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中华血液学杂志 2010年第6期31卷 418-420页

作者：范瑞华李惠民李晓进喻镁佳金从国昆明医学院第一附属医院血液科 650032 云南省第二人民医院血液科昆明医学院第三附属医院肿瘤研究所

近年来对干细胞和肿瘤研究的深入,已表明干细胞自我更新和肿瘤的生成有惊人的相似之处,而且肿瘤中某些数量极少的细胞具有干细胞特性,提出了肿瘤干细胞学说,认为肿瘤干细胞是肿瘤的转移、复发和耐药的根源.

关键词：侧群细胞白血病细胞系 K562 肿瘤干细胞分选细胞自我更新细胞特性细胞学说

应用慢病毒shRNA文库结合二代测序筛选白血病细胞系增殖相关lncRNA

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生物工程学报 2022年第9期38卷 3406-3418页

作者：马秋怡石得阳汪碧忱曹牧天李浩渊袁卫平初雅婧中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) 北京协和医学院实验血液学国家重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心细胞生态海河实验室天津300020

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是包括细胞增殖在内的许多细胞过程的重要调节因子。虽然已有研究表明多种lncRNA在造血系统恶性肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用,但是缺少一个更全面和无偏倚的方法同时研究多个lncRNA中对... 详细信息

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是包括细胞增殖在内的许多细胞过程的重要调节因子。虽然已有研究表明多种lncRNA在造血系统恶性肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用,但是缺少一个更全面和无偏倚的方法同时研究多个lncRNA中对白血病细胞系产生功能性影响的lncRNA。在此,我们利用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)文库结合高通量测序的方法,筛选对白血病细胞系增殖有影响的lncRNA,确定了74个候选lncRNAs。从中选取lncRNA C20orf204-203作为验证研究对象,发现C20orf204-203在K562和THP-1细胞系中均定位于胞质,敲降C20orf204-203的K562和THP-1细胞系增殖能力降低,早期凋亡细胞增加,BAD基因在mRNA水平上表达量增加,TP53、BCL2蛋白表达量下降,在THP-1细胞系中Caspase 3蛋白表达量减少,激活型Caspase 3蛋白表达量上升,但是二者变化在两种细胞系中不一致。结果表明,在白血病细胞系中敲降lncRNA C20orf204-203会使细胞增殖能力降低。但其在不同细胞系作用途径和机制可能存在差异。这一研究表明了利用shRNA文库结合高通量测序大规模研究lncRNA在白血病细胞系中发挥作用的可行性。

关键词：长链非编码RNA C20orf204-203 短发夹RNA文库高通量测序白血病细胞系

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一株伴有t(6;11)(q27;q23)和p53基因异常的人单核细胞白血病细胞系SHI-1的建立及鉴定

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中华血液学杂志 2005年第2期26卷 94-99页

作者：陈苏宁薛永权张学光吴亚芳潘金兰王勇岑建农苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所215006 苏州大学生物技术研究所

目的建立人急性单核细胞白血病(AMLM5b)细胞系并研究其生物学特性。方法从1例AMLM5b患者白血病复发时的骨髓标本分离出单个核细胞,用液体培养法进行培养。采用瑞特染色、电子显微镜、细胞化学染色、流式细胞仪、R显带核型分析、逆转录... 详细信息

目的建立人急性单核细胞白血病(AMLM5b)细胞系并研究其生物学特性。方法从1例AMLM5b患者白血病复发时的骨髓标本分离出单个核细胞,用液体培养法进行培养。采用瑞特染色、电子显微镜、细胞化学染色、流式细胞仪、R显带核型分析、逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、荧光原位杂交(FISH)、半固体甲基纤维素集落培养、裸小鼠致瘤实验、荧光定量PCR、DNA荧光染色法及支原体肉汤培养法、短串联重复序列(STR)PCR、p53基因的PCR扩增产物测序、多色FISH(MFISH)和3HTdR掺入实验等方法对SHI1细胞的生物学特性进行了鉴定。结果建立了1个可持续增殖的人单核细胞白血病细胞系SHI1;形态学和免疫表型呈现典型的单核系特征;核型分析显示SHI1细胞系有和患者复发时骨髓细胞完全相同的异常46,XY,t(6;11)(q27;q23),del(17)(p11);RTPCR检出MLLAF6融合基因的转录本;FISH检测结果显示存在6号和11号染色体之间易位、MLL基因的重排和p53基因的缺失;PCR产物测序结果显示1个p53等位基因6号外显子发生点突变ATC→ACC集落培养显示SHI1细胞具有较强的集落形成能力;皮下接种4只裸小鼠均形成实体肿瘤;荧光定量PCR提示无EB病毒感染;DNA荧光染色法和支原体肉汤培养法未检出支原体;MFISH证实传代至2003年3月的SHI1细胞除有t(6;11)、del(17)(p11)外,?

