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染料木黄酮对大鼠体内N-羟乙酰神经氨酸含量的影响及其与唾液酸转移酶相互作用的探讨

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生物工程学报 2019年第5期35卷 857-870页

作者：李洪英常瑞朱秋劲朱旭玲徐阿奇周樱子晏印雪贵州大学酿酒与食品工程学院贵州贵阳550025 贵州省农畜产品贮藏与加工重点实验室贵州贵阳550025

本研究旨在研究染料木黄酮(Genistein,Gen)对大鼠体内N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolylneuraminic acid,Neu5Gc)生物合成的影响。选取80只4周龄SD雄性大鼠,随机平均分为对照组和Gen组,分别灌胃5%的乙醇溶液和300 mg/(kg·d)的Gen溶液。利用... 详细信息

本研究旨在研究染料木黄酮(Genistein,Gen)对大鼠体内N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolylneuraminic acid,Neu5Gc)生物合成的影响。选取80只4周龄SD雄性大鼠,随机平均分为对照组和Gen组,分别灌胃5%的乙醇溶液和300 mg/(kg·d)的Gen溶液。利用荧光高效液相色谱(HPLC-FLD)检测大鼠后腿肌肉、肾脏、肝脏组织中Neu5Gc的含量,并采用Gen与唾液酸转移酶(Sialyltransferase,ST)分子对接,初步探讨了其抑制Neu5Gc合成的机理。结果表明:灌胃15 d时,后腿肌肉和肝脏组织中的Neu5Gc的含量分别降低了13.77%和15.45%,而肾脏组织中Neu5Gc的含量变化差异不显著;30 d时,在肌肉组织中未检出Neu5Gc,在肝脏组织中的Neu5Gc的含量降低了13.35%,肾脏组织中Neu5Gc的含量没有显著的变化;45 d时,在后腿肌肉、肾脏组织和肝脏组织中的Neu5Gc含量分别降低了32.65%、16.80%和32.78%;60d时,在后腿肌肉、肾脏组织和肝脏组织中Neu5Gc含量降低了12.72%、12.30%和11.42%。Gen与ST活性位点残基His319、Ser151、Gly293、Thr328形成氢键,且与残基His302、His301、Trp300、Ser271、Phe292、Thr328、Ser325、Ile274形成疏水作用。因此分子间弱相互作用是导致Gen抑制ST活性的主要原因。该研究结果为后续开展宰前降低红肉中Neu5Gc的方法提供了基础实验方法支撑。

关键词：染料木黄酮 N-羟乙酰神经氨酸分子对接唾液酸转移酶机理

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染料木黄酮对缺氧复氧心肌细胞损伤的影响

中国临床药理学杂志 2022年第2期38卷 108-112页

作者：李静沈建陈海波南金良浙江大学医学院附属第二医院心血管内科浙江杭州310000

目的探讨染料木黄酮对缺氧复氧心肌细胞损伤的影响与其机制。方法将心肌细胞H9c2分成对照组、模型组(缺氧复氧)、染料木黄酮组(缺氧复氧,2 mol·L^(-1)染料木黄酮预处理)、染料木黄酮+anti-miR-NC组(缺氧复氧,转染inhibitor control, 2 ... 详细信息

