检索结果-南通市图书馆

知母须根总皂苷提取工艺的优化及其对糖氧剥夺损伤的PC12细胞保护作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中草药 2018年第13期49卷 3087-3094页

作者：李丽丽黄琪彭代银吴德玲韩岚安徽中医药大学药学院安徽省中药研究与开发重点实验室安徽合肥230012

目的优化知母须根总皂苷提取工艺,探讨其对糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的PC12细胞的保护作用。方法在单因素实验基础上,利用响应面法优化知母须根总皂苷提取工艺;建立OGD损伤的PC12细胞模型,采用终质量浓度为20、40、... 详细信息

目的优化知母须根总皂苷提取工艺,探讨其对糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的PC12细胞的保护作用。方法在单因素实验基础上,利用响应面法优化知母须根总皂苷提取工艺;建立OGD损伤的PC12细胞模型,采用终质量浓度为20、40、80 mg/L的知母须根总皂苷进行干预。分别用倒置显微镜观察细胞形态,MTT法测定细胞存活率,荧光探针二氯荧光素-双乙酸盐(DCF-DA)法测定细胞内活性氧(ROS)含量,Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡率,蛋白免疫印记法检测凋亡信号蛋白Bcl-2、Bax表达情况。结果知母须根总皂苷提取的最优条件为乙醇体积分数72.22%,料液比1∶11,提取时间73.33 min,在此条件下,理论提取率为8.38%,实测提取率为8.33%。PC12细胞经OGD损伤4 h后细胞活力显著降低,知母须根总皂苷对其呈现保护作用,并随着知母须根总皂苷质量浓度的升高而增强;流式细胞术分析结果表明知母须根总皂苷能明显减少OGD损伤PC12细胞中ROS含量及凋亡率,免疫印迹实验结果表明知母须根总皂苷可上调PC12细胞Bcl-2表达并下调Bax表达。结论通过响应面法优化的工艺得率高、提取效果好。知母须根总皂苷对OGD损伤的PC12细胞具有一定的保护作用,其机制可能与减少OGD诱导PC12细胞ROS含量、抑制线粒体凋亡通路有关。

关键词：知母须根总皂苷响应面优化 PC12细胞 OGD损伤细胞凋亡

超高效液相色谱-串联质谱法测定知母主根和须根中18种成分

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验方剂学杂志 2020年第17期26卷 126-133页

作者：邵志愿黄琪吴德玲张伟李露廖延武安徽中医药大学药学院安徽省现代中药重点实验室合肥230012 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽亳州236816

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法分析知母主根和须根中螺甾皂苷类(知母皂苷AⅠ,知母皂苷AⅡ,知母皂苷AⅢ,知母皂苷Ⅲ,菝葜皂苷元),呋甾皂苷(新知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅢ,知母皂苷Ⅰa,知母皂苷Ⅰ,知母皂苷C,知母皂苷E),黄... 详细信息

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法分析知母主根和须根中螺甾皂苷类(知母皂苷AⅠ,知母皂苷AⅡ,知母皂苷AⅢ,知母皂苷Ⅲ,菝葜皂苷元),呋甾皂苷(新知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅢ,知母皂苷Ⅰa,知母皂苷Ⅰ,知母皂苷C,知母皂苷E),黄酮(淫羊藿次苷Ⅰ,宝藿苷Ⅰ),双苯吡酮(新芒果苷、芒果苷、异芒果苷),氢醌糖苷(β-熊果苷)5类共18种成分的方法,从而分析不同来源知母主根和须根差异性,为知母资源可持续发展提供参考。方法:取样品0.25 g用稀乙醇25 mL回流提取30 min,色谱分离采用Waters ACQUITY UPLC?BEH HILIC C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相0.1%甲酸水-乙腈,梯度洗脱,体积流量0.2 mL·min-1。采用电喷雾离子源(ESI+,ESI-),多反应离子监测(MRM)进行检测,利用外标法计算知母样品中所测成分的含量,通过SMICA14.1软件对知母主根和须根样品间的差异进行分析。结果:所测成分在各自的线性范围内呈良好的线性关系,精密度、重复性、稳定性良好,加样回收率在95.22%~101.42%,RSD均知母主根与须根有较大差异。结论:该研究为知母须根资源再利用和知母质量控制提供了实验依据。

