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温下方乙酸乙酯提取部位调控CAFs介导的Hh-Gli1通路抑制A549移植瘤生长的作用机制

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中华中医药杂志 2021年第9期36卷 5499-5504页

作者：王盟毕倩宇季旭明浙江中医药大学基础医学院杭州310053 济宁市第一人民医院医务部济宁272000 浙江中医药大学基础医学院方剂教研室杭州310053

目的:观察温下方乙酸乙酯提取部位(WFEA)对肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)介导的Hh-Gli1通路的影响,探讨其抑制A549移植瘤生长的作用机制。方法:建立肺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为A549组、模型组、顺铂组,WFEA高、中、低剂量组和环巴... 详细信息

目的:观察温下方乙酸乙酯提取部位(WFEA)对肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)介导的Hh-Gli1通路的影响,探讨其抑制A549移植瘤生长的作用机制。方法:建立肺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为A549组、模型组、顺铂组,WFEA高、中、低剂量组和环巴胺组,药物干预5周。采用超高压液相色谱-飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS)分析WFEA的主要化学成分;采用小动物活体成像、HE染色、免疫组化等方法检测WFEA在A549移植瘤裸鼠体内的抗肿瘤活性;采用Western blot法和实时PCR法检测CAFs介导的Hh-Gli1信号通路水平。结果:采用UPLC-Q-TOF-MS方法共定性出WFEA的15种化学成分;与模型组比较,WFEA各给药组裸鼠肿瘤的光子强度均有不同程度的降低(P<0.05,P<0.01)。模型组HE染色可见细胞排列紧密,瘤细胞形态不规则,未见明显的坏死,WFEA各给药组肿瘤细胞均有不同程度坏死,胞浆破裂,细胞膜不完整;与模型组比较,WFEA各给药组FN蛋白表达以及PTCH1、SMO和Gli1的蛋白和mRNA表达水平均有不同程度的降低(P<0.01,P<0.05)。结论:WFEA对A549移植瘤有一定的抑制作用,其作用机制可能与抑制CAFs介导的Hh-Gli1信号通路有关。

关键词：温下方肿瘤相关成纤维细胞(CAFs) 超高压液相色谱-飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS) Hh-Gli1 乙酸乙酯提取部位 A549移植瘤肺癌

温下方含药血清对A549／DDP细胞内erbB-2、Topo-Ⅱ表达及铂含量的影响

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新中医 2008年第5期40卷 101-102页

作者：欧阳兵季旭明王春燕张引强刘恒山东中医药大学山东济南250014

目的:观察温下方不同剂量含药血清对A549/DDP细胞内表皮生长因子受体(erbB-2),DNA拓扑异构酶-Ⅱ(Topo-Ⅱ)表达及铂含量的影响。方法:将对照血清及不同刺量温下方含药血清作用于A549/DDP细胞.用免疫荧光技术、激光共聚焦显微镜检测erbB-2... 详细信息

目的:观察温下方不同剂量含药血清对A549/DDP细胞内表皮生长因子受体(erbB-2),DNA拓扑异构酶-Ⅱ(Topo-Ⅱ)表达及铂含量的影响。方法:将对照血清及不同刺量温下方含药血清作用于A549/DDP细胞.用免疫荧光技术、激光共聚焦显微镜检测erbB-2、Topo-Ⅱ表达.用激光流式细胞仪技术检测细胞内顺铂浓度。结果:温下方含药血清能明显降低erbB-2表达(P温下方可能通过降低耐药细胞损伤后自我修复能力而逆转其耐药。

关键词：温下方药理学 A549/DDP 铂基因表达调控

温下方逆转MCF-7/ADM细胞耐药及诱导凋亡作用

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中国中医基础医学杂志 2005年第1期11卷 19-21,24页

作者：欧阳兵季旭明杨勇李文华山东中医药大学山东济南250014

目的 :研究自拟温下方逆转MCF 7 ADM细胞耐药、诱导凋亡作用。方法 :MTT法研究温下方含药血清对MCF 7 ADM耐药逆转作用 ,流式细胞术测定细胞内药物浓度及耐药相关蛋白P gp、凋亡调控蛋白p5 3、bcl 2的表达 ,激光共聚焦显微镜技术检测细... 详细信息

目的 :研究自拟温下方逆转MCF 7 ADM细胞耐药、诱导凋亡作用。方法 :MTT法研究温下方含药血清对MCF 7 ADM耐药逆转作用 ,流式细胞术测定细胞内药物浓度及耐药相关蛋白P gp、凋亡调控蛋白p5 3、bcl 2的表达 ,激光共聚焦显微镜技术检测细胞内钙浓度及线粒体膜电位。结果 :温下方含药血清可提高MCF 7 ADM对化疗药的敏感性 ,增加胞内化疗药物浓度 ,使P gp表达下降 ,p5 3表达增高 ,胞内钙浓度及线粒体膜电位均降低。结论 :温下方可部分逆转MCF 7 ADM耐药 ,其逆转机制可能与诱导耐药细胞凋亡密切相关。