目的探讨染料木黄酮对缺氧复氧心肌细胞损伤的影响与其机制。方法将心肌细胞H9c2分成对照组、模型组(缺氧复氧)、染料木黄酮组(缺氧复氧,2 mol·L^(-1)染料木黄酮预处理)、染料木黄酮+anti-miR-NC组(缺氧复氧,转染inhibitor control, 2 mol·L^(-1)染料木黄酮预处理)、染料木黄酮+anti-miR-499-5p组(缺氧复氧,转染miR-499-5p inhibitor, 2 mol·L^(-1)染料木黄酮预处理)。用Real-time聚合酶链反应(PCR)法检测miR-499-5p表达,用细胞计数法-8(CCK-8)实验测定细胞增殖活力,用膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡,用蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C蛋白表达,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,用紫外分光光度法检测过氧化氢酶(CAT)含量,用黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)含量,用JC-1法检测线粒体膜电位。结果对照组、模型组、染料木黄酮组、染料木黄酮+anti-miR-NC组、染料木黄酮+anti-miR-499-5p组心肌细胞中miR-499-5p表达量分别为1.00±0.00,0.40±0.04,0.74±0.09,0.73±0.08,0.40±0.03,细胞增殖活力(OD值)分别为0.63±0.05,0.35±0.03,0.54±0.04,0.54±0.03,0.42±0.02,细胞凋亡率分别为(5.17±0.75)%,(23.77±4.36)%,(10.65±1.33)%,(10.53±1.06)%,(14.71±1.78)%,MDA含量分别为(1.25±0.13),(5.39±0.41),(2.10±0.35),(2.02±0.29),(3.79±0.31)nmol·mg^(-1),CAT含量为(43.38±5.58),(26.82±1.92),(46.67±5.42),(43.85±4.67),(29.95±2.26)U·mg^(-1),线粒体膜电位为1.00±0.00,0.54±0.05, 0.89±0.08,0.92±0.09,0.67±0.07。以上指标,对照组、染料木黄酮组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P染料木黄酮+anti-miR-499-5p组与染料木黄酮+anti-miR-NC组相比,差异均有统计学意义(均P染料木黄酮通过上调miR-499-5p减轻缺氧复氧心肌细胞损伤。

关键词：染料木黄酮缺氧复氧心肌细胞

染料木黄酮对去势抵抗性前列腺癌VCaP细胞增殖的影响

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中华男科学杂志 2016年第12期22卷 1065-1070页

作者：李飞朱彦锋陈静瑶周杰贺易琼余小平成都医学院公共卫生系四川成都610500

目的:研究染料木黄酮(GDN)对去势抵抗性前列腺癌细胞VCa P增殖的抑制作用及可能机制。方法:以不同浓度(0、12.5、25、50、100、200μmol/L)的GEN处理去势抵抗性前列腺癌细胞VCaP,分别在24、48、72 h以CCK-8法测定细胞增殖;以流式细胞术... 详细信息

目的:研究染料木黄酮(GDN)对去势抵抗性前列腺癌细胞VCa P增殖的抑制作用及可能机制。方法:以不同浓度(0、12.5、25、50、100、200μmol/L)的GEN处理去势抵抗性前列腺癌细胞VCaP,分别在24、48、72 h以CCK-8法测定细胞增殖;以流式细胞术检测细胞周期;以免疫荧光法检测Ki-67表达水平;以Western印迹法检测Cyclin D1、PCNA、P53及PSA表达水平。结果:12.5、25、50、100、200μmol/L GEN作用于VCaP细胞72 h后,对VCaP细胞的抑制率分别为(25.38±0.02)%、(31.14±0.29)%、(45.27±0.03)%、(52.19±0.05)%与(68.21±0.19)%,与对照组[(10.08±0.02)%]相比差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术显示GEN可导致VCa P细胞G2/M期阻滞(P<0.05)。免疫细胞化学法检测显示GEN能够抑制细胞中Ki-67的表达。Western印迹显示去势抵抗性前列腺癌细胞内PSA、Cyclin D1、PCNA随着GEN浓度的增加逐渐下调,P53随着GEN浓度的增加逐渐上调(P<0.05)。结论:GEN能够抑制体外培养的去势抵抗性前列腺癌细胞VCaP增殖,其作用机制可能与阻滞细胞周期并伴随相关周期蛋白表达的改变有关。

关键词：染料木黄酮去势抵抗性前列腺癌增殖

染料木黄酮抑制前列腺癌进展和转移的机制研究

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天津医药 2023年第12期51卷 1288-1292页

作者：刘文瞻蔡启亮吴宝军杨思维姚智力侯泽楷孙彬栩邯郸市第一医院泌尿一科 056000 天津医科大学第二医院泌尿外科天津市津南医院泌尿外科天津中医药大学附属第一医院肿瘤科

目的探讨染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法将前列腺癌细胞株LNCaP和CWR22RV1细胞分为对照组(常规培养)和实验组(50μmol/L染料木黄酮处理)。采用噻唑蓝(MTT)法分析染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖... 详细信息

