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枸橘苷抑制血管生成作用的研究

时珍国医国药 2016年第2期27卷 277-279页

作者：李增陈灵芝刘晨安徽医科大学安徽合肥230032

目的研究传统中药枸橘主要成分之一枸橘苷对血管生成的抑制及初步的作用机制。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、黏附抑制试验、迁移抑制实验及体内鸡胚绒毛尿囊膜法(CAM法)研究枸橘苷体外抗血管生成作用;用逆转录聚合酶链反应(RT-RCR)方... 详细信息

目的研究传统中药枸橘主要成分之一枸橘苷对血管生成的抑制及初步的作用机制。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、黏附抑制试验、迁移抑制实验及体内鸡胚绒毛尿囊膜法(CAM法)研究枸橘苷体外抗血管生成作用;用逆转录聚合酶链反应(RT-RCR)方法检测枸橘苷对肿瘤细胞血管内皮生长因子A(VEGF-A)mRNA表达的影响。结果枸橘苷对血管内皮细胞增殖表现出良好的抑制作用,IC50值为(27.8±0.2)μmol·L-1,优于其抑制肿瘤细胞增殖的能力[IC50≥(33.8±0.1)μmol·L-1];在体外该化合物能够明显抑制内皮细胞的黏附和迁移作用,同时体内实验显示该化合物在30μg剂量浓度时能够显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成;RT-RCR实验显示枸橘苷在12.5μmol·L-1和25μmol·L-1剂量时显著抑制A549细胞的VEGF-A mRNA表达,且结果具有显著的差异。结论枸橘苷具有抑制新生血管形成作用,其作用机制可能与与抑制血管内皮细胞增殖以及降低肿瘤细胞表达VEGF的量有关。

关键词：枸橘苷血管生成抑制作用 VEGF

枸橘苷对人骨肉瘤U-2 OS细胞的抑制作用

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中国药业 2022年第4期31卷 37-43页

作者：唐捷张丕军林维李超艺海南医学院第二附属医院骨科二区海南海口570311

目的探讨枸橘苷对人骨肉瘤U-2 OS细胞的抑制作用。方法分别以0,5,10,20,40,80,160μmol/L的枸橘苷处理U-2 OS细胞,检测细胞活力并计算枸橘苷对U-2 OS细胞的半数抑制浓度(IC_(50));U-2 OS细胞实验分为空白对照组[等体积磷酸盐缓冲液(PBS)... 详细信息

目的探讨枸橘苷对人骨肉瘤U-2 OS细胞的抑制作用。方法分别以0,5,10,20,40,80,160μmol/L的枸橘苷处理U-2 OS细胞,检测细胞活力并计算枸橘苷对U-2 OS细胞的半数抑制浓度(IC_(50));U-2 OS细胞实验分为空白对照组[等体积磷酸盐缓冲液(PBS)]和枸橘苷高、低剂量组(52,26μmol/L),慢病毒转染细胞实验分为枸橘苷组(A组,52μmol/L)、空白对照组(B组,等体积PBS)、枸橘苷对照组(C组,52μmol/L+50 MOI pLVX-EGFP-C1)、枸橘苷+FBXO2组(D组,52μmol/L+50 MOI pLVX-EGFP-C1-FBXO2)。采用CCK-8法检测细胞活力,集落形成实验检测细胞增殖情况,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞FBXO2 mRNA表达水平,Western blot法检测细胞FBXO2,LC3Ⅰ,LC3Ⅱ,Beclin1,p62,p-STAT3,STAT3蛋白表达水平。结果枸橘苷对U-2 OS细胞的IC_(50)为52.08μmol/L。与空白对照组比较,枸橘苷高、低剂量组细胞在24,48,72 h时的细胞活力显著减弱(P枸橘苷可抑制U-2 OS细胞的增殖,并促进其自噬,其机制可能与抑制FBXO2的表达从而抑制STAT3通路激活有关。

