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基于兔尺桡骨解剖学测量的新型骨缺损模型的建立及评估

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中国修复重建外科杂志 2016年第2期30卷 173-177页

作者：刘寒江郭营梅伟郑州市骨科医院郑州450052

目的介绍一种基于兔尺桡骨解剖学测量的骨缺损模型建立方法,为组织工程研究提供标准化模型参考。方法取健康4月龄新西兰大白兔15只,对其尺桡骨进行解剖及micro-CT测量分析。另取健康4月龄新西兰大白兔30只,随机分为A、B、C 3组,每组10只... 详细信息

目的介绍一种基于兔尺桡骨解剖学测量的骨缺损模型建立方法,为组织工程研究提供标准化模型参考。方法取健康4月龄新西兰大白兔15只,对其尺桡骨进行解剖及micro-CT测量分析。另取健康4月龄新西兰大白兔30只,随机分为A、B、C 3组,每组10只。3组均通过手术造成双侧桡骨缺损,A组选择桡侧腕伸肌与指伸肌间隙入路,用线锯造模,完全切除骨膜和骨间膜;B、C组基于兔尺桡骨解剖学测量分析结果,选择桡侧腕伸肌与指深屈肌间隙入路,用电锯造模,B组完全切除骨膜和骨间膜,C组切除骨膜、保留骨间膜。分别于术后即刻及15周行大体观察、X线片检查、micro-CT及骨矿含量(bone mineral content,BMC)、骨密度(bone mineral density,BMD)定量分析;行HE染色和Masson染色观察骨缺损区成骨情况。结果 A组实验动物发生术中血管损伤1只、肌腱损伤2只,术后血肿及感染各1只;C组发生术后感染1只;B组无并发症发生;A组并发症发生率(50%)显著高于B(0%)、C组(10%)(P骨缺损在15周时仍未完全修复,C组已有连续性骨痂形成。骨组织定量分析显示,术后15周A、B、C组BMC和BMD组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术后15周HE染色和Masson染色示,A组有新生骨形成,但结构紊乱,骨质硬化;B、C组可见有新生骨形成,骨细胞中间仍有成软骨细胞存在。结论选择桡侧腕伸肌与指深屈肌间隙入路制备兔桡骨缺损模型,显露明显,出血量少,有效降低了手术并发症,为大段骨缺损研究提供了一种理想的造模方法;骨间膜在桡骨大段骨缺损修复过程中有一定作用,具体机制有待进一步研究。

关键词：桡骨缺损动物模型 Micro-CT 解剖测量兔

带腓骨长短肌的游离腓骨复合组织瓣在复杂肢体创伤中的应用

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中华创伤骨科杂志 2019年第10期21卷 839-842页

作者：孙蕴初文根徐佳徐凤吉柴益民上海交通大学医学院 200025 上海交通大学附属第六人民医院骨科 200233 上海市青浦区朱家角人民医院急诊科 201700

目的探讨应用带腓骨长短肌的游离腓骨复合组织瓣治疗复杂肢体创伤的可行性。方法回顾性研究2014年8月至2017年9月上海交通大学附属第六人民医院骨科采用带腓骨长短肌的游离腓骨复合组织瓣治疗的5例复杂肢体损伤患者资料。患者男4例,女1... 详细信息

