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链脲佐菌素致阿尔茨海默病模型大鼠脑内mTOR/P70s6K/IRs-1信号通路的变化

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重庆医科大学学报 2015年第5期40卷 687-692页

作者：王华杨容余华荣重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

目的:观察侧脑室(intracerebroventricular,ICV)注射链脲佐菌素(streptozotocin,sTZ)对大鼠脑内m TOR/P70s6K/IRs-1信号通路的影响。方法:将30只雄性sD大鼠随机分为对照组和模型组,每组各15只,对照组于第1天和第3天ICV注射生理盐水,模... 详细信息

目的:观察侧脑室(intracerebroventricular,ICV)注射链脲佐菌素(streptozotocin,sTZ)对大鼠脑内m TOR/P70s6K/IRs-1信号通路的影响。方法:将30只雄性sD大鼠随机分为对照组和模型组,每组各15只,对照组于第1天和第3天ICV注射生理盐水,模型组于第1天和第3天侧脑室注射sTZ(ICV-sTZ,3 mg/kg)建立AD模型。第1次注射后36 d采用Morris水迷宫检测2组大鼠空间学习和记忆能力的变化;Western blot检测2组大鼠大脑皮质和海马组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-m TORser2448)、核糖体40s小亚基s6蛋白激酶(P70 ribosomal s6 protein kinase,P70s6K)、磷酸化核糖体40s小亚基s6蛋白激酶(phosphorylated P70 ribosomal s6 protein kinase,p-P70s6KThr389)、胰岛素受体底物-1(insulin receptor substract-1,IRs-1)和磷酸化胰岛素受体底物-1(phosphorylated insulin receptor substract-1,p-IRs-1ser636)蛋白的表达;HE染色观察2组大鼠大脑皮质和海马组织形态学的改变;甲硫素s染色观察2组大鼠脑内Aβ的沉积。结果:Morris水迷宫结果显示ICV-sTZ能明显降低大鼠目标象限停留时间[对照组:(55.945±9.447)s,模型组:(31.961±5.346)s,t=8.558,P=0.000]和穿越平台次数[对照组:(7.533±2.560)次,模型组:(2.867±1.506)次,t=6.086,P=0.000];HE染色可见:ICV-sTZ大鼠大脑皮质和海马的部分细胞出现了明显的固缩和肿胀;甲硫素s染色发现:在ICV-sTZ处理后,大鼠脑内出现Aβ的大量沉积。Western blot结果表明:ICV-sTZ能同时增加大鼠大脑皮质p-P70s6KThr389[对照组:(0.268±0.066),模型组:(0.654±0.079),t=-8.409,P=0.000]、p-IRs-1ser636[对照组:(0.710±0.092),模型组:(1.033±0.135),t=-4.417,P=0.002]和海马p-P70s6KThr389[对照组:(0.405±0.064),模型组:(0.732±0.077),t=-7.339,P=0.000]、p-IRs-1ser636[对照组:(0.498±0.093),模型组:(0.836±0.102),t=-5.496,P=0.001]蛋白的表达,但不影响大鼠大脑皮质和海马P70s6K、m TOR、p-m TORser2448、IRs-1蛋白的表达。结论:ICV-sTZ能增加大鼠脑内m TOR/P70s6K/IRs-1信号通路的激活,提示异常活化的m TOR/P70s6K/IRs-1信号通路可能参与了AD的发生发展。

关键词：阿尔茨海默病哺乳动物雷帕霉素靶蛋白核糖体40s小亚基s6蛋白激酶胰岛素受体底物-1

非小细胞肺癌组织中p-mTOR、p70s6k的表达变化及其临床意义

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山东医药 2016年第11期56卷 11-13页

作者：许浩然吕艳超韩双双王丽红岳洪娟王嘉承德市中心医院河北承德067000 保定市第一中心医院总院河北医科大学第一医院

目的观察非小细胞肺癌组织中磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)及核糖体40s小亚基s6蛋白激酶(p70s6k)蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法非小细胞肺癌患者82例,手术切除肿瘤组织作为肺癌组,取患者肺癌同侧远端的肺泡正常组织46例份作为对照... 详细信息

目的观察非小细胞肺癌组织中磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)及核糖体40s小亚基s6蛋白激酶(p70s6k)蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法非小细胞肺癌患者82例,手术切除肿瘤组织作为肺癌组,取患者肺癌同侧远端的肺泡正常组织46例份作为对照组1,正常支气管黏膜组织50例份为对照组2。免疫组化方法检测3组组织中的p-m TOR及p70s6k蛋白,并分析其与非小细胞肺癌临床病理参数的关系。结果肺癌组、对照组1、对照组2 p-m TOR蛋白表达阳性率分别为68.29%、17.39%、32.0%,p70s6k蛋白表达阳性率分别为85.37%、21.74%、32.00%,肺癌组与对照组1、对照组2相比,P均小细胞肺癌低分化p-m TOR蛋白表达阳性率高于中高分化(Ps6k蛋白的表达呈正相关(r=0.21,P=0.003 2)。结论p-m TOR、p70s6k蛋白在非小细胞肺癌组织中高表达,可作为早期诊断肺癌的指标或抗癌药物作用的新靶点。

