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淀粉样纤维结构的侧链红外光谱探针研究

光谱学与光谱分析 2016年第S1期36卷 52-53页

作者：马刚高亚超邹烨李昊一河北大学化学与环境科学学院药物化学与分子诊断教育部重点实验室河北保定071002

探讨了如何应用侧链红外光谱探针技术研究淀粉样纤维的微观结构。首先对淀粉样多肽和蛋白的侧链红外光谱探针标记方法进行了探讨。之后,我们深入讨论了如何通过对探针光谱区和酰胺Ⅰ带光谱区的联合分析构建淀粉样纤维的微观结构模型。... 详细信息

探讨了如何应用侧链红外光谱探针技术研究淀粉样纤维的微观结构。首先对淀粉样多肽和蛋白的侧链红外光谱探针标记方法进行了探讨。之后,我们深入讨论了如何通过对探针光谱区和酰胺Ⅰ带光谱区的联合分析构建淀粉样纤维的微观结构模型。我们还对应用红外光谱指认平行与反平行的beta-折叠结构的光谱判据以及指认红外光谱探针微观水化程度的光谱判据进行了论述。

关键词：淀粉样纤维红外光谱红外光谱探针淀粉样多肽淀粉样蛋白

PSB0739抑制精液来源的淀粉样纤维形成

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南方医科大学学报 2018年第11期38卷 1338-1343页

作者：蓝燕杨梓超刘涵程宏彦刘叔文谭穗懿南方医科大学药学院广东广州510515

目的探究PSB0739对精液来源的淀粉样纤维形成的抑制作用。方法 440μmol/L的PAP248-286多肽分别与不同浓度的化合物孵育,在不同时间点分别取样,用刚果红染色法、透射电子显微镜法检测药物对淀粉样纤维形成的影响;通过病毒感染实验分析在... 详细信息

目的探究PSB0739对精液来源的淀粉样纤维形成的抑制作用。方法 440μmol/L的PAP248-286多肽分别与不同浓度的化合物孵育,在不同时间点分别取样,用刚果红染色法、透射电子显微镜法检测药物对淀粉样纤维形成的影响;通过病毒感染实验分析在PSB0739作用下,精液淀粉样纤维促进病毒感染的能力;利用Zeta电势仪检测PSB0739对成熟的精液来源性淀粉样纤维表面电荷的影响;MTT法检测PSB0739对Hela细胞的毒性作用,以评价磺酸类化合物PSB073的体外安全性;体外细胞病毒感染实验检测PSB0739抗HIV-1的活性。结果 PSB0739在体外能有效抑制精液淀粉样纤维的形成,在48 h内,220μmol/L的PSB0739能抑制440μmol/L的PAP248-286形成淀粉样纤维SEVI;透射电子显微镜可以直接观察到220μmol/L的PSB0739就能有效抑制PAP248-286形成的淀粉样纤维;PSB0739能拮抗SEVI介导的增强病毒感染的作用;体外220μmol/L的PSB0739能逆转SEVI携带的正电荷,差异均有统计学意义(P0.05);PSB0739能直接抑制HIV的能力与浓度正相关,PSB0739具有抗HIV作用,其IC50为21.77±5.15μmol/L。结论 PSB0739能抑制精液来源的淀粉样纤维的形成。

关键词： PSB0739 淀粉样纤维人类免疫缺陷病毒性传播精液

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乳酸抑制精液来源淀粉样纤维的形成

南方医科大学学报 2017年第7期37卷 907-913页

作者：李锦清宋亚丽寻添荣谭穗懿刘叔文南方医科大学药学院广东广州510515 南方医科大学南方医院妇产科生殖医学中心广东广州510515

目的探究乳酸对精液来源的淀粉样纤维形成的抑制作用。方法 2 mg/m L的PAP248-286多肽与不同浓度乳酸(4、2、1、0.5、0.25、0.125 mg/m L)分别孵育,在不同时间点取样,用硫磺素T和刚果红染色法分别检测淀粉样纤维形成的过程;采用圆二色... 详细信息

