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现代食品科技 2023年第3期39卷 102-111页

作者：陈伟哲杜李宇陈俊杰郑琦锴廖振林华南农业大学食品学院广东广州510642

该研究对从传统醋醅中分离的7株菌株进行体外益生功能检测,并研究其对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,***)寿命的影响。7株菌通过溶血性、抑菌能力、产蛋白酶、自聚集和共聚集、疏水性以及DPPH自由基清除能力检测有明显差异,筛选... 详细信息

该研究对从传统醋醅中分离的7株菌株进行体外益生功能检测,并研究其对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,***)寿命的影响。7株菌通过溶血性、抑菌能力、产蛋白酶、自聚集和共聚集、疏水性以及DPPH自由基清除能力检测有明显差异,筛选出两株斯塔贝基斯鲁梅利杆菌(Rummeliibacillus stabekisii,***)CY2与CY4具有无溶血性,产蛋白酶含量高(11.49 mm和13.24 mm),24 h自聚集与共聚集能力强,24 h细胞表面疏水性突出,DPPH自由基清除能力较好(上清液48.69%和59.22%,菌体44.00%和41.20%),进一步耐酸性实验得出CY2在pH值3.0时耐酸性显著优于CY4,且能够繁殖生长(4~8 h时存活率升高8.82%),并且CY2具有较高的LPS降解能力(46.95%),秀丽隐杆线虫(***)寿命实验表明CY2能够显著延长寿命,单独饲喂相较于OP50组,平均寿命延长1.37 d,延长率为15.91%(P潜在益生菌提供参考和依据。

关键词：醋醅潜在益生菌筛选秀丽隐杆线虫寿命

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饲料中添加潜在益生菌对凡纳滨对虾肠道消化酶活性和菌群组成的影响

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渔业科学进展 2013年第4期34卷 84-90页

作者：李桂英孙艳宋晓玲黄倢谢国驷农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛266071 胶州市胶莱镇双韩小学 266033

在基础饲料中添加不同配伍的坚强芽孢杆菌Bacillus firmus活菌(1.0×108 CFU/g)、美人鱼发光杆菌Photobacterium damsela灭活菌(1%)和溶藻弧菌Vibrio alginolyticus灭活菌(1%)作为实验饲料,基础饲料为对照组。实验所用凡纳滨对虾初始质... 详细信息

在基础饲料中添加不同配伍的坚强芽孢杆菌Bacillus firmus活菌(1.0×108 CFU/g)、美人鱼发光杆菌Photobacterium damsela灭活菌(1%)和溶藻弧菌Vibrio alginolyticus灭活菌(1%)作为实验饲料,基础饲料为对照组。实验所用凡纳滨对虾初始质量为3.2±0.26g,投喂15d后进行WSSV感染实验并继续观察14d。实验期间定期取样测定对虾肠道胃蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性变化,并分析可培养肠道细菌总数和优势菌数量。结果表明,实验组对虾肠道中胃蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性整体水平均显著高于对照组(P潜在益生菌可以提高凡纳滨对虾肠道消化酶活性并调节肠道菌群变化,利于养分的消化吸收。其中以坚强芽孢杆菌与美人鱼发光杆菌灭活菌复合组的整体效果较佳。

关键词：潜在益生菌凡纳滨对虾肠道消化酶肠道菌群

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基于微生物菌群探究难产对奶牛子宫内膜炎发病率的影响

基于微生物菌群探究难产对奶牛子宫内膜炎发病率的影响

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作者：李洁西北农林科技大学

学位级别：硕士

子宫内膜炎是奶牛常见的产后疾病,严重影响奶牛的生产性能和繁殖性能,造成严重的经济损失。产后子宫内病原菌清除延迟是造成子宫内膜炎的重要因素,而难产与子宫内膜炎的发生密切相关,但难产、子宫内膜炎以及产后子宫菌群结构三者关系尚... 详细信息

