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烟酰胺磷酸核糖转移酶及其与肿瘤关系研究进展

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浙江大学学报（医学版） 2014年第1期43卷 109-114页

作者：徐小方吴明浙江省肿瘤医院胸外科浙江杭州310022 浙江大学医学院附属第二医院胸外科浙江杭州310009

烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)是哺乳动物细胞合成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的限速酶;Nampt也是一种细胞因子,如作为一种新的具有结合并激活胰岛素受体、模拟胰岛素作用的脂肪细胞因子,调控B细胞分化、延缓中性粒细胞凋亡、参与炎症和免疫应... 详细信息

烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)是哺乳动物细胞合成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的限速酶;Nampt也是一种细胞因子,如作为一种新的具有结合并激活胰岛素受体、模拟胰岛素作用的脂肪细胞因子,调控B细胞分化、延缓中性粒细胞凋亡、参与炎症和免疫应答。本文就Nampt的结构、功能及其与肿瘤关系的研究进展作一综述。

关键词：烟酰胺磷酸核糖转移酶肿瘤磷酸类核糖烟酰胺综述

烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂在肿瘤治疗方面的研究进展

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第二军医大学学报 2012年第7期33卷 794-798页

作者：秦烨张偌瑜缪朝玉第二军医大学药学院药理学教研室上海200433

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是生命体内200多种氧化还原反应的辅酶,在很多细胞生理过程中发挥着重要作用。烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)是哺乳动物NAD合成途径的限速酶,调节着细胞内的NAD水平,是生物体内进行各种生命活动和能量代谢的重... 详细信息

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是生命体内200多种氧化还原反应的辅酶,在很多细胞生理过程中发挥着重要作用。烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)是哺乳动物NAD合成途径的限速酶,调节着细胞内的NAD水平,是生物体内进行各种生命活动和能量代谢的重要蛋白,具有多种生物学活性。在癌症中,肿瘤细胞为了快速增殖,对细胞内NAD水平的依赖比正常细胞更强。研究表明Nampt有促血管生成活性,支持着一些肿瘤细胞的生长,抑制Nampt酶活性可起到很好的抗肿瘤作用。这使得Nampt成为近年来药物研究中一个非常有吸引力的靶标,Nampt抑制剂被用于肿瘤化疗干预研究。目前有研究报道的Nampt抑制剂共4个:FK866、CHS828、CB30865、IS001。本文就近年来Nampt抑制剂在肿瘤治疗方面的研究进展进行综述,以期为Nampt调控剂的开发和应用提供参考。

关键词：烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂肿瘤

烟酰胺磷酸核糖转移酶在小鼠心肌梗死后修复中的表达变化与功能研究

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中国循环杂志 2023年第4期38卷 456-463页

作者：钟嘉俊黄成珍聂宇林爱玲王珏温州医科大学附属第一医院心脏外科温州325000 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京100005 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院心血管疾病国家重点实验室北京100037现为温州医科

目的:探讨心肌梗死后烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)表达变化及其对小鼠心肌细胞增殖的影响,为治疗心肌梗死探索新的理论依据与干预靶点。方法:分离原代乳鼠心肌细胞,给予NAMPT重组蛋白100 ng/ml,利用免疫荧光染色检测心肌细胞的磷酸化组... 详细信息

目的:探讨心肌梗死后烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)表达变化及其对小鼠心肌细胞增殖的影响,为治疗心肌梗死探索新的理论依据与干预靶点。方法:分离原代乳鼠心肌细胞,给予NAMPT重组蛋白100 ng/ml,利用免疫荧光染色检测心肌细胞的磷酸化组蛋白H3(pH3)、增殖抗原Ki67表达。将成年C57BL/6j雄性小鼠40只随机分成2组:NAMPT治疗组,磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,每组20只,同时取10只作为假手术组。通过结扎小鼠冠状动脉左前降支建立小鼠心肌梗死模型,NAMPT治疗组于结扎线以下通过显微心肌内注射NAMPT重组蛋白0.5μg,PBS对照组以同样方法注射PBS溶液,假手术组仅开胸不结扎冠状动脉。通过M型超声检测小鼠术后心功能,取出心脏后Masson染色在光学显微镜下观察并测定心肌梗死面积。结果:左前降支结扎构建心肌梗死模型的小鼠在术后第2、3天NAMPT的信使RNA(mRNA)均显著下调(P均0.05),心肌内注射NAMPT的乳鼠心脏中pH3阳性的心肌细胞较PBS对照组也无明显增多(P>0.05)。心肌梗死小鼠NAMPT给药后,与PBS对照组相比,NAMPT治疗组的左心室射血分数和左心室缩短分数差异均无统计学意义(P均>0.05),NAMPT治疗组的心重、体重、心重/体重比值差异均无统计学意义(P均>0.05);两组间梗死面积差异无统计学意义(P>0.05)。结论:心肌梗死损伤会导致心肌组织中NAMPT表达水平下调;但外源性补给NAMPT不能改善小鼠心肌梗死后的心功能,不能减小梗死面积,NAMPT在心肌梗死损伤修复中的作用有待进一步探究。

