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毛蕊花糖苷抗缺氧缺糖/再灌注所致神经细胞损伤的保护作用及核心药效团发现

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药学学报 2022年第4期57卷 1017-1023页

作者：张一驰张晓雯王丽超屠鹏飞王天文曾克武北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191 重庆市中药研究院重庆400065

探究毛蕊花糖苷抗缺氧缺糖/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion, OGD/R)所致的PC12神经细胞损伤的保护作用及核心药效团结构。以OGD/R诱导的PC12细胞作为神经细胞损伤模型,通过MTT存活率及结晶紫染色分析,考察毛蕊花糖苷及... 详细信息

探究毛蕊花糖苷抗缺氧缺糖/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion, OGD/R)所致的PC12神经细胞损伤的保护作用及核心药效团结构。以OGD/R诱导的PC12细胞作为神经细胞损伤模型,通过MTT存活率及结晶紫染色分析,考察毛蕊花糖苷及其系列结构片段(咖啡酸3,4-二羟基苯乙酯、咖啡酸、3,4-二羟基苯乙醇)对神经细胞的保护作用;通过Hoechst33258细胞凋亡染色、JC-1线粒体染色以及透射电镜分析,考察毛蕊花糖苷及其系列结构片段通过线粒体途径发挥神经细胞保护的可能性;通过Western blot检测B淋巴细胞瘤2 (B cell lymphoma 2, Bcl 2)/Bcl 2相关X蛋白(Bcl 2 associated X protein, Bax)介导的线粒体半胱天冬氨酸蛋白酶3 (cysteinyl aspartate specific proteinase 3, caspase 3)/DNA修复酶(poly ADP-ribose polymerase, PARP)凋亡通路蛋白表达,考察毛蕊花糖苷及其核心活性片段咖啡酸发挥神经细胞保护的分子机制。结果显示,毛蕊花糖苷、咖啡酸3,4-二羟基苯乙酯、咖啡酸均可显著提高PC12细胞存活率并维持细胞正常形态,同时还可显著逆转OGD/R诱导的PC12细胞凋亡,抑制细胞线粒体的去极化,维持线粒体的正常结构。此外,毛蕊花糖苷及其核心活性片段咖啡酸可明显抑制线粒体凋亡蛋白caspase 3和PARP的剪切,下调Bax并提高Bcl 2蛋白的表达。综上表明,毛蕊花糖苷能够通过线粒体caspase 3/PARP凋亡通路保护缺氧缺糖/再灌注所致的神经细胞损伤,且咖啡酸可能是其发挥该作用的核心药效团结构。

关键词：神经保护缺氧缺糖/再灌注毛蕊花糖苷咖啡酸药效团

毛蕊花糖苷联合Ly294002对人肝细胞癌裸鼠移植瘤的协同增效作用研究

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中华肿瘤防治杂志 2023年第15期30卷 904-911页

作者：文丽梅张嘉伟陈樟组皮艳木·马拜提姑丽米热·艾力阿依谢姆古丽·马木提王泽坤杨建华胡君萍新疆医科大学第一附属医院药学部新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830017

目的探讨毛蕊花糖苷(ACT)联合人工合成的PI3K/AKT信号通路抑制剂-2-吗啉代-8-苯基色酮(Ly294002)对人肝癌细胞系HepG2裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法建立HepG2裸鼠移植瘤,分组设置空白组、模型组、Ly294002(20mg/kg)组、ACT(80mg/... 详细信息

