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波形蛋白介导猪繁殖与呼吸综合征病毒感染Marc-145细胞作用的初步研究

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病毒学报 2011年第5期27卷 456-461页

作者：王伟伟张璐马晓春高继明肖一红周恩民山东农业大学动物医学院山东泰安271018 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

为了研究波形蛋白在介导PRRSV感染过程中的作用,根据GenBank中已发表的波形蛋白序列,设计特异性引物,利用RT-PCR方法从Marc-145细胞中扩增目的基因,克隆入pET-28a,转化表达菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达... 详细信息

为了研究波形蛋白在介导PRRSV感染过程中的作用,根据GenBank中已发表的波形蛋白序列,设计特异性引物,利用RT-PCR方法从Marc-145细胞中扩增目的基因,克隆入pET-28a,转化表达菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物,将表达产物纯化后免疫BALB/c小鼠制备血清,用病毒阻断实验验证PRRSV与波形蛋白及其抗体的关系。用ELISA方法确定了重组波形蛋白与PRRSV结构蛋白N蛋白和囊膜蛋白GP5蛋白之间的关系。结果表明,成功的从Marc-145细胞中扩增出全长的波形蛋白基因,将其克隆入pET-28a,诱导后得到高效表达,表达蛋白纯化后免疫小鼠抗体效价达到105,病毒阻断实验表明波形蛋白能部分阻断PRRSV感染,其抗血清能完全阻断PRRSV感染。ELISA结果表明波形蛋白能与N蛋白结合而不与GP5蛋白结合。此结果为PRRSV感染的细胞的受体机制增添了新的内容,为PRRSV感染过程中受体间的相互作用关系研究奠定基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒波形蛋白表达病毒阻断 N蛋白

基于定量荧光共振能量转移的潜伏膜蛋白-1与波形蛋白相互作用研究

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光学学报 2024年第20期44卷 220-230页

作者：吴志伟张先增谢树森泉州师范学院物理与信息工程学院福建泉州362000 福建师范大学光电与信息工程学院福建福州350007

爱泼斯坦-巴尔病毒编码的潜伏膜蛋白-1(LMP-1)和波形蛋白(VIM)是两种公认的鼻咽癌标志物,但两者之间是否存在直接相互作用尚不明确。荧光共振能量转移(FRET)是唯一能够在活细胞中非侵入、动态监测蛋白质相互作用的技术。采用同源重组技... 详细信息

爱泼斯坦-巴尔病毒编码的潜伏膜蛋白-1(LMP-1)和波形蛋白(VIM)是两种公认的鼻咽癌标志物,但两者之间是否存在直接相互作用尚不明确。荧光共振能量转移(FRET)是唯一能够在活细胞中非侵入、动态监测蛋白质相互作用的技术。采用同源重组技术构建LMP-1和VIM的分子荧光探针,并通过一种定量FRET技术,即三通道荧光共振能量转移(E-FRET),在活细胞中检测LMP-1与VIM之间的蛋白质相互作用。进一步地,使用甲基倍他环糊精(MβCD)研究脂筏完整性对LMP-1与VIM相互作用的意义,以及该相互作用在细胞凋亡过程中发挥的作用。荧光图像显示:VIM在LMP-1阳性细胞内的分布呈现明显的极化特征,并且聚集于两者相互作用强的区域。E-FRET成像和细胞活性检测的结果表明:LMP-1与VIM相互作用不依赖于脂筏完整性,且在脂筏被破坏的过程中逐步增强。此外,LMP-1与VIM相互作用也可以增强细胞的凋亡抵抗能力。从新的视角阐述LMP-1的抗凋亡机制,表明定量FRET技术可用于细胞凋亡过程中蛋白质相互作用和分布差异的研究。