目的探究乳酸对精液来源的淀粉样纤维形成的抑制作用。方法 2 mg/m L的PAP248-286多肽与不同浓度乳酸(4、2、1、0.5、0.25、0.125 mg/m L)分别孵育,在不同时间点取样,用硫磺素T和刚果红染色法分别检测淀粉样纤维形成的过程;采用圆二色谱法检测乳酸对PAP248-286形成β-片层结构的影响;采用透射电子显微镜观察乳酸对淀粉样纤维形态的影响;用病毒感染实验,检测与乳酸孵育的不同时间点,精液淀粉样纤维促进病毒感染的能力;将2 mg/m L的PAP248-286多肽与不同浓度的健康女性阴道分泌液孵育后,用硫磺素T和刚果红染色法评价阴道分泌液抑制精液淀粉样纤维形成的作用。结果乳酸体外能浓度依赖性地抑制精液淀粉样纤维的形成,在48 h内,0.5 mg/m L乳酸能够抑制2 mg/m L的淀粉样纤维SEVI的形成;在48 h内,1 mg/m L的乳酸能抑制精液淀粉样纤维(2 mg/m L)的β-片层结构的形成,透射电子显微镜观察到1 mg/m L的乳酸能完全抑制2 mg/m L PAP248-286聚合形成淀粉样纤维;与乳酸孵育的多肽PAP248-286,失去了促进病毒感染的能力;阴道分泌液浓度依赖性地抑制SEVI的形成,48 h内,2 mg/m L的PAP248-286在67%阴道分泌液存在时几乎无SEVI生成。结论乳酸能抑制精液来源的淀粉样纤维的形成。

关键词：乳酸淀粉样纤维人类免疫缺陷病毒性传播阴道分泌液

人工设计GAV-6短肽自组装形成淀粉样纤维的研究

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生物医学工程学杂志 2014年第3期31卷 686-690页

作者：张杰唐成康陈咏竹邢志华邱峰四川大学华西医院卫生部移植工程与移植免疫重点实验室成都610041 四川大学华西医院再生医学研究中心成都610041 四川大学华西医院期刊社成都610041

淀粉样纤维是一类与人类疾病密切相关的蛋白异常聚集体,从一些核心短肽序列入手研究天然蛋白形成淀粉样纤维的分子机制是近年来的研究热点。本文设计了一个由甘氨酸(G)、丙氨酸(A)、缬氨酸(V)三种疏水性氨基酸构成的六肽GGAAVV(GAV-6),... 详细信息

淀粉样纤维是一类与人类疾病密切相关的蛋白异常聚集体,从一些核心短肽序列入手研究天然蛋白形成淀粉样纤维的分子机制是近年来的研究热点。本文设计了一个由甘氨酸(G)、丙氨酸(A)、缬氨酸(V)三种疏水性氨基酸构成的六肽GGAAVV(GAV-6),并研究其形成淀粉样纤维的能力。以原子力显微镜(AFM)和动态光散射(DLS)为手段的纳米结构表征发现,GAV-6能够在水溶液中自组装形成光滑不分叉的纳米纤维。通过刚果红染色/结合实验和硫磺素T结合实验,我们证实了这些纳米纤维具有典型的淀粉样纤维的特征。上述结果表明,人工设计的GAV-6短肽能够自组装形成淀粉样纤维,这可能为今后深入研究天然蛋白形成淀粉样纤维的机制提供一种简单的模式分子。

关键词：短肽自组装淀粉样纤维胶束

淀粉样纤维-EGCG水凝胶的构建及其缓解结肠炎症和调节肠道菌群的作用研究

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淀粉样纤维-EGCG水凝胶的构建及其缓解结肠炎症和调节肠道菌群的...

