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骨髓基质成骨细胞-松质骨基质复合人工骨肌袋移植的成骨作用

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解放军医学杂志 2001年第4期26卷 238-240,F004页

作者：陶凯毛天球杨维东陈富林顾晓明陈书军第四军医大学口腔医学院西安710032

成年新西兰兔骨髓细胞体外培养、诱导后 ,经混匀、接种、固化形成骨髓基质成骨细胞藻酸盐松质骨基质复合人工骨 ,并植回取材兔肌袋内 ,对照组分别植入藻酸盐松质骨基质复合物和松质骨基质。植入 4、8周取材 ,行X线摄片、组织学检... 详细信息

成年新西兰兔骨髓细胞体外培养、诱导后 ,经混匀、接种、固化形成骨髓基质成骨细胞藻酸盐松质骨基质复合人工骨 ,并植回取材兔肌袋内 ,对照组分别植入藻酸盐松质骨基质复合物和松质骨基质。植入 4、8周取材 ,行X线摄片、组织学检查 ,观察骨形成情况。结果显示 ,骨髓基质成骨细胞松质骨基质复合人工骨肌袋内成骨效果明显优于藻酸盐松质骨基质复合物组和松质骨基质组。复合人工骨标本兼有膜内成骨和软骨成骨 ,以膜内成骨为主 ;对照组仅见少量软骨成骨。提示 ,采用组织工程方法形成的复合人工骨肌袋内成骨作用明显 ,用该方法所形成的组织工程骨展现出良好的应用前景。

关键词：组织工程骨髓基质成骨细胞松质骨基质复合人工骨肌袋移植

钛板固定的BMSC/松质骨基质复合物修复兔股骨缺损

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中国矫形外科杂志 2005年第1期13卷 55-57页

作者：张晓东杨维东宋九余钱奇春冯扬陈富林沈阳军区总医院口腔科 110016 第四军医大学口腔医学院颌面外科 710032 解放军徐州97医院口腔科 221000 沈阳军区总医院神经内科 110016

目的: 观察钛板加强固定的骨髓基质细胞 (BMSC) /松质骨基质复合物修复股骨缺损的能力。方法: 体外培养兔BMSC经扩增, 诱导分化后复合同种异体松质骨基质, 植入自体股骨缺损区, 修复骨缺损, 钛板固定和加强, 植入 6、12周后经大体观察,... 详细信息

目的: 观察钛板加强固定的骨髓基质细胞 (BMSC) /松质骨基质复合物修复股骨缺损的能力。方法: 体外培养兔BMSC经扩增, 诱导分化后复合同种异体松质骨基质, 植入自体股骨缺损区, 修复骨缺损, 钛板固定和加强, 植入 6、12周后经大体观察, 组织学检查, 骨磨片观察骨形成情况。结果: BMSC/松质骨基质复合物有很强的成骨作用, 实验组X线观察有骨形成, 组织学染色证实有新骨形成, 骨磨片显示钛板和新骨获得良好的结合。结论: 钛板加强的BMSC/松质骨基质可诱导修复兔股骨缺损, 为组织工程方法修复骨缺损提供了新的思路。

关键词：骨髓基质细胞松质骨基质钛板股骨缺损

以生物蛋白胶—松质骨基质为载体的软骨组织工程实验研究

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以生物蛋白胶—松质骨基质为载体的软骨组织工程实验研究

作者：陈学忠广西医科大学

学位级别：硕士

目的:研究生物蛋白胶、生物蛋白胶/松质骨基质载体负载关节软骨细胞在体外培养时的表现和修复关节软骨全层缺损的效果。方法:(1)取3 周龄的新西兰幼兔的关节软骨细胞种植于生物蛋白胶、生物蛋白胶/松质骨基质载体上作体外培养,通过倒置... 详细信息

