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基于RNA-seq不明原因复发性流产绒毛组织mRNA基因差异性表达研究

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国际妇产科学杂志 2024年第3期51卷 322-328,341页

作者：杨丽杨静叶尔登切切克韩锐腊晓琳新疆医科大学第一附属医院生殖医学中心乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院生殖疾病与出生缺陷综合防治研究中心乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院新疆生殖免疫临床医学研究中心乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学第五附属医院妇科

目的:构建不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)孕妇绒毛组织的mRNA差异性表达谱并进行功能分析,为阐明URSA的发生发展机制提供依据。方法:收集2022年3月于新疆医科大学第一附属医院妇科门诊收治的4例U... 详细信息

目的:构建不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)孕妇绒毛组织的mRNA差异性表达谱并进行功能分析,为阐明URSA的发生发展机制提供依据。方法:收集2022年3月于新疆医科大学第一附属医院妇科门诊收治的4例URSA(试验组)和4例选择性终止妊娠孕妇(对照组)的绒毛组织样本。应用转录组测序技术(RNA-seq)筛选2组差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并对其进行GO功能注释、KEGG通路分析及蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析,进一步研究差异表达mRNA的功能,并筛选出URSA的关键基因。结果:RNA-seq分析共筛选出3350个DEGs,其中上调基因2259个,下调基因1091个。通过PPI网络分析,筛选出与URSA有关的前10个关键基因:TYROBP、CD74、GH1、GH2、STAT5A、HLA-DRA、STAT5B、HLA-DRB1、CISH和HLA-A。通过GO和KEGG生物学功能分析,发现差异性表达的mRNA参与到多种白细胞分化相关免疫反应通路和同种异体免疫应答等生物学过程。结论:利用RNA-seq获得的URSA的mRNA差异性表达谱,筛选出可能与URSA有关的关键基因及生物学通路,为进一步研究URSA的发病机制和诊疗靶点提供了理论依据。

关键词：流产,习惯性绒毛组织 RNA,信使转录组测序免疫调节

FISH联合染色体核型分析明确复发性流产家系遗传病因一例

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国际生殖健康/计划生育杂志 2024年第3期43卷 201-203+211页

作者：庄建龙江矞颖曾书红陈新英福建省泉州市妇幼保健院.儿童医院产前诊断中心福建省泉州市妇幼保健院.儿童医院产前诊断中心

自然流产病因复杂，包括胚胎因素、母体因素、环境因素和免疫功能异常等，约50%～60%的流产与胚胎染色体异常有关。报告1例因2次自然流产行夫妇外周血染色体核型分析和荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）检测的... 详细信息

自然流产病因复杂，包括胚胎因素、母体因素、环境因素和免疫功能异常等，约50%～60%的流产与胚胎染色体异常有关。报告1例因2次自然流产行夫妇外周血染色体核型分析和荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）检测的情况。妻子染色体核型未见明显异常，丈夫染色体核型46,XY,t(1;11)(p36.2;q24)。丈夫携带的t(1;11)平衡易位可能是导致该家庭反复流产的原因。该案例验证了FISH检测对于可疑亚端粒结构重排的应用价值。

关键词：流产,习惯性核型分析原位杂交,荧光分子诊断技术易位,遗传

低分子肝素治疗复发性流产的临床疗效及安全性

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中国药物与临床 2024年第6期24卷 400-403页

作者：张赛男李俊峰白爱红李荣香付秀虹漯河市第一人民医院生殖医学与遗传中心河南漯河462300

目的探讨在治疗复发性流产中应用低分子肝素的临床疗效及安全性。方法本研究纳入所有病例均为2019年1月至2021年12月就诊于漯河市第一人民医院216例复发性流产患者,进行回顾性分析,将其按照治疗方法分为A组(108例,采用常规治疗措施)和B... 详细信息

目的探讨在治疗复发性流产中应用低分子肝素的临床疗效及安全性。方法本研究纳入所有病例均为2019年1月至2021年12月就诊于漯河市第一人民医院216例复发性流产患者,进行回顾性分析,将其按照治疗方法分为A组(108例,采用常规治疗措施)和B组(108例,采用低分子肝素联合常规治疗)。将2组患者治疗前后激素指标水平、凝血功能指标、足月生产率、流产率、早产率及不良反应发生情况进行对比。结果治疗后2组患者血清激素指标水平均相较于治疗前上升,且B组患者上述指标相较于A组升高(t=8.499、15.076、6.422,P均流产率为23.2%则相较于A组的41.7%下降(χ^(2)=9.989、8.454,P均0.05);治疗过程中A组患者发生血小板减少7例,占6.5%;牙龈出血2例,占1.8%;淤斑3例,占2.8%,B组患者治疗过程中发生发生血小板减少11例,占10.2%;牙龈出血3例,占1.8%;淤斑4例,占3.7%,经对比,2组患者各项不良反应发生率之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在复发性流产中应用低分子肝素,可提升足月生产率,降低流产率,使雌、孕激素水平提高,对凝血功能的改善起到促进作用,且不增加不良反应。

