检索结果-南通市图书馆

济南大学学报（自然科学版） 2021年第6期35卷 614-619,632页

作者：马凤秋高俊英李国荣谢英渤山东师范大学生命科学学院山东济南250014

针对白藜芦醇诱导癌细胞衰老在癌症治疗中的研究现状,对细胞衰老的特征及白藜芦醇诱导癌细胞衰老的机制进行综述,包括促进癌细胞衰老的治疗优势及研究进展,白藜芦醇的来源和功能,衰老细胞的形态、结构特征、衰老标志物(衰老相关-β-半... 详细信息

针对白藜芦醇诱导癌细胞衰老在癌症治疗中的研究现状,对细胞衰老的特征及白藜芦醇诱导癌细胞衰老的机制进行综述,包括促进癌细胞衰老的治疗优势及研究进展,白藜芦醇的来源和功能,衰老细胞的形态、结构特征、衰老标志物(衰老相关-β-半乳糖苷酶、衰老相关蛋白p16^(INK4a)、p21^(CIP1)、p27、p19^(ARF)和p53)及衰老相关分泌表型,总结白藜芦醇通过氧化应激、癌基因激活和脱氧核糖核酸损伤等多条信号通路诱导癌细胞衰老的机制,指出白藜芦醇作为一种重要的天然抗癌化合物,未来的研究重点应是提高白藜芦醇的生物利用度并将白藜芦醇作为放疗或化疗的增敏剂用于癌症治疗。

关键词：癌细胞衰老白藜芦醇氧化应激癌基因激活脱氧核糖核酸损伤

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

白藜芦醇通过DLC1-DYRK1A-EGFR轴介导的DNA损伤诱导癌细胞衰老

白藜芦醇通过DLC1-DYRK1A-EGFR轴介导的DNA损伤诱导癌细胞衰老

引用

作者：马凤秋山东师范大学

学位级别：硕士

细胞衰老是一种不可逆的细胞周期停滞状态,可由端粒损伤、DNA损伤、氧化应激等多种因素触发,通过诱导癌细胞衰老来抑制癌细胞增殖被认为是一种新的抗癌策略。DLC1是一种肿瘤抑制基因,在多种癌症中经常失活或表达下调。研究表明DLC1通过... 详细信息

