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生理条件下人朊蛋白错误折叠机制研究

生理条件下人朊蛋白错误折叠机制研究

作者：李雪收武汉大学

学位级别：硕士

朊病毒病是由于朊蛋白异构所引起的一组缓慢致死性中枢神经系统退行性疾病,主要是存在于诸多哺乳动物体内,又称传染性海绵状脑病。目前发现的有羊骚痒病、牛海绵状脑病、貂传染性脑病和人的克-雅氏病、新型克-雅氏病、库鲁病等。而这种... 详细信息

朊病毒病是由于朊蛋白异构所引起的一组缓慢致死性中枢神经系统退行性疾病,主要是存在于诸多哺乳动物体内,又称传染性海绵状脑病。目前发现的有羊骚痒病、牛海绵状脑病、貂传染性脑病和人的克-雅氏病、新型克-雅氏病、库鲁病等。而这种疾病发病的显著变化在于朊蛋白的构象,其中结构上主要明显的不同是正常的细胞型朊蛋白(PrPc)的二级结构主要以α-螺旋为主,而发生构象改变的具有感染性的朊蛋白(PrPSc)主要以β-折叠结构为主,但是这种构象转化的具体机制至今仍然没能够了解清楚。目前的体外实验在对于这一机制的探究上做出了诸多努力,也获得了大量可靠的成果和十分有意义的结论,但是之前的这些实验都主要集中在变性剂存在的变性条件下进行的。本文在借鉴和思考之前的实验方法和实验结果的基础上,尝试探索体外生理条件下是否也会存在变性条件下形成的淀粉样纤维这种结构以及类似性质的聚集体。我们采用野生型人朊蛋白及其病理突变体V180I和F198S作为实验样本,运用ThT荧光、Sarcosyl-soluble SDS-PAGE、蛋白酶K酶解实验、圆二色光谱法(CD)、傅里叶变换红外光谱法(FTIR)等实验技术。通过这一系列的实验,我们发现在生理条件下,除了在运用圆二色光谱法检测样品时几乎没有信号以外,其他基本呈现了变性条件相同或相似的实验结果:生理条件下其生长动力学类似,也呈“S”型曲线生长,可分为三个阶段,分别是延滞期、指数生长期和稳定期,但延滞期明显较长;最终形成的聚集体同样具有部分蛋白酶K的酶解抗性;通过FTIR数据分析发现该聚集体其二级结构也是以β-折叠结构为主。但不同于变性条件下形成的典型淀粉样纤维结构的聚集体,透射电子显微镜下观察到的是生理条件下形成了呈网状结构的聚集体,接着通过免疫电镜试验证实这种结构确实是朊蛋白所形成。不仅如此,当生理条件下形成的这种聚集体经超声处理成小片段作为种子,以1%的比例加入变性的朊蛋白聚集体生长体系进行种子诱导实验,我们发现这种聚集体小片段不仅具有促进单体的朊蛋白形成聚集体的能力,而且由于它的添加,在变性条件下也出现了类似生理体系中的网状结构聚集体,进一步实验同样证实了其与淀粉样纤维具有相似的性质。生理条件由于更加接近生物个体的细胞环境,因此这一研究对于了解在体内正常存在人朊蛋白的发病机制具有重要意义。

关键词：传染性海绵样脑病生理条件错误折叠阮蛋白种子诱导网状聚集

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运输后放牧对山羊生理条件和肉质性状的影响

中国饲料 2020年第8期 9-12页

作者：黄祥元唐伟龙冰雁蒋艾青永州职业技术学院湖南永州425000

本研究旨在探讨运输后放牧对山羊生理条件和肉质性状的影响.试验选择24只阉割雄公羊,随机分为4组,每组6个重复,每个重复1只.对照组未运输,T1组运输前6 h行走30 min,之后人为驱使行走30 min.T2组运输后48 h放牧,T3组运输后72 h放牧.结果... 详细信息

本研究旨在探讨运输后放牧对山羊生理条件和肉质性状的影响.试验选择24只阉割雄公羊,随机分为4组,每组6个重复,每个重复1只.对照组未运输,T1组运输前6 h行走30 min,之后人为驱使行走30 min.T2组运输后48 h放牧,T3组运输后72 h放牧.结果:与对照组相比,T1组和T2组血清T3和T4浓度显著降低(P<0.05).T3组血清皮质醇浓度显著高于其他三组(P<0.05).T1和T2组较对照组显著提高了血清中性粒细胞与淋巴细胞的比值(P<0.05).T1组肌肉pH显著高于其他三组(P<0.05),对照组肌肉蒸煮损失最高(P<0.05),T2组最低(P<0.05).T2和T3组肌肉滴水损失显著高于对照组和T1组(P<0.05),T1组较对照组显著提高了肌肉系水力(P<0.05),而T2组较其他三组显著降低了肌肉系水力(P<0.05).运输后显著降低了肌肉亮度、红度和黄度值(P<0.05).运输后放牧组肌肉亮度、红度和黄度值与对照组相比有显著性差异(P<0.05),其中T3组亮度和黄度值更高.结论:运输后72 h放牧除了显著提高血清皮质醇水平,降低部分肌肉品质外,可以缓解运输应激对山羊的影响.