关键词：肺肿瘤非小细胞肺癌磷酸化雷帕霉素靶蛋白核糖体40s小亚基s6蛋白激酶

shRNA对EC9706细胞p70s6K表达的影响

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郑州大学学报（医学版） 2011年第1期46卷 7-9页

作者：郭三星侯桂琴李杰张艳贝维娟薛乐勋郑州大学第一附属医院肿瘤细胞研究室郑州450052 郑州大学药学院郑州450001 郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州450001

目的:观察核糖体40s小亚基s6蛋白激酶(p70s6K)特异性短发夹RNA(shRNA)对EC9706细胞p70s6K表达的影响。方法:根据GenBank p70s6K的mRNA序列,设计并合成p70s6K特异性的shRNA序列,退火形成双链后插入psIREN-RetroQ-DsRed-Express载体,构建表达载体pshRNA-p70s6K,转染EC9706细胞。采用RT-PCR和Western blot方法分别检测转染24、48、72、96及120h后细胞中p70s6K mRNA和磷酸化p70s6K的表达,设未转染的EC9706细胞为对照。结果:各组细胞p70s6K mRNA和磷酸化p70s6K蛋白的表达差异有统计学意义(F=106.343,721.632,P均s6K mRNA的表达在转染24、48和72h后均较对照组下降(Ps6K蛋白的表达在转染24、48、72和96h后均较对照组下降(Ps6K特异性shRNA能够下调EC9706细胞中p70s6K mRNA和蛋白的表达。

关键词：食管肿瘤 EC9706 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白核糖体40s小亚基s6蛋白激酶短发夹RNA

Ezrin与P70s6K在三种骨肿瘤中的表达变化及临床意义

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Ezrin与P70S6K在三种骨肿瘤中的表达变化及临床意义

作者：王景峰河北北方学院

学位级别：硕士

通过检测骨肉瘤(osteosarcoma,Os)、骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCTB)及骨软骨瘤(osteochondroma,OC)组织中埃兹蛋白(Ezrin)和核糖体40s小亚基s6蛋白激酶(40s small subunit ribosomal protein s6 kinase,P70s6K)蛋白的表达情况,研究Ezrin与P70s6K分别在三种骨肿瘤中的表达差异,分析Ezrin和P70s6K与Os,GCTB临床病理特征的关系及两者表达的相关性;以期为Os,GCTB侵袭转移和复发分子机制的研究提供理论依据,也望为Os,GCTB的诊治提供新靶点。收集中国人民解放军第二五一医院病理科2000年1月015年1月间的穿刺或手术切除病理标本共100例,其中Os 40例、GCTB 40例、OC 20例。标本采集前均未行任何治疗,且排除其他基础性疾病干扰。每例病例均经过临床、病理、影像学结合确诊。采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)法检测三种骨肿瘤组织中Ezrin和P70s6K蛋白的表达情况,分析两指标在三种骨肿瘤中的表达差异,并分析Ezrin和P70s6K蛋白的表达水平与Os患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、病理分型、Enneking分期、分化程度、软组织侵犯、远处转移的关系,以及与GCTB患者的性别、年龄、肿瘤部位、Jaffe分级、三结合分期、软组织浸润及复发或转移的关系,并采用spearma-n秩相关检验对两者在Os,GCTB中的相关性进行分析。Ezrin和P70s6K阳性染色结果均表现为着色于细胞的浅黄色、棕黄色或棕褐色颗粒。Ezrin表达主要定位于细胞质,其在Os,GCTB和OC组织中的阳性表达率分别为72.5%(29/40),42.5%(17/40),15.0%(3/20);P70s6K表达主要定位于细胞质,其在Os,GCTB和OC组织中的阳性表达率分别为67.5%(27/40),40.0%(16/40),10.0%(2/20).Ezrin和P70s6K的表达与Os患者性别、年龄以及肿瘤部位、大小和病理分型均无关(P均>0.05;P均>0.05),而在EnnekingⅡB和Ⅲ期组阳性表达明显高于Ⅰ和ⅡA期组、中低分化组明显高于高于高分化组、有软组织侵犯组明显高于无软组织侵犯组、有远处转移组明显高于无远处转移组,差异均有统计学意义(P均s6K在Os中的表达呈正相关(r=0.409,Ps6K在GCTB中的表达与患者性别、年龄及肿瘤部位无关(P均>0.05;P均>0.05),而在Jaffe分级中Ⅱ级组表达明显高于Ⅰ级组、三结合分期Ⅱ期组明显高于Ⅰ期组、有软组织浸润组明显高于无软组织浸润组、有复发或转移组明显高于无复发或转移组(P均s6K在GCTB组织中的表达呈正相关(r=0.434,Ps6K在Os和OC组织中的阳性表达率均有显著性差异(Ps6K在GCTB和OC中的阳性表达率均有显著性差异(Ps6K在Os和GCTB中的阳性表达率均有显著性差异(Ps6K在Os,GCTB中表达均明显增高,提示两者可能在Os,GCTB的发生发展及侵袭转移或复发过程中起着重要的作用;Ezrin和P70s6K在Os,GCTB中的表达均呈正相关,提示两者可能具有相互协同作用,共同参与Os,GCTB的发病。因此,Ezrin和P70s6K可作为研究Os,GCTB诊治的新靶点。Ezrin和P70s6K在OC,GCTB,O-s中表达依次增高,提示两者可为预测骨肿瘤良恶性的有效指标。