关键词：温下方逆转耐药诱导凋亡乳腺癌耐药细胞株

温下方含药血清诱导A549/DDP细胞凋亡及对Bcl-2,Bax,p53蛋白表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2011年第12期17卷 123-126页

作者：季旭明欧阳兵吴智春于华芸王春燕李文华山东中医药大学济南250355

目的:研究温下方含药血清诱导人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP凋亡及对Bcl-2,Bax,p53蛋白表达的影响。方法:制备温下方含药血清,高效液相色谱法(HPLC)定性检测含药血清中人参皂苷Rb1、大黄素和乌头碱。A549/DDP细胞分为DDP干预组,含药血清+... 详细信息

目的:研究温下方含药血清诱导人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP凋亡及对Bcl-2,Bax,p53蛋白表达的影响。方法:制备温下方含药血清,高效液相色谱法(HPLC)定性检测含药血清中人参皂苷Rb1、大黄素和乌头碱。A549/DDP细胞分为DDP干预组,含药血清+DDP干预组,正常血清+DDP干预组。孵育24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜检测Bcl-2,Bax及p53蛋白表达。结果:HPLC结果显示含药血清中含有人参皂苷Rb1、大黄素及乌头碱。含药血清作用后,与DDP干预组比较,含药血清+DDP干预组细胞凋亡率增高至(21.82±3.27)%(P温下方含药血清明显诱导A549/DDP细胞凋亡,显著降低Bcl-2蛋白表达,提高Bax,p53蛋白表达,可能从诱导耐药细胞凋亡角度逆转耐药。

关键词：温下方含药血清人肺腺癌耐药细胞株凋亡 B细胞淋巴瘤/白血病-2 Bcl-2相关x蛋白 p53

基于PI3K/Akt信号通路探讨温下方乙酸乙酯部位对A549细胞移植瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用

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中成药 2023年第10期45卷 3247-3251页

作者：王盟李慧吕传峰郑斌济宁市第一人民医院山东济宁272000

目的探讨温下方乙酸乙酯部位经调控PI3K/Akt信号通路抑制A549细胞移植瘤生长的作用及机制。方法建立人肺腺癌A549细胞移植瘤裸鼠模型,随机分为模型组、阳性对照组(顺铂注射液,2.0 mg/kg)和温下方高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg)... 详细信息

目的探讨温下方乙酸乙酯部位经调控PI3K/Akt信号通路抑制A549细胞移植瘤生长的作用及机制。方法建立人肺腺癌A549细胞移植瘤裸鼠模型,随机分为模型组、阳性对照组(顺铂注射液,2.0 mg/kg)和温下方高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg),每组5只,药物干预5周后,取裸鼠肿瘤,称定质量并计算抑瘤率,HE染色观察裸鼠肿瘤病理形态学变化,TUNEL染色检测裸鼠肿瘤凋亡情况,Western blot法检测裸鼠肿瘤组织Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K、MMP-3、caspase-3、Bcl-2蛋白表达。结果与模型组比较,顺铂组和温下方各剂量组肿瘤质量和瘤组织p-Akt、p-PI3K、MMP-3、Bcl-2蛋白表达降低(P温下方乙酸乙酯部位可抑制裸鼠A549细胞移植瘤的生长,其机制可能与调控PI3K/Akt信号通路有关。

关键词：温下方乙酸乙酯部位人肺腺癌A549细胞移植瘤 PI3K/Akt信号通路

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温下方抑瘤作用及对免疫功能的影响

中医药信息 2003年第6期20卷 48-49页

作者：季旭明欧阳兵李文华黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 山东中医药大学山东济南250014

目的 :研究温下方对肿瘤的抑制和对免疫功能的影响及与化疗药合并的增效减毒作用。方法 :以小鼠移植性肿瘤为模型 ,测定其抑瘤率、血象变化和免疫功能指标。结果 :本方对小鼠S180和Heps具有明显的抑瘤作用 ,其抑瘤率可至 37%和 39% ,能... 详细信息

目的 :研究温下方对肿瘤的抑制和对免疫功能的影响及与化疗药合并的增效减毒作用。方法 :以小鼠移植性肿瘤为模型 ,测定其抑瘤率、血象变化和免疫功能指标。结果 :本方对小鼠S180和Heps具有明显的抑瘤作用 ,其抑瘤率可至 37%和 39% ,能减轻CTX引起的WBC、RBC的下降 ,提高免疫器官的质量及血清中IL - 6和TNF -a的含量。结论 :温下方可明显抑制肿瘤生长 ,提高机体免疫功能 ,与化疗药合用具增效减毒之功。