目的探讨应用带腓骨长短肌的游离腓骨复合组织瓣治疗复杂肢体创伤的可行性。方法回顾性研究2014年8月至2017年9月上海交通大学附属第六人民医院骨科采用带腓骨长短肌的游离腓骨复合组织瓣治疗的5例复杂肢体损伤患者资料。患者男4例,女1例;年龄23~52岁,平均35.1岁;桡骨缺损1例,尺骨缺损1例,胫骨缺损3例;骨缺损长度7~18 cm,软组织缺损面积10 cm×5 cm^18 cm×8 cm。彻底清创后根据损伤区域软组织条件及缺损面积,设计复合组织瓣修复骨缺损并固定,覆盖创面,功能重建。术后观察皮瓣存活情况、受区相应肌腱功能恢复情况、腓骨愈合时间。观察供区伤口愈合情况,供区踝关节活动功能,是否存在供区并发症。结果所有患者术后均获随访,时间为18~38个月(平均25.2个月)。所有皮瓣均存活,未出现血管危象,且均未出现感染。移植腓骨愈合时间为4~16个月(平均8.4个月)。3例胫骨缺损患者背伸最大角度为0~10°,未出现足下垂;前臂骨缺损患者均重建屈拇及屈指功能,仅能对示指,不能握拳。5例皮瓣供区均采用负压封闭引流后二期缝合伤口,伤口愈合良好,其中1例瘢痕增生明显。供侧未见明显足内翻,患者踝关节活动功能满意。随访过程中未出现腓骨瓣再骨折。患者对治疗结果满意。结论带腓骨长短肌的游离腓骨复合组织瓣治疗存在肌肉肌腱缺损的复杂肢体创伤可行,可以作为治疗的备选方案。

关键词：复合组织瓣肌腱缺损肢体创伤腓骨瓣游离关节活动功能皮瓣供区桡骨缺损

复合血管生成素1基因及富血小板血浆的组织工程骨修复桡骨骨缺损

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中国修复重建外科杂志 2011年第9期25卷 1115-1119页

作者：刘旭东曹乐蒋垚曾炳芳张长青上海交通大学附属第六人民医院骨科上海200233

目的探讨以β磷酸三钙(β tricalcium phosphate,β-TCP)为支架,复合富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)和转染血管生成素1(angiopoietin1,Ang-1)基因的组织工程骨修复节段性骨缺损的能力。方法取兔股骨骨髓分离培养BMSCs,将Ang-1... 详细信息

目的探讨以β磷酸三钙(β tricalcium phosphate,β-TCP)为支架,复合富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)和转染血管生成素1(angiopoietin1,Ang-1)基因的组织工程骨修复节段性骨缺损的能力。方法取兔股骨骨髓分离培养BMSCs,将Ang-1基因通过慢病毒转染至第2代BMSCs,转染后48h接种于β-TCP上培养,然后复合0.5mLPRP,制备复合PRP的组织工程骨。取20只3月龄新西兰大白兔制备双侧桡骨15mm骨缺损模型,采用自身对照,分别于每只动物左侧和右侧骨缺损处植入未转染Ang-1基因的组织工程骨(对照组)及转染Ang-1基因的组织工程骨(实验组)。术后行大体观察,于2、4、8、12周行X线片观察,取材行HE染色、免疫组织化学染色及生物力学检测。结果细胞转染48h后转染效率>90%,通过RT-PCR检测到转染细胞内Ang-1基因表达显著增高。术后所有动物患肢活动良好。X线片观察示实验组术后4周骨缺损处已有骨痂形成,8周有部分骨性愈合,12周骨缺损处完全骨性愈合;对照组至术后12周时无骨性愈合。HE染色示实验组术后8周有毛细血管出现,12周大量毛细血管生长于新生骨中;对照组8周未见新生毛细血管,12周见少量毛细血管。术后8、12周实验组微血管密度分别为(50.1±7.8)个/mm2和(66.1±3.5)个/mm2,对照组分别为0和(30.3±7.2)个/mm2;术后12周两组间比较差异有统计学意义(Z=—2.107,P=0.031)。免疫组织化学染色观察示术后8周实验组仍有Ang-1分泌。生物力学测试结果显示术后12周实验组三点弯曲试验和压缩试验的最大负荷均显著高于对照组(P桡骨节段性骨缺损后,组织工程骨内可形成新生血管,促进骨愈合。

关键词：组织工程骨血管生成素1 基因转染桡骨缺损修复兔

血管基质成分联合脱细胞骨基质-壳聚糖支架修复桡骨缺损

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中国组织工程研究 2017年第6期21卷 843-847页