关键词： SHI 人单核细胞 p53基因白血病细胞系患者裸小鼠增殖短串联重复序列(STR) 显带 PCR产物

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端粒酶活性与白血病细胞系的分化

中国肿瘤临床 1999年第3期26卷 178-181页

作者：张莉萍刘祥贵蒋纪恺张彦许湘儒刘北忠何渝军康格非刘小珊重庆医科大学第二临床学院重庆市400010 重庆医科大学临床生化教研室重庆医科大学第一临床学院

为了探讨白血病细胞的分化和端粒酶活性改变的关系。方法：采用ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ方法检测白血病细胞株Ｋ－５６２和ＨＬ－６０诱导分化前后的端粒酶活性。结果：未经药物处理的Ｋ－５６２和ＨＬ－６０细胞有高的端粒酶活性；用苦参碱... 详细信息

为了探讨白血病细胞的分化和端粒酶活性改变的关系。方法：采用ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ方法检测白血病细胞株Ｋ－５６２和ＨＬ－６０诱导分化前后的端粒酶活性。结果：未经药物处理的Ｋ－５６２和ＨＬ－６０细胞有高的端粒酶活性；用苦参碱作用Ｋ－５６２细胞和维甲酸处理ＨＬ－６０细胞一定时间后，端粒酶活性被明显抑制：分化诱导剂不能直接抑制端粒酶活性；端粒酶活性的高低与细胞所处的分化状态有关。结论：分化是细胞自身调控的过程，端粒酶活性的高低与细胞所处的分化状态密切相关。

关键词：端粒酶活性白血病细胞系 PCR-ELISA

低极性人参皂苷Rh4对白血病细胞系K562细胞增殖抑制及诱导分化作用的研究

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中华血液学杂志 2015年第4期36卷 347-349页

作者：余潇苓高瑞兰尹利明沃立科浙江中医药大学附属第一医院血液病研究所杭州310006

人参是我国传统中药，其主要药理成分人参皂苷具有抗白血病作用。人参皂苷Rh4是一类仅结合1个糖基的人参三醇型皂苷，属于低极性人参皂苷，具有适中的肠吸收极性，更易进入体内发挥作用，具备较其他多糖基皂苷更高的生物利用度。Rh4具... 详细信息

人参是我国传统中药，其主要药理成分人参皂苷具有抗白血病作用。人参皂苷Rh4是一类仅结合1个糖基的人参三醇型皂苷，属于低极性人参皂苷，具有适中的肠吸收极性，更易进入体内发挥作用，具备较其他多糖基皂苷更高的生物利用度。Rh4具有抗黑色素瘤、抑制黑色素合成的作用，对白血病细胞系P388细胞和L1210细胞具有细胞毒活性。本研究中我们观察人参皂苷Rh4对白血病细胞系株K562细胞增殖及分化的作用，现报道如下。

关键词： K562细胞增殖白血病细胞系诱导分化作用人参皂苷细胞增殖抑制极性 L1210细胞抗白血病作用

分泌IL-21的白血病细胞系的建立及其抑瘤作用

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基础医学与临床 2014年第7期34卷 961-967页

作者：朱琰孙蕊王春景刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系北京100005

目的建立及鉴定稳定表达白介素21的4种白血病细胞系,并初步分析其刺激活化的淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤功能。方法构建携带白介素21和红色荧光蛋白基因的质粒,包装慢病毒,感染4种白血病细胞系,连续传代后,通过荧光显微镜、流式细胞仪和EL... 详细信息

