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食品科学 2015年第22期36卷 137-141页

作者：李红卫王开萍吴娱唐正江汤飞刘国庆合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009 安徽省皖江禽产业研究院安徽宣城242000

建立高效液相色谱法测定富硒米曲霉中有机硒形态的分析方法。采用6 mol/L HCl溶液,50℃水解富硒米曲霉48 h,提取样品中的有机硒,4-氯-3,5-二硝基三氟甲苯柱前衍生,C18反相色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）分离,以乙腈-水（1∶1,V/V）和p H... 详细信息

建立高效液相色谱法测定富硒米曲霉中有机硒形态的分析方法。采用6 mol/L HCl溶液,50℃水解富硒米曲霉48 h,提取样品中的有机硒,4-氯-3,5-二硝基三氟甲苯柱前衍生,C18反相色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）分离,以乙腈-水（1∶1,V/V）和p H 6.8乙酸-乙酸钠缓冲液为流动相进行梯度洗脱,紫外检测波长：240 nm,测得富硒米曲霉中有机硒化合物主要是硒代胱氨酸,检出限（RSN=3）为0.680 mg/L,定量限（RSN=10）为2.244 mg/L,线性范围为5.0~100 mg/L,加标回收率为94.8%~105.8%,硒代胱氨酸的含量为1.25 mg/g。本方法简单、灵敏、重复性好,可适用于富硒米曲霉及相关产品中有机硒形态的检测分析。

关键词：富硒米曲霉有机硒硒代氨基酸柱前衍生-反相高效液相色谱法

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煮制对鸡肉及汤汁中游离氨基酸的影响

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食品工业科技 2014年第9期35卷 333-337,342页

作者：常亚楠赵改名柳艳霞李苗云黄现青孙灵霞河南农业大学食品科学技术学院/河南省肉制品加工与质量安全控制重点实验室河南郑州450002

本文采用柱前衍生-反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对95℃条件下不同煮制时间,不同部位的鸡肉及鸡汤中游离氨基酸(FAA)含量进行测定,研究煮制时间对鸡肉及鸡汤游离氨基酸含量的影响规律。结果表明:95℃煮制不同时间,蛋白质发生不同程度的... 详细信息

本文采用柱前衍生-反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对95℃条件下不同煮制时间,不同部位的鸡肉及鸡汤中游离氨基酸(FAA)含量进行测定,研究煮制时间对鸡肉及鸡汤游离氨基酸含量的影响规律。结果表明:95℃煮制不同时间,蛋白质发生不同程度的降解。因FAA形成量与降解量的比率及溶于汤中量的差异,鸡肉表层的FAA含量先升高后降低,在40min时达到最大值;鸡肉中心的FAA含量呈现升高趋势,在120min时达到最大值。鸡汤中的FAA含量因肉样中FAA溶于其中而随煮制延长呈显著升高趋势,煮制120min时的含量约是10min的5倍。因此加热120min内,随煮制时间延长鸡汤会更加鲜美可口,且营养价值高。

关键词：鸡肉鸡汤游离氨基酸柱前衍生-反相高效液相色谱法

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重组蛋白中甘氨酸、组氨酸含量柱前衍生反相高效液相色谱检测方法的建立及验证

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中国生物制品学杂志 2023年第7期36卷 844-849页

作者：张小雪梁舒静王惠欣王辉华北制药集团新药研究开发有限责任公司抗体药物研制国家重点实验室河北石家庄050015

目的建立定量检测重组蛋白中甘氨酸、组氨酸含量的柱前衍生反相高效液相色谱法(reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC),并进行验证。方法选用AccQ Tag-C18(3.9 mm×150 mm,4μm)色谱柱,以6-氨基喹啉-N-羟基... 详细信息

目的建立定量检测重组蛋白中甘氨酸、组氨酸含量的柱前衍生反相高效液相色谱法(reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC),并进行验证。方法选用AccQ Tag-C18(3.9 mm×150 mm,4μm)色谱柱,以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(6-aminoquinolyl-N-hydroxysccinimidyl carbamate,AQC)为柱前衍生化试剂,α-氨基丁酸为内标,AccQTag Eluent A液、乙腈溶液、超纯水为流动相,紫外检测波长为248 nm,进样量为10μL,流速为1.0 mL/min,柱温为37℃。内标法计算样品中甘氨酸、组氨酸含量,并对该方法专属性、线性、检测限、定量限、精密度、准确度和稳定性进行验证。结果建立的方法可将甘氨酸、组氨酸和内标α-氨基丁酸有效分离,专属性强。甘氨酸在2.25~11.25μg/mL范围内,组氨酸在72.85~364.24μg/mL范围内,标准曲线线性良好,R^(2)均>0.99。检测限为:甘氨酸2.25μg/mL,组氨酸18.21μg/mL。定量限为:甘氨酸4.69μg/mL,组氨酸32.86μg/mL。甘氨酸、组氨酸同浓度6份样品重复性验证结果的RSD分别为4.6%和5.0%,中间精密度试验回收率的RSD分别为6.9%和2.0%。甘氨酸含量接近定量限,其高、中、低浓度样品平均回收率为75.9%~111.7%;组氨酸回收率为88.9%~97.3%。同1份样品在0、12、18、24、30、48 h甘氨酸含量的RSD为7.7%,组氨酸含量的RSD为3.3%。结论柱前衍生RP-HPLC法精密度高,结果准确可靠,可对重组蛋白中的甘氨酸、组氨酸含量进行质量控制。

关键词：柱前衍生-反相高效液相色谱法甘氨酸组氨酸含量

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