目的:研究生物蛋白胶、生物蛋白胶/松质骨基质载体负载关节软骨细胞在体外培养时的表现和修复关节软骨全层缺损的效果。方法:(1)取3 周龄的新西兰幼兔的关节软骨细胞种植于生物蛋白胶、生物蛋白胶/松质骨基质载体上作体外培养,通过倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、AB-PAS 染色、Masson’s三色法染色、Ⅱ型胶原免疫组化检查等,了解细胞生长及软骨基质的分泌情况,并观察载体降解情况;(2)将培养出的软骨细胞-生物蛋白胶复合物、软骨细胞-生物蛋白胶-松质骨基质支架复合物分别植入兔股骨滑车关节软骨全层缺损处,对照组植入生物蛋白胶/松质骨基质或不作任何植入。术后1,2,3 个月取标本,从大体观察、组织学、透射电镜等方面了解关节软骨缺损的修复情况,并观察载体降解和吸收情况。结果:(1) 关节软骨细胞在生物蛋白胶、生物蛋白胶/松质骨基质载体中大部分保持卵圆形,小部分在载体表面如贴壁细胞状;(2) 于第9 天以后,两组支架内的细胞数均开始明显增加。软骨细胞活性达95%以上;(3) AB-PAS 染色(+)、Masson’s 三色法染色检查(+)。(4)生物蛋白胶在术后1 个月已降解,而松质骨基质在术后2 个月降解,术后3 个月时实验组关节软骨缺损以软骨组织修复,与周围软骨及软骨下骨愈合良好。AB-PAS 染色、Masson’s 三色法染色染色证实其基质有蛋白多糖和胶原,电镜观察表明修复组织软骨细胞及基质与正常关节软骨一致。生物蛋白胶/松质骨基质植入对照组以部分软骨组织修复,空白对照组以纤维组织修复。结论:关节软骨细胞能在生物蛋白胶、生物蛋白胶/松质骨基质载体中增殖,保持其表型和分泌软骨基质。由两者构建的组织工程软骨模块均能良好地修复关节软骨缺损,而生物蛋白胶/松质骨基质载体能有效地防止修复组织出现塌陷。

关键词：生物蛋白胶松质骨基质载体软骨细胞组织工程

中空多孔钛金属假体加载牛松质骨基质兔体内骨生成的实验研究

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中空多孔钛金属假体加载牛松质骨基质兔体内骨生成的实验研究

作者：魏均强中国人民解放军军医进修学院

学位级别：硕士

目的:本课题利用中空多孔钛金属假体(HPTP)作为骨组织再生工程构架,观察兔体内假体周围及其内部骨生成的可能性,并探讨在假体内加载经过去抗原处理的牛松质骨基质(CBM)来提高成骨活性,从而促进金属假体与骨质达到相对一体化结合的可行... 详细信息

目的:本课题利用中空多孔钛金属假体(HPTP)作为骨组织再生工程构架,观察兔体内假体周围及其内部骨生成的可能性,并探讨在假体内加载经过去抗原处理的牛松质骨基质(CBM)来提高成骨活性,从而促进金属假体与骨质达到相对一体化结合的可行性。希望实验结果能够为研制中空多孔人工关节假体或其他骨组织再生型骨植入物提供基础实验依据,对生物固定型人工关节的设计和改进有所帮助。方法:自行设计中空多孔(孔径2mm)和用作对照组的“实心无孔”钛金属假体。所有假体植入骨内部分与骨接触的表面均有羟基磷灰石(HA)涂层。实验分为三组:“实心无孔”假体组(SITP组,A组)、中空多孔假体组(HPTP组,B组)、中空多孔假体+牛松质骨基质组(HPTP+CBM组,C组),横向将各组植入体植入16只4～6月龄新西兰大白兔的股骨髁。实验动物饲养至第3、8、12周时取材,通过X线、普通光镜、荧光显微镜、扫描电镜以及骨组织形态计量软件等途径对金属假体和松质骨基质表面及其内部骨生成的情况进行观察;每组取6例第12周的标本进行生物力学检测,以比较分析各组植入体在体内的骨整合效果。用SPSS13.0软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差((?)±s)表示。结果:三组假体外表HA涂层部分在不同时间点的骨生长情况类似,而B组和C组骨组织最终可长入假体2mm大小的圆孔,达到交锁固定的效果;但是B组假体内部骨组织形成困难,即使在12周时仍大部分为血块和纤维组织,其内混有少量稀疏的类骨组织,在假体内壁也可见薄层类骨状组织贴壁生长,而C组3周时即可见松质骨基质内有大量类骨组织生长,8周时松质骨基质已有部分被吸收,12周时中空腔内新生骨组织更加成熟,可达到更好的整合效果(但中空腔内仍未完全充满骨质)。在生物力学测试中,B组和C组的拔出力明显大于A组,但是B组和C组拔出力之间未见统计学差异。结论:一、组织形态学和力学结果均证明,中空多孔金属假体与“实心无孔”假体相比,其表面的多孔结构可明显改善假体和骨的整合,达到交锁固定的效果。二、在较大的中空多孔金属假体中空腔内加载松质骨基质等具有成骨活性的物质,可使假体内部更早、更好地生成骨组织,使各部分形成有机的整体结构。三、假体的HA涂层与周围骨质的结合能够获得很强的抗剪切强度,“实心无孔”假体抗剪切强度的薄弱环节主要应该是HA涂层和假体之间能够达到的结合强度。四、中空多孔金属假体的设计思路是可行的,本实验为进一步即将进行的组织工程学(TE)研究提供了实验模型和参照数据。初步证明2mm的孔径尺寸是该模型中一个合适的尺寸。本实验从体内角度证明,加载成骨活性物质的中空多孔假体较传统的实心假体具有优越性,至于如何更好地促进骨整合还需进一步研究。