目的探讨毛蕊花糖苷(ACT)联合人工合成的PI3K/AKT信号通路抑制剂-2-吗啉代-8-苯基色酮(Ly294002)对人肝癌细胞系HepG2裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法建立HepG2裸鼠移植瘤,分组设置空白组、模型组、Ly294002(20mg/kg)组、ACT(80mg/kg)组、ACT+Ly294002(80mg/kg+20mg/kg)组,共5组,每组6只。给药期间,对肿瘤体积进行监测;给药结束后,称取肿瘤质量,计算肿瘤抑制率和生长率;采用HE染色、透射电镜和免疫荧光法分别对肿瘤组织的病理形态、超微结构和Ki-67及PCNA表达水平进行观察或统计分析,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测裸鼠血清中白介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、甲胎蛋白(AFP)和肿瘤坏死因子(TNF-α)活性水平。结果模型组、ACT组、Ly294002组和ACT+Ly294002组肿瘤质量分别为(0.90±0.24)、(0.63±0.18)、(0.66±0.05)和(0.45±0.04)g,F=8.533,P<0.01。HE染色结果显示,模型组有大量存活肿瘤细胞,Ly294002组和ACT组存活细胞相对减少,而ACT+Ly294002组肿瘤存活区域明显减少,坏死区面积增大。免疫荧光结果显示,模型组、ACT组、Ly294002组、ACT+Ly294002组Ki-67表达水平分别为(100.00±0.00)%、(179.92±3.96)%、(58.91±1.04)%和(1.21±0.04)%,F=4039.224,P<0.01。模型组、ACT组、Ly294002组、ACT+Ly294002组PCNA表达水平分别为(100.00±0.00)%、(31.39±0.87)%、(6.56±1.01)%和(1.81±0.42)%,F=12591.668,P<0.01。超微结构观察结果显示,模型组细胞核异型,核膜局部凹陷,形成核切迹、多核,肝肿瘤细胞细胞器不丰富;Ly294002组肿瘤细胞的细胞核受到损伤,异染色质团集;ACT组核膜溶解,絮状样改变,线粒体脊溶解;ACT+Ly294002组肿瘤细胞损伤最为严重,出现空泡化,细胞质和细胞器广泛溶解,异染色质边际化。与空白组相比,模型组荷瘤裸鼠血清中IL-6、hs-CRP、AFP和TNF-α活性水平均升高,均P<0.01;与模型组相比,ACT组、Ly294002组和ACT+Ly294002组IL-6、hs-CRP、AFP和TNF-α活性水平均有不同程度下降,其中Ly294002组IL-6和TNF-α的下降具有统计学意义,P<0.05;ACT+Ly294002组IL-6、hs-CRP和TNF-α的下降具有统计学意义,P<0.01;与Ly294002组相比,ACT+Ly294002组hs-CRP活性下降,P<0.05。结论ACT和Ly294002对HepG2裸鼠移植瘤的生长均有抑制作用,且联合用药具有协同增效的作用。

关键词：肝细胞癌毛蕊花糖苷 Ly294002 裸鼠移植瘤协同增效

毛蕊花糖苷在常氧、缺氧大鼠体内药动学的比较

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中成药 2022年第4期44卷 1041-1047页

作者：王维刚李晓琳燕娜刘天龙王芃郭姿良吴迪李茂星联勤保障部队第九四○医院临床药学科甘肃兰州730050 甘肃中医药大学药学院甘肃兰州730000 甘肃省高原药学行业技术中心甘肃兰州730050 兰州大学药学院甘肃兰州730030 宁夏医科大学药学院宁夏银川750004

目的比较毛蕊花糖苷在常氧、缺氧大鼠体内药动学。方法采用低压低氧动物实验舱模拟高原环境制备急性缺氧大鼠模型,常氧、缺氧大鼠灌胃给予毛蕊花糖苷(300 mg/kg),于5、10、15、30、45 min及1、1.5、2、4、6、8、12、24 h采血,HPLC-QTOF... 详细信息

目的比较毛蕊花糖苷在常氧、缺氧大鼠体内药动学。方法采用低压低氧动物实验舱模拟高原环境制备急性缺氧大鼠模型,常氧、缺氧大鼠灌胃给予毛蕊花糖苷(300 mg/kg),于5、10、15、30、45 min及1、1.5、2、4、6、8、12、24 h采血,HPLC-QTOF-MS法检测毛蕊花糖苷、羟基酪醇、咖啡酸血药浓度,计算主要药动学参数。结果常氧、缺氧大鼠血浆中均未检测到羟基酪醇。与常氧大鼠血浆比较,缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷AUC_(0~)_(t)、AUC_(0~∞)、C_(max)降低(P毛蕊花糖苷及其活性代谢产物咖啡酸的药动学参数发生明显变化。

关键词：毛蕊花糖苷常氧缺氧体内药动学 HPLC-QTOF-MS

毛蕊花糖苷通过Wnt/β-catenin信号通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的改善作用