关键词：温下方抑瘤 IL—6 TNF—α 方剂研究

温下方含药血清对肺腺癌耐药细胞内GSH、GST-π的影响

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山东中医药大学学报 2010年第1期34卷 67-69页

作者：季旭明江涛欧阳兵王春燕赵启韬山东中医药大学山东济南250355

目的:研究温下方含药血清对肺癌耐药细胞内谷胱苷肽(GSH)、谷胱苷肽转移酶-π(GST-π)及顺铂(DDP)含量的影响。方法:实验动物分为3组,灌服给药,制备温下方大剂量含药血清,温下方小剂量含药血清,正常血清。又将细胞分为4组,DDP干预组,大... 详细信息

目的:研究温下方含药血清对肺癌耐药细胞内谷胱苷肽(GSH)、谷胱苷肽转移酶-π(GST-π)及顺铂(DDP)含量的影响。方法:实验动物分为3组,灌服给药,制备温下方大剂量含药血清,温下方小剂量含药血清,正常血清。又将细胞分为4组,DDP干预组,大剂量含药血清+DDP干预组,小剂量含药血清+DDP干预组,正常血清+DDP干预组,分别孵育人肺腺癌耐药细胞株(A549/DDP)24h后,检测细胞内GSH含量及GST-π的表达,细胞内顺铂浓度。结果:A549/DDP细胞经温下方大、小剂量含药血清作用后,与对照组比较,细胞内GSH含量降低至3.55±0.65,3.54±0.74nmol/106(P温下方含药血清能降低肺腺癌耐药细胞内GSH含量及GST-π的表达,提高耐药细胞内铂含量,从而增强耐药细胞对DDP的敏感性而逆转耐药。

关键词：温下方含药血清人肺腺癌耐药细胞株谷胱苷肽谷胱苷肽转移酶-π 多药耐药

温下方逆转A549/DDP细胞的多药耐药及对膜表面蛋白表达的影响

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中国药物与临床 2006年第12期6卷 885-888,T0001页

作者：季旭明欧阳兵王春燕张引强江涛山东中医药大学基础医学院细胞生物实验室济南250014

目的运用血清药理学方法,体外研究温下方对A549/DDP细胞多药耐药的逆转作用及机制。方法正常血清及不同浓度的温下方含药血清作用于A549/DDP细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测温下方含药血清对A549/DDP细胞的逆转作用;运用免疫荧光技术,... 详细信息

目的运用血清药理学方法,体外研究温下方对A549/DDP细胞多药耐药的逆转作用及机制。方法正常血清及不同浓度的温下方含药血清作用于A549/DDP细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测温下方含药血清对A549/DDP细胞的逆转作用;运用免疫荧光技术,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测肺耐药相关蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和P-糖蛋白(P-gp)的表达。结果温下方含药血清能明显逆转A549/DDP细胞的多药耐药,增敏倍数为2～2.5倍。并可明显降低P-gp、LRP、MRP蛋白表达。结论温下方通过降低P-gp、LRP、MRP的表达以增强A549/DDP对化疗药的敏感性,逆转肺腺癌细胞的多药耐药。

关键词：细胞系肿瘤糖蛋白温下方多药耐药相关蛋白

温下方抑制肺癌A549细胞增殖及对PCNA Rb CyclinD1表达的影响

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中华中医药学刊 2010年第4期28卷 721-723页

作者：季旭明欧阳兵王春燕山东中医药大学山东济南250014

目的:研究温下方对肺癌A549细胞增殖的抑制作用及对PCNA、Rb、CyclinD1表达的影响。方法:正常血清及不同浓度的温下方含药血清作用于A549细胞,MTT法检测含药血清对A549细胞的抑制作用,激光共聚焦显微镜观察PCNA、Rb、CyclinD1的表达。结... 详细信息

目的:研究温下方对肺癌A549细胞增殖的抑制作用及对PCNA、Rb、CyclinD1表达的影响。方法:正常血清及不同浓度的温下方含药血清作用于A549细胞,MTT法检测含药血清对A549细胞的抑制作用,激光共聚焦显微镜观察PCNA、Rb、CyclinD1的表达。结果:温下方大、小剂量含药血清组作用24h抑制率为29.85%、25.90%,作用36h抑制率为42.02%、35.10%;PCNA表达降低至3.08±0.97、3.15±0.88,CyclinD1表达降低至2.65±0.83、2.70±0.79。结论:温下方可明显抑制肺腺癌细胞的增殖,明显降低PCNA、CyclinD1表达。

关键词：温下方 A549 PCNA Rb CyclinDl