目的建立及鉴定稳定表达白介素21的4种白血病细胞系,并初步分析其刺激活化的淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤功能。方法构建携带白介素21和红色荧光蛋白基因的质粒,包装慢病毒,感染4种白血病细胞系,连续传代后,通过荧光显微镜、流式细胞仪和ELISA法鉴定建立的4种细胞系。以稳定分泌IL-21白血病细胞为抗原刺激外周血单个核细胞增殖,细胞分析计数仪检测增殖倍数,流式细胞仪分析淋巴细胞的表型,细胞计数试剂盒(CCK8)检测增殖后的淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。结果建立稳定表达IL-21的4种细胞系:K562-IL-21、THP-1-IL-21、jurkat E6-1-IL-21和RPMI8226-IL-21。3份人PBMC在4种分泌IL-21的白血病细胞的作用下都有增殖,增殖倍数在1.147±0.057~2.725±0.345倍之间。不同数量的IL-21分泌白血病细胞都可激活淋巴细胞增殖,增殖的倍数在1.127±0.152~2.213±0.200之间。增殖后CD3+T淋巴细胞和CD56+NK细胞的比例降低(P细胞比例增加(P白血病细胞激活后的淋巴细胞对母系白血病细胞的杀伤作用明显高于对照组。由分泌IL-21白血病细胞激活后的淋巴细胞对母系白血病细胞和其他7种肿瘤细胞均有杀伤作用,杀伤率在(28.68±9.31)%^(78.45±0.61)%之间。结论 4种分泌IL-21的白血病细胞可刺激PBMC增殖并激活其对肿瘤细胞的杀伤作用。

关键词：白血病细胞系白介素21 肿瘤治疗

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应用人白血病细胞系进行抗癌药物筛选

中国药理学通报 1989年第3期5卷 184-187页

作者：殷建林万景华万美荣中国医学科学院天津血液学研究所 300020 徐州医学院附属医院

当今,全世界每年有数万个具有潜在抗癌作用的化学物质需要进行筛选,主要采用可移植性小鼠白血病模型P388等进行检测。但小鼠肿瘤模型筛选体系的缺点逐渐暴露,其结果与人体肿瘤细胞间存在一定的差异。为了筛选和寻找新的对人肿瘤细胞更... 详细信息

当今,全世界每年有数万个具有潜在抗癌作用的化学物质需要进行筛选,主要采用可移植性小鼠白血病模型P388等进行检测。但小鼠肿瘤模型筛选体系的缺点逐渐暴露,其结果与人体肿瘤细胞间存在一定的差异。为了筛选和寻找新的对人肿瘤细胞更为有效的抗癌药物。

关键词：抗癌药物肿瘤细胞靶细胞白血病细胞系细胞株有效剂量细胞计数实验室诊断体外筛选方法药物筛选

柔红霉素、地塞米松、全反式维甲酸对白血病细胞系CYP3 A5基因转录及活性的调控

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上海医学 2004年第12期27卷 923-926页

作者：王婷陈芳源黄洪晖钟华胡霄飞欧阳仁荣上海第二医科大学附属仁济医院血液科上海血液研究所200001

目的　探讨化疗药对白血病细胞系CYP3A5基因转录及活性的调控。方法　采用RT -PCR、高压液相色谱法 (HPLC)检测药物干预后白血病细胞系CYP3A5基因的转录及活性。结果　K5 6 2 /A0 2细胞经柔红霉素作用后CYP3A5转录增强 ,HL -6 0 /ADR细... 详细信息

目的　探讨化疗药对白血病细胞系CYP3A5基因转录及活性的调控。方法　采用RT -PCR、高压液相色谱法 (HPLC)检测药物干预后白血病细胞系CYP3A5基因的转录及活性。结果　K5 6 2 /A0 2细胞经柔红霉素作用后CYP3A5转录增强 ,HL -6 0 /ADR细胞则经诱导后出现CYP3A5转录。Jurkat细胞经地塞米松作用2 4h后出现微弱的CYP3A5转录 ,4 8h后转录明显增强。NB4细胞经全反式维甲酸作用 2 4～ 96h均诱导出现CYP3A5转录。K5 6 2细胞的CYP3A5活性显著高于HL- 6 0、NB4和Jurkat细胞。柔红霉素作用 2 4h后K5 6 2细胞的CYP3A5活性增高 ,4 8h后活性显著增高 ;而NB4和Jurkat细胞在柔红霉素作用 2 4h后CYP3A5活性无改变。地塞米松作用Jurkat细胞、全反式维甲酸作用NB4细胞均能诱导CYP3A5活性显著增高 ,并呈时间依赖性。结论　柔红霉素、地塞米松、全反式维甲酸的应用可诱导某些白血病细胞株CYP3A5基因的转录及活性。

