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氟对小鼠成骨细胞增殖与分化及骨保护蛋白和核因子κβ受体活化因子配体mRNA表达的影响

中国地方病学杂志 2011年第3期30卷 243-246页

作者：郭晓英蔡偌欣孙贵范中国医科大学公共卫生学院地球化学性疾病研究室辽宁省砷生物学作用与砷中毒重点实验室沈阳110001

目的观察氟对体外培养的小鼠成骨细胞增殖、分化、骨保护蛋白（OPG）mRNA及核因子κβ受体活化因子配体（RANKL）mRNA表达的影响.方法取出生1～2 d昆明小鼠颅盖骨,分离成骨细胞后进行传代培养.按培养液中加入不同浓度氟化钠（NaF）将... 详细信息

目的观察氟对体外培养的小鼠成骨细胞增殖、分化、骨保护蛋白（OPG）mRNA及核因子κβ受体活化因子配体（RANKL）mRNA表达的影响.方法取出生1～2 d昆明小鼠颅盖骨,分离成骨细胞后进行传代培养.按培养液中加入不同浓度氟化钠（NaF）将成骨细胞分为0（对照）、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4、10-3 mol/L组,分别在培养72 h或120 h后检测氟对成骨细胞增殖、分化（碱性磷酸酶,ALP）的影响;提取成骨细胞总mRNA,采用RT-PCR方法分析成骨细胞OPG mRNA、RANKL mRNA表达,并进行半定量分析.组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果培养72 h后,成骨细胞增殖组间比较差异有统计学意义（F=13.806,P〈0.05）;与对照组（0.434±0.010）比较,10-7～10-4mol/L组成骨细胞增殖明显增加（0.448±0.010、0.453±0.013、0.454±0.016、0.449±0.018,P均〈0.05）,10-3 mol/L组成骨细胞增殖降低（0.401±0.009,P〈0.05）.成骨细胞ALP活性组问比较差异有统计学意义（F=9.021,P〈0.05）;其中10-7～10-5 mol/L组[（2.447±0.756）×106、（2.603±0.183）×106、（2.687±0.886）×106 U/L]ALP活性明显高于对照组[（1.677±0.682）×106U/L,P〈0.05或〈0.01];10-4mol/L组[（1.479±0.366）×106 U/L]ALP活性明显低于对照组（P〈0.05）.OPG mRNA表达组间比较差异有统计学意义（F=11.299,P〈0.05）;与对照组（11000±0.000）比较,10-7～10-4 mol/L组表达增强（1.058±0.027、1.053 ±0.026、1.088±0.055、1.069±0.008,P〈0.05或〈0.01）,10-3mol/L组表达降低（0.941±0.029,P〈0.05）.成骨细胞RANKL mRNA表达组间比较差异无统计学意义（F=1.311,P〉0.05）.RANKL mRNA/OPG mRNA比值,在104～10-5mol/L组逐渐降低,10-4、10-3mol/L组升高,但组间比较差异无统计学意义（F=1.376,P〉0.05）.结论氟对小鼠成骨细胞增殖、分化呈双向调节作用,表现为低剂量刺激而高剂量抑制.低剂量染氟可能通过增加成骨细胞OPG的表达来抑制破骨细胞的分化和成熟,抑制骨吸收;而高剂量可能通过降低OPG的表达来促进破骨细胞的分化、成熟,促进骨吸收.

关键词：氟成骨细胞骨保护素核因子κβ受体活化因子配体

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人工髋关节置换手术前后外周血中OPG与RANKL浓度分析

人工髋关节置换手术前后外周血中OPG与RANKL浓度分析

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作者：孟超安徽医科大学

学位级别：硕士

背景随着人工关节材料与相关手术技术的飞速发展，越来越多的患者接受人工关节置换术，为患者解除了病患。然而，人工关节置换术后周围骨质溶解导致的无菌性松动临床上仍未得到很好解决，这已成为影响人工关节置换术远期疗效的重要难题... 详细信息

