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基于LC-MS研究交泰丸调控睡眠剥夺小鼠胆汁酸代谢变化

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中国中药杂志 2021年第20期46卷 5382-5392页

作者：郑伟王雪韩红翠荆紫琪赵雯雯薛宝娟张玉杰北京中医药大学中药学院北京102488 菏泽学院药学院山东菏泽274015 国家中医药管理局监测统计中心北京100027

为了探讨睡眠剥夺状态下小鼠体内胆汁酸水平变化,考察交泰丸对睡眠剥夺小鼠胆汁酸代谢的调控作用,采用UPLC-MS/MS建立同时测定小鼠体内23种胆汁酸的分析方法。将24只ICR小鼠随机分成正常组、模型组、交泰丸组,交泰丸组每天灌胃交泰丸3.... 详细信息

为了探讨睡眠剥夺状态下小鼠体内胆汁酸水平变化,考察交泰丸对睡眠剥夺小鼠胆汁酸代谢的调控作用,采用UPLC-MS/MS建立同时测定小鼠体内23种胆汁酸的分析方法。将24只ICR小鼠随机分成正常组、模型组、交泰丸组,交泰丸组每天灌胃交泰丸3.3 g·kg^(-1),连续给药8 d,正常组、模型组灌胃同等体积的纯净水;采用睡眠剥夺仪剥夺模型组、交泰丸组小鼠睡眠20 h·d^(-1),连续剥夺8 d,实验后对小鼠血清、肝脏、回肠中胆汁酸水平进行检测。选用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水-甲醇作为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源负离子模式,多反应监测(MRM)扫描方式建立23种胆汁酸的检测方法并进行方法学研究,同时考察小鼠血清、肝脏、回肠中胆汁酸的组成、含量。结果显示,23种胆汁酸可在15 min内快速测定,线性相关系数均大于0.99,准确度高,精密度良好,专属性、稳定性、提取回收率和基质效应等均符合生物样品分析要求;睡眠剥夺可显著升高小鼠血清、肝脏、回肠中的胆汁酸水平,给药交泰丸后,小鼠体内胆汁酸水平显著回调。以上结果表明,该分析方法可用于生物样品中23种胆汁酸的定量分析;给药交泰丸可显著降低睡眠剥夺小鼠升高的胆汁酸水平。

关键词： UPLC-MS/MS 睡眠剥夺胆汁酸交泰丸

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睡眠剥夺相关血液生物学指标研究进展

中国神经精神疾病杂志 2020年第6期46卷 376-379页

作者：岳宇娇徐平遵义医科大学附属医院遵义563000 遵义医科大学附属医院神经内科

睡眠剥夺(sleep deprivation)是指因自身原因或者环境因素无法满足正常睡眠需要,表现为睡眠时间不足或睡眠质量下降。睡眠剥夺可导致严重的健康问题,包括增加脑卒中、肥胖、糖尿病、肿瘤、认知功能损害、骨质疏松症、心血管疾病患病及... 详细信息

睡眠剥夺(sleep deprivation)是指因自身原因或者环境因素无法满足正常睡眠需要,表现为睡眠时间不足或睡眠质量下降。睡眠剥夺可导致严重的健康问题,包括增加脑卒中、肥胖、糖尿病、肿瘤、认知功能损害、骨质疏松症、心血管疾病患病及死亡风险,增加车祸发生率及医疗失误率等[1-2]。随着社会生活节奏加快、工作学习压力上升、夜生活丰富以及电子网络产品使用增加,睡眠剥夺在现代社会尤其是年轻人中已成为普遍存在的现象[3]。目前临床缺乏有效反映睡眠剥夺严重程度的血液学生物标志物,且睡眠剥夺造成损害的机制尚不清楚。本文就睡眠剥夺的血液生物学指标研究进展作一综述,主要包括免疫系统、代谢系统以及神经系统等方面相关指标,为进一步探索其损伤机制提供依据。

关键词：睡眠剥夺免疫系统代谢神经系统

睡眠剥夺对β淀粉样前体蛋白/早老素1双转基因小鼠学习记忆影响的研究

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中华老年心脑血管病杂志 2018年第11期20卷 1202-1206页