关键词：运输放牧山羊生理条件肉品质

民族女高音与美声女高音在生理条件与机能状态的对比研究

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民族女高音与美声女高音在生理条件与机能状态的对比研究

作者：牛婉婉中央音乐学院

学位级别：硕士

民族女高音与美声女高音是目前活跃在中国歌剧舞台、音乐会、歌舞晚会上的重要角色,由于她们演唱曲目的语言、风格和环境(用话筒和不同话筒)的不同,导致她们在用声方式上存在差异,此外美声唱法对女高音的声种有很多的分类,民族女高音是... 详细信息

民族女高音与美声女高音是目前活跃在中国歌剧舞台、音乐会、歌舞晚会上的重要角色,由于她们演唱曲目的语言、风格和环境(用话筒和不同话筒)的不同,导致她们在用声方式上存在差异,此外美声唱法对女高音的声种有很多的分类,民族女高音是否也存在这样的分类,是笔者非常感兴趣的研究课题。为此本研究采用民族女高音与美声女高音对比的方法,通过对15名民族女高音和15美声女高音的问卷调查、嗓音临床检测、音域图测量、B超对她们的声带长度以及展长情况的测量,试图在生理条件、呼吸方式、声带使用等方面找出两者的特点和差异来,最后所得结论如下:(一)民族女高音虽然没有像美声女高音声种划分得那么细致,同样也存在着不同的类型,生理条件对民族女高音所唱曲目的类型是有影响的,需要引起民族声乐教学的重视。(二)民族女高音歌唱后的疲劳人数明显多于美声女高音(9:4),这与她们追求明亮的音色、用嗓较多、喉头上提(8:1)、喉腔紧缩(15:6)的比例较高,发声效率受到一定影响有关。(三)民族女高音与美声女高音在发[衣]时腔体使用差异较大,表现为民族女高音中高舌位的比例(12:4)、随发高音喉头上提的比例(8:1)、随发高音假声带内收的比例(8:4)、随发高音喉腔前后径缩短的比例(15:6)都明显大于美声女高音,这与两种唱法对音色的要求不同有关,也进一步阐释了两种唱法歌手共振峰不同的原因。(四)美声唱法要求不用话筒、富于穿透力,带来了她们在呼吸支持方面与民族女高音有差别,表现为美声女高音随发高音喉头上提的比例少(1:8)、声门打开的角度大(47.89度>43.40度)、打开角度超过50度的人数较多(6:0)。(五)民族女高音随发高音声带拉长的长度以及变化率都明显大于美声女高音声带长度和变化率,这与民族唱法和美声唱法对音色和真假声的比例要求不同有关。(六)无论民族、美声,从中低声区到中高声区,声带变化率加大,声带的运动是以等张性收缩为主;从中高声区到高声区,声带变化率变小,声带的运动是以等长性收缩为主。(七)并不是声带拉得越长越容易唱高音,而是要兼顾张力、振动面积和声门下压力。

关键词：民族女高音美声女高音生理条件机能状态

生理条件下铜(Ⅱ)与氨基葡萄糖及α-氨基酸的配位性能

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化学研究与应用 2008年第7期20卷 883-886页

作者：董丽杨洁杨志军孙祥德河南省新乡医学院河南新乡453003

To study the coordination reactions of glucosamine and α-aminoacid with copper(Ⅱ) under the physiological condition,the pH potentiometric titration was used to determine the protonation constants of glucosamine and α-aminoacid,and the formation constants of the binary and ternary complexes of glucosamine and α-aminoacid with Cu(Ⅱ) at 37℃ with ionic strength I=0.154mol/L NaCl respectively.The results indicated that all of the protonation constants of glucosamine and α-aminoacid,and stability constant of the binary and ternary complexes of glucosamine and α-aminoacid with Cu(Ⅱ) at 37℃,I=0.154mol/L NaCl are smaller than those at 25℃ with ionic strength I=0.10 mol/L KNO3 respectively.The results also indicated that the stable ternary complex could be formed from glucosamine and α-aminoacid with copper(Ⅱ).Furthermore,the two biologically active ligand,glucosamine and α-aminoacid showed higher compatible.The stability of the ternary complexes increased with the increase of protonation constant of α-aminoacid and the stability of its binary complexes.

关键词：氨基葡萄糖 α-氨基酸铜(Ⅱ) 配合物稳定性生理条件

美声抒情女高音与抒情女中音生理条件、声学特征以及发声特点的比较研究

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美声抒情女高音与抒情女中音生理条件、声学特征以及发声特点的比...

