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高效液相色谱联用电喷雾检测器分析不同植物中棉子糖系列寡糖

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药物分析杂志 2018年第1期38卷 34-40页

作者：陈凌霄吴定涛赵静李绍平澳门大学中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078

目的:应用高效液相色谱联用电喷雾检测器(HPLC-CAD)分析不同植物中棉子糖系列寡糖(RFOs)。方法:采用微波辅助提取法制备RFOs提取物,再应用HPLC-CAD进行定性、定量分析。色谱条件:采用氨基色谱柱(4.6 mm×250 mm,3.5μm),流动相为水(A)-... 详细信息

目的:应用高效液相色谱联用电喷雾检测器(HPLC-CAD)分析不同植物中棉子糖系列寡糖(RFOs)。方法:采用微波辅助提取法制备RFOs提取物,再应用HPLC-CAD进行定性、定量分析。色谱条件:采用氨基色谱柱(4.6 mm×250 mm,3.5μm),流动相为水(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~20 min,75%B→45%B,20-22 min,45%B→75%B),流速为1 mL·min^(-1),柱温为30℃。外标一点法定量。结果:供试品溶液在48 h内稳定性较好,RSD小于2.8%;低、中、高浓度供试品溶液的重复性RSD分别小于3.6%、3.8%和3.1%。RFOs在豆科植物种子中分布广泛,其在水苏(总量426.19 mg·g^(-1))和生地黄(总量373.40 mg·g^(-1))中含量较高,而在车前草(总量1.08 mg·g^(-1))中含量极低。结论:水苏和地黄有潜力成为开发RFOs新资源。

关键词：棉子糖水苏糖毛蕊花糖水苏生地黄车前草定量分析质量控制高效液相色谱电喷雾检测器

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棉子糖制备及分析检测方法

粮油加工 2009年第6期 127-130页

作者：陈静云志南京工业大学化学化工学院

棉子糖是大豆低聚糖的重要组成部分。本文对棉子糖的制备和分析检测方法进行了综述。制备主要包括从甜菜糖蜜,棉籽和豆类种子中提取以及酶法合成;检测方法包括薄层色谱,离子交换色谱,高效液相色谱,毛细管电泳等。

关键词：棉子糖制备检测

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棉子糖乙酰化物的2D-NMR研究

波谱学杂志 1990年第3期7卷 261-268页

作者：李兴从王德祖杨崇仁中国科学院昆明植物研究所植物化学研究室

应用氢-氢和碳-氢相关谱(~1H-~1H COSY and^(13)C-~1H COSY),同核和异核J-分解谱(JRES and HETJRES),异核中继相干传递二维谱(RELAY)和异核远程化学位移相关谱(COLOC)研究了棉子糖乙酰化物的化学结构,并对COLOC及RELAY实验的参数取值进... 详细信息

应用氢-氢和碳-氢相关谱(~1H-~1H COSY and^(13)C-~1H COSY),同核和异核J-分解谱(JRES and HETJRES),异核中继相干传递二维谱(RELAY)和异核远程化学位移相关谱(COLOC)研究了棉子糖乙酰化物的化学结构,并对COLOC及RELAY实验的参数取值进行了讨论。结果表明,二维核磁共振技术特别是COLOC对于确定配糖体糖基的连接顺序和连接位置是十分有效的方法。

关键词：棉子糖乙酰化物核磁共振 NMR

棉籽双液相萃取工艺甲醇相中棉子糖提取液的脱色

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食品与发酵工业 2007年第4期33卷 73-76页

作者：梁立新云志南京工业大学化学化工学院

以棉籽为原料,经双液相萃取工艺中的甲醇相,通过加水及减压蒸馏得到棉子糖水溶液,超滤后用活性炭、Al2O3、硅胶和H2O2进行脱色处理,经过对比选择了最佳脱色剂活性炭,并对其脱色工艺进行了优化。得到活性炭最佳脱色条件为:活性炭添加量7.... 详细信息

以棉籽为原料,经双液相萃取工艺中的甲醇相,通过加水及减压蒸馏得到棉子糖水溶液,超滤后用活性炭、Al2O3、硅胶和H2O2进行脱色处理,经过对比选择了最佳脱色剂活性炭,并对其脱色工艺进行了优化。得到活性炭最佳脱色条件为:活性炭添加量7.5mg/mL,温度50℃,pH值3,时间20min。在最佳脱色条件下,测得脱色率为94.6%,且脱色液中检测不到游离棉酚的存在。