作者：于诗婕南京农业大学

学位级别：硕士

炎症性肠病(IBD)是一种伴随终身的胃肠道慢性炎症性疾病,已成为全球公共卫生面临的重大挑战之一。应用膳食或食品功能成分干预可能是一种预防或治疗IBD理想方法,可以改善并缓解结肠炎症状,同时减少了常规药物的不良反应。绿茶中含量最... 详细信息

炎症性肠病(IBD)是一种伴随终身的胃肠道慢性炎症性疾病,已成为全球公共卫生面临的重大挑战之一。应用膳食或食品功能成分干预可能是一种预防或治疗IBD理想方法,可以改善并缓解结肠炎症状,同时减少了常规药物的不良反应。绿茶中含量最高、活性最强的儿茶素是表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG)。EGCG具有抑制炎症,促进肠道健康的潜力,从而有望改善IBD症状。然而由于茶多酚的不稳定性和生物利用度差等因素,其在食品加工、功能性食品和医药等领域的应用受到了限制。目前已经开发了一些以纳米材料为载体的口服胃肠道递送系统用于提高EGCG的稳定性和生物利用度,但是绝大多数载体的负载能力较低,在体内动物研究中需要重复给药才能达到合适的功效。将蛋白质组装成具有高长径比的柔性生物胶体(淀粉样纤维),已成为高端技术材料和生物纳米技术中的新的模板化策略。同时,蛋白质淀粉样纤维是人们日常饮食的组分之一。故本研究以溶菌酶(HEWL)淀粉样纤维为模板,通过加入EGCG简单地混合,制备了一种3D超分子水凝胶,极大地提高了 EGCG的载量。首先对该水凝胶进行了表征,研究了多酚与淀粉样纤维之间的相互作用及其所形成的软物质跨多尺度的演变规律;然后对包封后的EGCG稳定性、胃肠道释放和水凝胶体内胃肠道分布情况进行了分析;最后研究了该水凝胶对结肠炎症的缓解作用及其对相应的肠道菌群的调节作用。主要研究结果如下:***淀粉样纤维-EGCG水凝胶的构建和结构表征本节应用酸热处理制得了 HEWL淀粉样纤维,通过向其中加入EGCG,简单地混合,形成了 3D超分子水凝胶,其中EGCG的载量可高达4.0 wt%,极大地提高了多酚在输送体系中的载量。该水凝胶在偏振光条件下显示半透明及双折射现象,表明凝胶的形成没有影响蛋白质淀粉样纤维的向列液晶结构,没有出现相分离。此外进一步地从分子相互作用和多尺度结构演变的角度探究了水凝胶的形成机制。多酚直接与HEWL淀粉样纤维结合,平衡解离常数(Kd)为3.41×10-7,表明两者具有很强的亲和力;微观结构分析发现,EGCG吸附到淀粉样纤维表面,并且不断地沉积,形成复合纳米丝,其进一步自组装成3D超分子水凝胶。流变学实验表明,当EGCG浓度从0.5 wt%增大到4.0 wt%时,水凝胶强度也逐渐增加。***淀粉样纤维-EGCG水凝胶中的EGCG稳定性、体外模拟胃肠道消化和体内胃肠道分布以及长期口服毒性研究本节进一步研究了淀粉样纤维-EGCG水凝胶的性能,首先制备了 pH 6.0的淀粉样纤维-EGCG水凝胶,研究EGCG的热稳定性和储存稳定性。结果表明在水凝胶中包封后,EGCG储存一段时间以及在不同温度下热处理后的稳定性显著增强。通过体外模拟胃肠道消化和体内MicroPET/CT成像实验,研究了水凝胶的消化及肠道分布情况,结果表明淀粉样纤维-EGCG水凝胶能够抵抗胃和小肠环境的消化,有效避免了EGCG在胃和小肠中的损失,并且该水凝胶可以较长时间保留在肠道内,特别是在结肠内,使其成为靶向肠道炎症的理想有效载荷。最后对正常小鼠进行长期口服干预评价了其体内肝肾毒性。结果表明,长期口服该水凝胶对小鼠不会产生毒性,并且可以显著提高肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平,在一定程度上增强机体抗氧化活性。***淀粉样纤维-EGCG水凝胶对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎症的缓解作用本节以2%葡聚糖硫酸钠(DSS)处理7天成功诱导的急性结肠炎小鼠为模型,研究了口服淀粉样纤维-EGCG水凝胶对结肠炎小鼠的治疗作用。结果表明,该水凝胶能够显著缓解小鼠结肠炎症,恢复小鼠体重、降低疾病活动指数(DAI)评分、改善结肠形态并抑制结肠缩短,显著降低血清中炎症因子的分泌。同时,淀粉样纤维-EGCG水凝胶能够修复肠上皮细胞损伤,显著提高肠道组织中紧密连接蛋白Claudin-1和Occludin水平,提高了肠道屏障完整性。此外,口服该水凝胶还可以有效抑制结肠组织中的炎症相关基因过表达。结合上一节可知,淀粉样纤维-EGCG水凝胶可以长时间保留在肠道中并覆盖表皮,直接充当保护屏障,阻止肠腔病原体和细菌的入侵。同时,水凝胶中的多酚EGCG可能有助于通过干扰肠上皮细胞中的核因子κB(NF-κB)信号来恢复上皮细胞损伤并修复受损的屏障完整性,进而减轻肠道炎症反应。***淀粉样纤维-EGCG水凝胶对葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎小鼠的肠道微生物的调节作用本节以DSS诱导的结肠炎小鼠为模型,通过盲肠内容物中短链脂肪酸(SCFAs)的测定以及肠道微生物高通量测序,研究了水凝胶对结肠炎小鼠肠道菌群组成和SCFAs的影响。结果表明,该水凝胶能够显著改善肠道微生物群失调,减少了在结肠炎中富集的微生物,特别是变形菌门中的兼性厌氧菌属(Aestuariispira和Escheri

