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犬尿氨酸代谢通路对牙周膜干细胞成骨分化的影响

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中华口腔医学杂志 2023年第7期58卷 650-658页

作者：王南南钱俊张杨珩崔迪刘蓉廖文正李艳芬闫福华南京大学医学院附属口腔医院·南京市口腔医院牙周病科南京210008

目的探索犬尿氨酸代谢通路对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)成骨分化的影响,为研究牙周炎微环境对牙周组织再生的影响提供依据。方法于2022年6至10月在南京大学医学院附属口腔医院牙周病科、口腔综合科收集19例... 详细信息

目的探索犬尿氨酸代谢通路对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)成骨分化的影响,为研究牙周炎微环境对牙周组织再生的影响提供依据。方法于2022年6至10月在南京大学医学院附属口腔医院牙周病科、口腔综合科收集19例牙周炎患者(牙周炎组)和19例牙周健康者(牙周健康组)的非刺激性唾液,采用超高效液相色谱-串联质谱检测两组受试者唾液中犬尿氨酸及其代谢产物的含量。对牙周炎组和牙周健康组的牙龈组织通过免疫组化检测吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)与芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)的表达情况。收集因正畸治疗需要拔除的前磨牙5颗(来自2022年7至11月南京大学医学院附属口腔医院口腔颌面外科12~18岁的5例就诊患者),从离体牙上提取PDLSC,使用成骨诱导分化培养基(对照组)或含有20μmol/L犬尿氨酸的成骨诱导分化培养基(犬尿氨酸组)培养7 d,对成骨诱导的PDLSC进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和ALP活性测定。通过实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测对照组和犬尿氨酸组PDLSC成骨相关基因ALP、骨钙素、runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen type-Ⅰ,COL-Ⅰ)mRNA表达和犬尿氨酸通路相关基因AhR、细胞色素P450家族成员(cytochrome P450 family,CYP)1A1、1B1 mRNA的表达。通过蛋白质印迹法检测对照组和犬尿氨酸组RUNX2、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和AhR蛋白表达情况。培养21 d时,用茜素红染色评估对照组和犬尿氨酸组PDLSC矿化情况。结果牙周炎组唾液中犬尿氨酸[8.26(0,19.60)nmol/L]及犬尿喹啉酸[11.4(3.34,13.52)nmol/L]含量均显著高于牙周健康组[分别为0.75(0,4.25)、1.92(1.34,3.88)nmol/L](Z=-2.84,P=0.004;Z=-3.61,P犬尿氨酸组PDLSC ALP活性(291.90±2.35)显著下降(t=3.34,P=0.029)。RT-qPCR结果显示,犬尿氨酸组PDLSC ALP、骨钙素和RUNX2表达(0.43±0.12、0.78±0.09、0.66±0.10)均较对照组(1.02±0.22、1.00±0.11、1.00±0.01)显著下降(t=4.71,P=0.003;t=3.23,P=0.018;t=6.73,P0.05)。蛋白质印迹法结果显示,犬尿氨酸组OPN、RUNX2表达(0.82±0.05、0.87±0.03)与对照组(1.00±0.00、1.00±0.00)相比均显著下降(t=6.79,P=0.003;t=7.95,P=0.001),AhR表达(1.24±0.14)显著高于对照组(1.00±0.00)(t=3.04,P=0.039)。结论牙周炎患者犬尿氨酸通路异常激活,不仅能上调AhR相关通路,还能抑制PDLSC的成骨向分化。

关键词：牙周炎犬尿氨酸牙周膜干细胞成骨分化牙周组织再生芳香烃受体

犬尿氨酸代谢通路对抑郁症的影响机制研究进展

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中国药理学通报 2020年第12期36卷 1640-1644页

作者：秦宇张永鹤北京大学基础医学院药理学系北京100191

必需氨基酸色氨酸不仅是五羟色胺的前体,还可降解为其他几种神经活性化合物,主要包括犬尿氨酸以及具有神经保护作用的犬尿喹啉酸和可激活氧化应激反应引起海马神经元变性的喹啉酸。这些代谢物的产生是由免疫系统严格控制的犬尿氨酸代谢... 详细信息