关键词：双液相萃取棉子糖活性炭脱色棉酚

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棉子糖对软骨细胞的保护作用及相关机制

棉子糖对软骨细胞的保护作用及相关机制

作者：王振南京医科大学

学位级别：硕士

目的探讨棉子糖(raffinose,RFN)对过氧化氢(hydrogen peroxide,HO)诱导的软骨细胞损伤的保护作用及相关机制。方法1.体外分离培养一周龄SD大鼠软骨细胞。CCK-8法检测棉子糖对HO作用下软骨细胞活力的影响。采用Western blot检测棉子糖对H... 详细信息

目的探讨棉子糖(raffinose,RFN)对过氧化氢(hydrogen peroxide,HO)诱导的软骨细胞损伤的保护作用及相关机制。方法1.体外分离培养一周龄SD大鼠软骨细胞。CCK-8法检测棉子糖对HO作用下软骨细胞活力的影响。采用Western blot检测棉子糖对HO作用下软骨细胞P16INK4a、Cleaved Caspase-3蛋白表达的影响。2.将细胞随机分为5组,予100 mM棉子糖分别刺激不同时间(0,6,12,24,48 h)。用Western blot检测AMPK磷酸化水平及自噬相关蛋白Atg12-5、LC3、P62的表达。用免疫荧光技术评估100 mM棉子糖处理24 h对胞浆内LC3荧光斑点数量的影响。将细胞随机分为如下4组:(1)对照组:常规培养细胞;(2)造模组,400μM HO处理细胞24 h;(3)棉子糖预保护组,100 mM棉子糖预处理2 h后予HO刺激细胞24 h;(4)3-MA抑制自噬组,10 mM 3-MA预处理1 h后再予棉子糖及HO处理细胞24 h。用Western blot检测Atg12-5、LC3、P62的表达。用SA-β-Gal染色检测软骨细胞衰老率。用Annexin V-FITC/PI双标法评估细胞凋亡率。用Western blot检测各组p-P53、P53、P21及P16INK4a等衰老相关蛋白及Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达。3.将细胞随机分为如下4组:(1)对照组:常规培养细胞;(2)造模组,400μM HO处理细胞24 h;(3)棉子糖预保护组,100 mM棉子糖预处理2 h后予HO刺激细胞24 h;(4)Compound C抑制AMPK组,用10μM Compound C预处理细胞1 h后,再予棉子糖及HO处理细胞24 h。Western blot检测AMPK磷酸化水平及自噬相关蛋白Atg12-5、LC3、P62的表达。结果1.棉子糖预处理可缓解400μM HO对细胞活力的抑制作用,且其最适保护浓度为100 mM。Western blot结果证实,棉子糖预处理剂量依赖性抑制HO诱导的P16INK4a及Cleaved Caspase-3的表达。2.100 mM棉子糖时间依赖性的诱导AMPK磷酸化,上调Atg12-5的表达及LC3-II/I的比值,并下调自噬底物蛋白P62的水平。免疫荧光结果显示100mM棉子糖处理24 h显著增加胞浆内LC3荧光斑点的数量。棉子糖还显著上调HO作用下软骨细胞Atg12-5的表达、LC3-II/I的比值并下调P62水平。而棉子糖对Atg12-5、LC3及P62的调节作用均被自噬抑制剂3-MA逆转。与造模组相比,棉子糖预处理显著降低细胞衰老率和凋亡率。而棉子糖对衰老率、凋亡率的抑制作用被3-MA显著缓解。一致地,棉子糖对P53磷酸化、P21、P16INK4a蛋白表达等衰老标志物及Bax/Bcl-2比值、Cleaved Caspase-3表达等凋亡标志物的抑制作用也均被3-MA逆转。3.棉子糖上调HO作用下软骨细胞AMPK磷酸化水平。而棉子糖对AMPK磷酸化的促进作用被Compound C显著抑制。此外,棉子糖对自噬相关蛋白Atg12-5、LC3、P62的调节作用,也均被AMPK抑制剂Compound C显著抑制。结论1.棉子糖通过抑制HO诱导的细胞衰老及凋亡,从而发挥软骨保护作用。2.棉子糖通过诱导AMPK磷酸化促进软骨细胞自噬,从而抑制HO诱导的软骨细胞衰老和凋亡。

关键词：棉子糖软骨细胞过氧化氢自噬衰老凋亡

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棉子糖工业化提取过程中的测定方法

上海大学学报（自然科学版） 2003年第3期9卷 276-278页

作者：罗宁刚顾建明上海大学生命科学学院上海200436

该文介绍了一种适用于工业化提取具有保健功能的棉子糖过程中糖含量的测定方法.采用薄层分离技术和盐酸水解-DNS比色法,建立了一种对于批量生产中同批样品适用的棉子糖的测定方法.该方法方便、快速、经济、重现性好.