关键词：心肌梗死心肌增殖烟酰胺磷酸核糖转移酶心肌内注射

烟酰胺磷酸核糖转移酶在大肠杆菌中的表达及催化合成烟酰胺单核苷酸

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现代食品科技 2021年第2期37卷 87-93,182页

作者：廖一波吴旻晖梁书利林影华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006

烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nicotinamide phosphate ribose transferase,Nampt)是生物酶法合成烟酰胺单核苷酸(Nicotinamide ribotide,NMN)中重要的酶,催化烟酰胺(Nicotinamide,NAM)和磷酸核糖焦磷酸(Phosphoribosyl pyrophosphate,PRPP)合成NMN。本研究将来源Meiothermus ruber的Nampt在大肠杆菌系统进行胞内表达,表达产物经纯化后进行酶学性质分析,并进一步将其用于催化合成NMN。将重组菌株在16℃低温下进行摇瓶水平诱导21 h,收集发酵菌体并进行超声破碎,破碎后上清利用Ni-NTA螯合亲和层析的方法进行纯化,SDS-PAGE结果显示表达与纯化后的产物大小约55 ku,与预期的蛋白分子量相符。重组Nampt的最适反应温度为45℃,最适p H为6。酶动力学分析显示,该酶对底物NAM催化的Km、Vmax、kcat分别是0.39μmol/L、3.20μmol/(mg·min)、1.391/s。使用该酶催化生产NMN,通过反应中补加一次底物PRPP,反应10min产物NMN产量可达30 mg/L。本研究成功表达一个酶学性质和热稳定性优良的Nampt,并将其应用在单酶催化生产NMN时有较高的产量和生产效率,为生物酶法合成NMN的应用研究奠定了基础。

关键词：烟酰胺磷酸核糖转移酶烟酰胺单核苷酸大肠杆菌

烟酰胺磷酸核糖转移酶和磷酸丙糖异构酶1在类风湿关节炎中的作用及机制研究

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烟酰胺磷酸核糖转移酶和磷酸丙糖异构酶1在类风湿关节炎中的作用...

作者：雷明安徽医科大学

学位级别：硕士

目的:糖代谢过程在RA的发生发展中发挥着重要作用,代谢干预被认为是一种新的抗风湿方法。因其可通过促进糖酵解而控制急性炎症,代谢调节剂烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nicotinamide phosphoribose Transferase,NAMPT)已被确证为RA新的治疗靶... 详细信息

目的:糖代谢过程在RA的发生发展中发挥着重要作用,代谢干预被认为是一种新的抗风湿方法。因其可通过促进糖酵解而控制急性炎症,代谢调节剂烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nicotinamide phosphoribose Transferase,NAMPT)已被确证为RA新的治疗靶点。然而,NAMPT如何协同其他糖酵解调节剂维持RA的炎症仍有待进一步研究。本研究首先基于NAMPT与RA之间的关系,进一步分析与之关联的糖酵解调节剂在RA中的作用与意义,以期为临床寻找治疗RA新靶点提供新的启示。方法:我们通过持续监测和验证胶原诱导性关节炎(Collagen-Induced Arthritis,CIA)大鼠外周血中NAMPT和相关炎症指标的表达变化。通过RNA测序比较CIA大鼠NAMPT和NAMPT样本的基因转录谱,确定差异表达基因。在另一批CIA大鼠模型上验证观察到的差异表达基因,并进一步在临床样本中研究RA炎症过程中持续变化的典型代谢调节因子。根据已鉴定的差异表达基因,将类风湿关节炎患者分为不同的亚群。比较两不同亚群间患者的临床表现和细胞因子谱。采用QPCR、ELISA等检测技术手段和现有的临床数据在更大的临床样本中进一步验证初步结论。结果:NAMPT的过度表达通常发生在CIA模型大鼠的早期,当NAMPT表达上调时,诱导型一氧化氮合酶(inducible Nitric Oxide Synthase,i NOS)和白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)同步上调。在NAMPT和NAMPT的CIA模型大鼠差异表达基因中,仅有糖酵解酶—磷酸丙糖异构酶1(Triosephosphate isomerase1,TPI1)在急性炎症后期持续变化。与NAMPT类似,在临床样本中RA患者的TPI1表达高于普通健康人群,并且TPI1与类风湿因子(Rheumatoid Factor,RF)及单核细胞炎性相关细胞因子(Eotaxin)的升高同步。与此同时,观察到TPI1和缺氧诱导因子(Hypoxia Inducible Factor,HIF-1α)之间的相互作用。HIF1α促进TPI1的表达,TPI1与HIF-1α在炎性单核细胞核内共定位。结论:1.糖酵解调节因子TPI1与NAMPT类似,在RA炎症进展过程中具有重要作用,其过度表达通常表示体内免疫环境的增强。2.NAMPT和TPI1分别介导CIA/RA的不同阶段,共同引发单核细胞介导的RA炎症反应。

