枸橘苷对人骨肉瘤U-2 OS细胞的抑制作用

作     者：唐捷 张丕军 林维 李超艺 TANG Jie;ZHANG Pijun;LIN Wei;LI Chaoyi

作者机构：海南医学院第二附属医院骨科二区海南海口570311 

出 版 物：《中国药业》 (China Pharmaceuticals)

年 卷 期：2022年第31卷第4期

页      面：37-43页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：海南省卫生计生行业科研项目[19A20185] 

主　　题：骨肉瘤细胞 U-2 OS细胞 枸橘苷 FBXO2 增殖 自噬 

摘      要：目的探讨枸橘苷对人骨肉瘤U-2 OS细胞的抑制作用。方法分别以0,5,10,20,40,80,160μmol/L的枸橘苷处理U-2 OS细胞,检测细胞活力并计算枸橘苷对U-2 OS细胞的半数抑制浓度(IC_(50));U-2 OS细胞实验分为空白对照组[等体积磷酸盐缓冲液(PBS)]和枸橘苷高、低剂量组(52,26μmol/L),慢病毒转染细胞实验分为枸橘苷组(A组,52μmol/L)、空白对照组(B组,等体积PBS)、枸橘苷对照组(C组,52μmol/L+50 MOI pLVX-EGFP-C1)、枸橘苷+FBXO2组(D组,52μmol/L+50 MOI pLVX-EGFP-C1-FBXO2)。采用CCK-8法检测细胞活力,集落形成实验检测细胞增殖情况,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞FBXO2 mRNA表达水平,Western blot法检测细胞FBXO2,LC3Ⅰ,LC3Ⅱ,Beclin1,p62,p-STAT3,STAT3蛋白表达水平。结果枸橘苷对U-2 OS细胞的IC_(50)为52.08μmol/L。与空白对照组比较,枸橘苷高、低剂量组细胞在24,48,72 h时的细胞活力显著减弱(P0.05),克隆形成数显著减少(P0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白表达水平显著升高(P0.05),p62蛋白表达水平、FBXO2 mRNA和蛋白表达水平、p-STAT3/STAT3均显著降低(P0.05);与C组比较,D组细胞在24,48,72 h时的活力显著增强(P0.05),克隆形成数显著增加(P0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白表达水平均显著降低(P0.05),p62蛋白表达水平、FBXO2 mRNA和蛋白表达水平、p-STAT3/STAT3均显著升高(P0.05)。结论枸橘苷可抑制U-2 OS细胞的增殖,并促进其自噬,其机制可能与抑制FBXO2的表达从而抑制STAT3通路激活有关。