关键词：低分子肝素流产,习惯性治疗结果

多次不良妊娠史合并胎儿同种免疫性血小板减少症妊娠期血浆置换成功分娩1例

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中华医学杂志 2024年第5期104卷 389-390页

作者：季璐李佳钋王秋实乔宠中国医科大学附属盛京医院妇产科沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院输血科沈阳110004

患者女,33岁,多次不良妊娠史合并胎儿同种免疫性血小板减少症,孕前行系统的病因学筛查,孕后在胎儿血流异常使用免疫球蛋白无效后,使用血浆置换清除有害抗体,成功延长孕周,最终母儿获良好预后,提示了反复妊娠失败的病因学全面筛查及准确... 详细信息

患者女,33岁,多次不良妊娠史合并胎儿同种免疫性血小板减少症,孕前行系统的病因学筛查,孕后在胎儿血流异常使用免疫球蛋白无效后,使用血浆置换清除有害抗体,成功延长孕周,最终母儿获良好预后,提示了反复妊娠失败的病因学全面筛查及准确的识别十分重要。

关键词：血浆置换流产,习惯性新生儿/胎儿同种免疫性血小板减少症人类白细胞特异性抗体

IVIG治疗习惯性流产并绒毛膜下血肿效果及对母婴结局的影响

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临床误诊误治 2023年第8期36卷 84-88页

作者：李冉陈荔闽王燕高文娟宋宁李萌潍坊市人民医院产科山东潍坊261041 潍坊市人民医院健康管理中心山东潍坊261041 潍坊市人民医院妇儿门诊山东潍坊261041 潍坊市人民医院超声科山东潍坊261041 潍坊市人民医院产后康复科山东潍坊261041

目的分析静脉注射免疫球蛋白(IVIG)治疗习惯性流产(RSA)并绒毛膜下血肿(SCH)的效果及对母婴结局的影响。方法选择2020年3月—2021年3月接诊的101例RSA并SCH,按治疗方法不同分为IVIG组53例(予IVIG)和对照组48例(予常规对症治疗),分析... 详细信息

目的分析静脉注射免疫球蛋白(IVIG)治疗习惯性流产(RSA)并绒毛膜下血肿(SCH)的效果及对母婴结局的影响。方法选择2020年3月—2021年3月接诊的101例RSA并SCH,按治疗方法不同分为IVIG组53例(予IVIG)和对照组48例(予常规对症治疗),分析治疗前后免疫学指标[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、B淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞、甲状腺过氧化物酶抗体、补体C3、补体C4、免疫球蛋白A(IgA)、IgG、IgM]、症状改善指标、不良反应及母婴结局。结果与治疗前比较,2组B淋巴细胞、NK细胞、甲状腺过氧化物酶抗体、IgA、IgG、IgM、TNF-α水平明显降低,补体C3、C4及IL-10水平明显升高,且IVIG组变化更明显(P<0.05,P<0.01)。IVIG组阴道出血持续时间、症状缓解时间、血肿消失时间均短于对照组(P<0.01)。IVIG组下腹刺痛、月经感、腰酸发生率明显低于对照组(P<0.05)。IVIG组妊娠成功率为84.91%(45/53)高于对照组的64.58%(31/48)(P<0.05)。IVIG组早产发生率、早产儿死亡率、新生儿重症监护病房入住率均低于对照组(P<0.01)。结论 IVIG对RSA并SCH有明显的疗效,可增强免疫调节功能,改善免疫学指标及母婴结局。

关键词：流产,习惯性绒毛膜下血肿免疫球蛋白静脉注射 B淋巴细胞肿瘤坏死因子-α 药物毒性母婴结局

细胞免疫功能的变化与原因不明习惯性流产的关系

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中国实用妇科与产科杂志 2006年第5期22卷 349-351页

作者：徐岚张新能张永凤郑燕銮汕头大学医学院第一附属医院妇产科广东汕头515041

目的探讨细胞免疫功能的变化与原因不明习惯性流产(unexplained habitual abortion,UHA)的发生及主动免疫治疗机制的关系。方法2002-08-2004-08汕头大学医学院第一附属医院采用流式细胞仪测定并比较112例UHA患者和30例正常已生育妇女及7... 详细信息