作者：邵擎东汪铮李宇飞许天明孙久一江峰吕峰霞解放军第四五五医院骨科上海市200052 解放军第四五五医院生物诊疗科上海市200052 解放军第四五五医院整形外科上海市200052

背景:研究表明,复合使用人工组织工程骨材料和脱细胞骨基质做为骨缺损修复的支架材料,可以综合两者的优点。目的:进一步验证脂肪组织基质血管基质性成分联合脱细胞骨基质壳聚糖支架复合物修复兔桡骨缺损的安全性和生物相容性。方法:取3... 详细信息

背景:研究表明,复合使用人工组织工程骨材料和脱细胞骨基质做为骨缺损修复的支架材料,可以综合两者的优点。目的:进一步验证脂肪组织基质血管基质性成分联合脱细胞骨基质壳聚糖支架复合物修复兔桡骨缺损的安全性和生物相容性。方法:取38只新西兰大白兔,其中3只用于脂肪组织血管基质成分的制备,3只用于脱细胞骨基质的制备,32只分为实验组和对照组,采用Brownlow法制备桡骨缺损型,实验组移植血管基质成分-脱细胞骨基质壳聚糖复合支架,对照组造模后不做任何处理。术后2,4个月分别进行一般情况和大体观察、X射线拍照、病理观察、Lane-Sandhu组织学评分。结果与结论:1术后2,4个月2组无感染现象,但实验组的活动量和愈合程度显著性好于对照组;2术后2个月实验组骨缺损部位的X射线影像结果有显著灰白色的高密度影,术后4个月与正常的桡骨骨组织相同,对照组骨不连接;3术后2,4个月实验组病理显示骨组织生长情况显著性的高于对照组,Lane-Sandhu组织学评分显著性的高于对照组(P桡骨缺损具有很好的安全性和生物相容性。

关键词：骨基质壳聚糖支架组织工程生物材料骨生物材料血管基质成分脱细胞骨基质桡骨缺损

磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料填充桡骨缺损的生物相容性

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中国组织工程研究 2016年第52期20卷 7829-7835页

作者：黄田郑南生张育专吴永乐王刚海南省第二人民医院海南省五指山市572299 海南省中医院海南省海口市570203

背景:磷酸钙骨水泥与人体自身骨矿物的化学组成和结构相似,能够填充因骨折造成的骨质塌陷,具有诱导成骨作用,但其降解速度较慢。目的:评估磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料的生物相容性及修复桡骨缺损的可行性。方法:(1)体外细胞毒性实... 详细信息

背景:磷酸钙骨水泥与人体自身骨矿物的化学组成和结构相似,能够填充因骨折造成的骨质塌陷,具有诱导成骨作用,但其降解速度较慢。目的:评估磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料的生物相容性及修复桡骨缺损的可行性。方法:(1)体外细胞毒性实验:分别以磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料浸提液、苯酚溶液,含体积分数为10%胎牛血清RPMI1640培养液培养小鼠成纤维细胞,检测细胞毒性分级;(2)血液相容性实验:在兔抗凝血中分别加入磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料浸提液、生理盐水及双蒸水,检测溶血率;(3)取45只新西兰大白兔,制备双侧桡骨缺损模型,随机分3组,空白对照组不进行任何干预,实验组与骨缺损处植入磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料,对照组植入自体桡骨。术后4,8,16周,进行X射线、组织学、骨密度及生物力学检测。结果与结论:(1)细胞毒性:磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料浸提液的毒性为0至1级;(2)血液相容性:磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料的溶血率为3.15%;(3)体内修复实验:术后16周,X射线显示,实验组和对照组骨折线完全消失,髓腔复通,塑性完全;组织学显示,对照组骨小梁重建较明显,板层骨较成熟,髓腔再通,实验组有大量新生编织骨成网格状长入材料中,材料降解明显,降解与骨长入同步;实验组与对照组骨密度、最大负荷、最大应力和破坏能量均明显高于空白对照组(P骨缺损可促进骨组织再生,获得与自体骨移植基本相当的治疗效果。

