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部分甲板、甲床与生发层切除术治疗嵌甲症

中国医科大学学报 2015年第3期44卷 278-279页

作者：冯博马世伟王春渤张志宇沈阳医学院附属中心医院手外科沈阳110024

对76例行部分甲板、甲床与生发层切除术的嵌甲症患者进行分析,探讨采用部分甲板、甲床与生发层切除术治疗嵌甲症的临床疗效。该术式具有切除病灶彻底、外形美观易被患者接受、治愈率高、治疗周期短等优点,可作为嵌甲症的常用术式进行推广。

关键词：嵌甲症部分甲板甲床生发层切除术

细粒棘球绦虫细胞体外培养的研究Ⅰ．细粒棘球蚴生发层细胞分离

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地方病通报 1996年第1期11卷 5-7页

作者：焦伟伊斯拉音张文林柴君杰新疆地方病防治研究所

本文报道采用胰酶消化的方法分离细粒棘球蚴生发膜细胞的研究结果，在３７℃下１０分钟的效果最好，延长消化时间可使细胞浆破裂，形成较多的裸核，不利于细胞进一步培养。梯度离心的分离方法增加细胞损伤，不能达到分离不同细胞的效果... 详细信息

本文报道采用胰酶消化的方法分离细粒棘球蚴生发膜细胞的研究结果，在３７℃下１０分钟的效果最好，延长消化时间可使细胞浆破裂，形成较多的裸核，不利于细胞进一步培养。梯度离心的分离方法增加细胞损伤，不能达到分离不同细胞的效果。分离的生发层细胞超微结构与完整生发膜超微切片上基本相同，能表现有线粒体肿胀和数量减少等特点，表明胰酶处理的细胞代谢能力受到一定的抑制。将分离的生发层细胞接种Ｂａｌｂ／ｃ小鼠腹腔可形成棘球蚴，并产生成熟的原头节。讨论了分离方法对生发细胞体外培养工作的意义。

关键词：细粒棘球蚴生发层生发细胞

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一岁宝宝长出白发或是生发层色素分泌不均

心血管病防治知识 2011年第2期 52-52页

家住城东的洪女士31岁才喜得贵子，上个月刚满一岁的宝宝两眼炯炯有神．头发乌黑茂密。可昨天洪女士无意间发现宝宝竟然长出两根白头发。洪女士非常担心，不会是少白头吧？这才一岁啊，怎么办？

关键词：生发层分泌色素白发白头发少白头

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热冲击对泡状棘球囊生发层细胞增殖力的影响

地方病译丛 1988年第6期 27-27页

作者：戚娅萍

泡状棘球囊有浸润的的倾向,类似一恶性肿瘤,其转移力也类似一恶性肿瘤。生发层细胞在棘球囊的生长上起重要作用。许多研究者报告了高温对恶性肿瘤细胞的影响。我们对把高温应用于治疗泡状棘球囊病感兴趣,为此目的重要的是研究生发层细... 详细信息

泡状棘球囊有浸润的的倾向,类似一恶性肿瘤,其转移力也类似一恶性肿瘤。生发层细胞在棘球囊的生长上起重要作用。许多研究者报告了高温对恶性肿瘤细胞的影响。我们对把高温应用于治疗泡状棘球囊病感兴趣,为此目的重要的是研究生发层细胞对热冲击的耐受限度。就我们所知,迄今尚无任何报告报道热冲击对棘球囊生发层细胞的影

关键词：棘球囊棉鼠细胞增殖力热冲击生发层

多房棘球绦虫蛋白Musashi-1的克隆及RNA结合功能初步鉴定

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中国兽医科学 2024年第10期 1377-1384页

作者：吴易璇仲顺虎郭小腊陈轶霞西北民族大学生命科学与工程学院临夏市动物疫病预防控制中心中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防治国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

初步探究Musashi-1蛋白在多房棘球蚴中的分布及其与RNA结合的能力。利用RACE技术获得Musashi-1全长，扩增该基因并克隆到载体pET-28a上，表达并纯化Musashi-1重组蛋白用于制备多克隆抗体；免疫荧光观察Musashi-1在多房棘球蚴组织中的分... 详细信息

初步探究Musashi-1蛋白在多房棘球蚴中的分布及其与RNA结合的能力。利用RACE技术获得Musashi-1全长，扩增该基因并克隆到载体pET-28a上，表达并纯化Musashi-1重组蛋白用于制备多克隆抗体；免疫荧光观察Musashi-1在多房棘球蚴组织中的分布；双荧光素酶试验检测Musashi-1蛋白与RNA结合能力。结果显示多房棘球绦虫Musashi-1基因有两个转录本，分别为1 017 bp和966 bp。Western-blot结果表明，制备的多克隆抗体能够特异性识别天然多房棘球绦虫Musashi-1蛋白。免疫荧光试验表明Musashi-1蛋白主要分布在多房棘球蚴生发层细胞中。在亚细胞水平上，Musashi-1蛋白主要分布在细胞质中。双荧光素酶试验表明Musashi-1蛋白能够与Musashi家族共识别RNA基序(富含GUA)结合。本研究确定了编码Musashi-1基因的全长，证实Musashi-1蛋白主要分布在多房棘球蚴生发层细胞中，具有RNA结合能力。本研究为进一步探讨多房棘球绦虫Musashi-1蛋白在多房棘球蚴生发层细胞中的功能提供了帮助。