子宫内膜炎是奶牛常见的产后疾病,严重影响奶牛的生产性能和繁殖性能,造成严重的经济损失。产后子宫内病原菌清除延迟是造成子宫内膜炎的重要因素,而难产与子宫内膜炎的发生密切相关,但难产、子宫内膜炎以及产后子宫菌群结构三者关系尚未阐述清楚。本研究于2021年1-12月,收集了宁夏地区某大型奶牛场1079头奶牛的产犊状态、产犊时间、产犊数量、犊牛初生重、犊牛性别、犊牛状态、产后子宫内膜炎以及妊娠指标,通过SPSS软件分析影响难产的因素以及难产对子宫内膜炎发病率的影响。后续根据分娩时是否发生难产以及产后是否发生子宫内膜炎进行分组,采集奶牛子宫灌洗液,通过16S r RNA基因高通量测序技术,分析难产、子宫内膜炎及子宫菌群结构之间的关系,并从测序结果中筛选出***和***两株潜在益生菌,利用标准菌株,通过细菌细胞共培养、流式细胞术和Real-time PCR等方法,在定量水平初步探索***和***对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)引起奶牛子宫内膜上皮细胞炎症反应中相关因子的影响。取得如下结果:(1)分析影响难产的因素,发现产犊月份,犊牛初生重,产犊数量,犊牛性别和犊牛存活状态与难产的发生显著相关,而胎次与难产的发生无相关性。其中:产犊时间表明,12-1月份为难产高发季节;产犊数量表明,与产单胎奶牛相比,双胎奶牛难产率较高;犊牛初生重表明,体重超50 kg的奶牛难产等级增加;犊牛性别和存活状态表明,产母犊的奶牛更容易自然分娩,而发生死产的奶牛容易发生难产。此外,随着难产等级的增加,受胎率呈现下降趋势,而难产对配种次数和空怀天数无影响。难产的发生导致子内膜炎的患病率上升,且随着难产等级的增加,子宫内膜炎的发病率逐渐增加。(2)为研究难产、子宫内膜炎以及微生物菌群的关系,本研究在产后28 d和产后45 d收集难产组健康奶牛(DH)和子宫内膜炎奶牛(DE)、非难产组健康奶牛(NDH)和子宫内膜炎奶牛(NDE)的子宫灌洗液样本40份。通过Illumina Hi Seq平台进行16S扩增子测序,分类操作单元(Operational Taxonomic Unit,OTUs)结果显示,健康组的OTU数量均显著高于子宫内膜炎组,随着产后天数的延长,健康组的特有OTUs数量逐渐降低,而子宫内膜炎组的特有OTUs数量逐渐增加;Beta多样性分析提示,产后28 d,健康奶牛组和子宫内膜炎奶牛组样本间的多样性指数均存在显著性差异;物种组成结果显示,各组相对丰度排名前五细菌属的占比随产后天数的延长逐渐降低,非难产健康奶牛组从25.18%降为16.60%,非难产子宫内膜炎奶牛组从73.31%降为29.60%,但难产健康奶牛组从44.18%降为35.44%,难产子宫内膜炎组从66.16%仅降为62.92%,因此,难产造成奶牛子宫微生物群异质性的丧失和细菌丰富度的减少;通过Wilcox检验发现,难产及非难产健康组奶牛子宫内***和***菌株的丰度均高于子宫内膜炎组。(3)利用奶牛子宫内膜上皮细胞,通过细菌细胞共培养,评估***和***菌株对子宫内膜上皮细胞的影响,以及对LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎症反应的影响。流式结果显示,***和***菌株对子宫内膜上皮细胞的凋亡无显著影响,Real-time PCR结果显示,***和***菌株显著降低了LPS引起的IL-1β、IL-6、IL-8在m RNA水平的上升。综上所述,12-1月份为难产高发季节,随着难产等级的增加,子宫内膜炎的发病率逐渐增加,受胎率逐渐降低。难产造成的奶牛子宫微生物群异质性的丧失和细菌丰度的减少,是子宫内膜炎患病的风险因素。此外,从m RNA水平初步探索***和***菌株对LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎症因子具有抑制作用,为子宫内膜炎的防控提供新的思路以及为下一步临床治疗奠定理论基础。继续探寻***和***成为潜在益生菌的更多证据,验证其对奶牛子宫内膜炎的防控作用,是我们下一阶段的工作目标。