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中华中医药杂志 2023年第10期38卷 4897-4901页

作者：徐霞张艺森雷瑞瑞驻马店市中心医院新生儿科驻马店463000

目的:探究毛蕊花糖苷通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对缺血缺氧性脑损伤(HIE)新生大鼠的作用。方法:将72只新生SD雄性大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、阳性药物组、毛蕊花糖苷高剂量组、毛蕊花糖苷低剂量组、毛蕊花糖... 详细信息

目的:探究毛蕊花糖苷通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对缺血缺氧性脑损伤(HIE)新生大鼠的作用。方法:将72只新生SD雄性大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、阳性药物组、毛蕊花糖苷高剂量组、毛蕊花糖苷低剂量组、毛蕊花糖苷+通路抑制组,每组12只,按组分别给予相应的干预。神经学评分评估大鼠神经行为学功能;TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测大鼠海马组织细胞凋亡率;干湿重法检测脑组织含水量;采用ELISA检测海马组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;荧光定量PCR法检测海马组织中Wnt1、Wnt3a、β-catenin mRNA表达水平;Western Blot法检测海马组织中Bcl-2相关x蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Wnt1、Wnt3a、β-catenin蛋白的表达水平。结果:与模型组比较,毛蕊花糖苷高剂量组、毛蕊花糖苷低剂量组大鼠神经学评分,脑组织含水量,细胞凋亡率,凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3及炎症因子TNF-α、IL-1β含量均显著降低(P毛蕊花糖苷高剂量组比较,毛蕊花糖苷低剂量组、毛蕊花糖苷+通路抑制组大鼠神经学评分、脑组织含水量、细胞凋亡率、凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3及炎症因子TNF-α、IL-1β含量均显著升高(P毛蕊花糖苷可通过调控Wnt/β-catenin信号通路,促进相关基因表达,缓解HIE新生大鼠脑损伤。

关键词：毛蕊花糖苷 Wnt β-连环蛋白缺血缺氧性脑损伤神经行为学功能肉苁蓉

毛蕊花糖苷抑制Erastin诱导的多巴胺能神经细胞系MN9D细胞铁死亡

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中国组织工程研究 2024年

作者：张明洋杨新玲新疆医科大学第二附属医院

背景：近年越来越多的研究证实多巴胺能神经元细胞铁死亡参与了帕金森病的发病，毛蕊花糖苷目前被证实具有抗氧化、抗炎和神经保护作用。目的：探讨毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡的保护效果及作用机制。方法：以MN9D细胞为... 详细信息

背景：近年越来越多的研究证实多巴胺能神经元细胞铁死亡参与了帕金森病的发病，毛蕊花糖苷目前被证实具有抗氧化、抗炎和神经保护作用。目的：探讨毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡的保护效果及作用机制。方法：以MN9D细胞为研究对象，分为对照组、模型组(20μmol/L Erastin组)、Erastin+1μg/mL毛蕊花糖苷组、Erastin+5μg/mL毛蕊花糖苷组、Erastin+10μg/mL毛蕊花糖苷组。MN9D细胞在CO2恒温培养箱中培养24 h，然后用不同质量浓度毛蕊花糖苷预处理8 h，再加入20μmol/L Erastin诱导24 h后，采用ELISA法检测还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、总铁离子、丙二醛水平，免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶的表达，Western blot法检测酪氨酸羟化酶、核因子红细胞-2相关因子2、血红素加氧酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4蛋白表达。结果与结论：(1)与对照组相比，模型组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显减少(P 毛蕊花糖苷1,5,10μg/mL组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显增加(P 毛蕊花糖苷1,5,10μg/mL组酪氨酸羟化酶阳性细胞面积明显增加(P 毛蕊花糖苷1,5,10μg/mL组酪氨酸羟化酶、核因子红细胞-2相关因子2、血红素加氧酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4的蛋白表达明显增加(P 毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡具有明显的抑制作用，其机制可能通过作用于核因子红细胞-2相关因子2/血红素加氧酶1/谷胱甘肽过氧化物酶4通路实现的。