关键词：多房棘球绦虫 RNA结合蛋白 Musashi-1 生发层

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丝氨酸蛋白酶在细粒棘球绦虫中的表达及活性鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第2期39卷 233-239页

作者：田梦潇臧小燕郭刚齐文静郭宝平任远李军张文宝新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830017 中亚高发病成因与防治国家重点实验室临床医学研究院新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830054

目的比较细粒棘球绦虫丝氨酸蛋白酶(EgSP)在原头节、生发层(包囊)和成虫中的表达水平差异及活性鉴定。方法采用TRIzol试剂分别提取细粒棘球绦虫原头节(经胃蛋白酶消化和未经胃蛋白酶消化)、生发层(包囊)和成虫总RNA,并进行PCR分别扩增E... 详细信息

目的比较细粒棘球绦虫丝氨酸蛋白酶(EgSP)在原头节、生发层(包囊)和成虫中的表达水平差异及活性鉴定。方法采用TRIzol试剂分别提取细粒棘球绦虫原头节(经胃蛋白酶消化和未经胃蛋白酶消化)、生发层(包囊)和成虫总RNA,并进行PCR分别扩增EgSP基因片段,PCR扩增产物测序后通过Clustal×2.0软件进行序列比对,采用邻接法构建系统进化树。选择具有SP活性基团的38 000亚基基因序列进行原核表达,将正确的目的片段克隆至表达载体pET-30a中,再转化至大肠埃希菌BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用His标签亲和层析纯化柱纯化重组蛋白EgSP(rEgSP)。将rEgSP(25μg)与等量的弗氏完全佐剂混合乳化,皮下多点注射免疫5只BALB/c小鼠,从第2次免疫开始,改为等量的弗氏不完全佐剂,第4次加强免疫采用腹腔注射,每次免疫间隔1周。免疫结束后,尾静脉采血,分离血清。ELISA检测血清中特异性抗体水平。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定不同阶段中EgSP mRNA的相对表达水平。蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测细粒棘球绦虫不同阶段中EgSP的表达情况,采用Image Lab 6.0软件分析蛋白质的表达丰度。免疫组化检测EgSP在细粒棘球绦虫原头节和生发层(包囊)中的表达情况。纯化的rEgSP和囊液蛋白用胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶和半胱氨酸酶底物(Z-Arg-AMC)、组织蛋白酶L底物(Z-Phe-Arg-AMC)测定其蛋白酶活性。采用Graphpad Prism 7统计学软件对多组数据进行单因素ANOVA方差分析。结果细粒棘球绦虫原头节、生发层(包囊)和成虫的cDNA中均扩增出目的片段,与预期大小(1 455 bp)相符。PCR产物测序结果显示,EgSP开放阅读框为1 455 bp,编码484个氨基酸,相对分子质量(Mr)为54 870,与多房棘球绦虫丝氨酸蛋白酶(Em SP)核苷酸序列一致性为97.73%,氨基酸序列一致性为96.69%。系统进化树分析结果显示,与其他绦虫属氨基酸序列一致性为33.10%~87.19%,其中与亚洲带绦虫(GenBank登录号:VDK43949.1),带状泡尾绦虫(GenBank登录号:VDM30859.1)的氨基酸序列一致性分别为87.19%、52.89%。qRT-PCR结果显示,胃蛋白酶消化的原头节、生发层(包囊)、成虫中EgSP mRNA的相对转录水平分别为2.1±1.2、9.1±2.1、5.8±2.3,均高于未经胃蛋白酶消化的原头节(1.0±0)(P生发层(包囊)、成虫中EgSP蛋白相对表达水平分别为1.2±0.1, 3.6±0.2, 4.0±0.1,生发层(包囊)和成虫中的表达水平高于原头节(P生发层(包囊)中表达,而在原头节中不表达。在3种不同pH缓冲液中,rEgSP和囊液蛋白均具有蛋白酶活性,且在pH7.2的缓冲液中,rEgSP和囊液蛋白丝氨酸蛋白酶活性最强(P生发层(包囊)和成虫组织中高表达,原头节中表达较低。rEgSP和囊液蛋白均具有较强的丝氨酸蛋白酶活性。

关键词：细粒棘球绦虫丝氨酸蛋白酶原头节生发层

抗癌药物索拉非尼体外抗多房棘球蚴的效果评价（英文）

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2017年第5期35卷 417-422页

作者：党志胜奥祐三郎周晓农胡薇张颋陈军虎徐斌赵玉敏肖宁中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织热带病合作中心科技部国家级热带病国际联合研究中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025 日本鸟取大学农学部兽医学院寄生虫学教研室复旦大学生命科学院微生物学与微生物工程系上海200433 桂林医学院生物技术学院生物医学工程系桂林541004