关键词：磷酸钙类纤维蛋白组织粘着剂组织工程生物材料骨生物材料桡骨缺损磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶生物相容性动物模型

BMP-2/bFGF双基因转染BMSCs复合生物陶瓷骨对兔桡骨缺损的修复作用

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解剖科学进展 2022年第1期28卷 9-13页

作者：韩操颜南王正东张丽娜沈阳医学院附属中心医院手外科辽宁沈阳110024 沈阳医学院应用技术学院康复教研室辽宁沈阳110034 沈阳医学院基础医学院解剖教研室辽宁沈阳110034 沈阳医学院附属中心医院重症医学科辽宁沈阳110024

目的探究BMP-2/bFGF双基因转染BMSCs复合生物陶瓷骨对兔桡骨缺损的修复作用及可能机制。方法分离培养兔BMSCs并鉴定,将BMP-2/bFGF过表达慢病毒转染兔BMSCs,Western blot验证转染效率;ALP试剂盒检测桡骨组织ALP活性,HE染色观察桡骨组织... 详细信息

目的探究BMP-2/bFGF双基因转染BMSCs复合生物陶瓷骨对兔桡骨缺损的修复作用及可能机制。方法分离培养兔BMSCs并鉴定,将BMP-2/bFGF过表达慢病毒转染兔BMSCs,Western blot验证转染效率;ALP试剂盒检测桡骨组织ALP活性,HE染色观察桡骨组织形态变化,并通过Lane-Sandhu组织学评分分析桡骨修复情况;免疫荧光检测桡骨组织Col I、OC和OPN表达;Western blot方法检测桡骨骨膜VEGF和EGF水平。结果BMP-2/bFGF双基因转染BMSCs改善缺损桡骨组织形态,增加桡骨组织Lane-Sandhu组织学评分,增加桡骨组织Col I、OC和OPN表达及桡骨骨膜VEGF和EGF表达水平。结论BMP-2/bFGF双基因转染BMSCs复合生物陶瓷骨对兔桡骨缺损存在修复作用,其机制可能与增加骨组织VEGF和EGF水平有关。

关键词： BMP-2 bFGF BMSCs 桡骨缺损生物陶瓷骨

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脂肪干细胞复合明胶海绵修复兔桡骨缺损

中国组织工程研究 2013年第34期17卷 6083-6088页

作者：刘刚汪明星闫长明王云清魏学杰胡兆丽徐州医学院第二附属医院江苏省徐州市221000 徐州医学院生物化学与分子生物学实验室江苏省徐州市221004

背景:脂肪干细胞是近年来新发现的一种成体干细胞,有很强的多向分化能力,但其在体内成骨分化的能力研究较少。目的:考察脂肪组织来源间充质干细胞复合明胶海绵修复骨缺损的效果。方法:从兔腹股沟脂肪垫分离和培养脂肪干细胞,用含骨形态... 详细信息

背景:脂肪干细胞是近年来新发现的一种成体干细胞,有很强的多向分化能力,但其在体内成骨分化的能力研究较少。目的:考察脂肪组织来源间充质干细胞复合明胶海绵修复骨缺损的效果。方法:从兔腹股沟脂肪垫分离和培养脂肪干细胞,用含骨形态发生蛋白2的成骨诱导培养液进行培养,然后注入明胶海绵继续培养。制作兔桡骨缺损模型,将脂肪干细胞-明胶海绵复合体植入实验侧兔桡骨缺损区,对照侧植入明胶海绵。于骨缺损修复后第6,12周处死动物,取标本进行X射线、CT扫描、苏木精-伊红染色作放射学和组织学评价。结果与结论:兔桡骨缺损修复后6,12周,植入明胶海绵-脂肪干细胞复合体的实验侧的Lane-SandhuX射线评分和Lane-Sandhu组织学评分均比对照侧显著升高,说明实验侧骨缺损修复更好。结果表明脂肪干细胞-明胶海绵复合体对兔长骨骨缺损修复有促进作用,具有较明显的体内诱导成骨作用。