作者：范倩倩劳基通贾丹丹陈永敏刘力源刘晓斌李其富廖小平马琳海南医学院第一附属医院神经内科海口570100

目的探讨睡眠剥夺对β淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠学习记忆及海马组织自噬相关蛋白表达的影响。方法选择APP/PS1双转基因小鼠24只,随机分为睡眠剥夺组12只和对照组12只。建立急性睡眠剥夺... 详细信息

目的探讨睡眠剥夺对β淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠学习记忆及海马组织自噬相关蛋白表达的影响。方法选择APP/PS1双转基因小鼠24只,随机分为睡眠剥夺组12只和对照组12只。建立急性睡眠剥夺模型,Morris水迷宫检测小鼠行为学改变;免疫组织化学法检测颞叶内侧皮质及海马组织β淀粉样蛋白42(Aβ42)及自噬相关蛋白LC3表达;Western blot法测海马组织LC3-Ⅱ表达。结果与对照组比较,睡眠剥夺组小鼠逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少;Aβ42阳性反应物表达明显增多,差异有统计学意义(P睡眠剥夺可促进APP/PS1双转基因小鼠认知功能障碍加重;海马组织自噬活性增强,可能是其介导阿尔茨海默病发病及进展的机制。

关键词：睡眠剥夺淀粉样β蛋白前体早老素1 小鼠,转基因自噬阿尔茨海默病记忆障碍

睡眠剥夺对小鼠蓝斑神经元抗氧化水平及自噬活动的影响

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第三军医大学学报 2017年第8期39卷 743-748页

作者：倪娜娜任栓成杨丽陈全辉胡志安樊双义安徽医科大学解放军307临床学院神经内科北京100071 第三军医大学基础医学部生理学教研室、重庆市神经科学研究所重庆400038

目的观察睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对蓝斑(locus coeruleus,LC)神经元抗氧化(antioxidant)水平和自噬(autophagy)活动的影响。方法成年(8~10周)雄性C57BL/6小鼠54只(23~26 g),采用轻柔刺激法建立全睡眠剥夺6 h(SD 6 h)(n=8只/组)和12 h(SD 12 h)(n=8只/组)模型,改良多平台法建立REM睡眠剥夺(REM sleep deprivation,RSD)(n=11只/组)模型。Western blot检测超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase,SOD2)、过氧化氢酶(catalase)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和P62(也称SQSTM1)的表达水平。免疫荧光染色观察溶酶体膜相关蛋白-1(lysosomalassociated membrane protein 1,LAMP-1)的表达。结果 SD 6 h后,蓝斑神经元SOD2(P睡眠剥夺对其神经元SOD2和catalase表达水平均无明显影响。SD 6 h和SD 12 h对蓝斑神经元LC3-Ⅱ和P62表达水平均无明显变化。但是RSD显著降低蓝斑神经元LC3-Ⅱ表达水平(P睡眠剥夺引起蓝斑神经元抗氧化反应一过性升高而自噬活动无明显影响;长时程REM睡眠剥夺使蓝斑神经元的抗氧化水平和自噬活动均减弱。

关键词：睡眠剥夺自噬抗氧化蓝斑

电针对睡眠剥夺模型大鼠学习记忆能力和Beclin1、LC3B、PI3K及Akt的影响

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中国中医基础医学杂志 2022年第12期28卷 1969-1974,2022页

作者：游明灿陈新旺游言文郝莉郑州大学第一附属医院郑州450052 河南中医药大学第三附属医院郑州450003 河南中医药大学医学院郑州450046

目的探讨针刺百会和大椎穴对睡眠剥夺导致认知能力下降的改善作用及机制。方法将27只2月龄雄性Sprague Dawley大鼠按照随机分配原则分为对照组、模型组和电针组每组各9只,采用改良多平台水环境法诱导建立睡眠剥夺大鼠模型,分别对对照... 详细信息