细胞衰老是一种不可逆的细胞周期停滞状态,可由端粒损伤、DNA损伤、氧化应激等多种因素触发,通过诱导癌细胞衰老来抑制癌细胞增殖被认为是一种新的抗癌策略。DLC1是一种肿瘤抑制基因,在多种癌症中经常失活或表达下调。研究表明DLC1通过抑制癌细胞增殖和迁移、诱导癌细胞凋亡来发挥抑癌作用,但关于DLC1诱导癌细胞衰老的研究较少。致癌基因EGFR过表达与癌症患者的不良预后密切相关,DLC1通过靶向抑制EGFR阻止癌症进展。此外,研究显示EGFR与调节激酶DYRK1A的表达呈正相关,DYRK1A-EGFR轴的失活介导了p53诱导的癌细胞衰老。我们推测DLC1和DYRK1A-EGFR轴之间可能存在某种调控关系。白藜芦醇是一种天然多酚,在预防和阻止癌症进展方面发挥着重要作用,可通过上调DLC1和促进DNA损伤诱导癌细胞衰老,但关于DLC1与DNA损伤的关系尚未有文献报道。因此,本论文探讨白藜芦醇是否通过DLC1调控DYRK1A-EGFR轴介导DNA损伤来诱导癌细胞衰老。首先,我们通过MTT和克隆形成实验检测了白藜芦醇对癌细胞增殖的影响。将人乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7、人肝癌细胞系Hep G2以及人正常肝细胞系WRL68用不同浓度的白藜芦醇处理24 h后进行MTT实验,结果显示:白藜芦醇以剂量依赖的方式抑制了癌细胞增殖,并在100μM时达到半抑制浓度(IC50),而其对正常肝细胞增殖的影响较小。将这三种癌细胞暴露于10或20μM白藜芦醇10 d后进行克隆形成实验,结果显示:白藜芦醇以剂量依赖的方式减少了癌细胞克隆形成的数量。SA-β-gal活性的增强是衰老细胞的一个重要特征,SA-β-gal染色实验结果显示:20μM白藜芦醇处理7 d或100μM白藜芦醇处理24 h均显著增加了三种癌细胞中SA-β-gal阳性细胞的比例。通过western blotting实验我们对其他衰老标志物p53、p21和Lamin B进行了检测,结果显示:100μM白藜芦醇处理24 h增加了癌细胞中p53和p21的表达,减少了Lamin B的表达。为了缩短实验周期,后续实验我们均采用100μM白藜芦醇处理24 h来探究白藜芦醇诱导癌细胞衰老的机制。我们通过western blotting和免疫荧光染色实验检测了白藜芦醇对癌细胞DNA损伤的影响,结果显示:白藜芦醇显著增加了癌细胞中DNA损伤蛋白γH2AX的表达和核聚集,减少了DNA修复相关蛋白RAD51和p-BRCA1的表达。为了探究白藜芦醇是否通过调控DLC1诱导癌细胞DNA损伤,我们进行了western blotting实验,结果显示:白藜芦醇显著上调了MDA-MB-231、MCF-7和Hep G2癌细胞中DLC1的表达,在MCF-7细胞中,敲低DLC1减弱了白藜芦醇诱导的癌细胞衰老,过表达DLC1显著上调了γH2AX、下调了p-BRCA1和RAD51的蛋白水平,说明白藜芦醇通过上调DLC1促进DNA损伤从而诱导癌细胞衰老。同时,白藜芦醇显著抑制了MDA-MB-231、MCF-7和Hep G2癌细胞中DYRK1A和EGFR的表达。在MCF-7细胞中,敲低DYRK1A后,EGFR表达减少,使用EGFR抑制剂Erlotinib处理MDA-MB-231和MCF-7细胞24 h后,γH2AX表达升高,p-BRCA1和RAD51表达降低,SA-β-gal活性增强,表明白藜芦醇通过负调控DYRK1A-EGFR轴促进DNA损伤从而诱导癌细胞衰老。我们进一步探究DLC1与DYRK1A-EGFR轴间的调控关系,结果显示:在MCF-7细胞中,敲低DLC1减弱了白藜芦醇对DYRK1A-EGFR轴的抑制作用,而过表达DLC1抑制了DYRK1A-EGFR轴的激活,说明DLC1负调控DYRK1A-EGFR轴。氧化应激也可导致DNA损伤从而促进癌细胞衰老,实验结果显示:白藜芦醇显著升高了MDA-MB-231、MCF-7和Hep G2癌细胞中ROS的水平,使用ROS清除剂NAC处理MCF-7和Hep G2细胞后,白藜芦醇诱导的DNA损伤和癌细胞衰老受到抑制。我们之前的研究显示,外源性添加HO上调了癌细胞中DLC1的m RNA水平,我们推测ROS可能对DLC1及其下游DYRK1A-EGFR轴有影响。western blotting实验结果显示:在MCF-7细胞中,加入NAC减弱了白藜芦醇对DLC1的激活和对DYRK1A-EGFR轴的抑制作用,表明ROS可以调控DLC1-DYRK1A-EGFR轴。最后,我们通过鸡胚尿囊膜异种移植瘤模型检测了白藜芦醇对体内肿瘤生长的影响,结果显示:与对照组相比,0.5 m M或1 m M白藜芦醇处理MCF-7细胞异种移植瘤6 d后,移植瘤体积明显减小。为了探究白藜芦醇抑制体内肿瘤生长的机制,我们将形成的

关键词：白藜芦醇癌细胞衰老 DNA损伤 DLC1 DYRK1A-EGFR轴

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

白藜芦醇上调p38MAPK和DLC1促进内质网应激诱导的癌细胞衰老

白藜芦醇上调p38MAPK和DLC1促进内质网应激诱导的癌细胞衰老

引用

作者：边妍山东师范大学

学位级别：硕士

白藜芦醇是一种植物多酚,因为其副作用小、易获得、价格低廉和良好的抗癌特性受到广泛关注。诱导癌细胞衰老是一种新兴的抗癌机制,目前已有研究证明白藜芦醇通过诱导癌细胞衰老发挥抗癌功效,但其机制尚不明确。内质网应激不仅与癌症进... 详细信息