目的探讨染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法将前列腺癌细胞株LNCaP和CWR22RV1细胞分为对照组(常规培养)和实验组(50μmol/L染料木黄酮处理)。采用噻唑蓝(MTT)法分析染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖能力的影响,通过细胞划痕实验和Transwell实验分析染料木黄酮对前列腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。Western blot检测上皮间质转化(EMT)中间质标志物E-钙黏蛋白(ECadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)以及肿瘤干细胞标志物CD44和Oct4的蛋白水平。结果MTT实验结果表明,染料木黄酮具有抑制前列腺癌细胞增殖的作用。实验组LNCaP和CWR22RV1细胞划痕闭合率较对照组下调,穿过Transwell膜的细胞数量减少(P染料木黄酮能够下调前列腺癌细胞中间质的标志物N-Cadherin、Vimentin和肿瘤干细胞的标志物CD44与Oct4蛋白表达,上调上皮细胞标志物ECadherin表达(P染料木黄酮通过抑制EMT过程并降低前列腺癌细胞的干性,从而降低前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

关键词：前列腺肿瘤染料木黄酮上皮-间质转化细胞运动

染料木黄酮对人甲状腺癌细胞SW579增殖的影响及其作用机制

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染料木黄酮对人甲状腺癌细胞SW579增殖的影响及其作用机制

作者：杨雪昆明医科大学

学位级别：硕士

【目的】本课题意在探究染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞增殖能力的影响,并对其过程中可能存在的作用机制进行初步探索,以期为染料木黄酮可能应用于甲状腺癌的相关临床治疗提供参考。【方法】1.运用MTT法检测雌激素对人甲状腺癌SW579... 详细信息

【目的】本课题意在探究染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞增殖能力的影响,并对其过程中可能存在的作用机制进行初步探索,以期为染料木黄酮可能应用于甲状腺癌的相关临床治疗提供参考。【方法】1.运用MTT法检测雌激素对人甲状腺癌SW579细胞增殖能力的影响以及雌激素受体阻断前后雌激素对人甲状腺癌SW579细胞增殖能力的影响;2.运用MTT法检测染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞增殖能力的影响以及雌激素受体阻断前后染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞增殖能力的影响;3.运用流式细胞技术检测雌激素受体阻断前后染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞周期和凋亡的影响;4.运用qRT-PCR检测雌激素受体阻断前后染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞周期、凋亡相关基因CDKN1A、Bcl-2、Bax m RNA表达量的影响;5.Western Blot检测雌激素受体阻断前后染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞周期、凋亡相关蛋白CDKN1A、Bcl-2、Bax蛋白表达量的影响;6.统计分析:采用Graph Pad Prism8.0绘图,SPSS 21.0软件进行统计学分析,组间比较采用one-way ANOVA法进行分析,两两比较运用LSD法进行,P染料木黄酮作用于SW579细胞24h和48h均可显著抑制SW579细胞的增殖(P染料木黄酮仍可显著抑制SW579细胞的增殖,与阻断前相比,当染料木黄酮的浓度≤40μmol/L时,阻断后细胞的增殖能力大于阻断前,当染料木黄酮的作用浓度≥80μmol/L时,阻断前后无显著差异(P染料木黄酮作用于SW579细胞,处理24h:G0/G1期的细胞增多,S期的细胞减少,G2/M期的细胞无显著差异,细胞周期被阻滞在G0/G1期(P染料木黄酮作用于SW579细胞24h和48h,均可显著增加SW579细胞的总凋亡率(P染料木黄酮仍可显著增加SW579细胞的总凋亡率,与阻断前相比,阻断前的总凋亡率大于阻断后(P染料木黄酮作用于SW579细胞24h和48h,均可显著增高CDKN1A m RNA的表达量(P染料木黄酮作用于SW579细胞24h和48h均可降低Bcl-2/Bax m RNA的比值;分别阻断或同时阻断两个受体,与对照组相比,染料木黄酮仍可降低Bcl-2/Bax m RNA的比值,与阻断前相比,阻断后Bcl-2/Bax m RNA的比值大于阻断前(P染料木黄酮作用于SW579细胞24h和48h均可显著增高CDKN1A的蛋白表达量(P染料木黄酮作用于SW579细胞24h和48h均