关键词：知母主根知母须根超高效液相色谱-串联质谱法

响应面法优选知母须根总黄酮提取工艺及其解热作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

天然产物研究与开发 2018年第12期30卷 2157-2165页

作者：黄琪李丽丽吴德玲金传山许凤清安徽中医药大学药学院安徽省现代中药重点实验室合肥230012

为了研究知母须根总黄酮(TF)最佳超声提取工艺及其解热作用。在单因素实验基础上,采用响应面法研究乙醇浓度、提取时间、提取次数、料液比等四个因素对总黄酮提取量的影响,根据拟合的数学模型确定最佳提取工艺。以干酵母致热大鼠为动物... 详细信息

为了研究知母须根总黄酮(TF)最佳超声提取工艺及其解热作用。在单因素实验基础上,采用响应面法研究乙醇浓度、提取时间、提取次数、料液比等四个因素对总黄酮提取量的影响,根据拟合的数学模型确定最佳提取工艺。以干酵母致热大鼠为动物模型,通过测定大鼠血清中TNF-α、PGE-2、IL-6、AVP的含量研究其解热作用。知母须根总黄酮最佳提取工艺为:乙醇浓度为70%,提取时间40 min,液料比为50 m L/g,提取次数2次。解热实验表明知母须根总黄酮提取物可显著降低发热大鼠模型体温及血清、下丘脑中TNF-α、PGE-2、IL-6的含量,升高发热大鼠模型血清及下丘脑中AVP的含量。本研究表明知母须根总黄酮具有一定的解热作用,本文可为知母须根开发利用提供参考依据。

关键词：知母须根总黄酮提取工艺解热作用

基于秀丽隐杆线虫模型筛选知母须根中抗衰老活性成分研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于秀丽隐杆线虫模型筛选知母须根中抗衰老活性成分研究

作者：邵志愿安徽中医药大学

学位级别：硕士

目的:基于秀丽隐杆线虫模型筛选知母须根中抗衰老活性成分,为知母须根综合利用提供科学依据。方法:以UPLC-MS/MS法对知母主产地(安国、亳州)的知母须根中皂苷类、黄酮类等成分进行测定,用SMICA软件对实验数据进行多元统计分析;用AB-8大... 详细信息

