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利用低频脉冲电击法防治草菇害虫双额岩小粪蝇的研究

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食用菌学报 2020年第4期27卷 149-154页

作者：吴华戴建青陈大嵩欧剑峰黄鸿广东省科学院动物研究所广东省动物保护与资源利用重点实验室广东省野生动物保护与利用公共实验室广东广州510262

考察了低频脉冲电击法对草菇(Volvariella volvacea)害虫双额岩小粪蝇(Bifronsina bifrons)幼虫的防治效果。结果表明:各因素的电击防治效果顺序是电击时间>输出频率>电极距离,其中电击时间是显著因素。优化的电击参数为输出频率90 Hz... 详细信息

考察了低频脉冲电击法对草菇(Volvariella volvacea)害虫双额岩小粪蝇(Bifronsina bifrons)幼虫的防治效果。结果表明:各因素的电击防治效果顺序是电击时间>输出频率>电极距离,其中电击时间是显著因素。优化的电击参数为输出频率90 Hz、电极距离45 cm、电击时间40 s,在此条件下,在田间(菇房)对双额岩小粪蝇进行电击处理,24 h的防治效果达到57.54%,显著优于对照药阿维菌素乳油(43.92%)。以电击时间40 s,输出频率90 Hz,两电极距离15、30、45 cm,分别对草菇菌丝进行电击处理,电击处理组的草菇菌丝长势和生长速度均与对照组无显著差异。本研究为草菇生产中双额岩小粪蝇的无公害防治提供有益参考。

关键词：电击法草菇双额岩小粪蝇电击参数防治效果菌丝生长

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电击法诱导细胞融合实验研究

实验技术与管理 2017年第1期34卷 53-55页

作者：王宏刚李烨陈成彬王春国陈力宋文芹白艳玲张金红刘方南开大学生物实验教学中心天津300071

分别利用两种不同的荧光染料Dio和DiI对细胞进行标记,使细胞膜可以发出绿色或红色荧光;然后选择合适的条件,使用细胞融合仪诱导2个细胞融合成为1个细胞;最后,通过荧光显微镜观察,成功融合的细胞可以同时观察到红色荧光和绿色荧光。该实... 详细信息

分别利用两种不同的荧光染料Dio和DiI对细胞进行标记,使细胞膜可以发出绿色或红色荧光;然后选择合适的条件,使用细胞融合仪诱导2个细胞融合成为1个细胞;最后,通过荧光显微镜观察,成功融合的细胞可以同时观察到红色荧光和绿色荧光。该实验可以帮助学生掌握电击诱导细胞融合的原理和操作方法,培养学生的科研兴趣,提高学生的综合素质。

关键词：细胞融合电击法实验教学教学改革

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电击法消除残余应力相关问题的研究

电击法消除残余应力相关问题的研究

作者：施彦彬浙江大学

学位级别：硕士

第一章阐述了本论文的研究背景和意义,介绍了脉冲电流对材料内部微观作用,残余应力测量方法及高功率脉冲技术的国内外研究现状,同时指出了本论文的研究内容和研究方法。第二章论述了位错运动中的阻力和动力,指出电击法消除残余应... 详细信息

第一章阐述了本论文的研究背景和意义,介绍了脉冲电流对材料内部微观作用,残余应力测量方法及高功率脉冲技术的国内外研究现状,同时指出了本论文的研究内容和研究方法。第二章论述了位错运动中的阻力和动力,指出电击法消除残余应力的机理:当动力大于阻力时,位错开通,残余应力得以消除。第三章首先介绍了盲孔法测量残余应力的原理,然后基于应变释放系数标定原理,采用有限元数值仿真的方法标定了应变释放系数,提出了塑性修正公式,并对该公式进行了验证。第四章研究了电脉冲发生装置的若干部分:脉冲电源储能装置、脉冲开关、脉冲回路、开关控制电路和脉冲电流测量系统。第五章进行了电击法消除残余应力的实验研究。电击法处理后,工件内残余应力下降明显,验证了电击法消除残余应力的效果。第六章总结了本论文的研究成果,同时展望了论文的研究方向。

关键词：电击法残余应力位错盲孔法高功率脉冲装置

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草菇电击法遗传转化的研究

上海农业学报 2017年第3期33卷 5-10页

作者：吕贝贝于海龙蒋玮吴潇武国干赵妍陈蕾唐雪明上海市农业科学院生物技术研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室上海201106 上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 南京野生植物综合利用研究院南京210000