关键词：骨肉瘤细胞 U-2 OS细胞枸橘苷 FBXO2 增殖自噬

基于AHP-熵权法结合正交试验设计优选岭南特色饮片制枳壳的发酵工艺及发酵前后成分对比研究

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中草药 2022年第20期53卷 6443-6450页

作者：杨婷黄莹莹方杨冰龙江玲李沁如徐启键黄爱华张英夏荃广州中医药大学中药学院广东广州510006

目的建立枳壳发酵品中多个成分的含量测定方法,优化岭南特色饮片制枳壳的发酵工艺,并比较枳壳发酵前后的成分变化。方法通过UHPLC测定枳壳发酵品中特征成分含量,在单因素实验的基础上,采用正交试验法考察发酵温度、发酵时间、发酵湿... 详细信息

目的建立枳壳发酵品中多个成分的含量测定方法,优化岭南特色饮片制枳壳的发酵工艺,并比较枳壳发酵前后的成分变化。方法通过UHPLC测定枳壳发酵品中特征成分含量,在单因素实验的基础上,采用正交试验法考察发酵温度、发酵时间、发酵湿度等影响因素,以枳壳发酵品中的10种特征黄酮类成分(包括黄酮苷及苷元)的含量和发酵品的外观性状作为指标,采用层次分析法(analytic hierarchy process,AHP)结合熵权法对这些指标设置不同的权重,并计算复合评分来优选其发酵工艺。结果枳壳的最佳发酵工艺为浸泡时间4 h,发酵时间48 h,发酵温度37℃,发酵湿度90%;枳壳发酵后,黄酮苷类成分的含量下降,黄酮单糖苷和苷元类成分的含量均大幅度增加。结论建立的UHPLC多成分含量测定方法操作简单、准确,优选的枳壳发酵工艺简便、稳定可行,可规范枳壳的发酵工艺,为制枳壳的工业化生产奠定基础。

关键词：枳壳制枳壳中药发酵工艺优化圣草次苷新北美圣草苷芸香柚皮苷柚皮苷橙皮苷新橙皮苷橙皮素-7-O-葡萄糖苷枸橘苷柚皮素橙皮素

基于HPLC-Q-TOF-MS及化学模式识别方法对陈皮的化学成分快速鉴别及产地判别研究

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中草药 2022年第20期53卷 6361-6368页

作者：黄芳周熙罗辉泰谢淑桐张春华谢梦婷邓欣吴惠勤广东省科学院测试分析研究所(中国广州分析测试中心) 广东省化学测量与应急检测技术重点实验室广东省中药质量安全工程技术研究中心广东广州510070

目的研究不同产地陈皮Citri Reticulatae Pericarpium化学成分的差异,结合化学模式识别方法对陈皮的产地进行判别分析。方法采用Agilent SB-C_(18)(150 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱,质谱采用电... 详细信息

目的研究不同产地陈皮Citri Reticulatae Pericarpium化学成分的差异,结合化学模式识别方法对陈皮的产地进行判别分析。方法采用Agilent SB-C_(18)(150 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱,质谱采用电喷雾离子源,在正离子模式下采集数据。对色谱图中各色谱峰进行精确质量数识别,利用二级质谱裂解规律、PCDL数据库及对照品对化学成分进行定性分析。结合主成分分析、聚类分析、判别分析等多元统计方法分析了新会陈皮与其他不同产地陈皮的差异成分,并利用这些分析方法鉴别了未知产地陈皮的来源。结果从不同产地陈皮中鉴定出了29个共有化学成分,主要为多甲氧基黄酮及黄酮苷类化合物。建立9个差异化学成分的判别模型,实现了新会陈皮的准确判别,准确率达94.4%。结论可作为陈皮产地鉴别和质量控制的有效方法,为道地药材新会陈皮的判别提供参考。

关键词：陈皮高效液相色谱-高分辨质谱(HPLC-Q-TOF-MS) 化学模式识别方法主成分分析产地鉴别甜橙黄酮辛弗林羟基-四甲氧基黄酮柚皮苷枸橘苷柠檬苦素橘皮素六甲氧基黄酮羟基六甲氧基黄酮