关键词：染料木黄酮甲状腺癌雌激素受体细胞凋亡细胞周期

染料木黄酮泊洛沙姆P407/P403混合胶束的制备及药动学研究（英文）

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2018年第5期27卷 342-351页

作者：蔡雁戴巍钦富华孙洁胤魏瑞龙宁波市第九医院药剂科浙江宁波315020 杭州东祥医药科技有限公司浙江杭州310051 浙江医药高等专科学校浙江宁波315100

本文主要制备载染料木黄酮的泊洛沙姆403/407混合聚合物胶束,以改善染料木黄酮的溶解度和口服生物利用度。研究采用薄膜分散法制备混合胶束,考察其形态,粒径,zeta电位,包封率和载药量;采用膜透析法考察其体外释药行为;以混悬液为对照,... 详细信息

本文主要制备载染料木黄酮的泊洛沙姆403/407混合聚合物胶束,以改善染料木黄酮的溶解度和口服生物利用度。研究采用薄膜分散法制备混合胶束,考察其形态,粒径,zeta电位,包封率和载药量;采用膜透析法考察其体外释药行为;以混悬液为对照,对混合胶束在大鼠体内的药物动力学过程进行了研究。结果显示所制备的混合胶束形态圆整,粒径均一,平均粒径为(20.31±0.43)nm,PDI为0.193,zeta电位为(–8.94±0.35)m V;包封率为和载药量分别为(90.59±0.67)%和(7.74±0.05)%;染料木黄酮在混合胶束中的溶解度达到3.80 mg/m L,比水中的溶解度提高了约130倍。混合胶束在体外呈现缓释特征,且无突释现象,但释放速度快于混悬液;大鼠灌胃混合胶束和混悬液的药动学结果显示混合胶束的AUC_(0–t)和AUC_(0–∞)分别为GEN混悬液的196.74%和204.62%,表明所制备的混合胶束显著地提高了染料木黄酮的溶解度和口服生物利用度。

关键词：染料木黄酮泊洛沙姆混合胶束药动学

染料木黄酮对过氧化氢引起的血管内皮细胞损伤保护作用研究

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染料木黄酮对过氧化氢引起的血管内皮细胞损伤保护作用研究

作者：王悦吉林大学

学位级别：硕士

目的:血管内皮细胞的损伤和氧化应激是心血管疾病发生的基础病变,利用过氧化氢(hydrogen peroxide,HO)作用于人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)建立氧化应激损伤模型。采用染料木黄酮(Genistein,GEN)作... 详细信息

目的:血管内皮细胞的损伤和氧化应激是心血管疾病发生的基础病变,利用过氧化氢(hydrogen peroxide,HO)作用于人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)建立氧化应激损伤模型。采用染料木黄酮(Genistein,GEN)作为抗氧化药物,探讨GEN对细胞氧化应激损伤及凋亡的调控作用,为GEN预防氧化应激损伤的研究奠定基础,为GEN的临床应用提供实验依据。方法:经前期实验条件摸索,用CCK-8法测定细胞存活率,确定10μmol/L GEN预处理1 h、130μmol/L HO处理1 h作为后续实验的条件。将细胞分为四组,分别为对照组、GEN处理组、GEN+HO处理组、HO处理组。采用流式细胞术测定不同处理组细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和细胞凋亡情况。利用酶活性检测试剂盒分别测定总谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)活力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量。利用q PCR法测定细胞内Nrf2、Ho-1、Sod1、Bax、Bcl-2、Caspase-3等m RNA的表达情况,用Western Blot法测定上述蛋白的表达情况。应用Graph Pad Prism 8.0进行统计分析,多组间比较采用方差分析,用Bonferroni方法进行校正。两组间比较采用两独立样本t检验,P0.05);GPx活力、SOD酶活性、GSH酶活性均提高(P<0.05)。q PCR结果表明,与HO单独处理组相比,GEN+HO组Nrf2、Ho-1、Sod1的m RNA表达量增高(P<0.01),Bax/Bcl-2的比值降低(P<0.01)、Caspase-3的表达量降低(P<0.001)。Western Blot结果显示,与HO单独处理组相比,GEN+HO组NRF2、HO-1、SOD1的蛋白表达量增加(P<0.05),BAX/BCL-2的比值及CASPASE-3表达降低(P<0.01)。结论:1.GEN能够改善HO对HUVEC所造成的细胞活力的下降。2.GEN能减轻HO引起的HUVEC细胞内ROS的聚集。3.GEN能降低HO处理对HUVEC所造成细胞的早期凋亡率、总凋亡率的升高。4.GEN可以提高HO导致的HUVEC细胞内抗氧化酶的表达降低。5.GEN可能通过调控NRF2/HO-1信号通路保护HUVEC免受HO所造成的血管内皮损伤。

