多房棘球绦虫蛋白Musashi-1的克隆及RNA结合功能初步鉴定

作     者：吴易璇 仲顺虎 郭小腊 陈轶霞 

作者机构：西北民族大学生命科学与工程学院 临夏市动物疫病预防控制中心 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防治国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2024年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(32260874) 

主　　题：多房棘球绦虫 RNA结合蛋白 Musashi-1 生发层 

摘      要：初步探究Musashi-1蛋白在多房棘球蚴中的分布及其与RNA结合的能力。利用RACE技术获得Musashi-1全长，扩增该基因并克隆到载体pET-28a上，表达并纯化Musashi-1重组蛋白用于制备多克隆抗体；免疫荧光观察Musashi-1在多房棘球蚴组织中的分布；双荧光素酶试验检测Musashi-1蛋白与RNA结合能力。结果显示多房棘球绦虫Musashi-1基因有两个转录本，分别为1 017 bp和966 bp。Western-blot结果表明，制备的多克隆抗体能够特异性识别天然多房棘球绦虫Musashi-1蛋白。免疫荧光试验表明Musashi-1蛋白主要分布在多房棘球蚴生发层细胞中。在亚细胞水平上，Musashi-1蛋白主要分布在细胞质中。双荧光素酶试验表明Musashi-1蛋白能够与Musashi家族共识别RNA基序(富含GUA)结合。本研究确定了编码Musashi-1基因的全长，证实Musashi-1蛋白主要分布在多房棘球蚴生发层细胞中，具有RNA结合能力。本研究为进一步探讨多房棘球绦虫Musashi-1蛋白在多房棘球蚴生发层细胞中的功能提供了帮助。