目的探讨针刺百会和大椎穴对睡眠剥夺导致认知能力下降的改善作用及机制。方法将27只2月龄雄性Sprague Dawley大鼠按照随机分配原则分为对照组、模型组和电针组每组各9只,采用改良多平台水环境法诱导建立睡眠剥夺大鼠模型,分别对对照组(大平台水环境法)、模型组(改良多平台水环境法,电针非穴位)和电针组(改良多平台水环境法,电针百会和大椎穴)进行干预,每天1次,每次15 min,连续7 d, Morris水迷宫和Y迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力,实时荧光定量PCR检测海马组织中肌球蛋白样BCL2结合蛋白(myosin-like BCL2 interacting protein, Beclin 1)、微管相关蛋白1轻链3 B(microtubule-associated protein 1 light chain 3 Beta, LC3B)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinases, PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)的mRNA水平,免疫组化法检测海马CA1区Beclin1和LC3B阳性神经元光密度值,免疫印迹法检测海马PI3K和Akt蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠在Morris水迷宫的第5天逃避潜伏期延长(P0.05),p-Akt/Akt水平上调(P睡眠剥夺大鼠模型的学习记忆能力。

关键词：电针睡眠剥夺学习记忆自噬 PI3K/Akt

四神聪电针预防急性睡眠剥夺大鼠海马神经元凋亡的机制及对焦虑行为的影响

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中山大学学报（医学科学版） 2022年第6期43卷 958-966页

作者：焦博钰孟凡琪肖兴茹张菁芸裴文娅阮经文中山大学附属第一医院针灸科广东广州510080 中山大学中山医学院广东广州510080

【目的】探讨四神聪电针预防急性睡眠剥夺大鼠海马神经元凋亡的机制及对焦虑行为的影响。【方法】将SD大鼠随机分为Sham组(对照组)、sleep deprivation(SD,睡眠剥夺组)、EA+SD组(eletroacupuncture,电针干预组)。采用改良水平台法对SD组... 详细信息

【目的】探讨四神聪电针预防急性睡眠剥夺大鼠海马神经元凋亡的机制及对焦虑行为的影响。【方法】将SD大鼠随机分为Sham组(对照组)、sleep deprivation(SD,睡眠剥夺组)、EA+SD组(eletroacupuncture,电针干预组)。采用改良水平台法对SD组、EA+SD组进行连续4天的急性睡眠剥夺,电针组在睡眠剥夺期间于四神聪穴位进行电针治疗,连续4 d,每天20 min。采用旷场实验检测大鼠探索能力以评估大鼠焦虑程度,并通过免疫荧光染色检测海马中CA1、CA2、CA3、DG1、DG2区域的神经元(NeuN阳性)和Cleaved Caspase-3的共标情况;采用免疫荧光标记海马中星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP),通过sholl analysis分析星形胶质细胞形态变化,并检测分别与补体C3^(+)、S100A^(+)的共标情况,以了解海马中星形胶质细胞A1、A2分型情况。【结果】旷场实验发现:EA+SD组大鼠在中心停留时间的时间增加,在中心区域的运动速度下降;免疫荧光染色显示:EA+SD组大鼠在海马不同区域除CA3外,其余的CA1、CA2、DG1、DG2区神经元上Cleaved caspase-3较SD组大鼠表达减少(P睡眠剥夺大鼠海马区神经元具有保护作用,其机制可能通过预防星形胶质细胞形态损伤,减少海马区A1型星形胶质细胞,增加A2型星形胶质细胞表达,降低急性睡眠剥夺导致的细胞毒性,减少神经元凋亡数而实现;同时,四神聪电针还能预防或降低急性睡眠剥夺对大鼠探索性行为的影响。

关键词：睡眠剥夺电针神经元凋亡星形胶质细胞旷场实验

睡眠剥夺影响恐惧记忆巩固的认知神经机制：静息态低频波动振幅分析

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中国科学：生命科学 2018年第10期48卷 1115-1125页

作者：冯攀靳玉乐郑涌冯廷勇西南大学心理学部重庆400715 西南大学认知与人格教育部重点实验室重庆400715 西南大学教育学部.重庆400715

恐惧是人类的基本情绪,在人类生存和适应中发挥着重要的作用.先前的研究表明,睡眠剥夺会对恐惧记忆巩固过程产生影响,然而睡眠剥夺影响恐惧记忆巩固的认知神经机制并不清楚.为此,本研究采用了功能性磁共振技术探究睡眠剥夺影响恐惧记忆... 详细信息

