑制冠脉粥样硬化进展因素之一。

关键词： AS CCL20 硒蛋白p CHD 相关性

慢性应激性抑郁发生中转化生长因子-β1与硒蛋白p的作用及其关系

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慢性应激性抑郁发生中转化生长因子-β1与硒蛋白P的作用及其关系

作者：李菲陕西师范大学

学位级别：硕士

抑郁症是一种高发病率、高死亡率及高复发率的情感障碍性精神疾病。慢性应激是引起抑郁症发生的一个关键因素。在现代社会,生活节奏不断加快,人们面临的各种生活、社会压力不断增加,致使抑郁症的发病也呈逐年上升的趋势,这给人们生活以... 详细信息

抑郁症是一种高发病率、高死亡率及高复发率的情感障碍性精神疾病。慢性应激是引起抑郁症发生的一个关键因素。在现代社会,生活节奏不断加快,人们面临的各种生活、社会压力不断增加,致使抑郁症的发病也呈逐年上升的趋势,这给人们生活以及国家经济发展带来极大的负担。据世界卫生组织预测,到2030年,抑郁症可能成为全球负担最大的疾病。关于抑郁症的发病机制,主要从神经递质与受体失调、神经可塑性等方面研究较多。而近年来神经免疫在抑郁症发生中的作用越来越引起人们的关注。转化生长因子-β1（Transforming growth factor-beta1, TGF-β1）不仅在控制炎症、免疫反应以及组织损伤中发挥重要作用,且通过多种途径对神经发挥保护作用。研究发现,抑郁症中TGF-β1表达异常。硒蛋白p （Selenoprotein p, Selp）对硒转运及维持体内硒平衡,维持正常脑功能非常重要。硒蛋白p与一些神经退行性疾病有关。硒蛋白p基因敲除导致神经损伤,突触可塑性改变,由此引起空间学习记忆以及运动协调能力的改变。一氧化氮（nitricoxide, NO）过多导致神经损伤从而引发抑郁,iNOS拮抗剂具有抗抑郁效应。有研究表明,TGF-β1抑制硒蛋白p的表达,且TGF-β1通过下调iNOS表达负性调控NO的产生。这些研究结果提示,抑郁发生与TGF-β1、硒蛋白p和NO是有关系的。海马结构和功能的改变与抑郁症的发生密切相关,然而,在应激性抑郁发生中,海马内TGF-β1、硒蛋白p和NO的变化、作用及其相互关系并不清楚,也没有系统的研究和报道。因此,本实验通过建立慢性不可预见性温和应激（chronic unpredictable mild stress, CUMS）抑郁模型,海马内微量注射TGF-β1以及TGF-βⅠ型受体激酶抑制剂LY-364947,测量体重变化率,运用糖水消耗实验、旷场实验以及悬尾实验检测大鼠行为变化,并采用免疫组织化学、酶联免疫吸附（ELISA）和western blot方法检测大鼠海马内TGF-β1和硒蛋白p的变化,硝酸还原试剂盒检测NO含量的变化,试图探讨慢性不可预见性温和应激中TGF-β1的作用及其与硒蛋白p、NO的关系。实验结果如下： 1、与正常对照组相比,CUMS大鼠表现出明显的抑郁样行为;应激导致海马内TGF-β1含量显著升高,硒蛋白p表达显著下降。 2、正常大鼠海马内注射TGF-β1并不导致抑郁样行为,相反,CUMS同时海马内注射TGF-β1明显改善应激诱导的抑郁样行为;正常和CUMS大鼠海马注射TGF-β1,均能明显抑制硒蛋白p的表达。 3、应激的同时注射LY-364947阻断TGF-β1信号通路同样具有抗抑郁效应,此时硒蛋白p表达较CUMS组明显升高。 4、各组内NO的含量没有显著性变化。以上结果表明海马TGF-β1与硒蛋白p参与了慢性应激反应,硒蛋白p对海马可能具有保护作用。TGF-β1可能通过TGF-βⅠ型受体抑制硒蛋白p的表达参与抑郁症的发生,而TGF-β1的抗抑郁作用可能是经过TGF-βⅠ型受体以外的其它途径实现的。降低NO的含量可能不是TGF-β1及硒蛋白p发挥作用的关键。

关键词：抑郁应激海马转化生长因子-β1 硒蛋白p 一氧化氮