一株伴有t(6;11)(q27;q23)和p53基因异常的人单核细胞白血病细胞系SHI-1的建立及鉴定

作     者：陈苏宁 薛永权 张学光 吴亚芳 潘金兰 王勇 岑建农 

作者机构：苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所215006 苏州大学生物技术研究所 

出 版 物：《中华血液学杂志》 (Chinese Journal of Hematology)

年 卷 期：2005年第26卷第2期

页      面：94-99页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家863计划资助项目(X19010105) 国家自然科学基金面上项目(30370596) 江苏省135重点学科开放课题基金资助项目(135XY4014) 苏州市科技项目(ZS0201) 

主　　题：SHI 人单核细胞 p53基因 白血病细胞系 患者 裸小鼠 增殖 短串联重复序列(STR) 显带 PCR产物 

摘      要：目的建立人急性单核细胞白血病(AMLM5b)细胞系并研究其生物学特性。方法从1例AMLM5b患者白血病复发时的骨髓标本分离出单个核细胞,用液体培养法进行培养。采用瑞特染色、电子显微镜、细胞化学染色、流式细胞仪、R显带核型分析、逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、荧光原位杂交(FISH)、半固体甲基纤维素集落培养、裸小鼠致瘤实验、荧光定量PCR、DNA荧光染色法及支原体肉汤培养法、短串联重复序列(STR)PCR、p53基因的PCR扩增产物测序、多色FISH(MFISH)和3HTdR掺入实验等方法对SHI1细胞的生物学特性进行了鉴定。结果建立了1个可持续增殖的人单核细胞白血病细胞系SHI1;形态学和免疫表型呈现典型的单核系特征;核型分析显示SHI1细胞系有和患者复发时骨髓细胞完全相同的异常46,XY,t(6;11)(q27;q23),del(17)(p11);RTPCR检出MLLAF6融合基因的转录本;FISH检测结果显示存在6号和11号染色体之间易位、MLL基因的重排和p53基因的缺失;PCR产物测序结果显示1个p53等位基因6号外显子发生点突变ATC→ACC集落培养显示SHI1细胞具有较强的集落形成能力;皮下接种4只裸小鼠均形成实体肿瘤;荧光定量PCR提示无EB病毒感染;DNA荧光染色法和支原体肉汤培养法未检出支原体;MFISH证实传代至2003年3月的SHI1细胞除有t(6;11)、del(17)(p11)外,?