UPLC-Q-TOF-MS联用研究不同厂家前列癃闭通片指纹图谱

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中草药 2021年第24期52卷 7493-7500页

作者：崔璐褚征康廷国赵庆春康烨北部战区总医院辽宁沈阳110023 辽宁中医药大学辽宁大连116600

目的通过建立前列癃闭通片(Qianlielong Bitong Tablets,QBT)的UPLC指纹图谱,考察了9个厂家58批次QBT的质量,为完善该制剂的质量控制奠定基础。方法采用UPLC法,色谱柱Eclipse Plus C18 RRHD(50 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.1%甲... 详细信息

目的通过建立前列癃闭通片(Qianlielong Bitong Tablets,QBT)的UPLC指纹图谱,考察了9个厂家58批次QBT的质量,为完善该制剂的质量控制奠定基础。方法采用UPLC法,色谱柱Eclipse Plus C18 RRHD(50 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,采用全时段多波长融合技术,体积流量0.3 mL/min;柱温30℃。建立QBT的指纹图谱,并对各样品的指纹图谱进行相似度评价,结合聚类分析评价58批样品的质量,指认了指纹图谱中主要共有峰的化学成分并确定了其药材归属。结果首次建立QBT的UPLC指纹图谱,对其中16个共有峰进行了化学成分鉴定,分别是辛弗林(1号峰)、虎杖苷(2号峰)、金丝桃苷(3号峰)、新圣草苷(4号峰)、柚皮苷(5号峰)、橙皮苷(6号峰)、新橙皮苷(7号峰)、枸橘苷(8号峰)、朝藿定A(9号峰)、朝藿定B(10号峰)、朝藿定C(11号峰)、淫羊藿苷(12号峰)、芒柄花素(13号峰)、宝藿苷(14号峰)、大黄素(15号峰)、大黄素甲醚(16号峰),确定了16个特征峰来源于方中4味中药,峰1、4~8归属枳壳药材,峰2、3、15、16归属虎杖药材,峰9~12、14归属淫羊藿药材,峰13归属黄芪药材。对9个生产企业58批次样品进行相似度评价,相似度分布在0.600~0.912,通过聚类分析大致可聚为4类。结论建立QBT的指纹图谱,该方法简便、可靠,为进一步评价和监测QBT的质量提供参考。

关键词： UPLC-Q-TOF-MS 前列癃闭通片质量评价指纹图谱相似度聚类分析全时段多波长融合技术辛弗林虎杖苷金丝桃苷新圣草苷柚皮苷橙皮苷枸橘苷朝藿定淫羊藿苷芒柄花素宝藿苷大黄素枳壳虎杖淫羊藿黄芪

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基于文献分析和分子对接法探讨化橘红防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的前景

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中草药 2020年第9期51卷 2368-2378页

作者：李沛波谌攀吴灏王永刚饶鸿宇苏薇薇中山大学生命科学学院广东省中药上市后质量与药效再评价工程技术研究中心/广东省热带亚热带植物资源重点实验室广东广州510275

目的探讨化橘红防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的前景,为化橘红的临床应用提供依据。方法通过文献查阅,对化橘红及其主要化学成分在祛痰、抗急性肺损伤、抗炎、抗肺纤维化、镇咳、抗氧化、抗肝损伤和抗肾损伤等方面的药理作用进行分析... 详细信息

目的探讨化橘红防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的前景,为化橘红的临床应用提供依据。方法通过文献查阅,对化橘红及其主要化学成分在祛痰、抗急性肺损伤、抗炎、抗肺纤维化、镇咳、抗氧化、抗肝损伤和抗肾损伤等方面的药理作用进行分析,并通过中药系统药理学平台(TCMSP)和查阅文献检索化橘红的化学成分,将各化学成分与血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)、3CL水解酶(Mpro)、木瓜样蛋白酶(PLP)和树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(DC-SIGN)进行分子对接,预测其在抑制新型冠状病毒(SARS-Co V-2)病毒感染和复制方面的潜在活性。结果文献分析结果表明,化橘红及其主要化学成分具有祛痰、抗急性肺损伤、抗炎、抗肺纤维化、镇咳、抗氧化、抗肝损伤和抗肾损伤等多方面药理活性;分子对接结果表明,柚皮苷(naringin)、新橙皮苷(neohesperdin)、野漆树苷(rhoifolin)、枸橘苷(poncirin)和西托糖苷(sitogluside)与ACE2、MPro、PLP和DC-SIGN均具有较强的结合力,具有抑制SARS-CoV-2病毒感染宿主细胞和自我复制的潜在活性。结论化橘红既具有通过多种药理活性改善COVID-19病程进程的潜力,又可能通过作用于ACE2、MPro、PLP和DC-SIGN发挥抑制病毒感染宿主细胞及自我复制的作用。提示化橘红可能对COVID-19的防治具有积极作用。