关键词：毛蕊花糖苷 Erastin MN9D细胞铁死亡核因子红细胞-2相关因子2 血红素加氧酶1 谷胱甘肽过氧化物酶4

毛蕊花糖苷抑制Erastin诱导的多巴胺能神经细胞系MN9D细胞铁死亡

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1408-1413页

作者：张明洋杨新玲新疆医科大学第二附属医院新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830028

背景:近年越来越多的研究证实多巴胺能神经元细胞铁死亡参与了帕金森病的发病,毛蕊花糖苷目前被证实具有抗氧化、抗炎和神经保护作用。目的:探讨毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡的保护效果及作用机制。方法:以MN9D细胞为研究对... 详细信息

背景:近年越来越多的研究证实多巴胺能神经元细胞铁死亡参与了帕金森病的发病,毛蕊花糖苷目前被证实具有抗氧化、抗炎和神经保护作用。目的:探讨毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡的保护效果及作用机制。方法:以MN9D细胞为研究对象,分为对照组、模型组(20μmol/L Erastin组)、Erastin+1μg/mL毛蕊花糖苷组、Erastin+5μg/mL毛蕊花糖苷组、Erastin+10μg/mL毛蕊花糖苷组。MN9D细胞在CO2恒温培养箱中培养24 h,然后用不同质量浓度毛蕊花糖苷预处理8 h,再加入20μmol/L Erastin诱导24 h后,采用ELISA法检测还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、总铁离子、丙二醛水平,免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶的表达,Western blot法检测酪氨酸羟化酶、核因子红细胞-2相关因子2、血红素加氧酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4蛋白表达。结果与结论:(1)与对照组相比,模型组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显减少(P毛蕊花糖苷1,5,10μg/mL组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显增加(P毛蕊花糖苷1,5,10μg/mL组酪氨酸羟化酶阳性细胞面积明显增加(P毛蕊花糖苷1,5,10μg/mL组酪氨酸羟化酶、核因子红细胞-2相关因子2、血红素加氧酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4的蛋白表达明显增加(P毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡具有明显的抑制作用,其机制可能通过作用于核因子红细胞-2相关因子2/血红素加氧酶1/谷胱甘肽过氧化物酶4通路实现的。

关键词：毛蕊花糖苷 Erastin MN9D细胞铁死亡核因子红细胞-2相关因子2 血红素加氧酶1 谷胱甘肽过氧化物酶4

毛蕊花糖苷对慢性心力衰竭大鼠交感神经兴奋性的影响

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中国老年学杂志 2022年第5期42卷 1155-1158页

作者：郭锦华张驰王东刘羽承李晶贾琳琳佳木斯大学基础医学院生理教研室黑龙江佳木斯154007 佳木斯市妇幼保健院佳木斯市肿瘤医院佳木斯大学基础医学院微生态-免疫调节网络与相关疾病重点实验室

目的观察毛蕊花糖苷对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心脏功能和交感神经兴奋性的影响。方法SD大鼠随机分成正常对照(Ctrl)组、CHF组、CHF+毛蕊花糖苷组和CHF+比索洛尔组。采用结扎左冠状动脉前降支制备心力衰竭(HF)大鼠模型,毛蕊花糖苷和比索... 详细信息

目的观察毛蕊花糖苷对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心脏功能和交感神经兴奋性的影响。方法SD大鼠随机分成正常对照(Ctrl)组、CHF组、CHF+毛蕊花糖苷组和CHF+比索洛尔组。采用结扎左冠状动脉前降支制备心力衰竭(HF)大鼠模型,毛蕊花糖苷和比索洛尔进行干预治疗,连续用药4 w后观察各组心功能,交感神经兴奋性变化,肺、体质量比(L/BW)和右心室、体质量比(RVW/BW);酶联免疫吸附试附试验(ELISA)比较各组血浆中去甲肾上腺素(NE)和HF标志物利钠肽(BNP)的表达。结果与Ctrl组相比,CHF组心功能各项指标明显恶化(P毛蕊花糖苷组心脏功能指标显著改善、交感神经兴奋性和血浆BNP、NE水平显著降低(均P0.05)。结论毛蕊花糖苷可通过改善心脏血流动力学和降低交感神经兴奋性对CHF起到治疗作用。