关键词：定量荧光共振能量转移时间序列成像鼻咽癌潜伏膜蛋白-1 波形蛋白

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波形蛋白表达和功能的研究进展

北京大学学报（医学版） 2009年第5期41卷 605-607页

作者：徐浩翔闫言中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院皮肤科北京100730

As a kind of cytoskeleton protein,vimentin is a major member of intermediate filament *** is found mainly in mesenchymal cells,and its expression and phosphorylation are regulated by many *** the past,vimentin was revealed as a scaffold maintaining cellular integrity,and recent studies shed lights on the evidence that vimentin played many important roles in cellular adhension,growth,apoptosis,cell signaling as well as inflammatory *** article summarizes the recent progress of vimentin about its expression and ***:SUMM ARY As a kind of cytoskeleton protein,vimentin is a majormember of intermed iate filament fam i-ly.V imentin is found mainly in mesenchymal cells,and its expression and phosphorylation are regulated by many *** the past,vimentin was revealed as a scaffold maintaining cellular integrity,and re-cent stud ies shed lights on the evidence that vimentin played many important roles in cellular adhension,growth,apoptosis,cell signaling as well as inflammatory *** article summarizes the recent progress of vimentin about its expression and function.

关键词：波形蛋白磷酰化细胞凋亡黏连

波形蛋白促进激素非依赖性前列腺癌细胞侵袭与转移的机制探讨

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肿瘤 2007年第11期27卷 857-860页

作者：魏军成张永涛吴明富游岚瑛陈颖周丽叶双梅卢运萍徐刚马丁华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科武汉430030

目的:探讨波形蛋白促进激素非依赖性前列腺癌细胞侵袭与转移的分子机制。方法:应用波形蛋白特异性扩增引物,借助RT-PCR获得波形蛋白正义全长和反义全长cDNA片段,分别插入pcDNA3.1(+)和pcDNA3.1(-)表达载体中,并将重组质粒导入激素非依... 详细信息

目的:探讨波形蛋白促进激素非依赖性前列腺癌细胞侵袭与转移的分子机制。方法:应用波形蛋白特异性扩增引物,借助RT-PCR获得波形蛋白正义全长和反义全长cDNA片段,分别插入pcDNA3.1(+)和pcDNA3.1(-)表达载体中,并将重组质粒导入激素非依赖性前列腺癌配对细胞系中,G418稳定筛选;应用体外运动和侵袭试验比较细胞侵袭能力的改变;用蛋白免疫印迹法检测相关蛋白的表达。结果:波形蛋白通过C-src激酶调节E-钙黏蛋白(E-cadherin)/β-连环蛋白(β-cate-nin)复合物,促进激素非依赖性前列腺癌细胞侵袭与转移。结论:波形蛋白可以作为判断激素非依赖性前列腺癌细胞侵袭与转移的一个重要指标。

关键词：前列腺肿瘤波形蛋白侵袭与转移

波形蛋白基因转染增强SW780人膀胱癌细胞的侵袭力

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第7期30卷 713-716页

作者：卢冠军丁娟王志军宁夏医科大学总医院泌尿外科宁夏银川750004 宁夏医科大学生理学系宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院放射科宁夏银川750004

目的构建人波形蛋白(vimentin)基因的真核表达载体,转染SW780人膀胱癌细胞,检测vimentin上调对SW780细胞侵袭能力的影响。方法 PCR扩增人vimentin基因的cDNA序列,将其插入pcDNA3.1真核表达载体中,酶切鉴定并测序验证重组质粒pcDNA3.1-vi... 详细信息

目的构建人波形蛋白(vimentin)基因的真核表达载体,转染SW780人膀胱癌细胞,检测vimentin上调对SW780细胞侵袭能力的影响。方法 PCR扩增人vimentin基因的cDNA序列,将其插入pcDNA3.1真核表达载体中,酶切鉴定并测序验证重组质粒pcDNA3.1-vimentin后,转染人膀胱癌SW780细胞。Western blot法检测vimentin及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,明胶酶谱分析MMP-9活性,TranswellTM实验检测vimentin对膀胱癌细胞侵袭能力的影响。结果酶切鉴定有预期目的片段,测序证实重组质粒pcDNA3.1-vimentin构建成功。Western blot法检测提示pcDNA3.1-vimentin转染SW780细胞后,vimentin与MMP-9表达水平均上调。明胶酶谱表明vimentin能够显著促进SW780细胞MMP-9的分泌。TranswellTM实验提示vimentin能显著增强SW780细胞的侵袭转移能力。结论成功构建了pcDNA3.1-vimentin真核表达载体并将其成功转染膀胱癌SW780细胞。Vimentin上调能够增强SW780细胞的侵袭能力,可能与上调MMP-9的表达及促进MMP-9分泌有关。