关键词：中空多孔假体骨生成松质骨基质组织形态学生物力学

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松质骨基质材料应用于牙周组织工程的可行性

中国组织工程研究 2012年第8期16卷 1443-1446页

作者：鲁红田宇吴织芬解放军第四军医大学口腔医学院牙周黏膜病科陕西省西安市710032 解放军第四军医大学口腔医学院牙体牙髓病科陕西省西安市710032

背景:松质骨基质材料具有骨诱导性和骨传导性双重特性,已被成功应用于骨再生及骨组织工程研究。目的:分析松质骨基质材料的细胞相容性与毒性,探讨其应用于牙周组织工程的可行性。方法:采用改良组织块法体外培养人牙周膜细胞,将其接种于... 详细信息

背景:松质骨基质材料具有骨诱导性和骨传导性双重特性,已被成功应用于骨再生及骨组织工程研究。目的:分析松质骨基质材料的细胞相容性与毒性,探讨其应用于牙周组织工程的可行性。方法:采用改良组织块法体外培养人牙周膜细胞,将其接种于松质骨基质三维支架上复合培养,采用细胞计数方法和扫描电镜观察人牙周膜细胞在松质骨基质支架上的附着、生长情况,并通过MTT测试法和碱性磷酸酶活性检测法观察松质骨基质浸提液对人牙周膜细胞增殖及功能表达的影响。结果与结论:扫描电镜可见松质骨基质具有良好的多孔网状结构,人牙周膜细胞在松质骨基质上贴附紧密,生长旺盛,伸展充分,而人牙周膜细胞在不同浓度材料浸提液中的生长、增殖及碱性磷酸酶活性与阴性对照组相比差异无显著性意义。表明松质骨基质具有良好的三维空间结构和细胞相容性,且无细胞毒性,有望应用于牙周组织再生及牙周组织工程研究。

关键词：松质骨基质牙周膜细胞组织工程支架材料细胞相容性细胞毒性

生物蛋白胶/松质骨基质负载软骨细胞体外培养的实验研究

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广西医学 2006年第9期28卷 1331-1333页

作者：杨渊陈学忠肖增明李世德广西骨伤医院骨科南宁530012 广西医科大学第一附院脊柱骨病科

目的探讨生物蛋白胶/松质骨基质作为软骨细胞培养支架的可行性。方法①取3周龄的新西兰幼兔的关节软骨细胞种植于生物蛋白胶/松质骨基质载体上作体外培养;②通过倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、AB-PAS染色、Ⅱ型胶原免疫组化检查等,... 详细信息

目的探讨生物蛋白胶/松质骨基质作为软骨细胞培养支架的可行性。方法①取3周龄的新西兰幼兔的关节软骨细胞种植于生物蛋白胶/松质骨基质载体上作体外培养;②通过倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、AB-PAS染色、Ⅱ型胶原免疫组化检查等,了解细胞生长及软骨基质的分泌情况,并观察载体降解情况。结果①生物蛋白胶/松质骨基质载体中大部分保持卵圆形,小部分在支架表面如贴壁细胞状;②于第9天以后,支架内的细胞数均开始明显增加。软骨细胞活性达95%以上;③AB-PAS染色(+)、Ⅱ型胶原免疫组化检查(+);④电镜观察显示软骨细胞较好地附在支架上并分泌细胞外基质。结论生物蛋白胶/松质骨基质是一种较好的软骨细胞培养支架。

关键词：软骨细胞培养松质骨基质生物蛋白胶组织工程支架

钛网加强的BMSC/松质骨基质修复下颌骨缺损的实验研究

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临床口腔医学杂志 2003年第10期19卷 582-584页

作者：张晓东杨维东宋九余钱奇春顾晓明陈富林沈阳军区总医院口腔科辽宁沈阳110016 第四军医大学口腔医学院颌面外科北京武警总队医院口腔科

目的 :观察钛网加强的骨髓基质细胞 (BMSC) /松质骨基质复合物修复下颌骨缺损的能力。方法 :体外培养兔BMSC经扩增 ,诱导分化后复合同种异体松质骨基质 ,植入自体下颌骨缺损区 ,修复骨缺损 ,钛网固位和加强 ,植入 6周、12周后经X线 ,组... 详细信息