目的对抗癌药物索拉非尼体外抗多房棘球蚴的效果进行评价。方法从感染小鼠体内收集多房棘球蚴小囊泡,加入预先接种大鼠肝细胞的DMEM培养液(含10%胎牛血清、100 U/m L青霉素、100 mg/L链霉素)中,37℃、5% CO_2培养2~3个月后,选取直径2~4... 详细信息

目的对抗癌药物索拉非尼体外抗多房棘球蚴的效果进行评价。方法从感染小鼠体内收集多房棘球蚴小囊泡,加入预先接种大鼠肝细胞的DMEM培养液(含10%胎牛血清、100 U/m L青霉素、100 mg/L链霉素)中,37℃、5% CO_2培养2~3个月后,选取直径2~4 mm的完整包囊用于药物效果评价实验。实验分阿苯达唑组(阳性对照),阿苯达唑终浓度分别为10μmol/L和30μmol/L;索拉非尼组(实验组),索拉非尼终浓度分别为10μmol/L和30μmol/L;DMSO组(溶剂对照组),加DMSO(1︰9溶于PBS中);PBS组(阴性对照),仅加PBS。每孔取25~30个包囊,每个浓度设3个重复。药物处理48、72、96、120、144和168 h后,光学显微镜和扫描电镜观察包囊形态结构变化,计算包囊抑制率,对其体外抗棘球蚴效果进行评价。结果10、30μmol/L索拉非尼处理48、72、96、120、144和168 h后,包囊的抑制率分别为6.6%、42.4%、68.5%、77.4%、84.0%、89.5%和7.1%、45.6%、70.9%、82.6%、84.0%、89.9%。10、30μmol/L阿苯达唑在每个时间点的包囊抑制率分别为2.6%、6.6%、21.4%、47.8%、59.9%、70.6%和3.8%、12.7%、27.0%、51.4%、54.0%、73.0%。DMSO和PBS对包囊没有明显的抑制效果。索拉非尼的抑制效果均高于阿苯达唑,从处理后72 h起,索拉非尼和阿苯达唑的抑制率差异有统计学意义(P生发层细胞脱落,完全失去活性。结论索拉非尼显示出较高的包囊抑制效果,是棘球蚴病治疗的潜在药物。

关键词：多房棘球蚴病生发层索拉非尼

论“中国式戏剧性表述”在中国大片中的缺失与错置——以《夜宴》和《满城尽带黄金甲》为例

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当代电影 2011年第1期 77-80,81页

作者：万传法上海戏剧学院戏剧文学系博士200040

中国大片或曰中国电影目前创作中的一个基本问题,是"戏剧性"特别是"中国式戏剧性表述"的缺失。"中国式戏剧性表述"包含着一个双层的叠面结构,即,技巧层和生发层。技巧层的核心是由"动作—情节—悬念(意义)"构成,而生发层的核心则是由"... 详细信息

中国大片或曰中国电影目前创作中的一个基本问题,是"戏剧性"特别是"中国式戏剧性表述"的缺失。"中国式戏剧性表述"包含着一个双层的叠面结构,即,技巧层和生发层。技巧层的核心是由"动作—情节—悬念(意义)"构成,而生发层的核心则是由"情—剧—诗"构成。技巧层代表着普遍,而生发层则代表着差异。"中国式戏剧性表述"在中国大片中的缺失或错置主要表现为:动作的意义被过分看作是一种暴力美学的展示;观众性视点、角色性视点以及凝视视点的缺失;以表演为中心的动作程式等韵味美的缺失和以积极价值为中心的仪式感等意境美的缺失。

关键词：戏剧性中国式戏剧性表述技巧层生发层凝视

阿苯达唑对绵羊细粒棘球蚴作用的扫描电镜观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1991年第2期9卷 73+83-73+83页

作者：王虎青海医学院

细粒棘球蚴病(Echinococcosis)的化学治疗是近十多年来兴起的热门研究课题。苯并咪唑类化合物(Benzimidazoles)被认为具有较好的抗包虫药理活性。但大多数研究是在实验室人感染细粒棘球蚴的小鼠体内进行的,距实际应用还有一定的距离。... 详细信息

细粒棘球蚴病(Echinococcosis)的化学治疗是近十多年来兴起的热门研究课题。苯并咪唑类化合物(Benzimidazoles)被认为具有较好的抗包虫药理活性。但大多数研究是在实验室人感染细粒棘球蚴的小鼠体内进行的,距实际应用还有一定的距离。作者等用国产阿苯达唑对绵羊体内原发性细粒棘球蚴进行了治疗试验,并用扫描电镜观察虫体超微结构的变化。

关键词：原头节原发性细粒生发层达哩扫描电镜观察绵羊