关键词：烟酰胺磷酸核糖转移酶磷酸丙糖异构酶1 胶原诱导性关节炎类风湿关节炎糖酵解

烟酰胺磷酸核糖转移酶促进结直肠癌细胞迁移及增殖

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中华实验外科杂志 2019年第7期36卷 1218-1220页

作者：刘鹭杨熹徐丰周毅吴剑宏华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科武汉430030

目的观察烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)是否能促进结直肠癌细胞迁移及对增殖的影响.方法通过Transwell方法检测Nampt对结肠癌细胞SW480及HT29迁移的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测其对SW480中基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白水平影响;... 详细信息

目的观察烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)是否能促进结直肠癌细胞迁移及对增殖的影响.方法通过Transwell方法检测Nampt对结肠癌细胞SW480及HT29迁移的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测其对SW480中基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白水平影响;在结肠癌细胞SW480及HT29细胞中高表达Nampt质粒检测其对细胞周期及DNA合成的影响.应用SPSS 22.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD表示,组间均数比较采用t检验.结果外源性Nampt促进SW480细胞及HT29细胞的迁移,且呈浓度依赖性,同时可以升高SW480细胞内MMP-9的蛋白表达;在SW480细胞及HT29细胞中高表达Nampt质粒能够促进细胞进入S期,SW480:Nampt组51.21±0.78、空白对照组31.47±0.90、阴性对照组32.35±1.15,差异有统计学意义(t =4.566,P<0.05);HT-29:Nampt组53.40±1.39、空白对照组35.71±1.28、阴性对照组33.15±2.04,差异有统计学意义(t=5.432,P<0.05).结论 Nampt能够促进结肠癌细胞的迁移及增殖.

关键词：烟酰胺磷酸核糖转移酶结直肠癌迁移增殖

烟酰胺磷酸核糖转移酶对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖和凋亡的影响及其机制

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白血病．淋巴瘤 2021年第1期30卷 27-30页

作者：王亚茹马艳萍山西医科大学第二医院血液内科太原030001

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)基因表达对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制。方法在体外合成针对NAMPT基因的siRNA并转染U266细胞,实验分为si-NAMPT组(转染siRNA-NAMPT的U266细胞)、si-N... 详细信息

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)基因表达对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制。方法在体外合成针对NAMPT基因的siRNA并转染U266细胞,实验分为si-NAMPT组(转染siRNA-NAMPT的U266细胞)、si-NC组(转染阴性对照siRNA的U266细胞),采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后U266细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测转染后各组细胞NAMPT、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)、β-catenin表达水平。结果si-NAMPT组转染48、72 h后与si-NC组比较,对U266细胞增殖抑制作用(570 nm处吸光度值)增加(48 h:0.78±0.06比1.62±0.11;72 h:1.23±0.14比2.37±0.18),差异均有统计学意义(t=3.54,P=0.034;t=4.72,P<0.01)。si-NAMPT组与si-NC组相比,细胞早期凋亡率升高[(53.42±0.25)%比(25.98±3.18)%],差异有统计学意义(t=4.41,P<0.01)。与si-NC组相比,si-NAMPT组p-AKT、p-GSK-3β、NAMPT、β-catenin蛋白水平均降低(均P<0.05)。结论沉默NAMPT基因可明显抑制U266细胞增殖并诱导细胞凋亡,其可能通过抑制AKT-GSK-3β-β-catenin信号通路发挥作用。

关键词：多发性骨髓瘤细胞增殖细胞凋亡烟酰胺磷酸核糖转移酶

烟酰胺磷酸核糖转移酶在2型糖尿病大鼠糖代谢相关组织中的表达

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吉林大学学报（医学版） 2014年第4期40卷 739-742,I0001页