必需氨基酸色氨酸不仅是五羟色胺的前体,还可降解为其他几种神经活性化合物,主要包括犬尿氨酸以及具有神经保护作用的犬尿喹啉酸和可激活氧化应激反应引起海马神经元变性的喹啉酸。这些代谢物的产生是由免疫系统严格控制的犬尿氨酸代谢途径的酶级联调控的。该通路的失调,导致活性代谢物功能亢进或减退,与神经退行性疾病、抑郁症和精神分裂症等精神疾病密切相关。本文就犬尿氨酸代谢途径参与抑郁症的病理生理学机制及其调控对抑郁症状的影响的研究做一综述,旨在为进一步研究抑郁的形成机制提供参考。

关键词：犬尿氨酸犬尿喹啉酸喹啉酸犬尿氨酸代谢途径抑郁症机制

色氨酸-犬尿氨酸代谢途径及其代谢产物在抑郁症中的研究进展

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中华精神科杂志 2021年第3期54卷 233-238页

作者：云雅君王志仁安会梅张琪马廷赵文暄王永前杨甫德北京大学回龙观临床医学院北京回龙观医院100096 中国药科大学基础医学与临床药学学院南京210009

抑郁症是一种严重的慢性致残性精神疾病,其高患病率、高复发率、高致残率给社会和家庭带来巨大的经济负担。越来越多的研究显示色氨酸-犬尿氨酸代谢途径异常在抑郁症的病理生理机制中可能具有重要作用。本文中系统的介绍了近年来色氨酸... 详细信息

抑郁症是一种严重的慢性致残性精神疾病,其高患病率、高复发率、高致残率给社会和家庭带来巨大的经济负担。越来越多的研究显示色氨酸-犬尿氨酸代谢途径异常在抑郁症的病理生理机制中可能具有重要作用。本文中系统的介绍了近年来色氨酸-犬尿氨酸代谢途径及其代谢产物在抑郁症中的相关研究,并梳理了基于该代谢途径的靶向药物潜在的抗抑郁效果,为探索抑郁症的病因及发病机制提供一定的理论基础。

关键词：犬尿氨酸抑郁症喹啉酸神经炎症

高效液相色谱手性冠醚固定相拆分丙氨酸、正缬氨酸和犬尿氨酸对映体

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分析化学 2009年第6期37卷 919-922页

作者：李齐林琳唐民华许旭中国科学院上海有机化学研究所

采用高效液相色谱法在手性冠醚柱上拆分丙氨酸、正缬氨酸和犬尿氨酸3种对映体。使用CROWN-PAK CR(+)柱(150 mm×4 mm,5μm),以HClO4溶液(pH1.0)为流动相,柱温20℃,流速1.0 mL/min,丙氨酸、正缬氨酸和犬尿氨酸的检测波长分别为200、220和... 详细信息

采用高效液相色谱法在手性冠醚柱上拆分丙氨酸、正缬氨酸和犬尿氨酸3种对映体。使用CROWN-PAK CR(+)柱(150 mm×4 mm,5μm),以HClO4溶液(pH1.0)为流动相,柱温20℃,流速1.0 mL/min,丙氨酸、正缬氨酸和犬尿氨酸的检测波长分别为200、220和254 nm,3种氨基酸都得到手性拆分。考察了流动相流速、温度及pH对分离的影响,并通过对选择性、保留时间和柱效的考察判断影响分离度的因素。结果表明:降低温度有助于提高手性选择性,但会降低柱效,从而影响分离度。在0～20℃柱温范围内研究了lnk′、lnα与1/T的关系,计算了3种氨基酸对映体与固定相相互作用的热力学函数。

关键词：高效液相色谱法手性冠醚柱对映体拆分丙氨酸正缬氨酸犬尿氨酸

别嘌醇调控犬尿氨酸代谢途径异常发挥治疗佐剂性关节炎大鼠的作用

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中国药理学通报 2022年第8期38卷 1176-1182页

作者：王越业贾成艳许媛许和鹏陈阿圆魏伟常艳安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室安徽抗炎免疫药物协同创新中心安徽医科大学类风湿关节炎研究中心安徽合肥230032