关键词：生物材料组织工程骨材料脂肪干细胞桡骨缺损骨形态发生蛋白细胞培养组织学放射学

深低温冻存羟基磷灰石/骨髓间充质干细胞修复兔桡骨缺损

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中国组织工程研究 2013年第25期17卷 4629-4636页

作者：邢志远张继波孔令菊刘建生郑德宇盘锦市中心医院骨科辽宁省盘锦市124000 辽宁医学院解剖学教研室辽宁省锦州市121001

背景:以往研究表明羟基磷灰石复合骨髓间充质干细胞具有良好的骨缺损修复效果,但这种复合材料在冻存后是否具有骨缺损修复效果还不清楚。目的:观察深低温冻存羟基磷灰石/骨髓间充质干细胞复合修复骨缺损的效果。方法:制备27只日本大耳... 详细信息

背景:以往研究表明羟基磷灰石复合骨髓间充质干细胞具有良好的骨缺损修复效果,但这种复合材料在冻存后是否具有骨缺损修复效果还不清楚。目的:观察深低温冻存羟基磷灰石/骨髓间充质干细胞复合修复骨缺损的效果。方法:制备27只日本大耳白兔桡骨10mm缺损模型,随机分为冻存复合材料组、新鲜复合材料组与羟基磷灰石组,3组分别于骨缺损处植入-80℃保存3个月的羟基磷灰石/同种异体骨髓间充质干细胞复合物、新鲜制备的羟基磷灰石/同种异体骨髓间充质干细胞复合物及单纯羟基磷灰石,植入后8,12周行大体观察、X射线观察及苏木精-伊红染色等组织学观察,并于12周行生物力学检测。结果与结论:术后12周,冻存复合材料组、新鲜复合材料组骨缺损大部分愈合,有成熟骨小梁通过,有的可见髓腔通畅,塑形较好;羟基磷灰石组骨痂生成少,骨缺损部分愈合,塑形欠佳,新骨生成少于冻存复合材料组、新鲜复合材料组(P骨缺损修复能力与新鲜制作的复合材料几乎一致,未因冻存受到影响。

关键词：生物材料骨组织构建羟基磷灰石骨髓间充质干细胞支架材料复合物低温冻存桡骨缺损省级基金

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绵羊羊膜上皮细胞治疗兔桡骨缺损模型的研究

中国生物工程杂志 2012年第7期32卷 31-36页

作者：朱雪敏刘俊平杨银凤王秀梅米焱李海军李砚孟庆刚曹贵方内蒙古农业大学动物组织胚胎与发育生物学研究室呼和浩特010018

为了确定绵羊羊膜上皮细胞在体内向骨组织的分化能力,实验在分离培养绵羊羊膜上皮细胞并对其进行干细胞特性的鉴定的基础上,制作新西兰大白兔桡骨13mm骨缺损模型,随机分组对其进行注射绵羊羊膜上皮细胞实验。高剂量组:移植细胞5×107个... 详细信息

为了确定绵羊羊膜上皮细胞在体内向骨组织的分化能力,实验在分离培养绵羊羊膜上皮细胞并对其进行干细胞特性的鉴定的基础上,制作新西兰大白兔桡骨13mm骨缺损模型,随机分组对其进行注射绵羊羊膜上皮细胞实验。高剂量组:移植细胞5×107个;低剂量组:移植细胞5×106个;对照组:生理盐水。细胞移植后2、4、8周拍摄X光片观察骨缺损部位的缺损修复情况;相应时段取骨缺损部位新生骨进行组织学观察:分析骨小梁生成数量和骨的改建时期。实验结果显示,高剂量实验组在移入细胞第8周,骨缺损完全修复,且同期高剂量组新骨生成的数量和质量明显高于低剂量组,低剂量组优于对照组。由此可见,绵羊羊膜上皮细胞不仅可以在不同种动物间进行移植,而且对骨缺损有良好的修复能力。

关键词：绵羊羊膜上皮细胞干细胞特性桡骨缺损