作者：黄薇中央音乐学院

学位级别：硕士

本文通过运用动态喉镜、间接喉镜和声学分析软件等手段对20名抒情女高音和20名抒情女中音的生理条件、声学特点和发声状态进行分析和比较,发现决定抒情女高音和抒情女中音声音特点的因素具有多维性,涉及到声带的形状及引起共鸣和传递声... 详细信息

本文通过运用动态喉镜、间接喉镜和声学分析软件等手段对20名抒情女高音和20名抒情女中音的生理条件、声学特点和发声状态进行分析和比较,发现决定抒情女高音和抒情女中音声音特点的因素具有多维性,涉及到声带的形状及引起共鸣和传递声音的管道——声道的形态,具体包括声道的长度和口咽腔、喉腔的形状。这些生理结构上的特征对于确定抒情型嗓音以及甄别抒情女高音和抒情女中音两种声音类型具有较大的参考价值。此外,通过本次研究,发现歌手共振峰和音域图测量可作为区分抒情女高音、抒情女中音及评价歌唱能力的有效手段。

关键词：抒情女高音抒情女中音生理条件声道发声特点歌手共振峰音域图

瞬时高压作用对豆渣膳食纤维(SDF)在生理条件下对Cu^(2+)、Ca^(2+)、Mg^(2+)、Pb^(2+)吸附的影响

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食品科学 2006年第8期27卷 170-173页

作者：刘成梅黎冬明钟业俊刘伟阮榕生南昌大学食品科学教育部重点实验室

本文在探讨豆渣膳食纤维(soybeandregsdietaryfiber,SDF)在生理条件下(37℃、pH2、pH7)对重金属离子的吸附过程上,研究了瞬时高压作用(instantaneoushighpressure,IHP)对其过程的影响。实验结果表明:瞬时高压作用增大了SDF的最大吸附量,... 详细信息

本文在探讨豆渣膳食纤维(soybeandregsdietaryfiber,SDF)在生理条件下(37℃、pH2、pH7)对重金属离子的吸附过程上,研究了瞬时高压作用(instantaneoushighpressure,IHP)对其过程的影响。实验结果表明:瞬时高压作用增大了SDF的最大吸附量,比40MPa处理的SDF的吸附量增加了30%～33%。经过瞬时高压处理后,SDF的吸附作用效果明显增强。

关键词： SDF 瞬时高压作用生理条件重金属离子吸附

生理条件下稀土及钙、锌离子与L—羟脯氨酸配位作用的研究

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泰山学院学报 1997年第5期22卷 59-61页

作者：高峰徐光李震

稀土元素的应用越来越广泛,而其特有的生物效应也日益受到人们的重视.钙、锌均是生命必需元素,具有多种重要生物功能,进入体内的稀土离子必将与半径相近以及配位作用接近的金属离子如Ca2+等发生作用,从而表现出一系列生物效应,同时又由... 详细信息

稀土元素的应用越来越广泛,而其特有的生物效应也日益受到人们的重视.钙、锌均是生命必需元素,具有多种重要生物功能,进入体内的稀土离子必将与半径相近以及配位作用接近的金属离子如Ca2+等发生作用,从而表现出一系列生物效应,同时又由于稀土离子丰富的光磁性质,做为钙等生命必需元素的生物探针亦得到应用,L—羟脯氨酸是人体重要氨基酸,其在人体血浆中的浓度与必需氨基酸相近,研究稀土、钙、锌离子与氨基酸的配位作用不仅对考察稀土在生物体内与生命元素的作用以及由此而引起的生物放应具有重要意义,而且还可以开拓稀土生物探针应用领域。

关键词：羟脯氨酸配位作用配合物稀土离子稳定常数锌离子生理条件稀土元素必需氨基酸必需元素

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生理条件下L-组氨酸质子化常数的测定

天水师范学院学报 1997年第3期17卷 10-11,13页

作者：冯武王晓芳冯卿如唐慧安朱元成

L-组氨酸是人体内比较重要的一种氨基酸,尤以其配位活性高而为研究者们所重视.精确测定L-组氨酸在生理条件下的质子化常数,确定各存在物种的分布形式,对研究其配位能力有一定的参考价值,此外做为基础研究也具有一定的理论意义.本文采用... 详细信息

L-组氨酸是人体内比较重要的一种氨基酸,尤以其配位活性高而为研究者们所重视.精确测定L-组氨酸在生理条件下的质子化常数,确定各存在物种的分布形式,对研究其配位能力有一定的参考价值,此外做为基础研究也具有一定的理论意义.本文采用计算机程序处理系统以PH电位法为实验手段精确测定了L-组氨酸的质子化常数.

关键词：质子化常数 L-组氨酸生理条件计算机程序离子强度玻璃电极精确测定配位活性残差平方和强酸性条件

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在生理条件下溶解载细胞微胶囊的方法及配方

科技开发动态 2004年第8期 40-41页

作者：马小军薛伟明于炜婷刘袖洞中国科学院大连化学物理研究所