建立了草菇电击遗传转化体系,遗传转化的最优条件为:用1.5%溶壁酶,32℃酶解草菇48 h菌龄菌丝体3 h,将20μL 50 ng/μL质粒融入100μL草菇酶解液中,在外加电压1 000 V的条件下电击;电击后的草菇菌丝体涂布于再生培养基中,32℃培养2 d后... 详细信息

建立了草菇电击遗传转化体系,遗传转化的最优条件为:用1.5%溶壁酶,32℃酶解草菇48 h菌龄菌丝体3 h,将20μL 50 ng/μL质粒融入100μL草菇酶解液中,在外加电压1 000 V的条件下电击;电击后的草菇菌丝体涂布于再生培养基中,32℃培养2 d后在含有20μg/mL潮霉素的培养基上进行抗性筛选,分子检测正常生长的单克隆是否为阳性克隆。

关键词：草菇遗传转化电击法潮霉素

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小麦花粉细胞电击法转化体系的优化

小麦花粉细胞电击法转化体系的优化

作者：邓艳芳西北农林科技大学

学位级别：硕士

小麦是主要的粮食作物。分子育种可缩短育种年限,弥补常规育种的不足,加快遗传育种的进程。近年来随着转基因技术的不断改进,小麦转基因技术的研究也越来越深入。研究探索更加简单、方便、高效的遗传转化技术对促进小麦基因工程育种具... 详细信息

小麦是主要的粮食作物。分子育种可缩短育种年限,弥补常规育种的不足,加快遗传育种的进程。近年来随着转基因技术的不断改进,小麦转基因技术的研究也越来越深入。研究探索更加简单、方便、高效的遗传转化技术对促进小麦基因工程育种具有重要的作用。花粉细胞以其单倍体、单细胞的特点是植物遗传转化的理想受体。而花粉电击转化法是将外源DNA通过电击法导入成熟花粉中,再利用常规杂交授粉的方式实现遗传转化的,是电击法和杂交授粉相结合的一种转化方法。与农杆菌转化法和基因枪转化法等目前主要转基因方法相比,花粉电击转化法具有操作简单、成本较低、省去了组织培养的过程、避免了再生性不强和容易产生嵌合体的问题,而且受体也没有种属限制等优点。目前利用花粉电击法进行遗传转化已成功应用于多种植物。本实验以小麦成熟花粉细胞为转化受体,在前期实验的基础上,通过对电击液、萌发液等电击条件的筛选和优化,以提高小麦成熟花粉细胞的活力和体外萌发率,从而优化其电击转化体系,提高其结实率和小麦花粉细胞电穿孔转化的遗传转化效率,为建立稳定实用的小麦花粉电穿孔转化技术奠定基础;并利用电击转化法对GUS基因及与干旱、低温诱导表达相关的转录因子基因DREB4A、W17进行转化,以获得转基因植株。通过本实验的研究,得到以下结论:(1)通过电击法转化小麦的花粉细胞,然后经过FDA染色和在光学显微镜下直接观察,统计并分析得到小麦花粉细胞电击转化时最适的电击缓冲液为P1,即(20%蔗糖+7%PEG6000)这一组合,此时花粉活力最高,为74.30%,而且显著高于其它处理,比对照高出20.26%。(2)比较了不同成份配比的花粉萌发液对电击后小麦花粉离体萌发的影响,结果表明小麦花粉细胞在进行体外萌发时最适的萌发液为C3,即(475mg/L Ca(NO3)2+10 mg/L VB1)这一组合,此时萌发率最高,为43.22%,而且也是显著高于其它处理,比对照高出27.33%。(3)利用经过优化后的电击缓冲液P1组合和优化后的体外萌发液C3组合进行电击操作和电击之后的授粉操作,以济麦22为受体分别转化了报告基因GUS和两个转录因子基因DREB4A和W17,平均结实率为3.37%,比对照的结实率0.88%高出2.49%;对获得的种子经萌发后取叶片进行PCR检测,结果显示得到了 2株转DREB4A基因的转基因植株,转化率为0.59%。

关键词：小麦电击法花粉萌发率结实率

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电击法抑制沉螺池钉螺上爬的实验研究

中国血吸虫病防治杂志 2006年第4期18卷 301-302页

作者：彭孝武赵耀升付正银袁梅枝何亮才王加松湖北省荆州市疾病预防控制中心血吸虫病预防控制所荆州434020

目的探讨电击法抑制沉螺池钉螺上爬的最低电场强度。方法通过测量不同类型电流电击钉螺收足及闭厣反应电场强度，找出抑制钉螺上爬的最低电场强度；测试模拟沉螺池电击抑制钉螺上爬的最低电场强度。结果各种类型电流产生的电场中，... 详细信息