关键词：埃兹蛋白核糖体40s小亚基s6蛋白激酶骨肉瘤骨巨细胞瘤骨软骨瘤免疫组织化学

非小细胞肺癌组织中p70s6K、ProGRP、CXCR2的表达情况及临床意义

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癌症进展 2019年第11期17卷 1310-1313页

作者：杨金华张慧青穆林长治医学院附属和平医院呼吸内科山西长治0460000 长治医学院附属和平医院普外科山西长治0460000

目的探讨非小细胞肺癌组织中核糖体40s小亚基s6蛋白激酶(p70s6K)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)、CXC趋化因子受体2(CXCR2)的表达情况及临床意义。方法收集180例非小细胞肺癌患者的非小细胞肺癌组织标本和癌旁正常组织(距离肿瘤组织﹥5 cm... 详细信息

目的探讨非小细胞肺癌组织中核糖体40s小亚基s6蛋白激酶(p70s6K)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)、CXC趋化因子受体2(CXCR2)的表达情况及临床意义。方法收集180例非小细胞肺癌患者的非小细胞肺癌组织标本和癌旁正常组织(距离肿瘤组织﹥5 cm)标本,采用免疫组织化学法检测组织标本中p70s6K、ProGRP、CXCR2的表达情况。分析非小细胞肺癌组织中p70s6K、ProGRP、CXCR2阳性表达情况与非小细胞肺癌患者临床特征的关系,以及非小细胞肺癌组织中p70s6K、ProGRP、CXCR2表达的相关性。结果非小细胞肺癌组织中p70s6K、ProGRP、CXCR2的阳性表达率分别为66.67%、72.22%和70.00%,均明显高于癌旁正常组织的21.11%、16.67%和18.89%,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。肿瘤直径﹥3 cm、低分化、有淋巴结转移的非小细胞肺癌患者非小细胞肺癌组织中p70s6K、ProGRP、CXCR2的阳性表达率均明显高于肿瘤直径≤3 cm、中高分化和无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。非小细胞肺癌组织中p70s6K、ProGRP、CXCR2的表达与非小细胞肺癌患者的肿瘤直径、分化程度、淋巴结转移情况均呈显著正相关(P﹤0.01)。非小细胞肺癌组织中p70s6K与ProGRP、CXCR2的表达均呈显著正相关(P﹤0.01),ProGRP与CXCR2的表达呈显著正相关(P﹤0.01)。结论非小细胞肺癌组织中p70s6K、ProGRP、CXCR2的阳性表达率均较高,三者可能共同参与非小细胞肺癌的发生和发展。

关键词：非小细胞肺癌核糖体40s小亚基s6蛋白激酶胃泌素释放肽前体 CXC趋化因子受体2

mTOR、PI3K和P70s6K在子宫颈鳞癌中的表达及临床意义

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江苏医药 2019年第4期45卷 370-373,F0002页

作者：杜秀銮刘蔚赵海峰周晓萍孙淑颖赵东晖戴欣张锦刘燕翔南京医科大学附属苏州科技城医院病理科江苏苏州215153 苏州大学附属第一医院病理科

目的探讨mTOR、PI3K和P70s6K在子宫颈鳞癌发生、发展中的作用。方法用免疫组化sP法分别检测子宫颈鳞癌(宫颈癌组,55例)与正常宫颈组织(对照组,30例)中mTOR、PI3K和P70s6K的表达,分析其与各临床因素之间的关系。结果宫颈癌组mTOR、PI3K和... 详细信息

目的探讨mTOR、PI3K和P70s6K在子宫颈鳞癌发生、发展中的作用。方法用免疫组化sP法分别检测子宫颈鳞癌(宫颈癌组,55例)与正常宫颈组织(对照组,30例)中mTOR、PI3K和P70s6K的表达,分析其与各临床因素之间的关系。结果宫颈癌组mTOR、PI3K和P70s6K的阳性表达率均高于对照组(72.73%vs.10.00%、65.55%vs.0和52.73%vs.0)(Ps6K阳性表达与肿瘤淋巴结转移相关(Ps6K的阳性表达呈正相关(r=0.32,Ps6K蛋白表达与其发生、发展相关。

关键词：子宫颈鳞癌雷帕霉素靶蛋白磷脂酰肌醇-3-激酶核糖体40s小亚基s6蛋白激酶