目的观察别嘌醇(allopurinol,ALLO)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠的治疗作用及其对色氨酸2,3-双加酶(tryptophan 2,3 dioxygenase,TDO)活性影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、AA模型组、ALLO给药组(10、20、40 mg·kg^(-1))和阳性对照甲氨蝶呤组(0.5 mg·kg^(-1))。通过在大鼠右足趾皮内注射完全弗氏佐剂建立AA大鼠模型,观察大鼠体质量变化、足爪肿胀数、关节病理、脾脏指数和成纤维样滑膜细胞(fibroblast like synoviocytes,FLS)增殖,探究ALLO的治疗效果;流式细胞术检测脾脏CD68^(+)巨噬细胞比例以及Th17/Treg比值;高效液相色谱法检测肝脏和FLS培养上清中色氨酸(tryptophan,Trp)和犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)含量。结果与模型组相比,ALLO给药后显著增加AA大鼠体质量,减少大鼠关节肿胀数,改善关节病理损伤,降低大鼠脾脏指数,抑制FLS增殖,减少脾脏巨噬细胞数量及降低Th17/Treg比值,抑制肝脏和FLS培养上清中Trp的代谢和Kyn的水平,降低肝脏Kyn/Trp比值(TDO活性)。结论ALLO对AA大鼠具有治疗作用,可能与其调控TDO介导的Kyn途径代谢有关。

关键词：类风湿关节炎别嘌醇佐剂性关节炎色氨酸犬尿氨酸色氨酸2,3-双加氧酶

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首次发病精神分裂症患者犬尿氨酸代谢异常及与血糖-胰岛素水平的关系

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中华精神科杂志 2021年第5期54卷 354-362页

作者：甘明远谭云龙王志仁谭淑平北京大学回龙观临床医学院北京回龙观医院100096

目的探讨首次发病精神分裂症患者犬尿氨酸代谢通路异常及其与血糖-胰岛素水平的关系。方法纳入160例首次发病精神分裂症患者(患者组)和122名年龄、性别、受教育程度与之相匹配的健康对照者(对照组)。采用液相色谱-串联质谱法测定血清中... 详细信息

目的探讨首次发病精神分裂症患者犬尿氨酸代谢通路异常及其与血糖-胰岛素水平的关系。方法纳入160例首次发病精神分裂症患者(患者组)和122名年龄、性别、受教育程度与之相匹配的健康对照者(对照组)。采用液相色谱-串联质谱法测定血清中色氨酸、犬尿氨酸、犬尿喹啉酸、喹啉酸的水平,同时测定所有受试者的空腹血浆葡萄糖及空腹血浆胰岛素水平,采用独立样本t检验或Mann Whitney U检验进行组间比较;采用双变量相关、偏相关分析空腹血浆葡萄糖-胰岛素代谢指标与犬尿氨酸代谢物之间的关系。结果与对照组相比,患者组空腹血浆葡萄糖水平升高[5.5(4.8,6.4)mmol/L与5.1(4.8,5.4)mmol/L,Z=-3.93,P氨酸[11449.5(10053.5,12828.5)nmol/L与16780.0(13735.0,18997.5)nmol/L,Z=-10.69,P犬尿氨酸[252.2(208.7,307.4)nmol/L与637.8(355.5,827.4)nmol/L,Z=-11.02,P犬尿喹啉酸[5.0(3.7,6.9)nmol/L与11.0(8.5,14.3)nmol/L,Z=-11.48,P犬尿喹啉酸水平呈正相关(r=0.46,P犬尿氨酸代谢通路水平降低,并可能与高胰岛素-葡萄糖代谢风险相关。

关键词：精神分裂症犬尿氨酸葡萄糖-胰岛素代谢

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犬尿氨酸途径在认知功能障碍中的作用及机制

中国医师杂志 2022年第1期24卷 157-160,F0003页

作者：景丽瑾杨静周琪臻王琦山西医科大学第二医院消化内科太原030000

色氨酸(TRP)是人体的必需氨基酸,是许多信号分子形成的前体。犬尿氨酸途径是TRP代谢的主要途径,在吲哚胺2,3-双加氧酶的催化下,形成代谢产物犬尿喹啉酸和喹啉酸,他们通过不同机制作用于N-甲基-D-天冬氨酸受体,参与神经调节,影响认知过程... 详细信息

