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杨梅和桃UDP-鼠李糖合成酶基因克隆及生化功能研究

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杨梅和桃UDP-鼠李糖合成酶基因克隆及生化功能研究

作者：赵志康浙江大学

学位级别：硕士

UDP-鼠李糖是植物糖苷类衍生物的重要糖供体,参与各种鼠李糖苷的形成。鼠李糖苷广泛存在于植物不同组织部位,具有重要生物活性。然而,商品化的UDP-鼠李糖难以获得,限制了植物鼠李糖苷相关的生物学研究。本论文以杨梅(Morella rubra)和桃... 详细信息

UDP-鼠李糖是植物糖苷类衍生物的重要糖供体,参与各种鼠李糖苷的形成。鼠李糖苷广泛存在于植物不同组织部位,具有重要生物活性。然而,商品化的UDP-鼠李糖难以获得,限制了植物鼠李糖苷相关的生物学研究。本论文以杨梅(Morella rubra)和桃(Prunus persica)为研究材料,鉴定不同组织中黄酮醇鼠李糖苷的种类,克隆UDP-鼠李糖合成酶基因,并对其生化功能进行研究。主要结果如下:1、利用HPLC,在杨梅不同组织中检测到三种黄酮醇鼠李糖苷,即杨梅素-3-O-鼠李糖苷(M3Rha)、槲皮素-3-O-鼠李糖苷(Q3Rha)和山奈酚-3-O-鼠李糖苷(K3Rha);在桃不同组织中检测到四种黄酮醇鼠李糖苷,即槲皮素-3-O-鼠李糖基-葡萄糖苷(芸香糖苷)(Q3Rut)、山奈酚-3-O-芸香糖苷(K3Rut)、异鼠李素-3-O-芸香糖苷(I3Rut)和K3Rha。2、从杨梅中克隆了两个UDP-鼠李糖合成酶基因,命名为MrRHM1和MrNRS/ER,编码区长度分别为2016 bp和909 bp。MrNRS/ER氨基酸序列与MrRHM1的C端序列高度相似。重组蛋白体外催化反应表明,MrRHM1可以催化UDP-葡萄糖生成UDP-鼠李糖,其催化反应最适pH为9.0,最适温度为25℃。MrNRS/ER不能独立催化UDP-葡萄糖生成UDP-鼠李糖,但可以与AtRHM2的N端(AtRHM2-N)共同催化UDP-葡萄糖生成UDP-鼠李糖。3、从桃中克隆了两个UDP-鼠李糖合成酶基因,命名为PpRHM1和PpRHM2,编码区长度分别为2028 bp和2016 bp。PpRHM1和PpRHM2氨基酸序列相似度为84.47%,重组蛋白体外催化反应表明,PpRHM1和PpRHM2均可以催化UDP-葡萄糖生成UDP-鼠李糖,催化反应最适pH分别为9.0和8.5,最适温度分别为35℃和30℃。本研究结果表明,MrRHM1,PpRHM1和PpRHM2均能催化UDP-葡萄糖生成UDP-鼠李糖,对于后续开展植物鼠李糖相关的糖苷类物质生物合成及调控研究具有重要意义。

关键词：杨梅桃黄酮醇鼠李糖苷 UDP-鼠李糖合成酶生化功能

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陆地棉miR397b的生化功能验证

上海农业学报 2017年第1期33卷 10-14页

作者：丁妍王燕美刘进元清华大学生命科学学院植物生物学研究中心植物分子生物学实验室北京100084

植物中的漆酶(LAC)作为蓝铜氧化酶家族的一个分支,可以聚合木质素单体形成木质素。拟南芥、番茄中miR397b可以调控LAC蛋白家族的表达,但验证棉花中miR397b生化功能的相关报道目前尚无。选取开花后25 d的陆地棉纤维材料,通过RLM-5'RACE试... 详细信息

植物中的漆酶(LAC)作为蓝铜氧化酶家族的一个分支,可以聚合木质素单体形成木质素。拟南芥、番茄中miR397b可以调控LAC蛋白家族的表达,但验证棉花中miR397b生化功能的相关报道目前尚无。选取开花后25 d的陆地棉纤维材料,通过RLM-5'RACE试验,验证了对GhLAC4 mRNA的切割发生在miR397b和GhLAC4的互补区域,即证明了GhLAC4是miR397b的靶基因。本研究预示着GhmiR397b可能参与棉花纤维中木质素的形成过程,为研究GhLAC4在棉花纤维发育过程中的调控作用提供了基础。

关键词：陆地棉纤维发育 miR397b GhLAC4 靶基因生化功能降解

羊栖菜多糖对S180荷瘤小鼠红细胞相关生化功能影响的研究

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中国药学杂志 2009年第1期44卷 22-25页

作者：季宇彬汲晨锋王翀哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心哈尔滨150076 国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心哈尔滨150076

目的分析羊栖菜多糖对S180荷瘤小鼠红细胞相关生化功能影响的研究。方法建立肿瘤动物模型,分高、中、低剂量腹腔给予羊栖菜多糖7 d,采集红细胞,制备红细胞悬液,运用激光共聚焦扫描技术测定荷瘤小鼠红细胞内[Ca2+]的变化;运用相关试剂盒... 详细信息