目的:基于秀丽隐杆线虫模型筛选知母须根中抗衰老活性成分,为知母须根综合利用提供科学依据。方法:以UPLC-MS/MS法对知母主产地(安国、亳州)的知母须根中皂苷类、黄酮类等成分进行测定,用SMICA软件对实验数据进行多元统计分析;用AB-8大孔树脂对安国、亳州产知母须根提取物进行分离富集得水部位、30%乙醇部位、50%乙醇部位、70%乙醇部位、90%乙醇部位;采用UPLC-QTOF-MS方法对知母须根提取物不同洗脱部位进行成分分析并推测各成分质谱裂解及总结皂苷类、黄酮类质谱裂解规律,再利用线虫GMC101和N2,探究不同洗脱部位对线虫GMC101寿命、瘫痪和线虫N2热应激、氧化应激的影响,从而筛选最佳洗脱部位,然后利用谱效关系寻找最佳洗脱部位中抗线虫GMC101瘫痪的活性成分,最后经过验证实验验证抗线虫GMC101瘫痪和延长线虫GMC101寿命的活性成分,进而得出知母须根中抗衰老活性成分。结果:(1)UPLC-MS/MS含量测定结果显示,知母须根所测定的18个成分中,皂苷类含量总和在4.5%左右,黄酮类含量在2.5%左右,对安国、亳州产知母须根以18种成分为主成分进行多元统计分析时,安国、亳州产知母须根明显聚成两类。(2)对安国、亳州产知母须根提取物水部位、30%乙醇部位、50%乙醇部位、70%乙醇部位、90%乙醇部位,经过UPLC-QTOF-MS方法分析结果表明水部位主要成分为水溶性糖苷类成分,共鉴定了3个色谱峰,30%乙醇部位主要为新芒果苷、芒果苷、异芒果苷等黄酮类成分,共鉴定了5个成分,50%乙醇部位主要为新芒果苷、芒果苷、异芒果苷等黄酮类成分和知母皂苷BⅡ等皂苷类成分,共鉴定了8个成分,70%乙醇部位主要为知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ等甾体皂苷类成分,共鉴定了13个成分,90%乙醇部位主要为知母皂苷BⅡ、知母皂苷Ⅲ、知母皂苷AⅢ等甾体皂苷类成分,共鉴定了13个成分,各类成分质谱裂解规律表明,在高能量场下,双苯吡酮类成分表现出了丢失90Da的CHO和120Da的CHO的特征碎片离子,螺甾皂苷骨架类型的F环为环合结构,在正离子模式下,一般出现E环断裂并脱去144Da侧链而形成的碎片离子;呋甾皂苷母核中F环为开链结构,其C-26位多存在糖链取代,故一般出现先脱去C-26位糖链再脱去144Da侧链的碎片离子;正离子模式下,当呋甾皂苷C-22位连接-OH/-OMe时,一般不会出现[M+H]准分子离子峰,而出现[M+H-HO]、[M+H-Me OH]离子峰,以其为母离子进行裂解。(3)通过对不同洗脱部位进行线虫GMC101瘫痪实验、寿命实验,以及线虫N2热应激实验、氧化应激实验等相关实验,筛选出70%乙醇部位为抗线虫衰老的最佳洗脱部位,利用UPLC-QTOF-MS方法分析各成分色谱峰峰强度结合15批次70%乙醇部位抗线虫GMC101瘫痪实验,通过谱效学方法,发现知母皂苷F(C50)、知母皂苷AⅡ、知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ、知母皂苷Ⅲ、知母皂苷C为抗线虫GMC101瘫痪的活性成分,通过验证实验发现,知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ为抗线虫GMC101衰老的最佳活性成分。结论:1.知母须根中皂苷类、黄酮类等各次生代谢产物含量较高,药效物质基础相对丰富,可进行深入研究。2.知母须根中70%乙醇部位具有最佳的抗线虫GMC101瘫痪,延长线虫GMC101寿命,延缓线虫N2氧化应激以及热应激损伤作用。3.知母须根中具有潜在抗衰老的活性成分为知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ。综上可知,知母须根具有综合利用开发的价值。

关键词：知母须根活性成分秀丽隐杆线虫

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

知母须根化学成分研究

安徽中医药大学学报 2018年第2期37卷 81-84页

作者：黄琪肖曦晨金传山吴德玲安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 现代中药安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的对知母(Anemarrhena asphodeloide Bunge.)的干燥须根进行化学成分研究。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶等手段进行分离纯化,运用波谱学方法鉴定化合物的结构。结果从知母须根中分离得到15个化合物,分别鉴定为... 详细信息

目的对知母(Anemarrhena asphodeloide Bunge.)的干燥须根进行化学成分研究。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶等手段进行分离纯化,运用波谱学方法鉴定化合物的结构。结果从知母须根中分离得到15个化合物,分别鉴定为胡萝卜苷(1)、菝葜皂苷元(2)、芒果苷(3)、7-hydroxy-3-(4-methoxybenzyl)-chroman(4)、3′-hydroxy-4′-methoxy-4-dehydroxynyasol(5)、5,7-dihydroxy-3-(4-methoxybenzyl)-chroman-4-one(6)、2,4′-dihydroxy-4-methoxy benzophenone(7)、1,3-Bis(4-hydroxyphenyl)pent-4-en-1-one(8)、(+)-syringaresinol(9)、ent-16,17-dihydroxy-kauran-19-oic acid(10)、(+)-pinoresinol(11)、对羟基苯甲酸(12)、新芒果苷(13)、丁香酸(14)、4′,6-dihydroxy-4-methoxy-benzophenone-2-O-(2″),3-C-(1″)-1-desoxy-α-L-fructofuranoside(15)。结论化合物5~11、14、15为首次从知母须根中分离得到。