关键词：化橘红新型冠状病毒肺炎柚皮苷新橙皮苷野漆树苷枸橘苷分子对接

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正交试验优选枸橘的提取工艺

中国医院药学杂志 2016年第20期36卷 1735-1738页

作者：刘丽萍雷鹏谭润雅辛锦钰黄琪刘海涛周政中南大学湘雅医院药学部湖南长沙410008 中南大学药学院湖南长沙410013

目的:对枸橘的提取工艺进行优选。方法:以乙醇浓度、提取时间、溶剂倍数为考察因素,枸橘苷、欧前胡素的转移率为评价指标,运用正交试验优化提取的最佳工艺条件,同时用方差分析对其进行评价。结果:枸橘最佳提取工艺条件为70%乙醇溶液提... 详细信息

目的:对枸橘的提取工艺进行优选。方法:以乙醇浓度、提取时间、溶剂倍数为考察因素,枸橘苷、欧前胡素的转移率为评价指标,运用正交试验优化提取的最佳工艺条件,同时用方差分析对其进行评价。结果:枸橘最佳提取工艺条件为70%乙醇溶液提取两次,第1次6倍量,提取60 min,第2次4倍量,提取45 min。结论:优选出的提取工艺简单、科学、合理,为枸橘的开发利用奠定基础。

关键词：枸橘提取工艺正交试验枸橘苷欧前胡素

瓯柑果实黄酮类化合物的分离鉴别及相关活性研究

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瓯柑果实黄酮类化合物的分离鉴别及相关活性研究

作者：朱晓艳浙江大学

学位级别：硕士

本论文以瓯柑(Citrus reticulate CV. Suavissima)果实为试材,建立和优化了瓯柑果实黄酮类化合物的提取检测体系,研究了果实发育过程中总酚、总黄酮、六种主要黄酮类化合物含量及其抗氧化活性的变化规律,分离纯化了瓯柑果实特色黄酮组... 详细信息