目的探讨电击法抑制沉螺池钉螺上爬的最低电场强度。方法通过测量不同类型电流电击钉螺收足及闭厣反应电场强度，找出抑制钉螺上爬的最低电场强度；测试模拟沉螺池电击抑制钉螺上爬的最低电场强度。结果各种类型电流产生的电场中，导致钉螺头足收缩和闭厣的电场强度均以直流电最高，脉冲电次之，交流电最低。交流电导致钉螺头足收缩的下界阈值随钉螺长度大小而变化，〈3mm的幼螺和〉7mm的成螺耐受阈值低，〉8mm的成螺耐受阈值最低，3～6mm的钉螺耐受阈值略高。抑制沉螺池钉螺上爬的最低电场强度为0．5～1．0V／cm。电场强度为220V／cm时钉螺不能被电死。结论电击法是抑制沉螺池钉螺上爬的有效方法之一。

关键词：钉螺沉螺池电击法

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“电击法”促蘑菇快速成长闪电助推作物丰收

福建农业 2010年第8期 31-31,36页

闪电可以使蘑菇长的更快更多，目前正在进行的一项电力刺激蘑菇生长的研究，为传统日本农业知识提供了科学性的坚实证明。

关键词：蘑菇闪电电击法作物助推速成农业知识科学性

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应用电击法获得转MT基因平菇(英文)

Acta Botanica Sinica 2002年第12期44卷 1445-1449页

作者：张竞聂思惟单龙茹炳根北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室北京100871

将MT基因用电击法转化平菇 (Pleurotusostreatus) ,MT基因表达蛋白与金属离子结合而形成络合物 ,用Zn诱导 ,转基因平菇能富集Zn ,可为缺Zn的人群补充Zn ,使平菇成为一种保健和治疗的食品或蔬菜。原生质体制备浓度为 6 .74 5× 10 6个 /m... 详细信息

将MT基因用电击法转化平菇 (Pleurotusostreatus) ,MT基因表达蛋白与金属离子结合而形成络合物 ,用Zn诱导 ,转基因平菇能富集Zn ,可为缺Zn的人群补充Zn ,使平菇成为一种保健和治疗的食品或蔬菜。原生质体制备浓度为 6 .74 5× 10 6个 /mL。原生质体电击转化率为 0 .0 1%。PCR检测 ,2 0 0bp处有MT基因条带。蛋白检测 :转基因MT平菇ELISA检测阳性 ,表达率为 0 .6 %～ 0 .8%。SDS_PAGE显示有表达条带。Westernblot显示有阳性条带。抗ZnSO4结果 :野生型平菇抗ZnSO4浓度为 1.0mmol/L ,1.2mmol/L开始受抑制 ,转基因平菇抗ZnSO4浓度为 1.5mmol/L ,2 .0mmol/L开始受抑制。出菇试验结果表明 ,在米糠与锯沫比为 1∶3的培养基上生长 ,在米糠与锯沫比为1∶4的培养基上不生长。 2 4d菌丝可在广口瓶中长满 ,用于子实体培养。

关键词：电击法转MT基因平菇原生质体转基因平菇

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电击法玉米转基因技术

玉米科学 1999年第2期7卷 30-32页

作者：曹靖生黑龙江省农科院玉米研究所

本文介绍了电击法转化玉米原生质体的原理、方法及转基因玉米鉴定的方法等。在离体条件下，将欲转入的靶基因与载体质粒重组构建重组ＤＮＡ分子，同时，用去壁液处理玉米未成熟胚的悬浮细胞制备原生质体。将２０～４０μｇ的超螺旋重组... 详细信息

本文介绍了电击法转化玉米原生质体的原理、方法及转基因玉米鉴定的方法等。在离体条件下，将欲转入的靶基因与载体质粒重组构建重组ＤＮＡ分子，同时，用去壁液处理玉米未成熟胚的悬浮细胞制备原生质体。将２０～４０μｇ的超螺旋重组ＤＮＡ分子与１５～３×１０６个玉米原生质体细胞混匀后，置于强电场环境中，用５００～７５０Ｖ／ｃｍ的高电压处理５ｍｉｎ，使原生质体的细胞膜通透性增强，并使重组分子进入到受体细胞内。在选择培养基中，选择已转入并稳定表达外源基因的转化细胞，再经组织培养形成愈伤组织，并再生成转基因玉米植株，最后用适当的方法对再生植株进行鉴定。

关键词：玉米转基因电击法原生质体转化