目的分析羊栖菜多糖对S180荷瘤小鼠红细胞相关生化功能影响的研究。方法建立肿瘤动物模型,分高、中、低剂量腹腔给予羊栖菜多糖7 d,采集红细胞,制备红细胞悬液,运用激光共聚焦扫描技术测定荷瘤小鼠红细胞内[Ca2+]的变化;运用相关试剂盒测定红细胞膜表面唾液酸含量和Na+,K+-ATPase及Ca2+,Mg2+-ATPase活性的变化;用流式细胞仪分析红细胞膜电位水平的变化;采用高效毛细管电泳法测定红细胞电泳合淌度的变化。结果羊栖菜多糖能降低荷瘤小鼠红细胞内[Ca2+],升高膜表面唾液酸的含量,增强膜表面Na+,K+-ATPase及Ca2+,Mg2+-ATPase的活性,提高红细胞膜电位水平,提高红细胞的电泳合淌度。结论羊栖菜多糖可调节或恢复S180荷瘤小鼠红细胞多种生理生化功能。

关键词：羊栖菜多糖红细胞生化功能

青龙衣冷、热乙醇提取物对H22小鼠肿瘤细胞膜生化功能影响的研究

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中国中药杂志 2005年第7期30卷 531-534页

作者：季宇彬汲晨锋马宏图哈尔滨商业大学药物研究所黑龙江哈尔滨150076

目的:研究青龙衣的冷、热乙醇提取物对H22小鼠肿瘤细胞膜蛋白含量、膜脂流动性、膜封闭度的影响。方法:应用SDSPAGE电泳分析膜蛋白含量,按Skinitzky法测定膜脂流动性,按Zamudio法测定膜封闭度。结果:青龙衣的冷、热乙醇提取物可降低肿... 详细信息

目的:研究青龙衣的冷、热乙醇提取物对H22小鼠肿瘤细胞膜蛋白含量、膜脂流动性、膜封闭度的影响。方法:应用SDSPAGE电泳分析膜蛋白含量,按Skinitzky法测定膜脂流动性,按Zamudio法测定膜封闭度。结果:青龙衣的冷、热乙醇提取物可降低肿瘤细胞膜蛋白含量,降低肿瘤细胞膜脂流动性,降低肿瘤细胞膜封闭度。结论:青龙衣冷、热乙醇提取物改变了肿瘤细胞膜的生化物质及生化功能,其结果导致肿瘤细胞的解体和死亡,这可能是青龙衣抗肿瘤作用的机制之一。

关键词：肿瘤细胞膜乙醇提取物生化功能青龙衣影响的研究 H22小鼠 SDS-PAGE 细胞膜脂流动性蛋白含量细胞膜封闭度抗肿瘤作用电泳分析生化物质测定

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人脑拥有一致基因设计但生化功能极复杂

科技风 2012年第18期 4-5页

物理学家组织网9月20日报道，艾伦脑科学研究所通过对“艾伦人脑图谱库”的大规模深入分析发现，虽然人类群体中存在各种不同的人格，也有着各种认知天才，但人脑却有着更多的相似性而非不同，不同的人脑有着一致的基因设计蓝图，并拥... 详细信息

物理学家组织网9月20日报道，艾伦脑科学研究所通过对“艾伦人脑图谱库”的大规模深入分析发现，虽然人类群体中存在各种不同的人格，也有着各种认知天才，但人脑却有着更多的相似性而非不同，不同的人脑有着一致的基因设计蓝图，并拥有极为复杂的生化功能。相关论文发表在最近出版的《自然》杂志上。

关键词：基因设计生化功能人脑能极《自然》杂志科学研究所物理学家论文发表

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辅酶A的生化功能和应用

中国生化药物杂志 2003年第3期24卷 159-161页

作者：栾贻宏路宁王基伟隗青济南维尔康生化制药有限公司山东济南250100

泛酸、泛硫乙胺是辅酶A的组成部分 ,作为前体物质在体内可转化成辅酶A ,起辅酶A的作用。此文主要介绍了辅酶A的生化功能和应用。

关键词：辅酶A 泛酸泛硫乙胺生化功能应用

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银翘散对鸭肝脏生化功能的影响试验

广东畜牧兽医科技 2009年第1期34卷 41-43页

作者：黄炳根岑锐坤潘渭棠佛山市大沥镇农林服务中心广东佛山528231 佛山市狮山镇农林服务中心广东佛山528225

银翘散由连翘、银花、桔梗、薄荷、牛蒡子、淡竹叶、荆芥、淡豆豉、芦根、甘草等十种药物组成。现代药理学的研究成果，证明了银翘散对病毒性感染疾病有治疗作用。它多用于治疗猪肺疫、猪丹毒、热毒湿疹、咳嗽多痰、中暑伤寒、肺热痰喘... 详细信息

银翘散由连翘、银花、桔梗、薄荷、牛蒡子、淡竹叶、荆芥、淡豆豉、芦根、甘草等十种药物组成。现代药理学的研究成果，证明了银翘散对病毒性感染疾病有治疗作用。它多用于治疗猪肺疫、猪丹毒、热毒湿疹、咳嗽多痰、中暑伤寒、肺热痰喘、热结、热毒湿疹等，均有较好疗效。也用于治疗流感、急性咽喉炎、支气管炎、肺炎以及某些感染性疾病初期而见有表热证者。

关键词：银翘散影响试验生化功能感染性疾病肝脏治疗作用病毒性感染急性咽喉炎