关键词：薄层层析棉子糖功能性低聚糖检测工业化提取

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脱脂麦胚棉子糖提取液的脱色

食品科学 2011年第8期32卷 138-142页

作者：魏培培马晓军江南大学食品学院江苏无锡214122

为提高棉子糖产品的质量,采用活性炭对棉子糖提取液脱色。先利用单因素试验分别考察活性炭添加量(1～5g/100mL)、脱色温度(40～80℃)、pH值(4.5～5.5)、脱色时间(0.5～2.5h)对脱色效果的影响。而后在此基础上采用三因素三水平响应面分析... 详细信息

为提高棉子糖产品的质量,采用活性炭对棉子糖提取液脱色。先利用单因素试验分别考察活性炭添加量(1～5g/100mL)、脱色温度(40～80℃)、pH值(4.5～5.5)、脱色时间(0.5～2.5h)对脱色效果的影响。而后在此基础上采用三因素三水平响应面分析法,依据回归分析确定较优脱色条件。结果表明,较优的脱色条件为活性炭添加量4g/100mL、脱色温度50℃、pH5.0、脱色时间2h。在此条件下脱色率可达94.6%,且棉子糖损失极小。采用活性炭对脱脂麦胚棉子糖提取液脱色可取得良好效果。

关键词：脱脂麦胚棉子糖活性炭脱色响应面分析

饲料中半乳寡糖和棉子糖对花鲈生长、免疫以及肠道菌群的影响

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饲料中半乳寡糖和棉子糖对花鲈生长、免疫以及肠道菌群的影响

作者：葛红云中国农业科学院

学位级别：硕士

本试验研究两种低聚寡糖半乳寡糖和棉子糖对肉食性鱼类花鲈(Lateolabrax japonicus)生长性能、血液生理生化指标、非特异性免疫、抗氧化功能、抗嗜水气单胞菌累积存活率及肠道微生物结构的影响。确定半乳寡糖和棉子糖在花鲈饲料中的最... 详细信息