恐惧是人类的基本情绪,在人类生存和适应中发挥着重要的作用.先前的研究表明,睡眠剥夺会对恐惧记忆巩固过程产生影响,然而睡眠剥夺影响恐惧记忆巩固的认知神经机制并不清楚.为此,本研究采用了功能性磁共振技术探究睡眠剥夺影响恐惧记忆巩固的认知神经基础.行为结果发现,相对于控制组,睡眠剥夺组在恐惧习得过程中有更大的主观恐惧和皮肤电反应;脑成像结果发现,恐惧记忆巩固中,睡眠剥夺组增强了杏仁核的活动,减弱了腹内侧前额叶的活动;进一步的相关分析表明,睡眠剥夺组杏仁核活动变化程度与个体恐惧习得效果呈现显著的正相关,而控制组腹内侧前额叶活动变化程度与个体恐惧习得效果呈现显著的正相关.这些结果表明,睡眠剥夺可能削弱了恐惧记忆巩固过程中腹内侧前额叶对杏仁核自上而下的调节能力.

关键词：恐惧睡眠剥夺记忆巩固杏仁核腹内侧前额叶功能性磁共振技术

改良的多平台水环境法在睡眠剥夺动物模型中的应用与评价

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中国实验动物学报 2023年第1期31卷 120-128页

作者：刁华琼张婧王敏陈雨菲朱庆生李小黎北京中医药大学第三附属医院北京100029 北京市朝阳区第三医院北京100121

改良的多平台水环境法(modified multi-platform method,MMPM)由单平台及多平台水环境法发展而来,目前多用于制备睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)动物模型。与单平台和早期的多平台水环境相比,MMPM可扩大动物的活动范围,减少群体分离和... 详细信息

改良的多平台水环境法(modified multi-platform method,MMPM)由单平台及多平台水环境法发展而来,目前多用于制备睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)动物模型。与单平台和早期的多平台水环境相比,MMPM可扩大动物的活动范围,减少群体分离和社会孤立带来的应激,具有易行性和适用性高及造模死亡率低的优点,是国内外较常用的一种SD造模方法。不过,影响SD模型制备的实验因素较多,MMPM在不同研究中的造模效果参差不齐。为提高模型的稳定性和实验的可重复性,本文梳理了MMPM在SD动物模型中的具体应用和评价方法,以供后期相关研究参考。

关键词：改良的多平台水环境法睡眠剥夺动物模型综述

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睡眠剥夺对学习记忆的影响及机制研究进展

巴楚医学 2022年第3期5卷 124-128页

作者：杨丽丽张晓爽解雅英内蒙古医科大学研究生学院内蒙古呼和浩特010030 内蒙古医科大学附属医院麻醉科内蒙古呼和浩特010030

睡眠在维持正常的学习和记忆过程中起关键作用。当前世界范围内睡眠不足问题非常普遍,长期睡眠不足会导致机体功能紊乱,引发神经认知功能障碍性疾病。关于睡眠不足影响学习记忆功能的机制尚不明确。最新研究表明睡眠剥夺会通过诱导异常... 详细信息

睡眠在维持正常的学习和记忆过程中起关键作用。当前世界范围内睡眠不足问题非常普遍,长期睡眠不足会导致机体功能紊乱,引发神经认知功能障碍性疾病。关于睡眠不足影响学习记忆功能的机制尚不明确。最新研究表明睡眠剥夺会通过诱导异常自噬损伤海马神经元结构、基因组转录和翻译,调控cPKCγ-Ng信号通路、调节突触可塑性等机制损害学习记忆。急性短期睡眠剥夺还可通过诱导早期生长应答因子3、脑源性神经营养因子表达及增加老年大鼠海马纺锤波数量等机制改善学习记忆。本文拟就睡眠剥夺对学习记忆的优劣影响及机制作一综述,以期为后续研究提供参考。

关键词：睡眠剥夺学习记忆昼夜节律基因