关键词：淀粉样纤维 EGCG 自组装水凝胶结肠炎肠道微生物

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食源性蛋白质淀粉样纤维的研究进展

中国调味品 2022年第11期47卷 195-199,220页

作者：张丽娜殷静霖熊舟翼熊汉国华中农业大学食品科学与技术学院武汉430070 武汉农业科学技术研究院农产品加工中心武汉430200

食源性蛋白质天然、无毒、可降解的优良性质使基于食源性蛋白质的自组装体系在食品加工和应用中具有一定的潜力。文章介绍了淀粉样纤维的形成机制、影响因素、形成方式和表征方法,以期推动食源性蛋白质自组装纤维在食品应用和材料科学... 详细信息

食源性蛋白质天然、无毒、可降解的优良性质使基于食源性蛋白质的自组装体系在食品加工和应用中具有一定的潜力。文章介绍了淀粉样纤维的形成机制、影响因素、形成方式和表征方法,以期推动食源性蛋白质自组装纤维在食品应用和材料科学方面的深入研究,为其在开发功能性食品和建立复杂食品蛋白体系中的应用提供理论依据。

关键词：食源性蛋白质淀粉样纤维形成机制影响因素表征方法

大豆蛋白淀粉样纤维制备、功能特性及应用研究进展

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食品科学 2024年

作者：朱秀清韩田露刘纪元郭汝杞朱颖黄雨洋刘琳琳哈尔滨商业大学食品工程学院黑龙江省普通高校食品科学与工程重点实验室黑龙江省谷物食品与谷物资源综合加工重点实验室

大豆蛋白具有较高的营养价值、优异的功能特性，在食品工业中备受关注，常被用于改善食品的加工性能和提高食品的营养价值。然而天然大豆蛋白的功能特性发挥有限，无法满足食品加工的需求，大豆蛋白改性成为研究热点。热、高压、酶法等... 详细信息

大豆蛋白具有较高的营养价值、优异的功能特性，在食品工业中备受关注，常被用于改善食品的加工性能和提高食品的营养价值。然而天然大豆蛋白的功能特性发挥有限，无法满足食品加工的需求，大豆蛋白改性成为研究热点。热、高压、酶法等改性技术得到了广泛应用并取得了突破。大豆蛋白单体或多肽可以在酸和高温的条件下进行自组装，随后聚集成淀粉样纤维，改变了大豆蛋白溶解性、凝胶性等。为了更好的了解大豆蛋白淀粉样纤维的研究进展，本文综述了大豆蛋白淀粉样纤维的制备方法、形成机制，并分析了处理条件对大豆蛋白淀粉样纤维的影响，概述了大豆蛋白淀粉样纤维的溶解性、凝胶性、起泡性、乳化性等功能特性，总结了大豆蛋白淀粉样纤维的应用并对其未来发展进行了展望，以期为大豆蛋白淀粉样纤维在食品领域的应用提供参考。