本试验研究两种低聚寡糖半乳寡糖和棉子糖对肉食性鱼类花鲈(Lateolabrax japonicus)生长性能、血液生理生化指标、非特异性免疫、抗氧化功能、抗嗜水气单胞菌累积存活率及肠道微生物结构的影响。确定半乳寡糖和棉子糖在花鲈饲料中的最适添加量,并对二者作为益生素添加剂的功能进行比较研究。本研究共包括5个部分试验,摘要如下:1、试验一评价乳源益生素半乳寡糖对花鲈生长、免疫及抗嗜水气单胞菌的效果。试验共有五个处理组: 0(对照组), 20, 40, 80和200g/kg半乳寡糖;每种饲料通过挤压旋转成球机器制成颗粒。每个处理3个重复,花鲈的初始体重3g左右,试验在260L的纤维玻璃缸循环养殖系统中进行。试验共持续16周,16周饲喂试验结束后,进行空气暴露试验和嗜水气单胞菌攻毒试验。结果表明,饲料中添加20g/kg以上半乳寡糖显著提高花鲈的抗病能力(P 糖组增加了花鲈的生长性能,但与对照组没有显著差异( P > 0.05 )。最高剂量组200g/kg花鲈血清中的丙二醛(MDA)显著较其它组高(P 糖。2、试验二研究了棉子糖对花鲈生长、非特异性免疫、抗应激能力和嗜水气单胞菌攻毒后累积存活率的影响。基础饲料依据花鲈营养需求配制。试验设计5个处理,棉子糖在饲料中的添加量分别为:0(对照组)、200、400、800和2000 mg/Kg,分别命名为R0、R200、R400、R800和R2000。每个处理3个重复,每个重复30尾鱼(初始体重3g左右)。试验共持续16周,试验结束后称重并取血清样品用于测定免疫和抗氧化指标。此外还分别进行了30s空气暴露应激和嗜水气单胞菌攻毒试验。结果表明,各试验组花鲈存活率和摄食率没有显著差异(P > 0.05 );R800组增重率显著高于对照组、R400和R2000组(P 0.05 );各个处理间肝指数没有显著差异( P > 0.05 );对照组、R200和R2000肥满度显著高于R400和R800组(P 糖和皮质醇也没有显示差异,但嗜水汽单胞菌(Aeromonas hydrophila Hoshina)攻毒后对照组累计存活率为65%,显著低于各试验组。棉子糖在花鲈饲料里适宜添加量为800mg/kg。3、试验三通过稀释涂布平板法,对花鲈肠道细菌进行计数和分离培养,分析半乳寡糖和棉子糖作为饲料添加剂对花鲈肠道微生物数量以及多样性的影响。结果表明,饲喂添加半乳寡糖和棉子糖的花鲈肠道细菌起始数量3.38×104cfu/g,8周后细菌数量级为108 cfu/g;16周后肠道细菌数量级为1011 cfu/g。16周时,对照组分离到了11株细菌,10株为假单胞菌,1株为气单胞菌。在16周半乳寡糖试验组中,G4处理组分离到了7株细菌,4株为芽孢杆菌;G20处理组分离到6株细菌,2株为气单胞菌。在16周棉子糖试验组中,R200处理分离到11株细菌,1株为芽孢杆菌;R2000处理分离到17株细菌,1株为芽孢杆菌,1株为气单胞菌。从本试验的结果可知,饲料中添加200mg/kg的棉子糖和4g/kg的半乳寡糖有利于芽孢杆菌的生长,同时抑制了气单胞菌的生长。4、试验四主要采用PCR结合变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术分析半乳寡糖作为饲料添加剂对饲喂初期、8周和16周花鲈肠道细菌多样性的影响。肠道细菌16S rDNA序列特征片段V3区序列经DGGE后,发现花鲈肠道内容物中细菌的多样性较丰富。结果表明,(1)8周,各试验组均能保持原生菌假单胞菌在肠道中定植,但到16周,假单胞菌从所有处理组肠道中消失;(2)除了8周G2处理肠道中没有肠杆菌外,8周其他各个处理和16周所有处理花鲈肠道中均存在肠杆菌;(3)从初期、8周和16周,G8和G20处理组均能够促进原生菌寡养单胞菌在肠道中定植;(4)16周时,G8和G20处理组出现克雷伯氏菌;(5)8周时,各个处理花鲈肠道中出现假交替单胞菌,但到16周时,仅各试验组肠道均分离到假交替单胞菌,可见,各试验组能够促进这种外源假交替单胞菌在肠道中定植。5、试验五采用PCR结合变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术分析棉子糖作为饲料添加剂对饲喂初期、8

关键词：花鲈半乳寡糖棉子糖非特异性免疫抗应激嗜水气单胞菌肠道细菌多样性稀释涂布平板 PCR-DGGE 16S rRNA

稀释液中添加棉子糖对冻融后绵羊精液品质的影响

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中国畜牧兽医 2011年第12期38卷 138-141页

作者：张少华张春香岳文斌曹宁贤任有蛇李志军山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 山西省畜禽繁殖改良站山西太原030001

本试验目的是研究稀释液中添加不同浓度的棉子糖对冻融后绵羊精液品质的影响。选用10只健康乌珠穆沁种公羊,采集精液经检验合格在37℃下混匀,精液样品平均分成5份,用含有0、5、10、15、20mmol/L的不同浓度棉子糖稀释液稀释。采用0.25mL... 详细信息

本试验目的是研究稀释液中添加不同浓度的棉子糖对冻融后绵羊精液品质的影响。选用10只健康乌珠穆沁种公羊,采集精液经检验合格在37℃下混匀,精液样品平均分成5份,用含有0、5、10、15、20mmol/L的不同浓度棉子糖稀释液稀释。采用0.25mL细管法冷冻,将冷冻后的细管精液置于37℃水浴锅中解冻15s后进行相关指标评价及酶(SOD、GSH、MDA、GSH-Px和CAT)的测定。结果表明,当棉子糖的添加量为15mmol/L时精子活率显著高于对照组(P<0.05),畸形率显著低于对照组(P<0.05),弯尾率显著高于对照组(P<0.05),SOD活力显著提高(P<0.05),MDA也显著低于对照组(P<0.05)。

关键词：稀释液棉子糖绵羊精子

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