关键词：波形蛋白膀胱癌细胞 SW780 侵袭转移

Sonazoid超声造影技术与波形蛋白葡萄糖转运蛋白-1 钙调节蛋白及P63蛋白表达对乳腺癌前哨淋巴结转移的诊断价值分析

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中国妇幼保健 2025年第1期 156-160页

作者：冯小凡丁艺文袁颜颜江莹义乌市中心医院超声科

目的探讨Sonazoid超声造影技术与波形蛋白、葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)、钙调节蛋白及P63蛋白表达对乳腺癌前哨淋巴结转移的诊断价值。方法选取2021年3月—2022年12月义乌市中心医院收治的98例乳腺癌患者为乳腺癌组；另收集同期50例乳... 详细信息

目的探讨Sonazoid超声造影技术与波形蛋白、葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)、钙调节蛋白及P63蛋白表达对乳腺癌前哨淋巴结转移的诊断价值。方法选取2021年3月—2022年12月义乌市中心医院收治的98例乳腺癌患者为乳腺癌组；另收集同期50例乳腺良性增生患者为对照组。乳腺癌组患者术前行Sonazoid超声造影检查，评估病灶性质，诊断前哨淋巴结转移情况，并与术后前哨淋巴结组织病理学检查结果对比，分析诊断价值；切换到常规模式，扫描前哨淋巴结大小，测量前哨淋巴结的横径和纵径，计算纵横比。采用免疫组化法检测乳腺癌组和对照组乳腺组织中波形蛋白、GLUT-1、钙调节蛋白、P63蛋白表达。结果 98例乳腺癌患者中，Sonazoid超声造影技术检出前哨淋巴结122个，其中增强模式A型65个(53.28%),增强模式B型49个(40.16%),增强模式C型8个(6.56%)。Sonazoid超声造影技术诊断乳腺癌前哨淋巴结转移的灵敏度为94.74%(36/38),特异度为75.00%(63/84),准确度为81.15%(99/122),阳性预测值为63.16%(36/57),阴性预测值为96.92%(63/65)。转移性前哨淋巴结横径、纵径均明显长于非转移性前哨淋巴结(均P波形蛋白、GLUT-1、P63蛋白表达阳性率分别为76.53%、62.24%、79.59%,明显高于对照组的16.00%、12.00%、6.00%,钙调节蛋白表达阳性率为14.29%,明显低于对照组的90.00%,差异均有统计学意义(均P波形蛋白、GLUT-1、P63蛋白表达阳性率分别为89.66%、86.21%、93.10%,明显高于非转移组的71.01%、52.17%、73.91%,钙调节蛋白表达阳性率为6.90%,明显低于非转移组的17.39%,差异均有统计学意义(均P波形蛋白、GLUT-1、钙调节蛋白及P63蛋白对乳腺癌前哨淋巴结转移均具有较高的诊断价值(P波形蛋白、GLUT-1、钙调节蛋白及P63可明显提升对乳腺癌前哨淋巴结转移的诊断效能。

关键词：乳腺癌前哨淋巴结转移 Sonazoid超声造影波形蛋白葡萄糖转运蛋白-1 钙调节蛋白 P63蛋白诊断价值

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波形蛋白对前列腺癌细胞侵袭与转移的影响

癌症 2008年第1期27卷 30-34页

作者：魏军成吴明富张永涛赵良平卢运萍马丁华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科湖北武汉430030

背景与目的:波形蛋白(vimentin)是一种细胞骨架蛋白,参与调节细胞的运动和增殖。本研究通过检测波形蛋白在前列腺癌细胞系中的表达,探讨其对前列腺癌细胞侵袭与转移的影响。方法:应用二维电泳-质谱分析(two-dimensionalgel electrophore... 详细信息