目的探讨细胞免疫功能的变化与原因不明习惯性流产(unexplained habitual abortion,UHA)的发生及主动免疫治疗机制的关系。方法2002-08-2004-08汕头大学医学院第一附属医院采用流式细胞仪测定并比较112例UHA患者和30例正常已生育妇女及76例经主动免疫治疗后的UHA患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD16+CD56+细胞亚群比例及CD4+/CD8+的比值;同时比较76例采用主动免疫治疗和36例未采用主动免疫治疗的UHA者再次妊娠成功率。结果UHA患者与正常已生育妇女比较,血中CD3+、CD16+CD56+细胞的百分率及CD4+/CD8+比值增高,差异有显著性意义(P<0·05)。主动免疫后CD3+、CD16+CD56+细胞百分率及CD4+/CD8+比值下降(P<0.05)。经主动免疫治疗的UHA者再次妊娠成功率为88.24%,对照组为31.25%,两组比较差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论淋巴细胞亚群比例的改变与UHA的发生有关,主动免疫治疗可调节异常的细胞免疫功能,有利于提高再次妊娠成功率。

关键词：流产,习惯性细胞免疫免疫治疗,主动

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西罗莫司在生殖领域的研究进展

国际生殖健康／计划生育杂志 2024年第2期43卷 132-137页

作者：叶霖侯志金孟昱时(审校) 昆明医科大学第二附属医院生殖医学科 650101

西罗莫司作为常用的免疫抑制剂,现广泛用于预防器官移植受者发生免疫排斥反应。随着医学研究的不断发展,已证明西罗莫司在女性生殖过程中具有免疫调节作用。西罗莫司通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白发挥免疫调节功能,可能会改善合并反... 详细信息

西罗莫司作为常用的免疫抑制剂,现广泛用于预防器官移植受者发生免疫排斥反应。随着医学研究的不断发展,已证明西罗莫司在女性生殖过程中具有免疫调节作用。西罗莫司通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白发挥免疫调节功能,可能会改善合并反复种植失败、复发性流产、子宫内膜异位症、慢性子宫内膜炎及多囊卵巢综合征等生殖系统疾病患者的生殖免疫状态。西罗莫司还可预防辅助生殖治疗过程中卵巢过度刺激综合征的发生,提高母胎界面免疫状态异常患者的胚胎种植率和临床妊娠率,实现更好的妊娠结局。综述西罗莫司在女性生殖相关疾病中的作用机制、研究现状及安全性。

关键词：西罗莫司生殖技术,辅助不育,女(雌)性流产,习惯性子宫内膜异位症多囊卵巢综合征卵巢过度刺激综合征

免疫治疗对原因不明习惯性流产Tim-1与Tim-3表达的影响

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免疫治疗对原因不明习惯性流产Tim-1与Tim-3表达的影响