关键词：染料木黄酮人脐静脉内皮细胞氧化应激核因子E2相关因子2 血红素加氧酶1

染料木黄酮对人甲状腺鳞癌SW579细胞增殖、侵袭等的影响

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卫生研究 2018年第6期47卷 984-987,992页

作者：赵丹殷建忠吴少雄吴志霜潘红梅昆明医科大学营养与食品研究所云南省高校营养与食品安全重点实验室健康云南发展智库昆明650500

目的探讨染料木黄酮对人甲状腺鳞癌SW579细胞增殖、粘附、侵袭、迁移能力的影响及其机制。方法利用MTT法检测不同浓度的染料木黄酮对SW579细胞增殖的影响;分别采用粘附、侵袭、迁移实验观察染料木黄酮作用后与肿瘤转移相关的细胞粘附、... 详细信息

目的探讨染料木黄酮对人甲状腺鳞癌SW579细胞增殖、粘附、侵袭、迁移能力的影响及其机制。方法利用MTT法检测不同浓度的染料木黄酮对SW579细胞增殖的影响;分别采用粘附、侵袭、迁移实验观察染料木黄酮作用后与肿瘤转移相关的细胞粘附、侵袭及迁移能力的变化;实时荧光定量PCR检测染料木黄酮对SW579细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2) mRNA水平的影响。结果与对照组相比,染料木黄酮对SW579细胞有促进增殖的作用,而对SW579细胞的粘附、侵袭、迁移和mRNA表达具有抑制作用。结论 40、80和160μmol/L染料木黄酮均可抑制SW579细胞的侵袭迁移能力,其作用机制可能与其抑制MMP-2基因的表达有关。

关键词：染料木黄酮细胞增殖甲状腺癌

染料木黄酮联合阿那曲唑对绝经后大鼠乳腺癌生长的影响

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中国中西医结合杂志 2014年第4期34卷 486-489页

作者：王丽康欣梅宋英马文杰赵红张清媛哈尔滨医科大学附属肿瘤医院内三科哈尔滨150081

目的利用7,12-二甲基苯蒽(DMBA)诱导大鼠绝经后乳腺癌模型,探讨染料木黄酮(Genistein)联合阿那曲唑(Anastrozole)对乳腺癌组织的抑制作用及机制。方法建立DMBA诱导的绝经后乳腺癌大鼠模型,随机分为对照组、染料木黄酮组、阿那曲唑组、... 详细信息

目的利用7,12-二甲基苯蒽(DMBA)诱导大鼠绝经后乳腺癌模型,探讨染料木黄酮(Genistein)联合阿那曲唑(Anastrozole)对乳腺癌组织的抑制作用及机制。方法建立DMBA诱导的绝经后乳腺癌大鼠模型,随机分为对照组、染料木黄酮组、阿那曲唑组、染料木黄酮与阿那曲唑联合治疗组(简称联合治疗组),观察各组肿瘤生长情况,测定肿瘤增殖指数、凋亡指数;ELISA法检测雌二醇(E2)及RTPCR法检测17β-羟甾脱氢酶1(17β-HSD1)mRNA的水平。结果染料木黄酮和阿那曲唑单独治疗组肿瘤生长均受到抑制,联合治疗组的抑瘤效果更显著(P染料木黄酮可抑制绝经后大鼠中乳腺肿瘤的生长,与阿那曲唑联合应用显示出降低E2和17β-HSD1水平的协同作用,可有效抑制乳腺肿瘤生长。

关键词：乳腺癌染料木黄酮阿那曲唑绝经