关键词：毛蕊花糖苷慢性心力衰竭交感神经兴奋性心脏功能

毛蕊花糖苷抑制2型猪链球菌的溶血素蛋白活性而降低其小鼠致病性

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浙江农业学报 2022年第8期34卷 1609-1616页

作者：詹佳飞徐魁张磊夏介英洪杨董涵刘洋露周静袁明铭王永金鄢良春四川省中医药科学院实验动物中心四川成都610041 四川农业大学动物医学院四川成都611130

为了探究天然化合物毛蕊花糖苷(verbascoside, VBS)对2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2, SS2)致病性的作用,本研究通过测定最低抑菌浓度、绘制细菌生长曲线及红细胞溶血试验,发现低浓度下的毛蕊花糖苷不影响猪链球菌的正常生... 详细信息

为了探究天然化合物毛蕊花糖苷(verbascoside, VBS)对2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2, SS2)致病性的作用,本研究通过测定最低抑菌浓度、绘制细菌生长曲线及红细胞溶血试验,发现低浓度下的毛蕊花糖苷不影响猪链球菌的正常生长,但对其溶血活性有显著抑制作用;免疫印迹试验表明,毛蕊花糖苷不影响2型猪链球菌分泌溶血素蛋白(suilysin, SLY);通过分子对接预测毛蕊花糖苷可与SLY的2个氨基酸残基(SER-388、GLN-441)形成3条氢键结合从而使毛蕊花糖苷嵌入SLY蛋白的第4结构域,同时体外溶血活性试验进一步证实毛蕊花糖苷可直接抑制SLY介导的溶血活性;最后,小鼠体内试验结果表明,毛蕊花糖苷可明显提高2型猪链球菌感染小鼠的存活率。综上,毛蕊花糖苷在不影响2型猪链球菌生长活性的情况下,可通过抑制溶血素活性来降低2型猪链球菌对小鼠的致病性。

关键词： 2型猪链球菌溶血素毛蕊花糖苷致病性

毛蕊花糖苷对MC3T3-E1细胞增殖及成骨作用研究

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毛蕊花糖苷对MC3T3-E1细胞增殖及成骨作用研究

作者：董如玉新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:探索毛蕊花糖苷对小鼠前成骨细胞增殖及成骨分化作用的影响。方法:配置毛蕊花糖苷溶液,浓度1mmol/L-10mmol/L。细胞增殖及毒性检测法检测1mmol/L-10mmol/L的毛蕊花糖苷在第1d、第2d、第3d、第5d对小鼠前成骨细胞的增殖能力及细胞... 详细信息

目的:探索毛蕊花糖苷对小鼠前成骨细胞增殖及成骨分化作用的影响。方法:配置毛蕊花糖苷溶液,浓度1mmol/L-10mmol/L。细胞增殖及毒性检测法检测1mmol/L-10mmol/L的毛蕊花糖苷在第1d、第2d、第3d、第5d对小鼠前成骨细胞的增殖能力及细胞毒性作用。碱性磷酸酶染色及定量检测毛蕊花糖苷干预小鼠前成骨细胞7d和14d后的碱性磷酸酶活性和早期成骨能力。茜素红染色及半定量检测毛蕊花糖苷干预小鼠前成骨细胞14d和21d后的钙结节数量和晚期成骨能力。实时荧光定量PCR检测1mmol/L-10-mmol/L的毛蕊花糖苷干预小鼠前成骨细胞3d后碱性磷酸酶、I型胶原蛋白、Runt相关转录因子2、骨钙蛋白、Osterix的m RNA表达情况。结果:细胞增殖及毒性检测法的结果显示10、10、10mmol/L毛蕊花糖苷显著促进细胞增殖能力(P毛蕊花糖苷能显著促进碱性磷酸酶活性(P毛蕊花糖苷能显著增加茜素红染色的钙结节的数量(P毛蕊花糖苷处理细胞后,成骨基因的m RNA表达水平显著增加,包括碱性磷酸酶、I型胶原蛋白、Runt相关转录因子2、骨钙蛋白、Osterix。结论:10、10mmol/L的毛蕊花糖苷能够促进小鼠前成骨细胞的增殖及成骨分化。

关键词：毛蕊花糖苷 MC3T3-E1细胞增殖成骨分化