波形蛋白基因转染增强SW780人膀胱癌细胞的侵袭力

作     者：卢冠军 丁娟 王志军 LU Guanjun;DING Juan;WANG Zhijun

作者机构：宁夏医科大学总医院泌尿外科宁夏银川750004 宁夏医科大学生理学系宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院放射科宁夏银川750004 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2014年第30卷第7期

页      面：713-716页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 071009[理学-细胞生物学] 09[农学] 100102[医学-免疫学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：宁夏自然科学基金(NZ13137) 

主　　题：波形蛋白 膀胱癌细胞 SW780 侵袭转移 

摘      要：目的构建人波形蛋白(vimentin)基因的真核表达载体,转染SW780人膀胱癌细胞,检测vimentin上调对SW780细胞侵袭能力的影响。方法 PCR扩增人vimentin基因的cDNA序列,将其插入pcDNA3.1真核表达载体中,酶切鉴定并测序验证重组质粒pcDNA3.1-vimentin后,转染人膀胱癌SW780细胞。Western blot法检测vimentin及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,明胶酶谱分析MMP-9活性,TranswellTM实验检测vimentin对膀胱癌细胞侵袭能力的影响。结果酶切鉴定有预期目的片段,测序证实重组质粒pcDNA3.1-vimentin构建成功。Western blot法检测提示pcDNA3.1-vimentin转染SW780细胞后,vimentin与MMP-9表达水平均上调。明胶酶谱表明vimentin能够显著促进SW780细胞MMP-9的分泌。TranswellTM实验提示vimentin能显著增强SW780细胞的侵袭转移能力。结论成功构建了pcDNA3.1-vimentin真核表达载体并将其成功转染膀胱癌SW780细胞。Vimentin上调能够增强SW780细胞的侵袭能力,可能与上调MMP-9的表达及促进MMP-9分泌有关。