阿仑磷酸钠对共育体系中成骨—破骨细胞生物特性的影响

作     者：朱芸 

作者单位：重庆医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈世荣

授予年度：2009年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：阿仑磷酸钠 成骨细胞 护骨素 核因子κβ受体活化因子配体 破骨细胞 共育体系 

摘      要：目的:①观察阿仑磷酸钠对人成骨细胞增殖和核因子κβ受体活化因子配体(RANKL)及护骨素(OPG)mRNA表达的影响。②观察阿仑磷酸钠对共育体系中成骨-破骨细胞生物学特性的影响。 材料:手术中取得的松质骨骨块,阿仑磷酸钠(杭州默沙东制药有限公司,批号06130),Ⅱ型胶原酶、胰蛋白酶(Invitrog),胎牛血清(cell science) 方法:①在含不同浓度的阿仑磷酸钠(10-9～10-4mol/L)培养液中培养成骨细胞。②阿仑磷酸钠(10-8mol/L)加入共育体系中,检测对成骨细胞和破骨细胞的影响。③成骨细胞观察。④以MTT检测阿仑磷酸钠对成骨细胞的增殖的影响。⑤以半定量RT-PCR方法观察不同浓度阿仑磷酸钠(10-9～10-5 mol/L)对成骨细胞表达OPG/RANKL mRNA的影响。⑥观察阿仑磷酸钠对破骨细胞的影响。 结果:①10-5、10-4mol/L的阿仑磷酸钠抑制成骨细胞增殖,10-9～10-6mol/L的阿仑磷酸钠促进成骨细胞增殖,其中10-8mol/L的阿仑磷酸钠对成骨细胞的增殖作用最强。阿仑磷酸钠呈浓度依赖性降低RANKL mRNA表达,干预72h,10-5mol/L抑制作用最大( P0.01)。阿仑磷酸钠呈浓度依赖性增加OPG mRNA表达,干预72h,10-6mol/L增加作用最明显(P0.01) ,而10-5mol/L时又减低。②阿仑磷酸钠促进共育体系中成骨细胞的增殖,增强其ALP活性,减弱破骨细胞TRAP活性,减少破骨细胞骨吸收陷窝数。 结论:①阿仑磷酸钠能使成骨细胞增殖,并有最适浓度。阿仑磷酸钠可能通过调节OPG/RANKL mRNA表达而影响骨代谢。②阿仑磷酸钠增加成骨细胞的活性,减弱破骨细胞的活性。