背景与目的:波形蛋白(vimentin)是一种细胞骨架蛋白,参与调节细胞的运动和增殖。本研究通过检测波形蛋白在前列腺癌细胞系中的表达,探讨其对前列腺癌细胞侵袭与转移的影响。方法:应用二维电泳-质谱分析(two-dimensionalgel electrophoresis matrix-assisted laser desorption/time of flight mass spectrometry,2-DE MALDI TOF-MS)检测波形蛋白在前列腺癌配对细胞系中的差异表达,用基因干预技术结合体外侵袭实验探讨波形蛋白对细胞侵袭能力的影响。结果:波形蛋白在前列腺癌高转移细胞系PC-3M-1E8中的表达高于低转移细胞系PC-3M-2B4中的表达。成功构建波形蛋白反义真核表达载体和正义真核表达载体,分别转染PC-3M-1E8和PC-3M-2B4细胞,转染波形蛋白反义真核表达载体的细胞(PC-3M-1E8/vas)的穿膜细胞数为99.3±4.8,明显低于空质粒对照组细胞[PC-3M-1E8/3.1(-)]的319.4±6.5(P波形蛋白正义真核表达载体的细胞(PC-3M-2B4/vs)的穿膜细胞数为330.5±5.8,明显高于空质粒对照组细胞[PC-3M-2B4/3.1(+)]的98.6±7.5(P波形蛋白高表达可促进前列腺癌细胞的侵袭与转移。

关键词：前列腺肿瘤侵袭转移波形蛋白

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波形蛋白与疾病关系的研究进展

基础医学与临床 2009年第10期29卷 1117-1120页

作者：徐浩翔王宝玺中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院皮肤科北京100730

波形蛋白是中间纤维家族中的一种重要成员,主要存在于中胚层来源的细胞中。新近研究发现,波形蛋白的表达和分布位置的改变,可以影响细胞完整性、细胞信号转导、细胞生长、迁移、凋亡和基因表达等多种功能,从而引发一些疾病,本文综述了... 详细信息

波形蛋白是中间纤维家族中的一种重要成员,主要存在于中胚层来源的细胞中。新近研究发现,波形蛋白的表达和分布位置的改变,可以影响细胞完整性、细胞信号转导、细胞生长、迁移、凋亡和基因表达等多种功能,从而引发一些疾病,本文综述了波形蛋白与疾病发生和诊断方面的研究进展。

关键词：波形蛋白疾病

波形蛋白表达对非小细胞肺癌患者预后影响的Meta分析

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中国新药与临床杂志 2015年第6期34卷 441-448页

作者：李世武陈瑶虞丽丽钱薪荣昆明理工大学附属医院药剂科云南昆明650500 昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500 云南省第一人民医院药剂科云南昆明650032 昆明理工大学附属医院护理部云南昆明650032

目的分析波形蛋白表达对非小细胞肺癌(NSCLC)患者总生存期(OS)和无病生存期(DFS)预后的影响,为其临床应用提供有效证据。方法检索中国知网、万方、维普、中国生物医学、Embase、Medline、Pub Med、The Cochrane library、The clinical t... 详细信息

目的分析波形蛋白表达对非小细胞肺癌(NSCLC)患者总生存期(OS)和无病生存期(DFS)预后的影响,为其临床应用提供有效证据。方法检索中国知网、万方、维普、中国生物医学、Embase、Medline、Pub Med、The Cochrane library、The clinical trail、Elsevier SD外文期刊数据库、SCI科学引文索引数据库,查找研究波形蛋白表达与NSCLC患者预后相关的前瞻性队列研究,文献检索时限均从建库至2015年2月2日。对符合条件的研究,由两位研究者按照纳入和排除标准,独立筛选文献、提取资料、文献质量评价,并交叉核对后,采用Stata12.0软件进行Meta分析。结果共纳入9篇文献,包含9项研究(n=1 302)。Meta分析波形蛋白表达对NSCLC患者OS和DFS影响的合并风险比(HR)分别为HR=2.04,95%CI(1.57,2.66),P波形蛋白高表达是NSCLC患者OS和DFS的风险因素,但本次分析纳入研究数量较少,其结论有待更多大样本量的研究进行证实。

关键词：波形蛋白癌非小细胞肺预后无病生存 Meta分析