本论文以瓯柑(Citrus reticulate CV. Suavissima)果实为试材,建立和优化了瓯柑果实黄酮类化合物的提取检测体系,研究了果实发育过程中总酚、总黄酮、六种主要黄酮类化合物含量及其抗氧化活性的变化规律,分离纯化了瓯柑果实特色黄酮组分构橘苷,并开展了相关生物活性的评价研究。主要结果如下： 1、优化得到的瓯柑果实黄酮类化合物的提取方法：材料在50℃下用80%乙醇超声提取30min,提取两次。黄酮类化合物的HPLC检测体系采用waters C18色谱柱,以双蒸水(A)和色谱乙腈(B)为洗脱溶剂,采用梯度洗脱法,每50min为一个循环,流动相A的浓度变化为78%-78%(0-10min),78%-39%(10-35min),39%-0(35-40min),0-0(40-42min),0-78%(42-45min),78%-78%(45-50min);检测波长为280nm,流速为1mL/min,进样量为10μL,检测温度为25℃。该提取与检测方法快捷、有效,可应用于柑橘及其它植物材料中多种黄酮类化合物的研究中。 2、瓯柑果实不同发育阶段总酚与总黄酮的总体变化趋势相似：幼果时总酚与总黄酮含量最高,但随着果实的发育含量呈显著下降趋势且在10月21日左右达最低水平,之后直至果实成熟总酚与总黄酮含量又略有增加。另外,果实不同部位总酚、总黄酮含量相差较大,油胞层、白皮层和囊衣中含量明显高于汁胞。同时,果实不同发育阶段的抗氧化活性的研究表明,抗氧化活性与果实总酚和总黄酮含量呈正相关关系,且相关性达89.3%以上。总酚和总黄酮含量最高的时期,果实相应的抗氧化能力也最强。对不同发育期瓯柑果实黄酮类化合物组分的鉴别和含量检测表明,瓯柑果实中主要黄酮类化合物为柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、枸橘苷、川陈皮素和桔皮素。其中,柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枸橘苷属于黄烷酮类化合物,而桔皮素、川陈皮素属于多甲氧基黄酮类。黄烷酮类化合物橙皮苷和新橙皮苷在果实各部位均有分布,但在油胞层和白皮层中含量水平明显高于囊衣和汁胞;柚皮苷和枸橘苷在白皮层和囊衣中含量一般高于油胞层和果肉中含量,而多甲氧基黄酮川陈皮素和桔皮素主要在油胞层中存在,白皮层、囊衣和汁胞中含量较少。 3、对9个柑橘品种成熟果实黄酮类化合物的研究发现,枸橘苷是瓯柑果实中的特有成分。利用大孔吸附树脂和HSCCC等纯化手段,本文建立了高效的瓯柑果实枸橘苷的分离纯化体系,并首次从瓯柑果实中分离得到枸橘苷单体。抗肿瘤活性研究结果表明,瓯柑枸橘苷对胃癌细胞(SGC株系)有明显抑制增殖的作用,且具有浓度效应,当枸橘苷浓度在25μg/ml条件下对胃癌细胞增殖的抑制率达到50%以上。本试验主要对瓯柑果实发育期总酚总黄酮含量及抗氧化活性进行了较为系统而深入的研究,首次从瓯柑果实中分离纯化得到特色黄酮组分枸橘苷并对其抗癌等生物活性进行了评价研究。

关键词：瓯柑黄酮类化合物枸橘苷分离纯化生物活性

高效液相色谱法对枳实提取物中黄酮类药效组分的定量分析

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辽宁中医药大学学报 2012年第10期14卷 98-100页

作者：罗容杨志刚张贵君崔湖荣贾富霞首都医科大学北京100069 北京市丰台区药检所北京100071 北京中医药大学北京100102 庆熙大学

目的:建立同时对枳实提取物中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枸橘苷进行定量分析的HPLC方法。方法:采用BDS液相色谱柱(5μm,4.6mm×250mm),流速1mL/min,检测波长283nm,流动相条件为乙腈和0.05%磷酸水梯度洗脱系统。0～5min为乙腈:0.05%磷酸... 详细信息

目的:建立同时对枳实提取物中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枸橘苷进行定量分析的HPLC方法。方法:采用BDS液相色谱柱(5μm,4.6mm×250mm),流速1mL/min,检测波长283nm,流动相条件为乙腈和0.05%磷酸水梯度洗脱系统。0～5min为乙腈:0.05%磷酸水(19:81);5～45min之间乙腈由19%等度梯度上升至40%。结果:柚皮苷在0.03200～0.07466μg(r=0.9995),橙皮苷在0.00095～0.00475μg(r=0.9994),新橙皮苷在0.04888～1.4664μg(r=0.9993),枸橘苷在0.01700～0.34900μg(r=0.9999)之间线性关系良好;精密度和重现性试验中待测的各黄酮类组分RSD值均小于2%;稳定性试验中样品在32h内各黄酮类组分RSD值均小于3%;柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枸橘苷的加样回收率结果分别为100.51%(RSD=2.90%,n=5)、99.86%(RSD=2.79%,n=5)、102.83%(RSD=2.17%,n=5)、98.86%(RSD=1.97%,n=5)。结论:检测方法稳定,精密度、重现性和回收率好,可作为控制枳实提取物质量的依据之一。

关键词：高效液相色谱法柚皮苷橙皮苷新橙皮苷枸橘苷枳实质量控制