关键词：奶牛子宫内膜炎难产因素子宫微生物群 16S扩增子测序潜在益生菌

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玫瑰酱中微生物多样性分析及优势菌群的鉴定

玫瑰酱中微生物多样性分析及优势菌群的鉴定

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作者：夏傲喃新疆大学

学位级别：硕士

玫瑰酱是中国传统发酵食品,含有丰富的营养物质,一般在开放的环境中加工,没有任何加热或杀菌处理,常含有丰富的微生物。我国的玫瑰酱产地众多,但没有统一的生产标准,不同批次的自然发酵玫瑰酱产品难以保持稳定一致的风味和品质。微生物... 详细信息

玫瑰酱是中国传统发酵食品,含有丰富的营养物质,一般在开放的环境中加工,没有任何加热或杀菌处理,常含有丰富的微生物。我国的玫瑰酱产地众多,但没有统一的生产标准,不同批次的自然发酵玫瑰酱产品难以保持稳定一致的风味和品质。微生物对发酵食品的理化性质以及风味有至关重要的影响,为了进一步了解玫瑰酱中微生物多样性、菌群分布和潜在益生菌,本文通过高通量测序技术明确玫瑰酱中微生物多样性和菌群结构,并结合传统方法筛选、鉴定玫瑰酱中优势微生物和潜在益生菌,利用潜在益生菌进行玫瑰酱发酵,并对玫瑰酱理化指标和风味物质进行分析,评估该菌株的发酵性能,尝试推动玫瑰酱生产菌株标准化,为玫瑰酱标准化生产打下基础。本研究主要得到以下结论:1、通过高通量测序对我国9种玫瑰酱中的微生物多样性进行分析,结果显示,在属水平上,玫瑰酱中优势细菌属为假单胞菌属（Pseudomonas）、罗森伯氏菌属（Rosenbergiella）、泛菌属（Pantoea）、伯克氏菌属（Burkholderia）和劳尔氏菌属（Ralstonia）。优势真菌属为酵母属（Zygosaccharomyces）,未分类属,葡萄孢属（Botrytis）,间座壳属（Diaporthe）和嗜热真菌属（Thermomyces）。玫瑰酱中真菌的丰度比细菌丰度分布更为均匀多样。与其他发酵食品相比,发酵玫瑰酱中微生物在门水平上差异不明显,在属水平上差异较大。2、根据高通量测序和已测微生物基因组的16S r RNA基因序列,本研究利用PICRUSt对发酵玫瑰酱细菌群落的功能基因进行预测,发现玫瑰酱中细菌许多功能基因与氨基酸代谢、膜转运、能量代谢、细胞转运和信号传导、碳水化合物代谢有关。3、本研究从9种自然玫瑰酱中分离出61株乳酸菌,16株酵母菌。乳酸菌经过p H、胆盐、模拟人工胃肠液,抗生素耐受性实验,筛选出一株优良的潜在益生菌*** MP13,测定该菌株的最适生长温度为37℃,并对高糖渗透压具有很好的耐受性。4、利用*** MP13菌株作为发酵剂进行玫瑰酱发酵并与不加菌自然发酵的玫瑰酱进行比较,发现利用MP13菌株作为发酵剂增加了玫瑰酱中花青素、总黄酮、总酚含量、并提高了抗氧化性能,增加了玫瑰酱的附加值。5、通过GC-IMS技术对加*** MP13菌株和不加菌自然发酵的两种玫瑰酱进行风味比较。共检测到50种挥发性有机化合物,包括醇13种、酮9种、醛17种、酯3种、醚2种、吡嗪1种及其他5种化合物。与自然发酵的玫瑰酱相比,添加了MP13菌株作为发酵剂的玫瑰酱中部分醇类（E-2-己烯醇、戊醇和2-甲基丁醇）和醛类（苯乙醛、苯甲醛、3-甲基丁醛、2-甲基丁醛、戊醛、己醛、庚醛和辛醛）含量减少,而部分酮类（3-羟基-2-丁酮、2,3-丁二酮、2-丁酮和2-戊酮）、醇类（3-甲基丁醇、2-苯乙醇和己醇）和酯类（乙酸乙酯、已酸乙酯）含量增加,改善了玫瑰酱风味。

关键词：玫瑰酱微生物多样性优势菌群潜在益生菌风味化合物

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