关键词：大豆分离蛋白淀粉样纤维制备功能特性应用

蛋清溶菌酶淀粉样纤维对人神经母细胞瘤细胞的毒性

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畜牧兽医学报 2022年第8期53卷 2721-2728页

作者：白瑜王武王碧李颖冯自立陕西理工大学生物科学与工程学院陕西省资源生物重点实验室汉中723000

本研究旨在探讨一定理化条件下形成的蛋清溶菌酶淀粉样纤维对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的毒性作用。采用高温(57±0.1)℃、pH 2.0甘氨酸溶液、振荡条件下孵育100μmol·L^(-1)的蛋清溶菌酶蛋白,使其聚集成为蛋清溶菌酶淀粉样纤维;透... 详细信息

本研究旨在探讨一定理化条件下形成的蛋清溶菌酶淀粉样纤维对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的毒性作用。采用高温(57±0.1)℃、pH 2.0甘氨酸溶液、振荡条件下孵育100μmol·L^(-1)的蛋清溶菌酶蛋白,使其聚集成为蛋清溶菌酶淀粉样纤维;透射电子显微镜观察蛋清溶菌酶淀粉样纤维的超微结构,ANS荧光法测定纤维的疏水性,圆二色谱法测定并计算纤维的二级结构含量;将此纤维作用于培养的SH-SY5Y神经细胞,MTT法检测细胞活力,核染色法检测细胞凋亡状况。透射电镜结果显示,蛋清溶菌酶在孵育4d后形成了呈短杆状超微结构的淀粉样纤维;与天然蛋清溶菌酶蛋白相比,纤维的疏水性和二级结构β折叠含量均显著提高;且1~3μmol·L^(-1)纤维作用于SH-SY5Y细胞12、24和48h均产生了显著的毒性作用(P纤维作用细胞12h时的细胞活力分别为75.16%±15.51%、67.54%±12.13%和67.89%±10.26%,作用24h的细胞活力分别为75.78±13.01%、58.41%±5.55%和61.90%±8.94%,作用48h的细胞活力分别为71.59%±14.75%、55.65%±5.78%和46.45%±6.23%,细胞活力降低呈现明显的浓度依赖性和时间依赖性,且细胞核染色呈现典型的核凋亡变化。结果提示,蛋清溶菌酶在一定理化条件下可形成具有神经细胞毒性的淀粉样纤维,为解释朊蛋白或其他蛋白质形成淀粉样纤维的机制提供参考。

关键词：淀粉样纤维蛋清溶菌酶 β折叠人神经母细胞瘤细胞

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牛血清白蛋白淀粉样纤维气凝胶吸附刚果红机理研究

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环境化学 2024年

作者：邓道通李远高明钊苑春刚华北电力大学环境科学与工程系华北电力大学白洋淀湿地研究中心

为了高效处理印染废水，本研究以牛血清白蛋白为原料，采用自组装、交联、冻干方法制备了淀粉样纤维气凝胶，系统研究了pH、染料初始浓度、吸附时间等因素对气凝胶吸附过程的影响以及吸附热力学和动力学过程.结果表明，气凝胶对刚果红... 详细信息

为了高效处理印染废水，本研究以牛血清白蛋白为原料，采用自组装、交联、冻干方法制备了淀粉样纤维气凝胶，系统研究了pH、染料初始浓度、吸附时间等因素对气凝胶吸附过程的影响以及吸附热力学和动力学过程.结果表明，气凝胶对刚果红的最大吸附量为1047 mg?g-1，吸附过程符合Langmuir模型.傅里叶红外光谱、X射线光电子能谱分析结果显示，吸附机理为静电吸引和氢键共同作用.该材料经5次再生循环后仍可保持84%的吸附效率，具有很好的重复利用性.

关键词：蛋白淀粉样纤维气凝胶染料吸附