背景随着人工关节材料与相关手术技术的飞速发展，越来越多的患者接受人工关节置换术，为患者解除了病患。然而，人工关节置换术后周围骨质溶解导致的无菌性松动临床上仍未得到很好解决，这已成为影响人工关节置换术远期疗效的重要难题。最近研究表明，人工关节无菌性松动的发生与力学因素和生物学因素相关，以生物学因素为主要因素。人工关节假体置入人体后，伴随着关节活动，会产生大量磨损颗粒，这些颗粒诱导机体发生生物学反应，促使人工关节与骨之间形成界膜组织，并随着磨损颗粒和骨细胞吸收刺激因子的增加，引起界膜组织中各种骨吸收因子的释放和破骨细胞的分化和活化，最终导致人工关节周围骨溶解。介导人工关节周围骨溶解引起人工关节无菌性松动，核因子受体活化因子(RANK)/RANK配体(RANKL)／骨保护素(OPG)信号调节系统对破骨细胞分化、活化和凋亡起重要作用。OPG在骨组织中表达最高，OPG有单双体两种形式存在，55KD单体通过两个半胱氨酸(cYS-4oo)残基间二硫键联接形成双体，再分泌到胞外介质，存在于外周血液中。RANKLmRNA在骨和骨髓中表达最高，RANKL为一种Ⅱ型跨膜蛋白，在体内有3种存在方式，膜结合型胞外切断脱落形成可溶性分子形式，并以可溶性分子形式发挥生物活性，RANKL亦主要存在于外周血液中。人工关节置换术后，患者外周血液中的OPG及RANKL的表达水平是否变化至今未曾从其他文献得知，为了了解这个问题本实验特以髋关节置换手术患者为例，测定患者手术前后外周血中OPG及RANKL这两种骨代谢调节因子表达水平变化，来评估术后机体短期内骨代谢如何调节，为术后远期检测提供参考，并在一定程度上对人工关节的术后远期松动在治疗上有一定参考价值。目的研究对人工髋关节置换术患者进行术前术后外周血液中骨保护素、核因子kappa B受体活化因子配体浓度测定，探讨髋关节术后短期内骨代谢如何调节。方法采用ELISA法检测血清中OPG、sRANKL手术前后浓度，分析OPG、sRANKL表达水平变化。结果人工髋关节置换手术后外周血液中的OPG浓度增加，RANKL浓度下降，RANKL/0PG比值下降。结论OPG过高表达提示髋关节术后短期内机体成骨增强，破骨受抑制。

关键词：骨保护素核因子κβ受体活化因子配体浓度测定髋关节置换

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阿仑磷酸钠对共育体系中成骨—破骨细胞生物特性的影响

阿仑磷酸钠对共育体系中成骨—破骨细胞生物特性的影响

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作者：朱芸重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:①观察阿仑磷酸钠对人成骨细胞增殖和核因子κβ受体活化因子配体(RANKL)及护骨素(OPG)mRNA表达的影响。②观察阿仑磷酸钠对共育体系中成骨-破骨细胞生物学特性的影响。材料:手术中取得的松质骨骨块,阿仑磷酸钠(杭州默沙东制药有... 详细信息

目的:①观察阿仑磷酸钠对人成骨细胞增殖和核因子κβ受体活化因子配体(RANKL)及护骨素(OPG)mRNA表达的影响。②观察阿仑磷酸钠对共育体系中成骨-破骨细胞生物学特性的影响。材料:手术中取得的松质骨骨块,阿仑磷酸钠(杭州默沙东制药有限公司,批号06130),Ⅱ型胶原酶、胰蛋白酶(Invitrog),胎牛血清(cell science)方法:①在含不同浓度的阿仑磷酸钠(10-9～10-4mol/L)培养液中培养成骨细胞。②阿仑磷酸钠(10-8mol/L)加入共育体系中,检测对成骨细胞和破骨细胞的影响。③成骨细胞观察。④以MTT检测阿仑磷酸钠对成骨细胞的增殖的影响。⑤以半定量RT-PCR方法观察不同浓度阿仑磷酸钠(10-9～10-5 mol/L)对成骨细胞表达OPG/RANKL mRNA的影响。⑥观察阿仑磷酸钠对破骨细胞的影响。结果:①10-5、10-4mol/L的阿仑磷酸钠抑制成骨细胞增殖,10-9～10-6mol/L的阿仑磷酸钠促进成骨细胞增殖,其中10-8mol/L的阿仑磷酸钠对成骨细胞的增殖作用最强。阿仑磷酸钠呈浓度依赖性降低RANKL mRNA表达,干预72h,10-5mol/L抑制作用最大( P<0.01)。阿仑磷酸钠呈浓度依赖性增加OPG mRNA表达,干预72h,10-6mol/L增加作用最明显(P<0.01) ,而10-5mol/L时又减低。②阿仑磷酸钠促进共育体系中成骨细胞的增殖,增强其ALP活性,减弱破骨细胞TRAP活性,减少破骨细胞骨吸收陷窝数。结论:①阿仑磷酸钠能使成骨细胞增殖,并有最适浓度。阿仑磷酸钠可能通过调节OPG/RANKL mRNA表达而影响骨代谢。②阿仑磷酸钠增加成骨细胞的活性,减弱破骨细胞的活性。