色氨酸(TRP)是人体的必需氨基酸,是许多信号分子形成的前体。犬尿氨酸途径是TRP代谢的主要途径,在吲哚胺2,3-双加氧酶的催化下,形成代谢产物犬尿喹啉酸和喹啉酸,他们通过不同机制作用于N-甲基-D-天冬氨酸受体,参与神经调节,影响认知过程,在许多中枢神经系统疾病的发生发展中起着重要作用。在生理和病理条件下,犬尿氨酸代谢过程不同,而且在犬尿氨酸代谢途径中有许多限速酶,通过影响这些限速酶可以干预犬尿氨酸代谢。本文就色氨酸/犬尿氨酸代谢与认知障碍之间作一综述。

关键词：色氨酸犬尿氨酸认知功能障碍吲哚胺-吡咯2,3-双加氧酶

高效液相色谱-荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸

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色谱 2008年第1期26卷 60-63页

作者：罗昔波唐爱国皮兰敢肖乐东敖翔卜艳红王瑞中南大学湘雅二医院检验科湖南长沙410011

建立了高效液相色谱-荧光检测（HPLC-FLD）测定血清中犬尿氨酸（kynurenine,Kyn）含量的方法。采用Hy-persil C8色谱柱（300mm×6.0mm,10μm）,流动相为0.25mol/L醋酸锌及50mmol/L醋酸溶液（含3%乙腈）,流速为1.5mL/min,荧光检测激发波... 详细信息

建立了高效液相色谱-荧光检测（HPLC-FLD）测定血清中犬尿氨酸（kynurenine,Kyn）含量的方法。采用Hy-persil C8色谱柱（300mm×6.0mm,10μm）,流动相为0.25mol/L醋酸锌及50mmol/L醋酸溶液（含3%乙腈）,流速为1.5mL/min,荧光检测激发波长和发射波长分别为365nm和480nm。血清标本经5%（v/v）高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样,Kyn经流动相等度洗脱分离后,用FLD进行测定。研究结果表明Kyn保留时间约为8.3min,线性范围为0.098-19.6μmol/L,最低检出浓度为0.04μmol/L,回收率为90.8%-96.2%,日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%,苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对犬尿氨酸的测定均无干扰。建立的方法简便、快速、灵敏、特异,适用于临床和科研应用。

关键词：高效液相色谱法荧光检测犬尿氨酸人血清

高血压定位区域犬尿氨酸酶基因多态性与高血压病相关

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中华心血管病杂志 2005年第7期33卷 588-591页

作者：张怡张奎星何鑫袁文涛王谷亮茅守玉高平进黄薇朱鼎良上海第二医科大学附属瑞金医院上海市高血压研究所医学基因组学国家重点实验室上海市血管生物学重点实验室现在山东省立医院心内科200025 国家人类基因组南方研究中心

目的检测中国汉族人群高血压病定位区域2q14-q23内犬尿氨酸酶基因(kynureninase,KYNU)调控区和编码区的单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)及与高血压病的相关性。方法采用直接测序法检测KYNU基因启动子区和外显子序列中... 详细信息

目的检测中国汉族人群高血压病定位区域2q14-q23内犬尿氨酸酶基因(kynureninase,KYNU)调控区和编码区的单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)及与高血压病的相关性。方法采用直接测序法检测KYNU基因启动子区和外显子序列中的SNP。应用变性高效液相色谱分析(DHPLC)技术对位于编码区且改变氨基酸编码的Lys412Glu(A/G)多态在456例高血压病患者和430例正常对照者中进行分型和关联研究。结果共检测得KYNU基因的16个SNP,其中启动子区6个,编码区2个(均改变氨基酸编码)。Lys412Glu多态基因型分布(χ2=6·693,P=0·035)和等位基因频率分布(χ2=4·188,P=0·041)在高血压病组和正常对照组间差异均有统计学意义,Lys412Glu等位基因频率分布在男性高血压病组和正常对照组间差异有统计学意义(χ2=4·424,P=0·035)。结论中国汉族高血压病定位区域内KYNU基因Lys412Glu多态可能与高血压病相关。

关键词：高血压基因多态性,单核苷酸高血压病患者酶基因多态性犬尿氨酸相关性变性高效液相色谱分析中国汉族人群基因启动子区