作者：冯乔王曼伊王平胡婷婷乔伟梁瑜祯冯乐平桂林医学院附属医院优生遗传科广西桂林541004 桂林医学院生物技术学院生物技术教研室广西桂林541004 广西医科大学第一附属医院糖尿病代谢中心广西南宁530001

目的:研究2型糖尿病大鼠机体主要能量代谢器官(肝脏、胰腺、肌肉和肾脏)中烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)的表达,探讨Nampt表达和分布与糖尿病发病的关系。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立SD大鼠糖尿病模型,将大鼠随机分为糖尿病组和对... 详细信息

目的:研究2型糖尿病大鼠机体主要能量代谢器官(肝脏、胰腺、肌肉和肾脏)中烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)的表达,探讨Nampt表达和分布与糖尿病发病的关系。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立SD大鼠糖尿病模型,将大鼠随机分为糖尿病组和对照组。检测大鼠空腹血糖(FBG)和胰岛素分泌水平;采用免疫组织化学Envision染色法检测大鼠肝脏、胰腺、骨骼肌和肾脏组织中Nampt蛋白表达和分布。结果:糖尿病组大鼠FBG水平明显高于对照组(P<0.01),空腹胰岛素水平明显低于对照组(P<0.01)。糖尿病组大鼠肝脏组织Nampt表达明显增高,Nampt蛋白充满全部细胞质;骨骼肌Nampt蛋白表达使整个细胞呈浓染;肾脏细胞Nampt表达主要分布在肾小管上皮细胞内,表达蛋白主要分布于胞浆;与对照组比较,糖尿病组大鼠肝脏、骨骼肌和肾脏组织Nampt阳性表达率明显增高(P<0.05或P<0.01);糖尿病组大鼠胰腺组织几乎未见Nampt表达,Nampt阳性表达率明显低于对照组(P<0.01)。结论:Nampt在糖尿病状态下大鼠主要能量代谢器官中的表达发生明显改变,且呈现出规律性变化,提示Nampt可能成为糖尿病发病过程中的一种特异的指示性标志物。

关键词：烟酰胺磷酸核糖转移酶 2型糖尿病链脲佐菌素免疫组织化学

烟酰胺磷酸核糖转移酶在初发多发性骨髓瘤患者中的表达及临床意义

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烟酰胺磷酸核糖转移酶在初发多发性骨髓瘤患者中的表达及临床意义

作者：王亚茹山西医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究通过检测烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)在初发多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达水平,探讨其与多发性骨髓瘤患者的临床分期、分型及预后的相关性,以了解其对多发性骨髓瘤患者的临床意义,进而为下一步指导临床及精准治疗提供新的... 详细信息

目的:本研究通过检测烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)在初发多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达水平,探讨其与多发性骨髓瘤患者的临床分期、分型及预后的相关性,以了解其对多发性骨髓瘤患者的临床意义,进而为下一步指导临床及精准治疗提供新的思路和方法。方法:1.收集2016年6月至2017年8月在山西医科大学第二临床医学院血液科初诊的经骨髓细胞形态学、血清蛋白电泳等实验室检查明确诊断的49例多发性骨髓瘤患者。对照者30例,为同期就医的贫血(无免疫系统、肿瘤及感染病史)患者和正常献髓者。2.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测49例初发多发性骨髓瘤患者及30例对照者的骨髓及外周血中NAMPT的表达水平。结果:1.初发组MM患者骨髓及外周血中NAMPT表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);不同分期MM患者NAMPT表达水平两两相比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同分型之间差异无统计学意义(P>0.05)。3.MM患者骨髓及外周血中NAMPT表达水平呈显著相关性(p<0.05),且外周血明显高于骨髓(p<0.01)。结论:1.NAMPT表达上调提示其参与了多发性骨髓瘤的发生、发展,且NAMPT高表达可能是多发性骨髓瘤的一种不良预后因素。2.NAMPT与MM的分期与分型无明确关系,初发MM患者骨髓及外周血中NAMPT的表达水平随着ISS分期升高而增加,不同分型MM患者NAMPT的表达水平也有一定差别,提示其可能与多发性骨髓瘤的发生、发展密切相关,有助于评估多发性骨髓瘤患者的预后,为进一步指导临床及精准治疗提供新的思路和方法。3.本研究的不足之处在于样本量较少,随访时间较短,还需包含大样本的研究及一些基础研究去证实。

关键词：烟酰胺磷酸核糖转移酶多发性骨髓瘤酶联免疫吸附测定法预后