作者：吕红娟山东大学

学位级别：硕士

目的: 对原因不明习惯性流产(Unexplained Recurrent SpontaneousAbortion,URSA)患者进行皮内注射丈夫淋巴细胞(Paternal LymphocyteImmunization)主动免疫治疗。通过荧光定量RT-PCR方法检测治疗前后外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMCs)中Tim-1与Tim-3mRNA的表达水平;通过补体依赖的微量混合淋巴细胞毒(complement-dependentmicro mixed lymphocyte cytotoxicity,CDC)实验,检测患者血清中的抗夫淋巴细胞抗体(Anti-paternal lymphocyte antibody,APLA)。评价免疫治疗效果,探讨Tim-1,Tim-3及APLA在URSA及主动免疫治疗中的作用。方法: 1.研究对象 35例临床诊断为URSA的患者,年龄23-34岁,流产次数2-5次。25例无不良妊娠史健康中期妊娠妇女,年龄23-31岁。 2.主动免疫治疗无菌抽取患者丈夫静脉血20ml,采用Ficoll密度梯度离心法无菌分离PBMCs,于患者前臂皮内注射,每21天进行一次同样的免疫注射,共4次。第三次注射结束后患者方可计划受孕,随访再次妊娠结局。 3.PBMCs中Tim-1与Tim-3 mRNA表达从NCBI数据库获得人β-actin(ACTB),Tim-1(TIM-1)及Tim-3(TIM-3)的cDNA序列,根据引物设计原则,应用Premier Primer5.0引物设计软件设计特异性引物,采用荧光定量RT-PCR方法,根据SYBR Premix EX Taq(Perfect Real Time)试剂盒说明,分别检测对照组PBMCs中β-actin,Tim-1和Tim-3 mRNA的相对表达水平;在治疗前及第4次治疗结束后第15天时检测患者PBMCs中β-actin,Tim-1和Tim-3 mRNA的相对表达水平。 4.APLA 采用补体依赖的微量混合淋巴细胞毒(CDC)实验,分别检测对照组妻子血清对其丈夫淋巴细胞、患者治疗前和第4次治疗结束后第15天时妻子血清对其丈夫淋巴细胞的反应。结果: 1.妊娠结局随访 35例患者中,4例在免疫治疗后随访期间未按计划受孕,31例按期受孕,其中28例安全度过孕早期,成功维持妊娠,3例再次发生早期自然流产。25例中期妊娠对照均正常分娩。 2.Tim-1和Tim-3 mRNA表达利用最低循环数值(Ct)比较法检测目的基因的相对表达,结果表明URSA患者在治疗前Tim-1和Tim-3表达均明显高于正常对照(Tim-3,1.22±0.13 vs 1.28±0.06,P＜0.05;Tim-1,1.25±0.07 vs 1.34±0.09 P＜0.05);免疫治疗后成功维持妊娠的28例URSA患者、未受孕的4例患者治疗后Tim-1和Tim-3的表达水平与治疗前相比,明显下调(P＜0.05);再次发生早期流产的3例患者治疗前后相比,Tim-1和Tim-3的表达水平无明显变化(P＞0.05)。 3.APLA检测结果主动免疫治疗前必须常规对患者进行APLA检测,阴性者方可接受治疗。纳入治疗对象的35例患者,治疗前APLA均为阴性,第4次免疫注射后第15天,有13例产生了APLA,其中12例成功维持妊娠,1例此疗程未按计划受孕。3例再次发生早期自然流产的患者,均未产生APLA抗体。25例对照组中,3例APLA阳性。结论: 1.皮内注射丈夫淋巴细胞主动免疫治疗对一部分URSA患者产生了较满意的治疗效果(28/35,有效率80%)。 2.Tim-1和Tim-3可能参与免疫治疗。 3.URSA患者体内Th细胞免疫应答水平较高,机体处于免疫应答活跃状态,免疫治疗后大部分患者Th细胞免疫应答水平降低,有利于建立和维持对胚胎的免疫耐受。 4.PBMCs中Tim-1和Tim-3 mRNA表达是一种可行的辅助检测指标,对于免疫治疗效果,指导免疫治疗方案及患者治疗后的受孕时机有一定的意义。 5.主动免疫治疗后一部分患者产生了APLA,这种抗体对胚胎可能具有保护作用,但未产生APLA抗体尚不能认为免疫治疗预期效果不佳。

关键词：流产,习惯性免疫治疗 Tim-1 Tim-3 抗夫淋巴细胞抗体荧光定量RT-PCR

主动免疫疗法在原因不明习惯性流产患者中的应用

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国际检验医学杂志 2009年第6期30卷 548-550页

作者：邱香廷宋玉翠山东省临沂市沂水中心医院 276400

目的探讨细胞免疫功能的变化与原因不明习惯性流产(UHA)的发生及主动免疫治疗机制的关系。方法用流式细胞仪测定并比较66例UHA患者和30例健康已生育妇女(NF组)及30例主动免疫治疗后的UHA患者外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD16^+CD56^+细... 详细信息

目的探讨细胞免疫功能的变化与原因不明习惯性流产(UHA)的发生及主动免疫治疗机制的关系。方法用流式细胞仪测定并比较66例UHA患者和30例健康已生育妇女(NF组)及30例主动免疫治疗后的UHA患者外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD16^+CD56^+细胞亚群百分率及CD4^+/CD8^+的比值;同时,比较采用主动免疫治疗30例和未采用主动免疫治疗的36例UHA患者再次妊娠成功率。结果UHA患者与NF组比较,血中CD3^+、CD16^+CD56^+细胞的百分率及CD4^+/CD8^+比值增高,差异有统计学意义(P<0.050)。主动免疫后CD3+、CD16+CD56+细胞的百分率及CD4^+/CD8^+比值下降(P<0.050)。主动免疫治疗组的再次妊娠成功率为92.86%,未主动免疫治疗组29.03%,P<0.001。结论淋巴细胞亚群比例的改变与UHA的发生有关,主动免疫治疗可调节异常的细胞免疫功能,有利于再次妊娠成功率的提高。

关键词：流产,习惯性免疫疗法,主动治疗