目的 :观察钛网加强的骨髓基质细胞 (BMSC) /松质骨基质复合物修复下颌骨缺损的能力。方法 :体外培养兔BMSC经扩增 ,诱导分化后复合同种异体松质骨基质 ,植入自体下颌骨缺损区 ,修复骨缺损 ,钛网固位和加强 ,植入 6周、12周后经X线 ,组织学检查 ,观察骨形成情况。结果 :骨髓基质细胞 (BMSC) /松质骨基质复合物有很强的成骨作用 ,实验组X线观察有骨形成 ,组织学染色证实有新骨形成 ,骨磨片显示钛网和新骨获得良好的愈合。结论 :钛网加强的BMSC/松质骨基质可诱导修复兔下颌骨缺损 ,为组织工程方法修复骨缺损提供了新的思路。

关键词：骨髓基质细胞松质骨基质钛网下颌骨缺损

牙周膜细胞松质骨基质支架复合移植促进牙周组织再生的研究

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北京口腔医学 2012年第4期20卷 185-189页

作者：鲁红田宇吴织芬第四军医大学口腔医学院牙周黏膜病科陕西西安710032 第四军医大学口腔医学院牙体牙髓病科陕西西安710032

目的观察牙周膜细胞(PDLCs)接种松质骨基质(CBM)支架复合移植对牙周组织再生修复的影响和意义。方法将体外培养的狗自体PDLCs接种到CBM三维支架上,体外进行细胞计数和扫描电镜观察,并植入狗人工牙周组织缺损处,表面覆盖聚四氟乙烯膜(e-P... 详细信息

目的观察牙周膜细胞(PDLCs)接种松质骨基质(CBM)支架复合移植对牙周组织再生修复的影响和意义。方法将体外培养的狗自体PDLCs接种到CBM三维支架上,体外进行细胞计数和扫描电镜观察,并植入狗人工牙周组织缺损处,表面覆盖聚四氟乙烯膜(e-PTFE),以单纯翻瓣组和只覆盖e-PTFE组作为对照。术后8周对动物组织标本进行组织学观察和测量,分析比较各组牙周组织的再生情况。结果 PDLCs在CBM支架材料上形成良好的贴附并增殖,扫描电镜可见CBM具有良好的多孔网状结构,细胞在CBM上生长旺盛,伸展充分。自体PDLCs/CBM/e-PTFE膜复合植入组较单纯翻瓣组和e-PTFE组有更多的新生牙槽骨、新生牙周膜和新生牙骨质生成,且未见上皮长入。结论 PDLCs接种松质骨基质支架复合移植能更有效地促进牙周组织再生和重建,CBM有望用作牙周组织工程的支架材料。

关键词：松质骨基质牙周膜细胞牙周组织再生组织工程支架材料

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负载骨结合式牙种植体的骨构建实验研究

中华口腔医学杂志 2005年第4期40卷 323-326页

作者：付松军王玉新陈富林陶凯张晓东葛成第四军医大学口腔医学院口腔颌面外科中国医科大学附属第一临床学院口腔颌面外科

目的观察骨结合式牙种植体与骨髓基质成骨细胞(MSO)及松质骨基质(CBM)支架复合人工骨皮下移植后,新骨的形成及与种植体的愈合情况。方法将骨结合式牙种植体置于圆柱状的CBM中,在其表面及孔洞内接种培养扩增的MSO,形成负载骨结合式牙种... 详细信息

目的观察骨结合式牙种植体与骨髓基质成骨细胞(MSO)及松质骨基质(CBM)支架复合人工骨皮下移植后,新骨的形成及与种植体的愈合情况。方法将骨结合式牙种植体置于圆柱状的CBM中,在其表面及孔洞内接种培养扩增的MSO,形成负载骨结合式牙种植体的骨髓基质成骨细胞-藻酸盐-松质骨基质复合人工骨(MCCAB),然后植入裸鼠背部皮下组织中,对照组植入负载骨结合式牙种植体的藻酸盐-松质骨基质复合物。植入4、8周取材,通过大体标本观察、X线检查、组织学观察和组织学定量分析评价新骨形成情况。结果负载骨结合式牙种植体的MCCAB皮下成骨效果明显优于负载骨结合式牙种植体的藻酸盐-松质骨基质复合物组。复合人工骨标本内有大量新骨形成,兼有膜内成骨和软骨内成骨的特点,并以前者为主;种植体与新骨结合。对照组成骨作用不明显,为单纯软骨内成骨,与种植体未见结合。结论骨结合式牙种植体与复合人工骨复合植入后,在支架材料与种植体表面均有大量新骨形成,并可与种植体结合,表明用组织工程学方法进行颌面部骨修复时,可以同期植入种植体。

关键词：牙种植体结合式负载实验研究骨髓基质成骨细胞骨构建松质骨基质复合人工骨软骨内成骨新骨形成组织学观察 MCCAB 组织工程学藻酸盐愈合情况培养扩增皮下组织大体标本 X线检查分析评价成骨效果膜内成骨