白藜芦醇是一种植物多酚,因为其副作用小、易获得、价格低廉和良好的抗癌特性受到广泛关注。诱导癌细胞衰老是一种新兴的抗癌机制,目前已有研究证明白藜芦醇通过诱导癌细胞衰老发挥抗癌功效,但其机制尚不明确。内质网应激不仅与癌症进展密切相关,还参与细胞衰老调控。因此我们猜想:白藜芦醇通过激活内质网应激诱导癌细胞衰老。在本论文中,我们使用癌细胞系MCF-7、NCI-H1299探讨白藜芦醇的抑癌机理。首先,衰老相关β半乳糖苷酶染色实验结果显示20μM白藜芦醇处理癌细胞7天和100μM白藜芦醇处理癌细胞1天均可诱导癌细胞衰老,这与我们实验室之前的研究结果一致。克隆形成实验结果显示10和20μM白藜芦醇均可抑制癌细胞克隆形成,进一步说明了白藜芦醇的抑癌效果。接下来我们开始探讨白藜芦醇诱导癌细胞衰老的机制。将癌细胞暴露于100μM白藜芦醇24 h后进行实时荧光定量PCR和western blot实验,结果显示白藜芦醇上调了内质网应激相关基因Perk、IRE-1α、ATF-6α和GRP78的mRNA表达水平以及GRP78的蛋白表达水平。钙离子探针装载实验结果显示白藜芦醇升高了癌细胞内钙离子浓度。此外,内质网应激抑制剂4-PBA处理癌细胞后改善了白藜芦醇诱导的癌细胞衰老。白藜芦醇是SIRT1的激活剂,有文献显示SIRT1缺失可降低肝癌细胞中p38MAPK活性形式pp38MAPK的表达,而p38MAPK参与癌细胞内质网应激的调控。为了探讨SIRT1/p38MAPK通路是否参与白藜芦醇诱导的内质网应激调控,我们引入SIRT1抑制剂EX527和p38MAPK抑制剂SB203580,western blot结果显示100μM白藜芦醇促进了SIRT1、p-p38MAPK和p38MAPK的表达,而抑制SIRT1逆转了白藜芦醇促进的p-p38MAPK和GRP78表达,抑制p38MAPK部分恢复了白藜芦醇促进的GRP78的表达。肿瘤抑制基因DLC1在癌细胞中经常下调或缺失,是潜在的抗癌靶点。我们实验室之前的研究证明白藜芦醇通过促进ROS产生上调DLC1表达,从而诱导癌细胞衰老。已有研究表明参与氧化应激的另一个高活性分子NO可以正向调控DLC1下游分子Rho A,白藜芦醇可以调控细胞质NO的浓度,此外,抑制Rho A/C信号通路可促进非折叠蛋白反应相关蛋白的mRNA水平表达,因此我们推测NO参与DLC1调控,从而激活内质网应激。我们的NO荧光探针装载和western blot实验结果显示100μM白藜芦醇减少了癌细胞内NO浓度并下调了i NOS蛋白表达,加入NO供体硝普钠(SNP)后显著逆转了白藜芦醇促进的DLC1表达。敲低DLC1后GRP78表达水平也随之下调,而过表达DLC1促进了GRP78的表达。DNA损伤是衰老的重要指标,为了探究内质网应激是否通过引起DNA损伤诱导癌细胞衰老,我们进行了western blot实验,结果显示:100μM白藜芦醇上调了DNA损伤相关蛋白p-CHK1的表达,而内质网应激抑制剂4-PBA干预后逆转了白藜芦醇对p-CHK1的上调。线粒体功能紊乱也是诱导细胞衰老的重要因素,通过线粒体膜电位检测实验发现,白藜芦醇降低了癌细胞线粒体膜电位,而抑制内质网应激改善了白藜芦醇诱导的膜电位下降。此外,western blot结果显示100μM白藜芦醇下调了线粒体生物合成相关分子PGC-1α的表达,而4-PBA缓解了白藜芦醇对PGC-1α的影响。以上结果表明:在癌细胞MCF-7和NCI-H1299中,白藜芦醇通过激活SIRT1促进p38MAPK表达,并通过下调i NOS表达降低胞质NO浓度,从而促进DLC1表达。p38MAPK和DLC1分子均可激活内质网应激,引起DNA损伤和线粒体功能紊乱,最终诱导癌细胞衰老。本文首次在癌细胞中证明了SIRT1对p38MAPK的调控作用,并提出白藜芦醇通过NO/DLC1信号通路调控内质网应激,为天然产物白藜芦醇的抑癌机制提供了新的信号通路及实验依据。

关键词：白藜芦醇癌细胞衰老内质网应激 p38MAPK DLC1

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：