关键词：知母须根化学成分成分分离结构鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

知母须根化学成分预实验

广州化工 2016年第22期44卷 42-43,61页

作者：肖曦晨贾鹏晖黄琪许凤清吴德玲安徽中医药大学药学院安徽合肥230012

为初步探索知母须根中的化学成分,采用试管反应法、纸反应法以及薄层色谱试验等方法对知母须根水提取部位、乙醇提取部位以及石油醚提取部位中的化学成分进行初步探究。结果表明知母须根中可能含有氨基酸、多肽、蛋白质、糖类、苷类、... 详细信息

为初步探索知母须根中的化学成分,采用试管反应法、纸反应法以及薄层色谱试验等方法对知母须根水提取部位、乙醇提取部位以及石油醚提取部位中的化学成分进行初步探究。结果表明知母须根中可能含有氨基酸、多肽、蛋白质、糖类、苷类、皂苷、黄酮类、酚类及鞣质、甾体、三萜类等化学成分。为后续提取、分离和分析实验提供理论依据,同时也为深入探究知母须根生物活性及其综合开发利用奠定基础。

关键词：知母须根化学成分预实验

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

不同产地知母须根中3个酮类成分含量测定

安徽中医药大学学报 2018年第2期37卷 90-92页

作者：贾鹏晖黄琪许凤清金传山王培马凯穆凤扬吴德玲安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽省现代中药重点实验室安徽合肥230012 亳州市永刚饮片厂有限公司安徽亳州236800

目的测定不同产地知母须根中新芒果苷、芒果苷和异芒果苷的含量。方法采用高效液相二极管陈列检测法,Shim-pack色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);乙腈-0.4%冰醋酸水溶液梯度洗脱,流速1.0mL/min;柱温25℃;检测波长为258nm。结果所收集的知母须... 详细信息

目的测定不同产地知母须根中新芒果苷、芒果苷和异芒果苷的含量。方法采用高效液相二极管陈列检测法,Shim-pack色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);乙腈-0.4%冰醋酸水溶液梯度洗脱,流速1.0mL/min;柱温25℃;检测波长为258nm。结果所收集的知母须根样品中新芒果苷的含量为1.2%~1.9%,芒果苷的含量为1.0%~1.6%,异芒果苷的含量为0.4%~0.6%。结论知母须根中酮成分含量较高,在知母须根的综合开发利用中可考虑此类成分。

关键词：产地知母须根口山酮含量测定

HPLC法分析比较亳州知母须根和主根中芒果苷和知母皂苷B-Ⅱ的含量

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中医药临床杂志 2016年第12期28卷 1773-1776页

作者：黄琪贾鹏晖肖曦晨许凤清吴德玲安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽省高校科研创新平台团队(中药饮片产地加工与炮制一体化关键技术研究创新团队) 安徽合肥230012

目的:分析比较亳州地区知母须根和主根中芒果苷和知母皂苷B-Ⅱ的含量。方法:采用HPLC-DAD法测定芒果苷的含量,HPLC-ELSD法测定知母皂苷B-Ⅱ的含量。结果:知母须根中芒果苷和知母皂苷B-Ⅱ的平均含量分别为3.23%,1.77%,知母主根中芒果苷... 详细信息

目的:分析比较亳州地区知母须根和主根中芒果苷和知母皂苷B-Ⅱ的含量。方法:采用HPLC-DAD法测定芒果苷的含量,HPLC-ELSD法测定知母皂苷B-Ⅱ的含量。结果:知母须根中芒果苷和知母皂苷B-Ⅱ的平均含量分别为3.23%,1.77%,知母主根中芒果苷和知母皂苷B-Ⅱ的平均含量分别为1.59%,3.29%。结论:芒果苷和知母皂苷B-Ⅱ为知母须根主要化学成分,实验结果可为知母须根的综合开发利用提供科学依据。

关键词：知母须根芒果苷知母皂苷B-Ⅱ 资源开发