关键词： CYP3A 柔红霉素全反式维甲酸地塞米松活性 Jurkat细胞白血病细胞系基因转录调控 K562细胞

抗CD44单克隆抗体A3D8对人白血病细胞系HL-60细胞增殖及分化的影响

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上海医学 2004年第3期27卷 190-192页

作者：郝洪岭董作仁罗建民刘泽林李晓红杨敬慈姚丽潘崚河北医科大学附属第二医院血液科 050017

目的　探讨抗CD4 4单克隆抗体A3D8对HL 6 0细胞增殖及分化的影响 ,寻找急性髓系白血病(AML)治疗的新靶点。方法　以AML细胞株HL 6 0为模型 ,通过观察细胞生长、形态学、表面分化抗原、细胞周期和细胞因子表达 ,以及应用硝基四氮唑蓝 (N... 详细信息

目的　探讨抗CD4 4单克隆抗体A3D8对HL 6 0细胞增殖及分化的影响 ,寻找急性髓系白血病(AML)治疗的新靶点。方法　以AML细胞株HL 6 0为模型 ,通过观察细胞生长、形态学、表面分化抗原、细胞周期和细胞因子表达 ,以及应用硝基四氮唑蓝 (NBT)还原实验来研究抗CD4 4单克隆抗体A3D8对细胞增殖及分化的影响。结果　HL 6 0细胞高表达CD4 4 ;A3D8以浓度和时间依赖性方式抑制HL 6 0细胞生长。A3D8使HL 6 0细胞周期阻滞在G0 /G1期 ,CD11b、CD14表面抗原阳性率明显增高 ,细胞体积增大 ,核 /浆比例减小 ,核染色质聚集 ,NBT还原实验阴性 ,细胞表达粒细胞集落刺激因子mRNA ,呈现向单核细胞系方向分化。结论　A3D8可抑制HL 6 0细胞增殖 ,并诱导其向单核系细胞分化 ,CD4 4有可能成为AML治疗的新途径。

关键词：抗CD44 单克隆抗体 A3D8 白血病细胞系 HL—60 细胞增殖分化

SPGL对白血病细胞系HL-60细胞增殖的影响

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中药材 2005年第9期28卷 808-810页

作者：张建辉杨华中宋奎孙小娟湖南师范大学医学院长沙410006 中南大学湘雅医学院长沙410007

采用CFU-GM和白血病CFU-L集落培养、白血病HL-60细胞液体培养的方法,观察了光叶海酮总皂甙(SPGL)对正常人骨髓粒-巨噬系造血祖细胞(CFU-GM)和人急性髓系白血病HL-60细胞增殖的影响。结果表明:5 ×10^(-6)-5×10^(-4)mg/ml浓度SPGL能显... 详细信息

采用CFU-GM和白血病CFU-L集落培养、白血病HL-60细胞液体培养的方法,观察了光叶海酮总皂甙(SPGL)对正常人骨髓粒-巨噬系造血祖细胞(CFU-GM)和人急性髓系白血病HL-60细胞增殖的影响。结果表明:5 ×10^(-6)-5×10^(-4)mg/ml浓度SPGL能显著抑制HL-60细胞增殖,且具有明显的量-效关系。而对正常人造血祖细胞无明显的细胞毒作用,提示SPGL有抗白血病作用。此结果为进一步研究SPGL提供了实验依据。

关键词： SPGL HL-60细胞粒-巨噬系造血祖细胞骨髓白血病增殖 HL-60细胞增殖白血病细胞系人造血祖细胞急性髓系白血病