关键词：阿仑磷酸钠成骨细胞护骨素核因子κβ受体活化因子配体破骨细胞共育体系

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抗疏健骨颗粒对骨质疏松模型大鼠OPG和RANKL的影响

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西部中医药 2012年第3期25卷 11-13页

作者：史传道邓海东樊晓晨陕西中医学院陕西咸阳712046 西安红十字会医院

目的:观察抗疏健骨颗粒对骨质疏松模型大鼠骨保护素(OPG)和核因子κβ受体活化因子配基(RANKL)的影响,探讨抗疏健骨颗粒防治骨质疏松症的作用机理。方法:60只大鼠随机分为6组,每组10只,除假手术组外切除大鼠双侧卵巢诱发大鼠骨质疏松症... 详细信息

目的:观察抗疏健骨颗粒对骨质疏松模型大鼠骨保护素(OPG)和核因子κβ受体活化因子配基(RANKL)的影响,探讨抗疏健骨颗粒防治骨质疏松症的作用机理。方法:60只大鼠随机分为6组,每组10只,除假手术组外切除大鼠双侧卵巢诱发大鼠骨质疏松症模型,连续给不同剂量的药物灌胃12周,心脏取血,离心取上清,采用ELISA法检测血清中OPG和RANKL含量,并与假手术组、模型组和尼尔雌醇组进行比较。结果:假手术组、尼尔雌醇组、抗疏健骨颗粒大剂量组OPG及OPG/RANKL与模型组比较P0.05;抗疏健骨颗粒中剂量组RANKL与模型组比较P<0.01;OPG含量随着抗疏健骨颗粒剂量的增大逐渐增高。结论:抗疏健骨颗粒能够升高OPG,抑制成骨细胞表达RANKL,从而达到防治骨质疏松症的作用。

关键词：骨质疏松症抗疏健骨颗粒骨保护素核因子κβ受体活化因子配体

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血清骨保护素水平与慢性冠心病的相关性研究

血清骨保护素水平与慢性冠心病的相关性研究

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2012年浙江省检验医学学术年会

作者：翁秀妹叶雄伟王强周欢琴浙江医院检验科

目的探讨骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)、核因子κβ受体活化因子配体(Receptoractivator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)在慢性冠心病患者中的水平变化及与冠状动脉狭窄程度和钙化程度的相关性。方法用E LISA方法检测80例... 详细信息

目的探讨骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)、核因子κβ受体活化因子配体(Receptoractivator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)在慢性冠心病患者中的水平变化及与冠状动脉狭窄程度和钙化程度的相关性。方法用E LISA方法检测80例慢性冠心病患者和34例正常对照组血清OPG、RANKL水平,并分析其在慢性冠心病患者中的变化及与慢患者冠脉狭窄程度、狭窄的冠脉支数及冠状动脉粥样斑块钙化情况等因素的相关性。结果 (1)慢性冠心病组血清OPG、RANKL水平均高于正常对照组,具有显著性差异(P<0.01,P<0.05);(2)慢性冠心病不同狭窄支数组显示:OPG,RANKL在二、三、四支数狭窄组均明显高于对照组及一支狭窄组(P<0.01,P<0.05);(3)慢性冠心病不同程度狭窄组显示:OPG在中、重度狭窄组,RANKL在重度狭窄组均明显高于对照组(P<0.01);与轻度狭窄组比较OPG在中度狭窄组和重度狭窄组中明显升高(P<0.01),RANKL在重度狭窄中明显升高(P<0.05);与中度狭窄组比较,RANKL在重度狭窄组明显升高(P<0.01)。(4)慢性冠心病不同性质斑块组显示:血清OPG水平在钙化斑块组中明显高于软斑块组及混合斑块组(P<0.05)。结论血清OPG、RANKL水平与冠状动脉狭窄、钙化有一定关联,血清OPG及RANKL含量变化可能在一定程度上反映冠状动脉粥斑块狭窄、钙化及损伤情况。因此,血清OPG、RANKL水平的检测具一定临床应用价值。

关键词：冠心病骨保护素核因子κβ受体活化因子配体冠状动脉狭窄冠状动脉钙化

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